不同浓度KH902对兔碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用

目的　观察不同浓度ＫＨ９０２对兔碱烧伤后角膜新生血管（ｃｏｒｎｅａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ,ＣＮＶ）的抑制作用。方法　取成年新西兰兔２４只,建立兔碱烧伤模型,将兔随机分为４组,使用ＫＨ９０２眼用注射剂（康柏西普）配置不同浓度的ＫＨ９０２,Ａ组２．５ｍｇ·ｍＬ－１,Ｂ组５ｍｇ·ｍＬ－１,Ｃ组１０ｍｇ·ｍＬ－１,Ｄ组为对照组（生理盐水）,均为每日滴眼３次。分别在制模后３ｄ、７ｄ、１４ｄ、３０ｄ拍摄眼前节照片,观察ＣＮＶ情况并行角膜激光共焦显微镜检查,并计算ＣＮＶ面积。观察各组处死兔常规病理和ＶＥＧＦ表达情况。结果　在制模后２８ｄ内,四组ＣＮＶ形成,其中Ｄ组ＣＮＶ较Ａ、Ｂ、Ｃ组生长明显;对各组切片进行观察发现,四组均出现了角膜上皮及基质细胞的损失和修复、炎性细胞的浸润和ＣＮＶ的生长,但Ｄ组的炎性细胞较密集,ＣＮＶ管径和密度较高。制模后１４ｄ、２８ｄ,Ａ、Ｂ、Ｃ组炎性细胞密度较Ｄ组均显著减少（均为Ｐ＜０．０１）;在制模后７ｄ、１４ｄ、２８ｄ,Ａ、Ｂ、Ｃ组较Ｄ组ＶＥＧＦ表达明显减少;Ａ、Ｂ、Ｃ三组进行组间比较,仅制模后２８ｄ时Ｂ、Ｃ组间差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）,其余差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）;制模后７ｄ、１４ｄ、２８ｄ,Ａ、Ｂ、Ｃ三组均较Ｄ组ＣＮＶ面积减少,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）,而三组组间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　不同浓度的ＫＨ９０２对兔碱烧伤后的ＣＮＶ均有抑制作用,低浓度的ＫＨ９０２即可产生明显的抑制作用。     

骨髓间充质干细胞移植对兔碱烧伤角膜新生血管形成的抑制作用

目的　观察角膜碱烧伤兔行骨髓间充质干细胞（ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＢＭＳＣ）移植后不同时间受损角膜新生血管（ｃｏｒｎｅａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ,ＣＮＶ）发生情况,探讨ＢＭＳＣ移植后对碱烧伤ＣＮＶ的抑制作用。方法　取日本大白兔２４只,随机分为实验组和对照组各１２只,实验组进行烧伤后ＢＭＳＣ移植,体外分离培养得到ＢＭＳＣ,制备中度角膜碱烧伤模型,随后行ＢＭＳＣ移植。对照组不进行移植。分别于移植后３ｄ、１４ｄ、２８ｄ观察ＣＮＶ生长状态、计算ＣＮＶ面积、采用ＲＴ-ＰＣＲ检测角膜中基质金属蛋白酶-２（ＭＭＰ-２）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ-α）的表达情况。结果　ＢＭＳＣ贴壁生长,呈长梭形,ＣＤ９０呈现高表达（表达率９７．９４％）,ＣＤ３１低表达（表达率０．１５％）。ＢＭＳＣ移植后２８ｄ时实验组角膜较对照组明显透亮,新生血管面积显著减小（Ｐ＜０．０５）。ＢＭＳＣ移植后１４ｄ、２８ｄ,实验组ＭＭＰ-２基因条带的灰度值均低于对照组（均为Ｐ＜０．０５）,实验组ＭＭＰ-２ｍＲＮＡ表达低于对照组且１４ｄ时差异最明显（Ｐ＜０．０１）。ＢＭＳＣ移植后３ｄ,实验组ＴＮＦ-α基因条带灰度值较对照组低,实验组ＴＮＦ-αｍＲＮＡ的表达明显受到抑制,且两组间差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;１４ｄ时,实验组ＴＮＦ-α基因表达仍低于对照组（Ｐ＜０．０５）,２８ｄ时实验组与对照组ＴＮＦ-αｍＲＮＡ表达量相当,差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　ＢＭＳＣ通过抑制ＭＭＰ-２的表达,减少细胞外基质的溶解,抑制ＣＮＶ的形成;通过降低炎性细胞因子ＴＮＦ-α的表达,减轻局部炎症反应,从而抑制ＣＮＶ的生长。     

加减驻景方对病理性近视脉络膜新生血管动物模型血管内皮生长因子及色素上皮衍生因子表达的影响

目的　观察加减驻景方对病理性近视脉络膜新生血管（ｃｈｏｒｏｉｄａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ,ＣＮＶ）的血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕ-ｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）及色素上皮衍生因子（ｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ-ｄｅｒｉｖｅｄｆａｃｔｏｒ,ＰＥＤＦ）表达的影响,探讨中药驻景方对病理性近视ＣＮＶ的干预作用。方法　将３周龄雌性三色豚鼠７５只随机选取１５只为空白对照组,剩余豚鼠均戴头套右眼形觉剥夺诱导病理性近视,并随机分为模型组、中药组,每组各３０只,右眼行氪激光光凝。于光凝后第１天开始连续灌胃２１ｄ,中药组予驻景方３．２８５ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１（１．５ｍＬ·ｄ－１）,模型组予等量的生理盐水。造模后７ｄ、１４ｄ、２１ｄ分别行免疫组织化学及ＲＴ-ＰＣＲ检测。结果　免疫组织化学结果显示,造模完成后１４ｄ、２１ｄ时中药组ＶＥＧＦ表达的光密度值（０．１３０１±０．０１９６、０．０５５６±０．０１１９）较模型组（０．１６５９±０．０５４３、０．０９６１±０．０２５９）减少,差异均有统计学意义（Ｐ＝０．００６,Ｐ＜０．００１）。造模完成后１４ｄ及２１ｄ时中药组ＰＥＤＦ表达的光密度值（０．０３８９±０．００４０、０．０５４３±０．００８５）较模型组（０．０３０５±０．００７７、０．０２９３±０．００５９）增高,差异有统计学意义（Ｐ＝０．０２６,Ｐ＜０．００１）。ＲＴ-ＰＣＲ结果显示,ＶＥＧＦｍＲＮＡ、ＰＥＤＦｍＲＮＡ在各组中均有表达,中药组ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达水平较模型组明显减弱,而ＰＥＤＦｍＲＮＡ的表达较模型组增强。结论　中药驻景方可抑制氪激光诱导的病理性近视ＣＮＶ模型中ＶＥＧＦ的表达,促进ＰＥＤＦ的表达,从而抑制ＣＮＶ的形成。     

紫外光A/核黄素角膜交联后兔角膜基质内基质金属蛋白酶-1含量的变化

目的　检测紫外光Ａ／核黄素角膜交联（ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔＡ／ｒｉｂｏｆｌａｖｉｎｃｏｒｎｅａｌｃｒｏｓｓ-ｌｉｎｋ-ｉｎｇ,ＵＶＡＲＣＸＬ）后兔角膜基质内基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ,ＭＭＰ）-１的短期含量变化。方法　１５只新西兰白兔,随机分为３组,每组５只,Ａ组为空白对照组,Ｂ组为角膜交联后３ｄ,Ｃ组为角膜交联后７ｄ。Ｂ、Ｃ两组行ＵＶＡＲＣＸＬ。各组取角膜后去除角膜上皮和内皮细胞,应用ＥＬＩＳＡ法检测角膜基质内ＭＭＰ-１的含量。结果　Ａ组角膜基质内ＭＭＰ-１／总蛋白含量为（０．１４０±０．０３６）×１０－６,Ｂ组为（０．２４２±０．０５９）×１０－６,Ｃ组为（０．３７２±０．０６１）×１０－６,３组之间差异有统计学意义（Ｆ＝２４．０５１,Ｐ＝０．０００）。ＵＶＡＲＣＸＬ后３ｄ,兔角膜基质内ＭＭＰ-１含量显著升高,与Ａ组相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）,术后７ｄ其含量进一步升高,与Ｂ组相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。结论　ＵＶＡＲＣＸＬ后７ｄ内,兔角膜基质内ＭＭＰ-１含量持续增加,推测ＭＭＰ-１可能对ＵＶＡＲＣＸＬ后的角膜基质重塑起一定作用。     

同轴微切口超声乳化白内障吸出术后角膜生物力学变化

目的　比较同轴微切口超声乳化白内障吸出术（ｐｈａｃｏｅｍｕｌｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ,Ｐｈａｃｏ）及标准切口Ｐｈａｃｏ术后角膜生物力学的变化。方法　年龄相关性白内障患者３１２例（３１２眼）随机分成两组。其中研究组（２．２ｍｍ同轴微切口组）１５９例,对照组（３．０ｍｍ标准切口组）１５３例。记录两组术前数据,包括年龄、性别、裸眼视力（ｕｎｃｏｒｒｅｃｔｅｄｖｉｓｕａｌａｃｕｉｔｙ,ＵＣ-ＶＡ）、最佳矫正视力（ｂｅｓｔｃｏｒｒｅｃｔｅｄｖｉｓｕａｌａｃｕｉｔｙ,ＢＣＶＡ）、角膜滞后性（ｃｏｒｎｅａｌｈｙｓｔｅｒｅｔｉｅ,ＣＨ）、角膜阻力因数（ｃｏｒｎｅａｌｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｆａｃｔｏｒ,ＣＲＦ）、Ｇｏｌｄｍａｎｎ相关眼压（ｇｏｌｄｍａｎｎｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒｐｒｅｓｓｕｒｅ,ＩＯＰｇ）、角膜补偿眼压（ｃｏｒｎｅａｌｃｏｍｐｅｎｓａｔｅｄＩＯＰ,ＩＯＰｃｃ）、中央角膜厚度（ｃｅｎｔｒａｌｃｏｒｎｅａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＣＣＴ）、角膜内皮细胞计数（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｃｏｕｎｔ,ＥＣＣ）;术中数据包括累积能量复合参数（ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅｄｉｓｓｉｐａｔｅｄｅｎｅｒｇｙ,ＣＤＥ）、手术时间。术后１ｄ、１周、２周、１个月复查,比较两组ＵＣＶＡ、ＢＣＶＡ、ＥＣＣ、ＣＣＴ、ＣＨ、ＩＯＰｇ、ＣＲＦ和ＩＯＰｃｃ。结果　术后１ｄ两组ＣＨ、ＣＲＦ均较术前明显降低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。术后１周,研究组ＣＨ、ＣＲＦ与术前差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）;对照组ＣＨ、ＣＲＦ较术前降低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。术后２周,两组ＣＨ、ＣＲＦ均恢复至术前水平（均为Ｐ＞０．０５）;两组ＩＯＰｇ、ＩＯＰｃｃ仍高于术前（均为Ｐ＜０．０５）,而低于术后１周（均为Ｐ＜０．０５）;两组ＣＣＴ恢复至术前水平（均为Ｐ＞０．０５）。术后４周,两组ＣＨ、ＣＲＦ、ＩＯＰｇ、ＩＯＰｃｃ、ＣＣＴ均恢复至术前水平（均为Ｐ＞０．０５）。术前,两组ＣＨ、ＣＲＦ与ＣＣＴ存在正相关性（研究组:ｒ１＝０．４３,ｒ２＝０．５２,对照组:ｒ１＝０．５６,ｒ２＝０．５３;均为Ｐ＜０．０５）。术后１ｄ,两组ＣＨ与ＣＣＴ均无相关性（ｒ１＝０．１３,ｒ２＝０．１０,均为Ｐ＞０．０５）。两组的ＣＲＦ值与ＣＣＴ在不同时相始终存在相关性（均为Ｐ＜０．０５）。两组间不同时相的ＣＨ与ＣＲＦ均存在正相关性（均为Ｐ＜０．０５）。结论　同轴微切口Ｐｈａｃｏ和标准切口Ｐｈａｃｏ均会改变角膜生物力学特征。同轴微切口Ｐｈａｃｏ比标准切口Ｐｈａｃｏ术后角膜生物力学特征恢复更快。     

兔角膜碱烧伤后角膜基质注射脐带间充质干细胞的疗效

目的　观察角膜基质注射脐带间充质干细胞（ｕｍｂｉｌｉｃａｌｃｏｒｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＵＭＳＣｓ）治疗兔角膜碱烧伤的效果。方法　健康新西兰大白兔随机分为３组,每组１２只,每只兔左眼为角膜碱烧伤模型眼。Ａ组兔左眼在碱烧伤２ｄ后角膜基质内注射含有２×１０６个ＵＭＳＣｓ的磷酸盐缓冲液２μＬ,Ｂ组注射相同剂量的磷酸盐缓冲液,Ｃ组为角膜碱烧伤后未进行处理组,在注射后不同时间对角膜混浊程度、新生血管生长情况、角膜上皮缺损情况等进行临床观察并评分,同时进行综合评分。结果　注射后１４ｄＡ组新生血管生长较Ｂ组明显缓慢,Ａ组、Ｂ组注射隧道周围角膜新生血管生长评分分别为０分、２分,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。注射后２ｄ和６ｄＡ组角膜混浊程度较Ｂ组明显轻,注射后２ｄＡ组、Ｂ组角膜混浊程度评分分别为２分、４分,注射后６ｄ评分与２ｄ相同,差异均具有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。注射后２ｄ、７ｄ角膜上皮荧光素染色评分各组之间差异均无统学意义（均为Ｐ＞０．０５）。结论　碱烧伤后角膜基质注射ＵＭＳＣｓ可减少新生血管的形成,为抑制碱烧伤后角膜血管化提供参考,碱烧伤后角膜基质注射ＵＭＳＣｓ可在一定程度上恢复角膜透明度。     

敲除TLR2基因对同种异体小鼠角膜移植排斥反应的影响

目的　探讨敲除Ｔｏｌｌ样受体２（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒ２,ＴＬＲ２）基因后是否抑制同种异体小鼠角膜排斥反应的发生。方法　以ＢＡＬＢ／ｃ为供体,各取３０只Ｃ５７ＢＬ／６和同背景ＴＬＲ２基因敲除鼠为受体行右眼角膜移植术,设为野生组（ＷＴ）和基因敲除组（ＫＯ）;取１９只Ｃ５７ＢＬ／６行右眼自体角膜移植术,为自体组（ＩＳＯ）;各取９只Ｃ５７ＢＬ／６和ＴＬＲ２基因敲除鼠分别设为野生对照组（ＷＴｃｏｎｔｒｏｌ）和基因敲除对照组（ＫＯｃｏｎｔｒｏｌ）。术后每周两次观察植片并记录免疫排斥的发生时间;术后１４ｄ,收集术眼同侧颈部淋巴结,行流式细胞术分析ＣＤ４＋Ｔ细胞百分比;收集术眼角膜,行免疫组织化学染色和实时荧光定量ＰＣＲ检测角膜干扰素（ｉｎｔｅｒ-ｆｅｒｏｎ,ＩＦＮ）-γ、ＴＬＲ２和ＭｙＤ８８的表达。结果　ＷＴ组和ＫＯ组小鼠角膜移植术后中位生存时间ＫＯ组（３５．０±３．８）ｄ长于ＷＴ组（２１．０±１．５）ｄ（Ｐ＜０．０５）。流式细胞术分析显示,ＷＴ组同侧颈部淋巴结ＣＤ４＋Ｔ细胞百分比较ＷＴｃｏｎｔｒｏｌ组明显增高（Ｐ＜０．０５）,而ＩＳＯ和ＫＯ组相对于其对应的ｃｏｎｔｒｏｌ组（ＷＴ／ＫＯｃｏｎｔｒｏｌ）差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）;免疫组织化学结果显示,ＩＳＯ和ＫＯ组间角膜ＩＦＮ-γ和ＭｙＤ８８分子表达无差异,但两者均低于ＷＴ组。ＫＯ组角膜几乎不表达ＴＬＲ２分子,ＩＳＯ组有微量表达,ＷＴ组表达明显增高;ＰＣＲ检测显示,ＩＳＯ和ＫＯ组角膜ＩＦＮ-γ和ＴＬＲ２ｍＲＮＡ相对表达量差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）,但两者均低于ＷＴ组（均为Ｐ＜０．０５）;ＫＯ组角膜ＭｙＤ８８ｍＲＮＡ相对表达量比ＩＳＯ组高（Ｐ＜０．０５）,但两者均低于ＷＴ组（均为Ｐ＜０．０５）。结论　敲除ＴＬＲ２基因可以一定程度抑制同种异体小鼠角膜排斥反应的发生。     

多西环素对碱烧伤大鼠角膜组织中IL-1和TNF-α表达的影响

目的　通过建立大鼠角膜碱烧伤模型,研究多西环素对碱烧伤角膜组织中白细胞介素-１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ-１,ＩＬ-１）及肿瘤坏死因子-α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ-α,ＴＮＦ-α）表达的影响,探索多西环素作用于角膜碱烧伤的抗炎机制。方法　使用自制模具建立６４只ＳＤ大鼠一侧眼角膜碱烧伤动物模型,分成以３ｇ?Ｌ－１多西环素眼液滴眼的实验组和以溶媒滴眼的阴性对照组,每日滴眼４次。于碱烧伤后３ｄ、７ｄ、１４ｄ、２１ｄ分别取下３２只大鼠烧伤侧角膜组织行酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）,检测角膜组织中ＩＬ-１、ＴＮＦ-α的表达情况。结果　ＥＬＩＳＡ检测显示碱烧伤后第３天阴性对照组ＩＬ-１蛋白相对表达量为（１２７．５８±３５．９２）μｇ?ｇ－１,第７天为（８９．５４±４２．６３）μｇ?ｇ－１,第３天多西环素组ＩＬ-１蛋白相对表达量为（５３．７７±２１．１８）μｇ?ｇ－１,第７天为（３６．６０±１０．７８）μｇ?ｇ－１,第３天、第７天时多西环素组ＩＬ-１与阴性对照组相比表达显著下降（均为Ｐ＜０．０５）;第１４天、第２１天与阴性对照组比较ＩＬ-１蛋白表达差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。碱烧伤后第３天阴性对照组ＴＮＦ-α蛋白相对表达量为（６９．４５±２１．４３）μｇ?ｇ－１,第７天为（５５．３７±１８．３４）μｇ?ｇ－１,第３天多西环素组ＴＮＦ-α蛋白相对表达量为（２４．０６±９．３９）μｇ?ｇ－１,第７天为（１４．８１±５．７２）μｇ?ｇ－１,碱烧伤后第３天、第７天时多西环素组ＴＮＦ-α与阴性对照组相比表达显著下降（Ｐ＜０．０５）;第１４天、第２１天与阴性对照组比较ＴＮＦ-α蛋白表达差异均无统计学意义（均为Ｐ＞００５）。结论　多西环素作用于碱烧伤大鼠角膜可下调ＩＬ-１、ＴＮＦ-α基因的表达,这可能是多西环素下调炎症因子表达,减轻炎症反应的机制之一。     

超声微泡造影剂联合鼠神经生长因子对高眼压兔视神经损害的保护作用

目的　观察超声微泡造影剂联合鼠神经生长因子（ｍｏｕｓｅｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｍＮＧＦ）对高眼压兔视神经损害的保护作用。方法　新西兰大白兔４０只,随机分为５组（每组８只）。空白对照组（Ａ组）、高眼压模型组（Ｂ组）、高眼压模型＋玻璃体内注射ｍＮＧＦ组（Ｃ组）、高眼压模型＋玻璃体内注射ｍＮＧＦ联合超声组（Ｄ组）、高眼压模型＋玻璃体内注射ｍＮＧＦ联合超声微泡组（Ｅ组）。行闪光视觉诱发电位（ｆｌａｓｈｖｉｓｕａｌｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌ,Ｆ-ＶＥＰ）检测,记录Ｐ１００波潜伏期及振幅;取各组兔视网膜行病理形态学观察和透射电镜观察兔视神经超微结构。结果　Ｂ组眼压在造模后１周、２周、４周分别为（３３．４±２．８）ｍｍＨｇ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）、（３４．１±２．５）ｍｍＨｇ和（３４．８±２．２）ｍｍＨｇ,与Ａ组眼压（１３．６±１．８）ｍｍＨｇ、（１３．４±１．７）ｍｍＨｇ和（１３．３±１．４）ｍｍＨｇ相比差异有显著统计学意义（Ｐ＝０．０００）。Ｂ组的Ｐ１００潜伏期（１２５．００±１８．７０）ｍｓ和振幅（５．５０±３．０３）ｎＶ较Ａ组的Ｐ１００潜伏期（４６．２０±６．９０）ｍｓ和振幅（１５．９０±２．４８）ｎＶ明显延长和降低,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;Ｅ组的Ｐ１００潜伏期（６３．８０±８．３５）ｍｓ和振幅（１１．３７±２．８４）ｎＶ较Ｂ、Ｃ、Ｄ组明显缩短和升高,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。Ｂ组视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌｓ,ＲＧＣ）计数（１４．９７±１．３０）个明显少于Ａ组（２６．０４±０．７０）个,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;Ｅ组ＲＧＣ计数（２３．９７±０．９０）个明显高于Ｂ、Ｃ、Ｄ组,但仍低于Ａ组,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。Ｅ组兔视网膜各层结构较Ｂ、Ｃ、Ｄ组完整,分层较清晰。Ｅ组兔视神经髓鞘结构尚完整,轴突内微管、微丝结构可见,较Ｂ、Ｃ、Ｄ组视神经超微结构明显改善。结论　超声微泡造影剂与鼠神经生长因子联合使用可增强鼠神经生长因子对高眼压兔视神经损害的保护作用。     

视网膜静脉阻塞患者血浆和泪液中血管内皮生长因子表达的研究

目的　观察视网膜静脉阻塞（ｒｅｔｉｎａｌｖｅｉｎｏｃｃｌｕｓｉｏｎ,ＲＶＯ）患者血浆和泪液中血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的表达情况。方法　选取我院确诊的２８例ＲＶＯ患者,收集血浆和泪液样本,通过酶联免疫吸附试验测定ＶＥＧＦ表达水平,在１ｄ、２周和４周使用光学相干断层扫描检查中央视网膜厚度（ｃｅｎｔｒａｌｒｅｔｉｎａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＣＲＴ）,另选健康志愿者３０人作为对照组,比较两组血浆和泪液中ＶＥＧＦ、ＣＲＴ表达差异。结果　各时间点,ＲＶＯ组血浆中ＶＥＧＦ表达水平显著高于对照组（均为Ｐ＜０．０５）,１ｄＲＶＯ组泪液ＶＥＧＦ表达水平与对照组差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。ＲＶＯ组血浆和泪液中ＶＥＧＦ表达水平呈微弱正相关（Ｐ＜０．０５）,而对照组中这种相关性稍强（Ｐ＜０．０５）。两组２周后ＣＲＴ明显增加,１ｄ与２周ＣＲＴ值差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）,２周与４周差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）,各时间段ＲＶＯ组与对照组差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论　ＲＶＯ患者泪液中ＶＥＧＦ表达水平及ＣＲＴ与健康人比较显著升高,血浆与泪液中ＶＥＧＦ表达水平的变化有一致性,泪液检测作为非侵入性的检测方式,对ＲＶＯ的早期诊断有较高的临床应用价值。     

人参皂苷Rg3抑制角膜新生血管生长的实验研究

目的观察人参皂苷Rg3对大鼠角膜碱烧伤后新生血管形成（CNV）有无抑制作用及其对正常角膜有无毒副作用。方法采用0．5％人参皂苷Rg3滴眼液滴眼21d,通过裂隙灯显微镜、光镜、电镜观察检测人参皂苷Rg3滴眼液的毒副作用。建立角膜碱烧伤后角膜新生血管模型,用0．1％、0．2％、0．5％3种不同浓度人参皂苷Rg3滴眼液及0．1％地塞米松磷酸钠滴眼液4次／d滴眼治疗28d,观察人参皂苷Rg3治疗效果。并用免疫组化方法观察血管内皮细胞生长因子（VEGF）及色素上皮细胞衍生因子（PEDF）表达。结果人参皂苷R船滴眼液滴眼21d后无明显不良反应。治疗组与地塞米松组较对照组CNV减少（P〈0．01）。治疗组与地塞米松组较对照组VEGF表达降低,PEDF表达增高（P〈0．01）。结论人参皂苷Rg3滴眼液局部滴眼无明显毒副作用,且对CNV有显著抑制作用。     

人羊膜匀浆提取液抑制大鼠角膜碱烧伤后新生血管生成

目的:研究人羊膜匀浆提取液对角膜碱烧伤后新生血管形成过程中色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived fac-tor,PEDF)和血管内皮生长因子(vascular-endothelial growthfactor,VEGF)的表达影响及对角膜新生血管的抑制作用。方法:SD大鼠54只建立双眼角膜碱烧伤模型,随机分为3组:A组为3g/L氧氟沙星滴眼液组,B组为10g/L泼尼松龙滴眼液组,C组为新鲜人羊膜匀浆提取液组,并分别于治疗后不同时间点进行角膜新生血管增生情况观察,HE染色病理学观察,免疫组化行VEGF和PEDF的表达检测。结果:B,C组比A组新生血管增生少,多形核白细胞(poly-morphonuclear leukocyte,PMN)浸润程度轻,VEDF表达水平显著降低,但B,C两组之间VEDF表达无显著性差异(P>0.05)。C组PEDF表达水平显著高于A,B组(P<0.01),但A,B之间PEDF表达无显著性差异(P>0.05)。结论:新鲜人羊膜匀浆提取液能减少碱烧伤后角膜组织中PMN浸润,增强角膜组织PEDF的表达水平。     

氢气水对大鼠碱烧伤角膜新生血管抑制作用的研究

目的　研究氢气水（H₂水）滴眼对大鼠碱烧伤诱导角膜新生血管（corneal neovascularization,CNV）的抑制作用并探讨H₂水抑制CNV的机制。方法　SPF级SD大鼠48只48眼,成功建立碱烧伤诱导CNV模型,随机分为空白组、对照组和治疗组。治疗组给予1.6×10^-6 H₂水滴眼,对照组给予妥布霉素地塞米松眼液滴眼,空白组不做任何处理。分别在模型建立后第1天、第3天、第7天、第14天测量CNV长度,计算CNV面积。碱烧伤后第14天深麻醉下取大鼠角膜及房水,免疫组织化学染色法检测角膜组织中PEDF蛋白表达,RT-PCR法检测角膜组织中PEDF mRNA表达,ELISA检测房水内TNF-α蛋白表达。结果　角膜碱烧伤后第3天、第7天、第14天,治疗组新生血管面积分别为（3.26±1.82）mm²、（8.59±3.98）mm²和（3.24±2.34）mm²;对照组分别为（4.27±2.68）mm²、（6.44±4.67）mm²和（15.98±4.75）mm²;空白组分别为（9.49±2.79）mm²、（17.71±4.06）mm²和（25.35±1.40）mm²。碱烧伤后第3天、7天和14天,治疗组和对照组均小于空白组,差异均有显著统计学意义（均为P＜0.01）;碱烧伤后第3天和第7天,治疗组与对照组差异均无统计学意义（均为P>0.05）;碱烧伤后第14天治疗组明显小于对照组,差异具有显著统计学意义（P＜0.01）。碱烧伤后第14天,免疫组织化学染色结果显示,治疗组角膜上皮层PEDF蛋白表达较对照组和空白组明显增强,基质层新生血管极少;RT-PCR检测结果显示,治疗组PEDF mRNA表达明显高于对照组和空白组,差异均有显著统计学意义（均为P＜0.01）;ELISA检测结果显示,治疗组房水中TNF-α蛋白含量明显低于对照组与空白组,差异均有显著统计学意义（均为P＜0.01）。结论　1.6×10^-6 H₂水滴眼能有效抑制大鼠碱烧伤诱导的CNV。     

二十碳五烯酸对大鼠角膜新生血管核转录因子KB及细胞因子表达的抑制作用

背景角膜新生血管（CNV）是炎症性角膜病变导致视力下降和角膜移植后发生排斥反应的重要原因,其发生机制和治疗一直是国内外角膜病研究的热点。目的探讨二十碳五烯酸（EPA）对碱烧伤大鼠CNV核转录因子KB（NF—KB）、白细胞介素1α（IL一1αt）、IL一6表达的影响及作用机制。方法用浸有1mol／LNaOH的3mm圆形滤纸贴附于72只SD大鼠的右眼角膜中央30s制作角膜碱烧伤模型,用随机数字表法将大鼠随机分为3个组,另6只匹配的正常大鼠作为正常对照组。碱烧伤0．02mgEPA治疗组和碱烧伤0．03mgEPA治疗组大鼠分别于碱烧伤后即刻结膜下注射0．04ml剂量为0．02mg或0．03mgEPA,碱烧伤模型组结膜下注射0．04ml生理盐水,正常对照组大鼠未行结膜下注射。大鼠干预后每天裂隙灯下观察CNV的生长面积和角膜水肿。分别于造模后24h,4、7、14d过量麻醉处死动物后制备角膜标本,采用苏木精一伊红染色法检测各组大鼠角膜的组织病理学变化,免疫组织化学方法检测各组大鼠角膜组织中CD34的表达以计数血管内皮细胞,用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及蛋白印迹法分别检测各组大鼠角膜组织中IL-1α-mRNA和IL．6mRNA的表达及NF—KBp65的蛋白表达。结果裂隙灯下见造模后2～4d,CNV缓慢生长,角膜水肿,上皮缺损;造模后7～10d,CNV面积增加,角膜水肿减轻;造模后14d,CNV面积最大,血管变细。苏木精一伊红染色显示,碱烧伤后7d碱烧伤组角膜上皮部分缺损,基质层水肿明显,可见较多炎性细胞及大量CNV;碱烧伤0．03mgEPA治疗组与碱烧伤0．02mgEPA治疗组均可见角膜上皮修复,基质层水肿减轻,少量炎性细胞,未见CNV。碱烧伤后7d和14d,碱烧伤0．02mgEPA治疗组CNV相对面积分别为（15．80±6．43）％、（11．06±2．14）％,碱烧伤0．03mgEPA治疗组为（16．10±7．41）％、（11．06±2．51）％,均明显小于碱烧伤组的（84．74±7．77）％、（89．63±7．50）％,差异均有统计学意义（P〈0．05）。碱烧伤后7d,碱烧伤组CD34在CNV的内皮细胞中呈强阳性表达,而在碱烧伤0．02mgEPA治疗组、0．03mgEPA治疗组角膜中未见表达。RT—PCR检测结果表明,碱烧伤后4d,碱烧伤0．02mgEPA治疗组、0．03mgEPA治疗组IL一1α、IL一6mRNA在角膜组织中的表达量明显低于碱烧伤组,蛋白印迹检测证实NF—KBp65蛋白在角膜组织中的表达低于碱烧伤组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论EPA能够抑制NF—KB、IL一1α、IL一6的表达,从而抑制碱烧伤后CNV的生长。     

核糖核酸酶抑制因子抑制碱烧伤后角膜新生血管

目的 制作兔碱烧伤后角膜新生血管(CNV)模型,结膜下注射核糖核酸酶抑制因子(RI),以探讨RI对碱烧伤后CNV的抑制效果。方法 每只兔双眼均制成碱烧伤后CNV模型。自身双眼对照,实验眼结膜下注射RI,对照眼用等量生理盐水结膜下注射。根据烧伤范围和烧伤时间,16只兔随机分成4组,各组给药量相应改变。两周后,摄片分析CNV面积。结果 实验眼组较对照眼组,CNV被抑制了27.83％,P<0.01组1的抑制率为35.26%,P<0.01;组2的抑制率为48.32％,P<0.05;组3的抑制率为8.01％,P<0.01;组4的抑制率为34.84%,P<0.01。结论 RI能够抑制碱烧伤后CNV的发生。