YG系列菌株在检测烃致突性中的应用

Ａｍｅｓ试验菌株的培养基保存法安慧敏，赵冰琪，王松枝（哈尔滨市卫生防疫站毒理科哈尔滨１５００１０）毒理实验经常选用Ａｍｅｓ试验，其菌株的保存方法主要有冷冻干燥保存法和低温冷冻保存法，但因需特定的设备，故在一般实验室内应用受到一定的限制。为了适应实际工...     

保存年轻乳腺癌患者生育能力的相关临床问题

保存年轻乳腺癌患者的生育能力是影响患者生活质量的重要问题,但治疗后生育对患者远期生存有影响,因而需合理选择妊娠时机.乳腺癌系统治疗下生育能力会遭受各种损伤,现阶段保护生育能力的措施有应用促性腺激素释放激素类似物、胚胎冷冻保存、卵母细胞冷冻保存和卵巢组织冷冻保存.     

应用穿梭载体检测转基因动物的基因突变

应用穿梭载体检测转基因动物的基因突变陈汉源第一军医大学细胞生物学实验室广州５１０５１５基因突变涉及发育异常、遗传疾病、肿瘤演发和衰老。检测突变方法大多用于体外培养细胞，Ａｍｅｓ法检测需组氨酸沙门菌的回复突变，需要补充肝浆，提供酶以激活原诱变剂成为诱变...     

长期冷冻保存的外周血干细胞采集物形成CIK的能力及其生物学活性的研究

目的:观察是否能从长期深低温冷冻保存的外周血干细胞采集物(PBSC)大量诱导出具有细胞毒活性的CIK细胞。方法:10例液氮中保存3~6年的PBSC标本作为实验组,7例新鲜的PBSC标本作为对照组。PBSC标本去除红细胞后用IFN-γ、CD3单抗、IL-2联合诱导CIK细胞。14天后收获细胞,检测活力、扩增倍数。流式细胞学检测CIK细胞免疫表型,MTT法检测其细胞毒活性。结果:实验组和对照组培养后CIK细胞分别扩增了41·8倍和22·8倍,活化后CD8 T细胞比例升高(P<0·05),但两组的NKT细胞(CD3 CD16/56 T细胞)纯度活化后并没有升高。两组CIK细胞对K562细胞株的杀伤作用无显著性差异。结论:从长期冷冻保存的外周血干细胞采集物中可以诱导出具有细胞毒活性的CIK细胞。     

肺癌快速诊断渗滤试剂盒的研制及其临床应用

目的:为能简便快速检出肺癌。方法:研制以微孔滤膜为载体,以胶体金有色微粒为标记物的渗滤试剂盒。结果:检测肺癌血清141例,检出116例,漏诊25例;阳性率为82.3％,假阴性率为17.7％。检测良性肺疾患106例,检出肺癌阴性101例,阴性率为95.3％,其敏感性为82.3％,特异性为95.3％,准确性为87.9％。结论:其优点:不需加显色剂,检测快速简便;性能稳定,冷冻干燥后可在室温下长期保存;不需任何仪器设备,几分钟即可用肉眼判断结果。     

致突变性的原位测定应用研究

致突变性的原位测定应用研究毕和堪，顾淑珠，王永鑫（上海医科大学，放射医学研究所）目前用于监测评价大气污染方法很多，应用微生物的基因突变检测污染物遗传毒作用的方法最广。美国ＮＩＯＳＨ发展了ＴＡ９８和ＴＡ１００菌，使该菌既保存了其亲代原有的遗传特性，具有...     

自身免疫性肝炎的分类和自身抗体对发病机制及诊断的意义

自身免疫性肝炎是一原因不明症状群,病毒、细菌、化学物质和药物是遗传敏感个体诱发自身-参与炎症性疾病过程的潜在病因。自身免疫性肝炎的诊断根据许多临床和实验室指标,自身抗体是重要的诊断指标,常规实验室的检测方法是间接免疫荧光法。然而,间接免疫荧光法并不能区分个别抗体抗原系统,过去数年应用分子生物学技术,已在分子水     

肿瘤患者术后手术部位感染的病原菌分布及其耐药性研究

目的:调查我院近5年肿瘤患者术后手术部位感染的病原菌分布及其耐药性,为临床合理选用抗生素提供参考依据.方法:选取我院于2008年10月至2013年9月接受手术治疗的肿瘤患者750例,严格按《全国临床检验操作规程》进行细菌分离培养及鉴定和药敏试验,采用伤口拭子法采集标本,药敏试验采用纸片扩散法,分别对葡萄球菌属甲氧西林耐药株和肠杆菌科细菌产生的超广谱3-内酰胺酶(ESBLs)菌株进行检测,计算不同致病菌的耐药率和产耐药酶菌株的比例.结果:750例患者中共分离出病原菌845株,其中G-杆菌占64.85％(548/845),G+球菌占31.72％(268/845),G-杆菌和G+球菌分别以大肠埃希菌和凝固酶阴性的葡萄球菌为主;可产生超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌比例分别为48.65％(72/148)和22.89％(19/83),阴沟肠杆菌产生高产头孢菌素酶(AmpC)的菌株占22.58％(14/62),铜绿假单胞菌产生金属β内酰胺酶的菌株占21.84％(19/87),甲氧西林耐药株分别占金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的26.67％(20/75)和20.45％(18/88),未发现MRSA和MRCNS对万古霉素的耐药株;万古霉素和碳青霉烯类药物仍然分别是G+球菌和肠杆菌科细菌最敏感的药物.结论:本院肿瘤患者术后感染以G-杆菌为主;细菌耐药性以产生超广谱β内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌、产AmpC酶的阴沟肠杆菌、产金属β内酰胺酶的铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌比较严重,其他细菌也分别存在不同程度的耐药情况,临床微生物实验室应继续加强耐药性监测调查,为临床合理选用抗菌药物提供依据.     

-80℃直接冷冻保存造血干细胞移植治疗恶性血液病

:[目的]探讨 -80℃直接冷冻保存自体造血干细胞移植(APBSCT)治疗恶性血液病的疗效。[方法]ABSCT5例 ,移植前采用粒细胞集落刺激因子(G CSF)动员外周血干细胞(PBSC) ,分离后 ,将采集的PBSC分袋直接置于 -80℃冰箱冷冻保存。[结果]PBSC短期冻存后检测回收率和台盼蓝拒染率均在80%以上 ;接受移植的5例患者均获成功 ,并持续缓解(CCR) ,中位CCR时间为18(5～31)个月 ,无复发。[结论] -80℃直接冷冻短期保存PBSC具有良好效果 ;具有简单、方便、费用低等优点 ;ABSCT造血重建快并发症少 ,值得进一步推广     

DNA重组修复试验检测39种药品和化学品诱变性的研究

本文按Kada推荐的方法建立了DNA重组修复试验的3种方法,用于检测药品的遗传毒性和潜在致癌性。 结果表明:基本划线法、低温孵化法和代谢活化法同时检测7种致突变剂,4-硝基喹啉、呋喃基糠酰胺、丝裂霉素C、盐酸氮芥、正定霉素和黄曲霉毒素B_1等6种获阳性结果,仅环磷酰胺1种呈阴性结果。低温孵化法比基本划线法敏感性高的多,代谢活化法可做为低温孵化法的补充。     

低温等离子射频消融技术对猪感染创面的在体杀菌作用

目的观察低温等离子对不同细菌的在体杀菌效果。方法选取5头小型猪,每只猪背部使用特制打孔器制备36个直径为9mm（面积约为0．64cm3）、深度约为0．3cm的圆形创面,分别为每个创面接种0．05ml浓度为0．5×10^8CFU／ml的金黄色葡萄球菌稀释液、表皮葡萄球菌稀释液或铜绿假单胞菌稀释液,制成全层皮肤缺损感染创面的动物模型。每种细菌感染的60个创面采用数字随机法分为10组,3档5s组、3档10s组、3档15s组、6档5s组、6档10s组、6档15s组、9档5s组、9档108组、9档15s组和未处理组。每组6个创面。然后对创面进行细菌定量检查并进行统计学分析。结果180个创面接种金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和铜绿假单胞菌稀释液后48h,均制成感染性创面。经过等离子射频处理后的各种细菌感染创面细菌量均较未处理的创面有明显降低,金葡菌3档0．0034;金葡菌6档0．0128;金葡菌9档0．0058。表皮葡萄球菌3档0．0213;表皮葡萄球菌6档0．0005;表皮葡萄球菌9档0．0012。铜绿假单胞菌3档0．0318;铜绿假单胞菌6档0．0085;铜绿假单胞菌9档0．0125,差异有统计学意义（P〈0．05）;各档位的不同作用时间相比较,差异有统计学意义fP〈0．05）,作用时间越长,杀菌率越高;各作用时间的3档和6档、9档比较,差异有统计学意义（P〈0．05）,且档位越高,杀菌作用越明显。6档和9档之间比较差异不明显。结论低温等离子射频消融术对多种不同临床常见细菌均具有明显的在体杀菌作用。     

甲状腺细针穿刺不同细胞学标本保存方法对BRAF V600E基因突变检测的影响

目的:探讨不同保存方法对甲状腺细针穿刺细胞学标本BRAF V600E基因突变检测的影响。方法:回顾性分析自2019年01月至2022年02月华北理工大学附属医院收治的接受B超引导下行甲状腺细针穿刺检查的患者164例。分别从商品化细胞保存液固定标本、生理盐水保存标本和刮取染色后涂片标本中提取DNA并检测BRAF V600E基因突变。结果:通过三种保存方法提取的DNA浓度均数及内控Ct值相比,差异均无统计学意义（P＞0.05）。细胞保存液组和生理盐水保存液组、生理盐水保存液组和刮片组所提取DNA的A260/280值相比,差异均无统计学意义（P＞0.05）,而细胞保存液组和刮片组所提取DNA的A260/280值比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:甲状腺FNAC涂片标本刮片后进行基因突变检测获得DNA的纯度高,且对实验室要求低,适宜在基层医院推广。     

抗肿瘤药物敏感实验试剂盒的建立及其稳定性的观察

目的:为了对MTT法抗肿瘤药物敏感试验方法进行规范,制备成试剂盒,并对试剂盒的稳定性进行了观察。方法:试剂盒组成:(1)预加抗肿瘤药物的细胞培养板,将各种抗肿瘤药物稀释到工作浓度后加入48孔细胞培养板中,冷冻干燥,真空包装。(2)淋巴细胞分离液。(3)含10%牛血清的DMEM培养基。(4)5%的MTT溶液。(5)GKN溶液。以新鲜加抗肿瘤药物的细胞培养板为对照,测定试剂盒的稳定性。结果:由冷冻干燥、真空包装的预加药的细胞培养板组成的试剂盒保存6个月和12个月后,与对照组比较,结果没有显著性差异(P>0.05)。结论:该试剂盒操作简便,稳定性好,利于临床推广使用。     

抗肿瘤药物敏感实验试剂盒的建立及其稳定性的观察

目的：为了对MTT法抗肿瘤药物敏感试验方法进行规范,制备成试剂盒,并对试剂盒的稳定性进行了观察。方法：试剂盒组成：（1）预加抗肿瘤药物的细胞培养板,将各种抗肿瘤药物稀释到工作浓度后加入48孔细胞培养板中,冷冻干燥,真空包装。（2）淋巴细胞分离液。（3）含10%牛血清的DMEM培养基。（4）5%的MTT溶液。（5）GKN溶液。以新鲜加抗肿瘤药物的细胞培养板为对照,测定试剂盒的稳定性。结果：由冷冻干燥、真空包装的预加药的细胞培养板组成的试剂盒保存6个月和12个月后,与对照组比较,结果没有显著性差异（P〉0.05）。结论：该试剂盒操作简便,稳定性好,利于临床推广使用。     

微量知释法对肿瘤患者术后合并感染ESBLs菌株的检测验证

用新型微量稀释法肿瘤患者术后并感染广谱β－内酰胺酶菌株进行检测验证。方法双纸片法衬试微量稀释法验证，对２７株肺炎克雷伯氏菌和３２株大肠埃希氏菌进行超广谱β－内酰胺酶检测。     

血液肿瘤患者化疗后院内血行感染细菌分布特点及药敏分析

 目的　了解血液肿瘤化疗患者院内血行感染细菌分布特点及药物敏感性。方法　采用Kirby-Bauer法进行药敏试验,分析血液中分离得到的56株细菌。结果　革兰阴性菌（G-）占69.64 ％,革兰阳性菌（G+）占30.36 %。以大肠埃希菌最为常见（37.50 ％）,其次为肺炎克雷伯菌（10.71 ％）。葡萄球菌全部为耐甲氧西林葡萄球菌,仅对万古霉素敏感。结论　血液肿瘤化疗患者院内血行感染仍以G-菌为主;大肠埃希菌最常见;葡萄球菌全部为耐甲氧西林葡萄球菌,仅对万古霉素100 %敏感。     

胰腺癌实验室诊断现状与研究进展

胰腺癌是一种预后极差的恶性肿瘤,临床早期诊断胰腺癌较为困难。目前临床对胰腺癌特征性实验室诊断指标的检测尚属于探索阶段。随着医学检验技术的发展,临床实验室在肿瘤基因突变检测、肿瘤标志物的免疫学检验等方面不断涌现出新的方法和技术。目前主要的学术观点认为,实验室选择2种或2种以上具有较高灵敏度和特异度的胰腺癌相关基因和血清肿瘤标志物进行联合检测,有助于早期诊断胰腺癌。本文对近年来胰腺癌实验室诊断的相关文献进行综述,以期为临床早期诊断胰腺癌提供参考依据。     

一种促进sos反应间接法噬菌斑清晰的方法

业已证明在检测环境诱变剂众多的方法中,SOS反应间接法即原噬菌体诱导法。也是一种快速,敏感的实用方法,其检出的诱变剂一般都是致癌剂。因此,国外已普遍应用,目前我国也在积极推广应用。该方法是将溶原性菌及其释放出的λ噬菌体敏感的指示菌,按一定比例混在半固体培养基中,遇诱变剂后,溶原菌释放出噬菌体溶解指示菌,培养基上呈现噬菌斑,周围呈混浊的菌苔。但噬菌斑与菌苔之间的光度反差不明     

肾脏疾病的临床化学指征

尿液的化学检测,是从最早的炼金术中产生的。早在1695年德克尔斯已发表了检测蛋白质的尝试,但大多数至今常用的定性检测方法,是十九世纪的化学实验室建立的。这些检测方法,不仅用于检测代谢物质,如葡萄糖、胆色素和酮体,而且也用于发现肾脏疾病的特异征象(蛋白质、血和亚硝酸盐)。此外,还有尿沉渣的显微镜检,这一方法作为标准“尿常规”检查的组成部分,已有一百多年。显微镜检除了发现血细胞和细菌外,还可查出上皮以及肾小管内含物所形成的管型。 在传统基础上,我们试图把现代的分析方法与对肾脏疾病病理机制的深入了解结合起来,并且按照现代实验室诊断的基本规范,形成一个排除肾脏疾病的策略。     

乳癌孕激素受体的酶联孕酮亲和组化检测法

乳癌的治疗和预后与乳癌激素受体水平有着密切的关系。雌激素受体(ER)阳性的乳癌病人较阴性者预后好,对内分泌治疗的有效率高。如同时考虑雌激素受体水平和孕激素受体水平则对病人的治疗和预后的提示价值更高。 目前孕激素受体(PgR)的检测方法主要是生化法如葡聚糖——活性炭法(DCC法)等,但由于其操作技术复杂,需要精密而价昂的测试仪器,在国内推广仍受较大的限制。为了建立一个方法简便,数据可靠,易于推广的检测方法,本实验室在前一阶段成