β_3肾上腺素能受体激动对慢性心力衰竭大鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流的影响

目的探讨选择性β_3肾上腺素能受体(β_3-adrenoreceptor,β_3-AR)激动剂BRL-37344对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠左心房肌细胞瞬时外向钾电流(I_(to))的影响。方法 26只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=6)和CHF组(n=20),CHF大鼠模型的建立采用主动脉缩窄法。CHF组大鼠再被分为CHF对照组和BRL组(经尾静脉注射BRL-37344 0.4 nmol/kg,每周2次,共4周)。采用酶解法分离获得大鼠左心房肌细胞。左心房肌细胞I_(to)的测定采用全细胞膜片钳技术(以电流密度pA/pF表示)。结果当指令电压为+60 mV时,Sham组,CHF组、BRL组大鼠左心房肌细胞I_(to)电流密度达最大值,分别为(20.85±3.44)pA/pF、(11.54±1.21)pA/pF、(6.29±1.50)pA/pF。当指令电压从+60 mV至+30 mV时,BRL组和CHF对照组I_(to)电流密度均显著低于Sham组,差异有统计学意义(P0.01);BRL组显著低于CHF对照组,差异有统计学意义(P0.05或0.01)。当指令电压从+20 mV至0 mV时,BRL组和CHF对照组I_(to)电流密度均显著低于Sham组,差异有统计学意义(P0.01);但BRL组与CHF对照组之间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论β_3-AR选择性激动剂BRL-37344显著抑制了CHF大鼠心房肌细胞I_(to)电流密度。     

胡椒碱对H2O2致兔心房肌细胞动作电位时程及L型钙电流异常的保护作用

目的:研究胡椒碱(PIP)对H2O2引起的单个兔心房肌细胞动作电位时程（APD）及L型钙电流(ICa,L)异常的保护作用。方法:采用全细胞膜片钳技术,观察10和50 μmol/L的H2O2引起单个兔心房肌细胞APD及ICa,L的改变,以及预先应用7 μmol/L的PIP对其的作用。结果:7 μmol/L的PIP对正常兔心房肌细胞APD、ICa,L及L型钙通道动力学无明显影响。在10和50 μmol/L的H2O2作用下,兔心房肌细胞APD50和APD90明显缩短(P<0.05),静息膜电位（RMP）绝对值显著下降(P<0.05),ICa,L峰值由(39.3±5.4) pA/pF降低至(32.8±2.0) pA/pF(P<0.05),电流-电压曲线上移,通道稳态激活曲线右移,通道稳态失活曲线左移,但恢复时间不变。预先给予7 μmol/L的PIP可明显减轻H2O2对APD、ICa,L的抑制作用(P<0.01),对L型钙通道动力学的异常影响。结论:PIP可减轻氧化应激对心房肌细胞APD、ICa,L的影响。     

Beta3肾上腺素能受体对心力衰竭大鼠心室肌细胞钙通道的影响

目的探讨beta3肾上腺素能受体（beta3受体）对慢性心力衰竭（心衰）大鼠心室肌细胞钙通道的影响。方法 34只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham组）和心衰组。采用主动脉缩窄法建立慢性心衰大鼠模型。Sham组同样经麻醉、开腹及分离动脉等步骤,但不予动脉缩窄。笼养3个月。32只心衰组存活的大鼠随机分为心衰对照组（HF组）和BRL组。BRL组大鼠尾静脉注射beta3受体特异性激动剂BRL-37344、每周2次、连续4周。另外两组同时尾静脉注射相应剂量的生理盐水。测定大鼠心率（HR）、左心室收缩末压（LVESP）、左心室舒张末压（LVEDP）、左心室内压最大收缩和舒张速率（±dp/dtmax）。测定左心室质量指数（LVMI）。酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录钠通道电流;RTPCR检测心室肌细胞beta3受体、L型Ca²⁺通道mRNA表达。结果 （1）与Sham组比较,心衰组大鼠LVESP、dp/dtmax显著降低（P<0.01）,HR、LVEDP显著升高（P<0.01）。与HF组比较,BRL组LVESP、dp/dtmax显著降低（P<0.01）,HR、LVEDP显著升高（P<0.01）。BRL组大鼠的LVMI显著低于Sham组和HF组（P<0.01）。（2）大鼠心室肌细胞beta3受体表达心衰组明显高于Sham组（P<0.01）,BRL组明显高于HF组（P<0.01）。（3）与Sham组比较,HF组L型Ca²⁺通道电流(I_Ca,L)峰值明显减低（P<0.05）,BRL组I_Ca,L,峰值无明显变化（P>0.05）。于各组左心室肌细胞外液加入不同浓度的BRL-37344,Sham组的I_Ca,L峰值变化不明显（P>0.05）,HF组和BRL组I_Ca,L峰值明显增加（P<0.01）,且同等浓度下BRL组I_Ca,L峰值增加的更显著（P<0.01）。（4）Sham组与HF组L型Ca²⁺通道mRNA表达无明显差异（P>0.05）,BRL组表达明显增加。结论 BRL-37344可促进慢性心衰大鼠心室肌细胞beta3受体、L型Ca<     

异丙肾上腺素对犬心房肌细胞动作电位及L型钙电流的影响

目的研究两种浓度的异丙肾上腺素（Isoproterenol，ISO）对犬心房肌细胞（AP）及L型钙电流（ICa，L）的作用。方法采用离体灌注和消化的方法获取心房肌细胞，用全细胞记录技术记录单个心房肌细胞AP以及ICa，L。结果低浓度ISO（10nmol／L）可延长APD，可使90％AP时程（APD90）延长34．4％，并降低AP平台期水平。高浓度ISO（1μmol／L）可减少APD，APD90减少32．1％。两种浓度的ISO均可诱发AP后除极及触发活动。10nmol／L和1μmol／L ISO分别增加ICa，L 36．7％和49．3％。结论两种浓度的ISO对心肌细胞ICa，L均有促进作用，Ca^2＋内流引起的肌浆网Ca^2＋释放可能是房性心律失常的发生机制之一。     

异丙肾上腺素对犬心房肌细胞动作电位及L型钙电流的影响

目的研究两种浓度的异丙肾上腺素(Isoproterenol,ISO)对犬心房肌细胞(AP)及L型钙电流(ICa,L)的作用。方法采用离体灌注和消化的方法获取心房肌细胞,用全细胞记录技术记录单个心房肌细胞AP以及ICa,L。结果低浓度ISO(10nmol/L)可延长APD,可使90%AP时程(APD90)延长34.4%,并降低AP平台期水平。高浓度ISO(1μmol/L)可减少APD,APD90减少32.1%。两种浓度的ISO均可诱发AP后除极及触发活动。10nmol/L和1μmol/LISO分别增加ICa,L36.7%和49.3%。结论两种浓度的ISO对心肌细胞ICa,L均有促进作用,Ca2+内流引起的肌浆网Ca2+释放可能是房性心律失常的发生机制之一。     

U69 593对家兔心室肌细胞L型Ca2+电流的影响

目的 :研究 U695 93对家兔心室肌细胞 L 型 Ca2 +电流 （ ICa· L）的影响。方法 :采用全细胞膜片钳技术记录家兔心室肌细胞 IC a· L。结果 :在 -2 0～ +4 0 m V测试电压范围内 ,10 0 nmol/ L U695 93显著增加 IC a· L,以 +10 m V为最大激活电压 ,其峰值 ICa· L由加药前 -7.1± 0 .4p A/ p F增至 -8.3± 0 .5 p A/ p F （ P<0 .0 1,n=8）。 10 0 nmol/ LU 695 93不影响 IC a· L电压依赖性激活与失活特性。结论 :U695 93可增加家兔心室肌细胞 ICa· L。     

黄芪总黄酮对急性心肌梗死大鼠心室肌细胞L-型钙电流及钠电流的作用

目的研究黄芪总黄酮（TFA）对急性心肌梗死（Am）大鼠心室肌细胞L-型钙电流（L—ICa）及钠电流（INa）的作用。方法设正常对照组、AMI组及TFA实验组。大鼠开胸左前降支结扎造成AMI,开胸前5min实验组大鼠舌静脉注射剂量为20mg／kg的TFA溶液50ul。用胶原酶酶解法急性分离AMI模型大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术记录左前降支供血区心外膜细胞的L—ICa及INa的作用。结果①应用TFA（20mg／kg）后,L—ICa从（0．313±0．14）nA增加到（0．402±0．27）nA,差异有统计学意义（P〈0．01,n=6）。②应用TFA（20mg／kg）后与对照组比较,峰值从（-8．43±2,03）nA下降到（-6．37±1．58）nA,差异有统计学意义（P〈0．01,n=6）。结论TFA可以增加AMI大鼠心室肌细胞L—ICa的幅值,TFA可显著降低AMI大鼠心室肌细胞INa的幅值。     

乙酰胆碱对离体豚鼠心房肌动作电位及其脱敏的影响

目的 :研究迷走神经递质乙酰胆碱 （ACh）对离体豚鼠心房肌细胞动作电位 （AP）的影响及其对心房肌的脱敏 ,探讨脱敏可能发生的机制。方法 :采用标准玻璃微电极细胞内记录方法 ,观察不同浓度 （0 .0 1,0 .1,1μm ol/ L） ACh对心房肌细胞 AP的影响及对动作电位时程 （APD）和收缩力的脱敏现象 ,并观察了受体或通道水平的阻断剂阿托品、氯化铯 （Cs Cl）对 ACh所致的心房肌 APD脱敏的影响。结果 :10 .0 1,0 .1,1μm ol/ L ACh分别缩短 APD的变化率为 （6 .0 2± 1.0 4） % ,（14.2 0± 3.79） % ,（30 .2 0± 3.6 5 ） %。 2 0 .0 1μmol/ L ACh对心房肌细胞没有脱敏 ;0 .1μm ol/ L ACh对心房肌细胞 APD有轻微脱敏 ,脱敏持续时间为 1m in;而 1μmol/ L ACh对心房肌细胞 APD脱敏明显 ,脱敏持续时间为 5 m in。 31μmol/ L 阿托品与 2 0 m mol/ L Cs Cl并不能阻断 1μmol/ L ACh对心房肌细胞APD的脱敏。结论 :ACh缩短 APD的作用随浓度增大而增大 ;ACh对离体豚鼠心房肌细胞 APD的脱敏有浓度依赖性与时间依赖性 ;脱敏的发生可能与毒蕈碱型胆碱能受体及 Ik,ACh电流有关。     

氧化苯胂对大鼠心室肌细胞L型Ca2+电流的影响

目的 :探讨氧化苯胂 （PAO） ,一种膜可通透的酪氨酸磷酸酶抑制剂 ,对大鼠心室肌细胞 L型 Ca2 +电流 （ICa,L）的影响。方法 :采用全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞 ICa,L。结果 :1PAO对基础 ICa,L及β-肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素 （Iso）激发的 ICa,L有抑制作用 ;2 PAO对腺苷酸环化酶激动剂 forskolin激发的 ICa,L亦有抑制作用 ;3电极内液加入 1.5 mm ol/ L矾酸钠不能消除 PAO的作用 ;4PAO对 ICa,L的抑制作用可被二硫代苏糖醇反转。结论 :PAO抑制 ICa,L的作用与 c AMP- PKA-磷酸化途径和酪氨酸磷酸酶无关 ,可能与其使 L 型 Ca2 +通道蛋白上巯基氧化有关。     

美托洛尔对急性心肌梗死大鼠心房重构的影响

目的:探讨β1受体阻滞剂美托洛尔对急性前壁心肌梗死大鼠心房结构和电重构的影响. 方法:通过结扎冠状动脉前降支制备前壁心肌梗死大鼠模型.将存活大鼠随机分为心肌梗死组(MI组,n=6)、美托洛尔组(MI+M组,n=6),另设假手术组(Sham组,n=6).MI+M组术后24 h给予美托洛尔10 mg· kg-1·d-1灌胃...     

渗透压对大鼠心室肌细胞L型Ca2+电流的影响

目的 :观察细胞胞外渗透压的改变对大鼠心室肌 L型 Ca2 +（ICa,L）电流的影响。方法 :采用全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞 ICa,L。结果 :细胞外的渗透压由 3 10 m Osm / kg H2 O降低至 2 2 0 m Osm/ kg H2 O可使 ICa,L的 rundown明显变慢 ,电流大小无统计学意义上的差异 ;而当其中细胞外的渗透压由 3 10 m Osm/ kg H2 O升高至 410m Osm/ kg H2 O时可使 ICa,L减小 （5 1.4± 7.9） % （n=4,P<0 .0 1）。结论 :细胞外渗透压变化对大鼠心室肌基础 ICa,L有明显影响     

环孢素A对心房颤动犬心房钾通道蛋白Kv1．5的影响

目的：研究环孢素A（CsA）作用下心房颤动犬心房钾离子通道蛋白Kv1．5表达变化。方法：实验犬分为环孢素A干预组（CsA组）、心房纤颤（AF组）及假手术组（Sham组）三个处理组，应用Western免疫印迹技术比较各组间钾离子通道蛋白Kv1．5表达的差异。结果：AF组较Sham组钾通道蛋白Kv1．5表达明显降低（P〈0．01）；CsA组较AF组钾通道蛋白Kv1．5升高（P〈0．01），CsA组与Sham组之间差异不明显（P〉0．05）。结论：CsA逆转了心房颤动犬心房钾离子通道蛋白Kv1．5表达变化，可能会在心房纤颤的治疗中发挥积极的意义。     

心房快速起搏和链霉素对兔心房电重构和心房钠尿肽影响的研究

目的 探讨心房快速起搏(RAP)和牵张激活性离子通道(SAC)阻断剂链霉素对兔心房电重构和心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide, ANP)的影响。方法 选用新西兰白兔18只，随机分为RAP组和RAP+链霉素组[起搏前静脉推注链霉素30 mg/kg,然后以25μg/(kg·h)维持静脉滴注],每组9只。检测2组心房有效不应期(AERP),采用ELISA法测定起搏前和起搏后15 min、30 min和1 h血浆ANP水平及环磷酸鸟苷(cGMP)浓度。结果 与基线比较，RAP组起搏后1 h的AERP₂₀₀和AERP₁₅₀明显缩短(P<0.05),RAP+链霉素组起搏后15 min的AERP₂₀₀和AERP₁₅₀明显延长(P<0.05)。与RAP组比较，RAP+链霉素组在起搏后30 min和1 h的AERP₂₀₀和AERP₁₅₀明显延长，差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。RAP组AERP频率适应性与...     

慢性房颤患者心房肌细胞KAch通道Kir3.4基因和蛋白表达变化及机制

目的研究慢性房颤（AF）患者心房肌细胞乙酰胆碱敏感钾通道（KAch）Kir3.4基因及蛋白表达变化,探讨其在AF离子通道重构机制中的作用。方法选择22例心脏瓣膜病手术患者,根据基础心律分为AF组9例和窦性心律（SR）组13例。术中AF组取左、右心房标本,SR组取右心房标本,用半定量RT-PCR技术检测心房肌细胞KAch基因Kir3.4 mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测Kir3.4表达的KAch蛋白亚基GIRK4表达。结果与SR组比较,AF组心房肌细胞Kir3.4 mRNA表达明显减少,GIRK4蛋白表达明显降低（P均〈0.05）。AF组左、右心房肌细胞Kir3.4 mRNA表达及GIRK4蛋白含量无统计学差异（P〉0.05）。结论慢性AF患者心房肌细胞KAch通道的Kir3.4基因及蛋白表达均下调,此变化可能是KAch通道电流密度减小的分子基础,是机体代偿保护机制反应。     

扩张性心肌病患者心房Cx43蛋白的表达及其意义

目的:观察扩张性心肌病（dilated cardiomyopathy,DCM）患者心房连接蛋白43（Cx43）的表达、磷酸化的Cx43（pCx43）及其分布特征。探讨Cx43与房颤（atrial fibrillation,AF）之间的关系。方法: 18例接受心脏移植术的DCM患者中,8例无AF史且手术时为窦性心律（SR,SR组）,6例有AF史但手术时为SR（AF+SR组）,4例有AF史且手术时有AF（AF+AF组）。用超声心动图(ECG)测定左心房大小与左心室收缩功能;用免疫印迹法及免疫荧光染色法检测Cx43、pCx43及其分布。结果: DCM患者的左心房直径(LAD)、左室射血分数(LVEF)在SR、AF+SR、AF+AF组间均没有显著差异。与SR组相比,AF+SR组心房组织中Cx43和pCx43无显著差异;AF+AF组总Cx43的表达量及pCx43显著升高(P<0.01及P<0.05)。病理观察提示,AF+AF组Cx43和pCx43升高,Cx43向细胞两侧分布,且pCx43升高。结论: DCM患者的房颤节律伴随Cx43的表达、磷酸化及其分布异常。     

小檗碱对快速心房起搏兔心房肌场电位时程及兴奋传导速度的影响

目的应用微电极阵(MEA)技术研究小檗碱对快速心房起搏(RAP)兔心房肌场电位时程(fAPD)及兴奋传导速度(ECV)的影响,探讨其抗心房颤动(简称房颤)的作用机制。方法新西兰兔40只,随机分成5组,对照组(n=8),起搏组(n=8),起搏+小檗碱A组(5μmol/L,n=8),起搏+小檗碱B组(10μmol/L,n=8),起搏+小檗碱C组(20μmol/L,n=8)。RAP 24h后,对照组于相应时间,迅速开胸取出心脏,分别灌流改良台氏液或含5、10、20μmol/L小檗碱的改良台氏液行Langendroff灌流,用柔性电极贴附右房,分别记录各组fAPD和ECV的变化。结果相较对照组,起搏组心房肌fAPD缩短,传导速度减慢(P0.05)。相较起搏组,小檗碱A、B、C组心房肌fAPD逐渐延长,ECV逐渐加快(P0.05)。结论在RAP兔模型中,小檗碱不仅能有效延长心房肌fAPD,还能加快ECV,显示出可能具有较好的抗房颤作用。     

肾去交感神经对犬心房颤动易患性和心房重构的影响

目的 探讨肾去交感神经对犬长期快速右心房起搏后心房颤动（房颤）易患性和心房重构的影响.方法 20只杂种犬分为假手术组、右心房起搏（RAP）组、肾去交感神经（RSD）组3组.假手术组（n=6）植入起搏器后程控关闭起搏器;RSD组（n=7）先行双侧肾交感神经消融,经6周恢复后植入起搏器;RAP组（n=7）和RSD组快速起搏（400～ 450次/min）右心房5周.所有犬在实验基线期和终点进行超声心动图及电生理检查,取静脉血检测血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平;处死动物后迅速取心房组织行形态学评估.结果 与假手术组和RSD组相比,RAP组犬起搏5周后房颤诱发率明显升高（P＜0.05）.RAP组心房有效不应期（AERP）明显缩短[（142±8）ms对（115±9）ms,P＜0.05],而RSD组AERP缩短无统计学意义（P＞0.05）.超声心动图结果发现,RAP组和RSD组的左心房内径（LAD）、左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心房容积最大值和最小值（LAVmax和LAVmin）起搏5周后均较起搏前明显增加,但RSD组的LAVmax和LAVmin较RAP组明显减少（P＜0.05）.右心房快速起搏5周后,与假手术组相比,RAP组和RSD组犬血清AngⅡ水平明显增加[RAP组：（217.5±53.5） ng/L对（95.0±25.2） ng/L,P＜0.05;RSD组：（149.6±26.3）ng/L对（95.0±25.2） ng/L,P＜0.05];与RAP组相比,RSD组犬血清AngⅡ显著降低（[（149.6±26.3）ng/L对（217.5±53.5） ng/L,P＜0.05）.电镜结果显示肾去交感神经能显著减缓快速右心房起搏5周后导致的肌丝分解、肌纤维带型和收缩完整结构的丧失和线粒体肿胀等超微结果变化.Masson三色法染色结果表明与RAP组相比,RSD组犬左、右心房肌的胶原容积分数（CVF）均明显减低（P＜0.05）.结论 肾去交感神经可抑制长期快速右心房起搏后房颤的诱发和心房重构.     

风湿性心脏病心房纤颤和窦性心律患者心房肌细胞外向钾电流的比较

目的 :探讨外向钾 （ K+ ）电流的变化在风湿性心脏病 （ RHD）心房纤颤 （ AF）心房电重构 （ AER）中的作用。方法 :采用酶解法获得人心房肌单个细胞 ,利用膜片钳技术的全细胞记录法 ,记录 RHD AF和窦性心律患者心房肌细胞外向性 K+ 电流的两个主要组分瞬时外向钾电流 （ Ito）和持续外向钾电流 （ IKSUS）。结果 :AF患者心房肌细胞 Ito和 IKSUS在不同除极电压下均较窦性心律患者明显减小 （ P<0 .0 1）。结论 :外向电流减小是复极延缓的因素 ,外向钾电流的减小可能在慢性 AF引起 AER中不起主要作用     

糖尿病兔心房电生理及L型钙电流的变化

目的研究糖尿病时心房电生理参数、L型钙电流(ICa,L)变化,探讨糖尿病引起心房颤动(简称房颤)的机制。方法本研究分为离体电生理实验和全细胞膜片钳实验两部分,每部分均分为糖尿病组和对照组。糖尿病兔采用四氧嘧啶诱导。每组各8只兔,饲养8周,离体电生理部分在建立Langendorff灌流的离体兔心脏模型后,测量心房间传导时间(IACT)、高位右房、高位左房、低位左房有效不应期(AERP)、AERP的离散度(AERPD)、应用Burst刺激观察房颤诱发情况;膜片钳实验采用酶解法分离单个心房肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录ICa,L。结果与对照组比较,糖尿病组IACT延长(37.66±8.88 ms vs 27.70±2.12 ms),AERPD增大(28.37±7.52 ms vs 11.62±5.60 ms);房颤诱发率升高(6/8 vs 1/8);心房肌细胞ICa,L最大电流密度显著增加(8.94±3.81 pA/pF vs 5.16±1.10 pA/pF),P均<0.05。结论糖尿病时存在心房电重构。     

起搏成纤维细胞调控心房肌细胞电生理的机制研究

目的探究快速起搏状态下大鼠心房成纤维细胞对心房肌细胞动作电位的影响及其作用机制。方法本研究为前瞻性对照研究, 分离大鼠的乳鼠(雌雄不限, 体重8～10 g)心房成纤维细胞和心房肌细胞分别进行培养, 采用随机数字表法将心房成纤维细胞分为A组(不做任何处理)、B组(在1.0 V/cm的电压、10 Hz频率条件下起搏48 h)、C组[起搏+10 μmol/L中性鞘磷脂酶2抑制剂(GW4869)培养48 h], 48 h后收集成纤维细胞上清液, 超速离心提取外泌体以2×109颗粒/ml的量与心房肌细胞共培养。将心房肌细胞分为D组(心房肌细胞+A组外泌体共培养组)、E组(心房肌细胞+B组外泌体共培养组)、F组(心房肌细胞+C组外泌体共培养组)。比较不同状态成纤维细胞来源的外泌体对心房肌动作电位时限的影响。透视电镜分析外泌体形态, 纳米颗粒跟踪分析外泌体粒径分布、浓度等指标, 膜片钳检测不同组间心房肌细胞动作电位时限[复极达50%和90%时的动作电位时限(APD50和APD90)]。结果与A组相比, B组外泌体分泌量明显增加{[(1.193±0.090)×1012]颗粒/ml对[(1.613±0....