AMPA受体对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响

目的：通过建立大鼠坐骨神经损伤神经再生室模型，观察局部应用α-氨基-3-羧基-5-甲基异恶唑-4-丙酸(alpha-amino-3-hydoxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate，AMPA)受体激动剂及其拮抗剂对周围神经再生的影响。方法：雄性SD大鼠40只，随机分为4组(AMPA组，CNQX组，细胞内液组以及正常对照组)，每组10只，手术切断右侧6mm坐骨神经并用硅胶管套接，前3组分别向套管内注入10μmol／L AMPA，10μmol／LCNQX，细胞内液5μL，术后两个月后观察坐骨神经功能指数、电生理、组织学及超微结构。结果：CNQX组坐骨神经功能指数[(-33．79&;#177;3．91)％]，神经肌肉动作电位[(9．41&;#177;0．54)mV]和运动神经传导速度[(22．83&;#177;3．44)m／s]，组织学检查有髓神经纤维数目(400．0&;#177;17．0)条、纤维直径为[(406．7&;#177;21．1)nm]，均优于细胞内液组[(-45．09&;#177;6．23)％，(6．60&;#177;0．42)mV，(14．62&;#177;2．47)m／s，(337．0&;#177;8．03)条，(349．0&;#177;24．1)nm]，P&;lt;0．01，超微结构观察有髓神经纤维的髓鞘厚度、成熟度优于细胞内液组；而AMPA组上述各指标[(-52．13&;#177;5．73)％，(5．63&;#177;1．00)mV，(7．51&;#177;1.83)m／s，(247．0&;#177;39．0)条，(283．7&;#177;32．5)nm]则较细胞内液组差(P&;lt;0．01或0．05)。结论：AMPA受体拮抗剂CNQX能有效促进神经再生及功能的恢复，而其激动剂AMPA则相反。     

党参总皂苷抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠皮质神经细胞凋亡的作用

目的：以原代培养的胚胎大鼠大脑皮质神经细胞进行缺氧缺糖再给氧处理，观察党参总皂苷对神经细胞凋亡的抑制作用。方法：胚胎大鼠大脑皮质神经细胞原代培养，含连二亚硫酸钠的无糖Earle’s液进行缺氧缺糖处理造模，MTT法测定细胞存活率，Hoechst 33342和PI原位双染法荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死、凋亡细胞百分率，APO-BRDU法流式细胞术检测凋亡细胞百分率，Fluo-3法流式细胞术检测细胞内Ca^2+浓度，评价药效。结果：细胞存活率：与模型组[(19．69&;#177;5．80)％]比较党参总皂苷0．52mg／L组[(39．21&;#177;12．21)％]，0．052mg／L组[(37．9l&;#177;4．67)％]能显著提高细胞存活率(P&;lt;0．001)；细胞坏死率：与模型组[(44．99&;#177;12．81)％]比较党参总皂苷0．52mg/L组[(15．66&;#177;4．67)％]，0.052mg／L组[(23、98&;#177;4.04)％]和0．0052mg／L组[(20．50&;#177;5．19)％]能显著降低细胞坏死率(P&;lt;0．001)；原位双染法细胞凋亡率：与模型组[(17．44&;#177;4．82)％]比较党参总皂苷0．52mg／L组[(10．58&;#177;2．04)％]，0．052mg／L组[(11．61&;#177;2．35)％]能显著降低细胞凋亡率(P&;lt;0．05)；流式细胞术检测细胞凋亡率：与模型组[(8．55&;#177;3．84)％]比较党参总皂苷0．52mg／L组[(3．85&;#177;1．92)％]，0．0052mg／L组[(3．45&;#177;2．22)％]能显著降低细胞凋亡率(P&;lt;0．05)；细胞内Ca^2+平均荧光值，与模型组(47．37&;#177;9．68)比较党参总皂苷0．52mg／L组(23．56&;#177;13．19)能显著降低细胞内Ca^2+平均荧光值(P&;lt;0．05)，表明党参总皂苷能明显降低细胞内Ca^2+浓度。结论：党参总皂苷对缺血再灌注损伤后神经细胞的坏死和凋亡过程均具有抑制作用，这种作用可能与其能降低细胞内Ca^2+浓度有关，提示党参总皂苷是党参治疗脑卒中急性期的主要效应成分。     

钙三醇和甲状旁腺素对鼠心肌细胞凋亡的影响及机制

目的：研究甲状旁腺素(parathyroid hormone，PTH)对心肌细胞内游离钙和细胞凋亡的影响，以及钙三醇的修复作用。方法：利用培养的新生SD大鼠(n=25)心肌细胞，以F1uo-3／AM负载，通过激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙浓度([Ca^2+],)；采用透射电镜和流式细胞仪观察细胞凋亡的变化。结果：PTH1-34 0．01μmol／L和0．1μmol／L刺激7d后，心肌细胞内钙荧光强度分别为186．0&;#177;43．6，217．9&;#177;22．2，、细胞凋亡率分别为(6．97&;#177;1．00)％和(12．58&;#177;1．75)％较对照组[(77．7&;#177;19．9)％，(0．12&;#177;0．11)％]显著增加，差异有显著性意义(F=158．52,54．19．P&;lt;0．01)。若以PTH1-34 0．1 μol／L刺激，并同时加入0．001μmol／L的钙三醇干预上述指标明显降低[分别为(114．3&;#177;29．9)％，(3．43&;#177;0．40)％]，差异有显著性意义(F=158．52，54．19，P&;lt;0．01)；但同时应用0．1μmol／L钙三醇干预，则无显著改善。结论：PTH1-34可以浓度依赖性增加心肌细胞内[Ca^2+]i，诱导细胞肥大和凋亡；适宜浓度的钙三醇干预，具有修复作用。     

帕金森病黑质多巴胺神经元的凋亡与其发病机制

目的：研究帕金森病黑质多巴胺神经元的死亡机制。方法：用四唑盐法及流式细胞仪观察囊泡单胺类转运体(Vesicular Monoamine Transporter，VMAT)功能抑制对大鼠嗜铬细胞瘤(pheochromoeytoma cell，PC12)细胞凋亡的影响。结果：多巴胺浓度为0．15，0．30，0．45，0．60mmol／L时，PC12细胞生存率为(89．3&;#177;7．7)％．(62．9&;#177;4．3)％，(42．5&;#177;2．7)％，(37．6&;#177;3．7)％，与对照组100％比较0．30组差异有显著性意义(t=2．373-5．323，P&;lt;0．05)，0．45组与0．60组比较差异有显著性意义(t=4．673-5．323．P&;lt;0．01)，利血平协同多巴胺作用时，其生存率为(73．7&;#177;3．9)％．(49．8&;#177;2．1)％。(31．6&;#177;1．9)％，(20．1&;#177;1．7)％，与对照组100％比较，差异有显著性意义(t=3．043-5．673，P&;lt;0．05)。结论：VMAT功能抑制引发了多巴胺的内源性毒性，进而诱发多巴胺神经元的凋亡，可较好解释帕金森病的发病机制。     

HD02对慢性前脑缺血大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：研究HD02在大鼠慢性前脑缺血过程中对神经细胞凋亡的作用。方法：16～18个月SD大鼠64只，雄性，体质量300-350g。利用末端标记法和流式细胞仪，测定HD02干预前后脑缺血大鼠脑组织神经细胞的凋亡情况，并检测Caspase-3免疫阳性细胞、Calcineurin和钙激活中性蛋白酶(Calpain)活性。结果：HD02有减少阳性凋亡细胞出现率[(5．404&;#177;1.38)％与模型对照组(12.72&;#177;3．45)％比较，t=4．84，P&;lt;0．01]及减少Caspase-3免疫阳性细胞表达(HD02组比模型对照组：缺血15d：7．10&;#177;1．90比12．55&;#177;3.30,t=3．86，P&;lt;0．01：缺血30d：4，60&;#177;1．15比9．50&;#177;4．20，t=4．67，P&;lt;0．01)，降低Calcineurin D02组比模型对照组：大脑皮质每克蛋白中含[(38．24&;#177;5．58)比(48．98&;#177;5.04)nmol／s，t=3.64，P&;lt;O．O1]；海马每克蛋白中含[(37．87&;#177;3．38)比(52．58&;#177;4．92)nmol／s，t=3．75，P&;lt;0．O1]和Calpain活性[大脑皮质每毫克蛋白中含(2．96&;#177;O．77)比(4．56&;#177;0．85)A／h，t=3．84，P&;lt;0．05]；海马每毫克蛋白中含[(2．90&;#177;0．28)比(4．91&;#177;0．94)A／h，t=3．97，P&;lt;0，01]的作用。结果：HD02有一定的抗神经细胞凋亡的作用．     

大鼠脑组织缺血再灌注后促红细胞生成素对神经元的保护

目的：观察促红细胞生成素对缺血再灌注大鼠脑组织海马CA1区神经元数量、凋亡细胞数量变化、脑组织匀浆一氧化氮含量、丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性改变的影响。方法：实验于2003-03／2004-12在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室完成。选择健康Wistar大鼠66只，随机分为正常对照组6只，缺血再灌注生理盐水组30只(生理盐水对照组)，缺血再灌注促红细胞生成素组30只(促红细胞生成素治疗组)。除正常对照组线栓法制备大鼠大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型，缺血2h后再灌注。促红细胞生成素组于再灌注开始时经腹腔按2000U／kg注入生理盐水稀释的重组人红细胞生成素(200U／mL)，生理盐水对照组经腹腔注入等量的生理盐水。再灌注后观察时相点为2．6，12，24，48h，每个时间点6只。应用苏木精-伊红染色观察脑海马CA1区细胞数量情况，应用末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法检测海马CA1区神经元凋亡情况，应用硝酸还原酶法测定脑组织一氧化氮含量，羟胺法测定脑组织超氧化物歧化酶活性，硫代巴比妥酸法测定脑组织中丙二醛含量。结果：66只大鼠全部进入结果分析。①脑海马CA1区细胞计数：促红细胞生成素治疗组再灌注后12，24，48h比生理盐水对照组细胞数明显增加[(286.7&;#177;33.8)，(268.6&;#177;44.5)个／视野；(271．9&;#177;30．4)．(240．8&;#177;22，5)个／视野：(258，3&;#177;29．5)，(2018&;#177;307)个／视野；(t=3.189～5.589，P&;lt;0.01)]。②脑海马CA1区凋亡细胞计数：促红细胞生成素治疗组再灌注后6，12，24，48h比生理盐水对照组阳性细胞数明显减少[(21.5&;#177;5.8)，(28．4&;#177;6．51个／视野：(327&;#177;4．6)，(48.8&;#177;7.6)个／视野；(42.8&;#177;6.6)，(60．7&;#177;10.2)个／视野；(51.8&;#177;9.5)个／视野，(81.6&;#177;12．3)个／视野，(t=3.457～6.347,P&;lt;0.01)1。③脑组织一氧化氮含量：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6．12，24，48h比生理盐水对照组一氧化氮含量明显降低[(48．2&;#177;5．1)，(59，4&;#177;5．5)mmol／L;(51．4&;#177;6，3)，(66，3&;#177;98)mmol／L：(59．7&;#177;6．6)，(80.7&;#177;10.2)mmol／L；(55．7&;#177;8．1)，(77．8&;#177;9.2)mmol／L：(49.3&;#177;6．7)，[67．3&;#177;7，1)mmol／L，(t=3．258～5，624，P&;lt;0．01)]。④脑组织超氧化物歧化酶活性：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组超氧化物歧化酶活性明显增高[(3.78&;#177;0.74)，(3.21&;#177;0．31)μkat／L；(3．41&;#177;0.43)，(2．92&;#177;0.31)μkat／L；(3．21&;#177;0．35)，(2．51&;#177;0．27)μkat／L；(3．64&;#177;0．55)，(3.01&;#177;0.32)μkat／L；(4．10&;#177;0.56)，(3.55&;#177;0.41)μkat／L，(t=3．485～6，457，P&;lt;0．01)]。⑤脑组织丙二醛含量：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组丙二醛含量明显降低[(40.7&;#177;4．4)，(54.6&;#177;6．7)μmol／L；(51.3&;#177;5.4)，(65.7&;#177;8．8)μmol／L；(61.7&;#177;7．2)，(77.4&;#177;7.5)μmol／L；(53.8&;#177;6．4)，(67．8&;#177;9.1)μmol／L；(39．7&;#177;4．0)，(53．3&;#177;4.9)μmol／L，(t=3.541～6.045，P&;lt;0．01)]。结论：促红细胞生成素可增加大鼠局灶性脑缺血再灌注组织海马cAl区细胞存活数量，对海马CA1区细胞凋亡具有阻抑作用，降低一氧化氮生成量，使脂质过氧化反应的程度减轻，起到了对神经细胞的保护作用。     

促红细胞生成素对大鼠脑组织缺血再灌注海马CA1区神经元的作用

目的：观察促红细胞生成素对缺血再灌注大鼠脑组织海马CA1区神经元数量以及凋亡细胞数量变化、热休克蛋白70表达的影响。方法：实验于2003—03／2004-12在解放军第三军医大学新桥医院中心实验室完成。选择健康清洁级Wistar大鼠66只，随机分为正常对照组6只、缺血再灌注生理盐水组30只(生理盐水对照组)、缺血再灌注促红细胞生成素组30只(促红细胞生成素治疗组)。线栓法制备大鼠大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型，缺血2h后再灌注，促红细胞生成素治疗组经腹腔按200U／b注入生理盐水稀释的重组人红细胞生成素(200U／mL)，生理盐水对照组经腹腔注入等量的生理盐水。再灌注后观察时相点为2，6，12，24，48h，应用苏木精-伊红染色观察脑海马CA1区细胞数量情况，应用末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法检测海马CA1区神经元凋亡情况，应用免疫组织化学法测定热休克蛋白70表达情况。结果：66只大鼠全部进入结果分析。①脑海马CA1区细胞的计数：生理盐水对照组再灌注后12，24，48h比正常对照组细胞数明显减少[(268．6&;#177;44．5)个／视野。(240．8&;#177;22．5)个／视野，(201．8&;#177;30．7)个／视野，(337．3&;#177;45．3)个／视野，t=2．845—5．587，P&;lt;0．01]，促红细胞生成素治疗组再灌注后12，24，48h比生理盐水对照组细胞数明显增加[(286．7&;#177;33．8)个／视野，(271．9&;#177;30．4)个／视野，(258．3&;#177;29．5)个／视野，t=3．189—5．589，P&;lt;0．01]。②脑海马CA1区凋亡细胞计数：生理盐水对照组再灌注后2，6，12，24、48h比正常对照组脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记阳性细胞数明显增多[(16．5&;#177;3．5)个／视野，(28．4&;#177;6．5)个／视野，(48．8&;#177;7．6)个／视野，(60．7&;#177;10．2)个／视野，(81．6&;#177;12．3)个／视野，(8．8&;#177;2．1)个／视野，t=2．985—6．324，P&;lt;0．01]，促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记阳性细胞数明显减少[(12．7&;#177;3．4)个／视野，(21．5&;#177;5．8)个／视野，(32．7&;#177;4．6)个／视野，(42．8&;#177;6．6)个／视野，(51．8&;#177;9．5)个／视野，t=3．457—6．347，P&;lt;0．01]。③脑海马CA1区热休克蛋白70表达水平：生理盐水对照组再灌注后2，6，12，24，48h比正常对照组热休克蛋白70表达明显增多(0．264&;#177;0．027，0．328&;#177;0．053，0．475&;#177;0．067，0．587&;#177;0．095，0．512&;#177;0．063，0．225&;#177;0．024，t=3．254—6．028，P&;lt;0．01)，促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12h比生理盐水对照组热休克蛋白70表达明显增多(0．335&;#177;0．033，0．448&;#177;0．055，0．647&;#177;0．078，t=3．262—5．483．P&;lt;0．01)。结论：促红细胞生成素治疗可增加大鼠局灶性脑缺血再灌注组织海马CA1区细胞存活数量，对海马CA1区细胞凋亡具有阻抑作用，使热休克蛋白70表达上调，从而起到了对神经细胞的保护作用。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血中性粒细胞凋亡率的动态变化

背景：慢性阻塞性肺疾病是以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征，这些炎症细胞数量增加和活性改变的机制目前还不十分清楚。目的：探讨慢性阻塞性肺疾病患者外周血中性粒细胞凋亡特点及其与慢性阻塞性肺疾病发生发展的关系，以期为慢性阻塞性肺疾病患者的早期干预和功能监测提供参考方向。设计：以慢性阻塞性肺疾病患者为观察对象，健康人群为对照组的观察对比研究。单位：一所军医大学医院的呼吸内科。对象：观察对象为2003-02／12因慢性阻塞性肺疾病急性发作在第三军医大学大坪医院野战外科研究所呼吸内科住院的慢性阻塞性肺疾病患者，同期同类住院患者98例，采用随机数字表法随机选择18例患者作为慢性阻塞性肺疾病组，其中男12例，女6例，年龄48～70岁，平均(56&;#177;7)岁。对照组14例，为来本院查体的健康成年人，其中男10例，女4例，年龄50～70岁，平均(59&;#177;8)岁。方法：用密度梯度离心法分离外周血中性粒细胞，利用流式细胞仪和原位末端标记技术观察外周血中中性粒细胞凋亡的动态变化。主要观察指标：各组外周血中性粒细胞凋亡率比较。结果：流式细胞分析显示，缓解期慢性阻塞性肺疾病患者凋亡早期中性粒细胞的比率为(8．5&;#177;1．3)％，明显低于正常对照组[(12．5&;#177;1．8)％](t=6．25，P&;lt;0．01)，急性加重期[(5．1&;#177;0．6)％]又明显低于缓解期组(t=5．66，P&;lt;0．01)。原位末端标记技术分析也显示，慢性阻塞性肺疾病患者缓解期凋亡中性粒细胞的比率[(12．4&;#177;2．7)％]明显低于正常对照组[(21．5&;#177;4．8)％](t=5．76，P&;lt;0．01)，急性加重期[(4．9&;#177;0．4)％]又明显低于缓解期组(t=6．12，P&;lt;0．01)。凋亡晚期／坏死中性粒细胞的变化却出现相反的趋势，即缓解期慢性阻塞性肺疾病患者凋亡晚期／坏死中性粒细胞的比率[(2．8&;#177;0．5)％]明显高于正常对照组的比率[(1．3&;#177;0．4)％](t=6．37，P&;lt;0．01)，急性加重期[(3．7&;#177;0．3)％]又明显高于缓解期组(t=5．81，P&;lt;0．01)。结论：中性粒细胞的凋亡异常可能是引起慢性阻塞性肺疾病气道和肺组织中性粒细胞聚集的一个重要原因，该过程可能会在慢性气道炎症的发生发展中具有重要意义，为慢性阻塞性肺疾病的一级康复干预提供病因学基础。     

局灶脑缺血再灌注期亚低温对神经元凋亡及Bcl－2和Bax表达的影响

目的：研究再灌注期实施亚低温治疗对大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)后神经元细胞的凋亡及Bcl-2，Bax基因表达的影响。方法：采用Longa线栓法制作MCAO模型，模型成功后分别进行缺血期3h、再灌注期3h、缺血期至再灌注期6h的亚低温治疗。再灌注后24h断头取脑，连续切片作TUNEL染色及Bcl-2，Bax免疫组化染色。结果：①与对照组的Bcl-2阳性细胞百分率[(19．79&;#177;0。92)％]相比，缺血期亚低温3h组[(23．04&;#177;3．76)％]和缺血亚低温至再灌亚低温6h组[(25．47&;#177;2．03)％]的Bcl-2阳性细胞率增加(q=4．19,0．O1&;lt;P&;lt;O．05；q=7．17，P&;lt;0．01)。比较单纯再灌亚低温3h组[(22．21&;#177;2．25)％]与缺血亚低温至再灌亚低温6h组的Bcl-2阳性细胞百分率，前者Bcl-2阳性细胞率较后者低(q=4．1l，P&;lt;0．01)。②与对照组的Bax阳性细胞百分率[(52．15&;#177;6．18)％]相比，缺血期亚低温3h组[(32．35&;#177;3．71)％]和缺血亚低温至再灌亚低温6h组[(26．86&;#177;2．43)％]的Bax阳性细胞百分率均降低(q=14．21，P&;lt;0．O1；q=18．95，P&;lt;0．01)；而单纯再灌亚低温3h组的Bax阳性细胞百分率[(47．26&;#177;4．52)％]降低不明显(q=2．75，P&;gt;0．05)。③凋亡细胞阳性率与Bcl-2／Bax的比值呈负相关关系(r=-O．9759，P&;lt;O．01)。结论：①单纯于再灌注期实施亚低温3h不能明显抑制神经元细胞凋亡，对Bcl-2和Bax基因的表达也无明显影响；但将缺血期实施的亚低温延长至再灌注期后3h能进一步抑制神经元细胞凋亡并降低Bax基因的表达。②Bcl-2／Bax的比值能影响细胞凋亡的发生。     

酒依赖患者家庭干预后生活质量对照分析

目的：探讨家庭干预对酒依赖患者及家属生活质量的影响。方法：对济宁、泰山、枣庄3地市286例酒依赖患者采用单纯随机抽样方法划分为干预组(n=148)和对照组(n=138)，对干预组家庭采用上门随访、电话随访等形式给予有关治疗的详细内容及注意事项，并给予心理辅导3年后与对照组家庭采用相应生活质量问卷进行评定。结果：干预组患者生理维度(3．5&;#177;0．5)、心理维度(3．4&;#177;0．7)、总均分(3．4&;#177;0．6)明显高于对照组(3．2&;#177;0．5，3．2&;#177;0．6，3．2&;#177;0．5)，(t=5．09，2．59。-2．83，P(0．0l—0．05)。而对照组焦虑(1．9&;#177;0．5)、抑郁(1．8&;#177;0．3)、躯体化(2．0&;#177;0．8)及SCL均分(1．9&;#177;0．6)却高于干预组(1．7&;#177;0．3。1．6&;#177;0．5，1．8&;#177;0．7，1．7&;#177;0．6)，(t=-4．15，-4．08，-2．26，-2．83，P(0．0l～0．05)。家庭干预组在客观评分(4．6&;#177;1．2)、家庭关系(5．8&;#177;1．4)及Q0L总分(60．2&;#177;12．5)明显优于对照组(4．1&;#177;1．1。5．0&;#177;0．8，52．2&;#177;l0．2)，(￡=3．68，2．48，5．93，P(0．0l—0．05)。家庭干预组和对照组复发率分别为l0．9％，64．5％。结论：综合式家庭干预有利于提高酒依赖患者及家属的生活质量，降低复发率，提高患者的社会功能。     

比较猪去氧胆酸与牛磺熊去氧胆抗神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的作用

目的：研究猪、熊胆粉的主要成分猪去氧胆酸及牛磺熊去氧胆对神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用。方法：实验于2000-07／2002-08在北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室完成。培养人神经母细胞瘤细胞，以含连二亚硫酸钠的无糖Earle液模拟造成缺氧缺糖再给氧损伤，随机分为正常培养对照组，缺氧缺糖再给氧组，猪去氧胆酸3.125，1．563，0.781μmol／L浓度组，牛磺熊去氧胆3.125，1.563，0.781μmol／L浓度组。应用锥虫蓝染色测定细胞死亡率，应用比色法测定乳酸脱氢酶漏出率，四甲基偶氮唑蓝比色法测定细胞存活率，应用以Hoechst33342和碘化丙啶原位双染法荧光显微镜检测细胞坏死率和凋亡率。结果：①细胞死亡率：猪去氧胆酸、牛磺熊去氧胆3．125，1563．0．781μmol／L浓度组细胞死亡率均明显低于缺氧缺糖再给氧组[(34．1&;#177;7.1)％，(32.8&;#177;8．2)％，(29.4&;#177;9．8)％，(27.7&;#177;6.9)％，(26.8&;#177;9．4)％，(26.2&;#177;11.1)％，(71.2&;#177;9.2)％，P&;lt;0.001]。②乳酸脱氢酶漏出率：猪去氧胆酸、牛磺熊去氧胆3.125，1.563，0.781μmol／L浓度组乳酸脱氢酶漏出率均明显低于缺氧缺糖再给氧组[(46．6&;#177;5.6)％，(49.8&;#177;5.3)％，(47．0&;#177;4.0)％，(48.5&;#177;2.7)％，(44.1&;#177;4.3)％，(40．2&;#177;7.5)％，(66.4&;#177;7．6)％，P&;lt;0.001)。③细胞存活率：猪去氧胆酸、牛磺熊去氧胆3．125，1．563，0.781μmol／L浓度组细胞存活率均明显高于缺氧缺糖再给氧组[(44.5&;#177;3.2)％，(45.3&;#177;2．0)％，(41.5&;#177;1．6)％，(41．6&;#177;2.4)％，(37.6&;#177;2．8)％，(40．1&;#177;18)％，(25.6&;#177;3．7)％，P(0.01～0.051。④细胞坏死率：猪去氧胆酸、牛磺熊去氧胆3．125，1．563，0．781μmol／L浓度组细胞坏死率均明显低于缺氧缺糖再给氧组[(19.7&;#177;6.2)％，(23.9&;#177;7.0)％，(26.0&;#177;6.9)％，(21.8&;#177;5．6)％，(18.7&;#177;6.1)％，(25.4&;#177;5．8)％，(46.8&;#177;10.4)％，P&;lt;0.01]。⑤细胞凋亡率：猪去氧胆酸3．125，1．563μmol／L浓度组和牛磺熊去氧胆3．125，1.563，0.781μmol／L浓度组明显低于缺氧缺糖再给氧组[(7.4&;#177;2.7)％，(8.3&;#177;4.0)％，(6.9&;#177;3.8)％，(9.2&;#177;4.5)％，(8．7&;#177;3.6)％,(16．0&;#177;4.8)％，P&;lt;0．05]。结论：猪去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸均可明显地降低神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤时的细胞坏死率、凋亡率，显著提高细胞存活率，显著减少乳酸脱氢酶的漏出，表明猪去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸均具有显著的抗神经细胞缺氧缺糖再给氧损伤的作用，并且猪去氧胆酸与牛磺熊去氧胆酸之间没有显著差异。     

椎管内局部灌注丹参注射液对急性脊髓损伤的保护

背景：脊髓损伤后的继发性损伤期大量细胞以凋亡的方式死亡。目的：探讨中药丹参注射液局部灌注对急性脊髓损伤后脊髓细胞坏死‘和调亡的影响。设计：随机对照实验。单位：陨阳医学院附属人民医院临床医学试验中心。对象：4～5个月龄的一级中国白兔44只，雌雄不限，体质量2．0～2．5kg。材料：选择实验于2002-06／2003-07在郧阳医学院附属人民医院临床医学试验中心完成。随机分成2组，丹参组和对照组，每组22只。两组动物均以改良Allen法造成兔不完全性脊髓损伤的模型。丹参组术后按0．3mL／(k只&;#183;d)的总量分4次(每6h1次)从硬膜下导管推人丹参注射液，对照组推入等量生理盐水。注射至损伤后8，24，72h分别处死动物，进行病理、组织形态学观察，过氧化物歧化酶和丙二醛检测，凋亡抑制基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)阳性细胞数检测。主要观察指标：脊髓损伤区细胞凋亡指数和细胞凋亡率。结果：44只兔均进入结果分析。①细胞凋亡结果：丹参组的凋亡指数明显少于对照组(13．10&;#177;1．38，20．39&;#177;2．96，t=4．101，P&;lt;O．01)：细胞凋亡率明显低于对照组[(9．67&;#177;1．09)％，(14．68&;#177;2．81)％，t：4．072，P&;lt;0．01]；Bcl-2的表达高于对照组[(19．12&;#177;4．74)个／mm^2，(13．37&;#177;3．68)个／mm2，t=2．347，P&;lt;0．0l]。②氧化物歧化酶含量：丹参组高于对照组[(136．20&;#177;13．64)NU／mL，(101．70&;#177;15．24)NU／mL．t=4．132。P&;lt;0．01]。③丙二醛含量：丹参组低于对照组[(1．27&;#177;0．22)nmol／mL，(2．54&;#177;0．69)nmol／mL，t=4．309，P&;lt;0.01]。④神经元和神经纤维变性及坏死：丹参组轻于对照组。结论：丹参局部灌注后，减少了脊髓损伤局部的细胞凋亡，抑制和减轻了急性脊髓损伤后细胞坏死。     

实验性大鼠急性脑缺血细胞凋亡与相关蛋白表达的关系

目的：研究大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡及p53，Bcl-2蛋白家族表达的变化，并探讨它们在细胞凋亡中的作用。方法：实验在华北煤炭医学院形态实验室完成。54只大鼠用随机数字表法随机分成3组：脑缺血组(42只)、假手术组(6只)和正常组(6只)。脑缺血组又分为7组：即缺血2h再灌注1，3，6，12，24，48和72h组(n=6)。采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型，用TUNEL法检测细胞凋亡的变化，用免疫组化法检测p53，Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果：①缺血2h再灌注1h皮质区可见凋亡细胞[(7．83&;#177;1．72)个／高倍视野]，24～48h达高峰[(43．33&;#177;5．20)个／高倍视野，(48．50&;#177;6．25)个／高倍视野]，72h开始下降[(26．67&;#177;3．56)个／高倍视野](P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)；缺血2h再灌注1h皮质区可见p53蛋白阳性细胞[(14．35&;#177;1．92)个／高倍视野]，24h达高峰[(48．00&;#177;6．42)个／高倍视野]，48h后开始下降[(31．00&;#177;6．60)个／高倍视野](P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)；缺血2h再灌注1h皮质区可见Bcl-2蛋白阳性细胞[(28．62&;#177;6．80)个／高倍视野]，3h达高峰[(56．50&;#177;7．87)个／高倍视野]，6h后开始下降[(45．00&;#177;6．63)个／高倍视野](P&;lt;0．01)；缺血2h再灌注1h皮质区可见Bax蛋白阳性细胞[(45．83&;#177;4．07)个／高倍视野]，24h达高峰[(61．00&;#177;8．88)个／高倍视野]，48h开始逐渐下降[(45．83&;#177;6．49)个／高倍视野](P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)。②缺血再灌注后不同时间点细胞凋亡数与p53及Bax蛋白的阳性表达数呈正相关(r=0．843，P&;lt;0．001；r=0．840，P&;lt;0．001)，与Bcl-2蛋白的阳性表达数呈负相关(r=-0．387，P&;lt;0．05)。结论：大鼠脑缺血再灌注后，缺血周边区发生明显的细胞凋亡，同时伴有p53及Bax蛋白表达增加及Bcl-2表达降低，p53及Bax蛋白表达对细胞凋亡起促进作用，而Bcl-2蛋白表达则对细胞凋亡起抑制作用。     

厄贝沙坦对大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2／Bax蛋白表达的影响

目的：观察自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)心肌细胞凋亡和Bax／Bcl-2蛋白的表达；同时观察血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensinⅡ1type recptor，AT1R)拮抗剂一厄贝沙坦对SHR大鼠心肌细胞凋亡和BcL-2／Bax蛋白表达的影响。方法：24只16周龄SHR大鼠(上海市高血压研究所提供，医动字02-37-1号)分为SHR治疗组[沙坦30mg／(kg&;#183;d)，20周|和SHR对照组，另选16周龄Wistar大鼠12只作为正常对照组。分别采用SP免疫组化法和末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法方法检测心肌细胞凋亡指数和BcL-2／Bax蛋白水平的表达，放射免疫法检测血浆和组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)。结果：SHR治疗组与正常对照组比较：收缩压明显增高[(243&;#177;13)和(151&;#177;11)mmHg，1mmHg=0．133kPa]，左心室质量与体质量比(left ventricular mass／body mass，LVW／BW)明显增加[(4．05&;#177;0．33)和(2．90&;#177;0．23)g／kg]；血浆和心肌组织ArgⅡ增高[血浆：(31．8&;#177;5．4)和(22．2&;#177;18．5)ng；心肌：(13．2&;#177;2．1)％和(8．3&;#177;1．2)％]；心肌细胞凋亡指数明显增加[(4．75&;#177;0．70)％和(2．84&;#177;0．60)％]；心肌细胞Bax蛋白的表达明显增强[(5．02&;#177;0．34)％和(2．85&;#177;0．29)％]，Bcl-2／Bax比率明显降低(0．65&;#177;0．13和1.05&;#177;0．18)，差异有显著性意义(P&;lt;0．05～0．01)；而Bcl-2蛋白的表达[(3．29&;#177;0．24)％和(2．95&;#177;0．29)％]差异无显著性意义。SHR治疗组与SHR对照组比较：收缩压明显回落，LVWI明显下降，心肌细胞凋亡指数明显减少，心肌细胞Bax蛋白的表达减弱，Bcl-2／Bax比率、血浆和心肌组织AngⅡ则高于SHR对照组[SHR对照组上述指标分别为(179&;#177;11)mmHg，(3．22&;#177;0．38)g／kg，2．73&;#177;0．60)％，(3．17&;#177;0．27)％，0．65&;#177;0．13，(31．8&;#177;5．4)ng／k(13．2&;#177;2．1)ng／L]，差异均有显著性意义(P&;lt;0．05～0．01)。SHR治疗组与正常对照组比较：心肌细胞凋亡指数、Bax,Bcl-2蛋白表达均无明显差别，血浆、心肌组织AngⅡ则明显高于正常对照组，差异均有显著性意义(P&;lt;0．05～0．01)。结论：成年SHR大鼠的左室心肌细胞凋亡活跃与Bax蛋白表达增强，致Bcl-2／Bax比率减低有关。其次还提示较长时间给予AT1R厄贝沙坦能有效抑制Bax的过度表达，增加Bcl-2／Bax比率，从而让心肌细胞凋亡恢复正常。AT1R-厄贝沙坦使心肌细胞凋亡恢复正常的作用可能与心肌局部肾素血管紧张素系统有关。     

急诊患者心理应激与压疮发生的相关性

目的 观察急诊入院患者遭遇心理应激与压疮发生的关系，寻找其规律性。方法收集2003-12／2004-12在中国医科大学附属第一医院急诊科住院治疗的各种急症患者306例，出现压疮者95例(31．0％，压疮组)；无压疮者21例(68．9％，无压疮组)。进行自拟急诊压疮患者调查表和临床精神卫生症状自评量表和生活事件量表调查。结果按意向处理分析，306例全部进入结果分析。有无压疮的患者其平均年龄[(55．3&;#177;10．7)，(43．7&;#177;11．2)岁]、急性期损伤指数(3．1&;#177;0．5，2．1&;#177;0．4)、压疮指数(5．9&;#177;2．4，3．5&;#177;1．7)、遭遇生活事件频度件数(1．4&;#177;0．5，0．6&;#177;0．6)、遭遇生活事件强度平均值(1．8&;#177;4．4，0．7&;#177;0．3)体质量指数(24．8&;#177;5．3．21．7&;#177;7．0)和空腹血糖浓度[(7．0&;#177;1．6)．(6．0&;#177;1．7)mmol／L]差异均有显著性意义(t=1．845～2．942．P均&;lt;0．01～0．05)。有无压疮患者的精神卫生症状自评量表总分(155&;#177;32．6，147．5&;#177;30．3)、总均分(2．0&;#177;0．6，1．7&;#177;0．6)、阳性项目数(43．5&;#177;11．5，37．3&;#177;9．8)和阳性症状均分(3．0&;#177;0．4．2．5&;#177;0．5)差异有显著性意义(t=2．135～3．246；P均&;lt;0．01～0．05)。结论急症入院患者有年龄大、病情重、肥胖、遭遇生活事件多、应激程度高和精神心理损伤明显等特点，急性应激引起的系列病理变化是压疮发生的物质基础。     

针刺对帕金森病模型大鼠血液T淋巴细胞亚群的影响

目的：探讨针刺治疗对帕金森模型大鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法：采用脑内黑质部注射6—羟基多巴制备帕金森病大鼠模型，分别采用针刺、美多巴及针刺结合美多巴对模型大鼠进行治疗。采用免疫荧光法测定T细胞亚群数。结果：CD3，CD4，CD8在正常对照组为(68．7&;#177;8．8)％，(42．1&;#177;8．0)％，(31．4&;#177;6．4)％；模型自然恢复组为(54．9&;#177;8．4)％，(31．9&;#177;7．8)％，(23．9&;#177;4．2)％；针刺治疗组为(66．8&;#177;8．7)％，(32．1&;#177;9，9)％，(29．9&;#177;6．6)％；美多巴治疗组为(68．4&;#177;73)％，(31．9&;#177;5．4)％，(31．2&;#177;7．6)％；针刺结合美多巴治疗组为(69．3&;#177;7．6)％，(32．8&;#177;8．0)％，(32．3&;#177;6．3)％。与正常对照组比较，模型自然恢复组CD3，CD4，CD8均明显降低(t=1．814～1．831，P&;lt;0.05)。与模型自然恢复组比较，针刺、美多巴及针刺结合美多巴治疗后CD3，CD8的百分数明显升高(t=1．813～1．830，P&;lt;0．05)。结论：针刺治疗帕金森病模型大鼠有效可能与调节T淋巴细胞亚群的比例及改善其功能有关。     

强化管理在糖尿病足高危患者保肢治疗中的意义

目的 探讨综合强化管理与医疗方法的运用对糖尿病足高危患者保肢及生活质量提高的意义。方法 入选的糖尿病患者在糖尿病教育中心接受专科糖尿病教员的教育，包括常规糖尿病教育及足部特别教育，教育前后各完成糖尿病知识问卷，到达研究终点时评价强化管理组(n=65)及普通管理组(n=58)，两组患者糖尿病知识、足部防护知识、血糖控制情况、足部溃疡发生率、截肢率的差异。结果 两组的糖尿病一般知识和足部防护知识在干预前和干预后1月无显著性差异(P&;gt;0．05)，而干预后1年和2年的差异则具有显著统计学意义(P&;lt;0．001)。强化管理组在HBAlc[(7．1&;#177;2．3)％]、平均收缩压[(142&;#177;10)mmHg]、平均舒张压[(80&;#177;10)mmHg]、总胆固醇[(4．4&;#177;1．1)mmol／L]、三酰甘油[(1．8&;#177;0．9)mmol／L]的改善较普通管理组[分别为(8．5&;#177;4．2)％，(158&;#177;9)mmHg，(92&;#177;10)mmHg，(5．6&;#177;2．6)mmol／L，(2．5&;#177;1．8)mmol／L]显著(t=2．310，9．019，6．647，2．804，2．745，P&;lt;0．05)，强化管理组的糖尿病足发生率(7．7％)及截肢率(3．1％)较普通管理组(20．7％，13．8％)显著降低(t=4．347，4．712，P&;lt;0．05)。结论 强化管理有助于减少糖尿病足发生率及截肢率，提高生活质量及节省医疗费用．     

银杏内酯对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经功能缺失评分、脑梗死体积及皮质神经元凋亡的影响

目的：观察银杏内酯对大鼠局灶脑缺血再灌注后神经功能缺失评分、脑梗死体积、皮质神经元凋亡的影响及其银杏内酯的脑保护作用。方法：实验于2004—01／09在福建医科大学解剖学研究所完成。将月龄3个月雄性SD大鼠96只随机分为实验组和对照组，采用改良线栓法制作大脑中动脉闭塞局灶缺血模型。实验组在缺血即刻腹腔注射银杏内酯20mg／k，对照组腹腔注射等量的生理盐水。两组又随机分为再灌注6，24和48h组，每组16只，运用zea-Longa法进行神经功能缺失评分。在再灌注6，24，48h时间点每组随机取8只采用2，3，5-三苯四氮唑染色法观察梗死灶范围，并计算梗死灶体积占半球体积的百分率。另每组8只大鼠应用原位细胞凋亡检测法计数神经元凋亡数目。结果：实验过程中有4只大鼠因未出现神经功能缺损体征予以剔除，补充4只造模成功大鼠，进入结果分析大鼠保持为96只。①再灌注6，24h实验组神经功能缺损评分明显低于对照组(1.69&;#177;0．6，1．25&;#177;0．45，2．56&;#177;0．51，2．06&;#177;0．77，U=37，41，P&;lt;0．001)，再灌注48h实验组评分与对照组基本一致(0．62&;#177;0．50，0．69&;#177;0．48，U=120，P=0．714)。②再灌注6，24，48h实验组脑梗死体积占半球体积的百分率明显低于对照组[(12，27&;#177;0．55)％，(15．28&;#177;0．45)％，(16．30&;#177;0．36)％，(19．06&;#177;0．80)％，(24．19&;#177;0．57)％，(29．27&;#177;1．09)％，F=2314．44lP&;lt;0.001]。随着缺血再灌注时间的延长，两组缺血灶逐渐增加(F=1012，037，P&;lt;0．001)。③脑缺血再灌注后6h，两组均未出现TUNEL染色阳性细胞，再灌注24，48h实验组神经元凋亡数目明显少于对照组[(7．85&;#177;0．64)]个／视野，(12．74&;#177;0．78)个／视野，(14．18&;#177;0，90)个／视野。(23．80&;#177;0．80)个／视野](F=693．212，P&;lt;0．001)。随着缺血再灌注时间的延长，两组神经元凋亡数目明显增多(F=221．210，P&;lt;0．001)。结论：实验组大鼠神经功能缺损评分低、脑梗死体积小、缺血灶周围皮质神经细胞凋亡少。提示银杏内酯脑保护作用与减少皮质神经元凋亡有关。     

睡眠剥夺引起大鼠海马神经元凋亡及相关基因表达的变化

背景：睡眠剥夺是否引起细胞变性，其信号传导是否与某些基因调控有关。目的：探讨睡眠剥夺引起的神经元凋亡与相关基因表达的变化。设计：随机对照实验研究。地点和材料：实验地点：郑州大学医学院生理学实验室。成年健康SD大鼠，雌雄不限，体质量(200&;#177;20)g，由河南省实验动物中心提供。干预：采用TUNEL染色观察了快眼动睡眠剥夺大鼠海马神经元形态学变化，应用原位杂交检测了快眼动睡眠剥夺大鼠海马bcl-2．bax mRNA表达。主要观察指标：睡眠剥夺大鼠海马神经元形态学变化；海马bcl-2和bax mRNA表达。结果：快眼动睡眠剥夺大鼠海马CA1，CA3区神经元阳性凋亡细胞数增多，异相睡眠剥夺组海马CA1～CA4区细胞凋亡率分别为(6．60&;#177;2．24)％，(1．69&;#177;0．45)％，(6．87&;#177;1．32)％，(1．74&;#177;0．98)％。CA1，CA3区细胞凋亡率和CA2，CA4区相比较差异有显著性意义(t=5．26～6．95，P&;lt;0．05)。bc1-2mRNA阳性信号表达积分值较强，四个区之间差异无显著性意义，bax mRNA表达增强[CA1为(211．12&;#177;59．85)；CA3为(205．56&;#177;56．99)]与CA2和CA4区[(123．42&;#177;22．80)。(124．21&;#177;20．47)]比较差异有显著性意义(t=3．20～4．36．P&;lt;0．05)。结论：睡眠剥夺可引起大鼠海马神经元凋亡，与凋亡相关的bc1-2。bax mRNA基因表达的变化可能涉及神经元的凋亡机制。     

多种诱发电位检测对早期诊断帕金森病的评估价值

背景：对帕金森病进行了多种神经电生理的观察，但还没有发现哪一种电生理指标对早期诊断帕金森病是敏感而又确切的。目的：观察帕金森病早期体感诱发电位(SL-SEP)、脑干听觉诱发电位(BAEP)和棋盘格翻转视觉诱发电位(PR-VEP)的异常特征，寻找敏感可靠的诊断指标。设计：以诊断为依据，病例对照研究。地点和对象：对福建医科大学附属协和医院神经内科门诊和住院的52例Yahr分期为Ⅰ期的帕金森患者(病例组)和40例年龄匹配的健康自愿受试对照组进行3种诱发电位观测。干预：对病例组和对照组进行SL-SEP，BAEP和PR-VEP检测。主要观察指标：SL-SEP各主波峰潜伏期(PL)、峰间潜伏期(IPL)、波幅；BAEPⅠ，Ⅲ，Ⅴ波PL，Ⅰ-ⅢIPL，Ⅲ-ⅤIPL，Ⅰ-Ⅲ／Ⅲ-Ⅴ比值；PR-VEP P100 PL。结果：帕金森病早期SLSEP异常率为69．2％；BAEP的异常率为32．7％；PR-VEP的异常率为30．7％；病例组SL-SEP各主波峰潜伏期、峰间潜伏期与对照组比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；病例组SL-SEP P25和N30波幅[(2．4&;#177;1．9)μV，(1．5&;#177;1．5)μV]与对照组[(3．4&;#177;2．3)μV，(2．4&;#177;1.1)μV]比较差异有显著性意义(P&;lt;0.01)；病例组SL-SEP N20和P22波幅[(2．5&;#177;1．0)μV，(2．3&;#177;1．4)μV]与对照组[(2．7&;#177;1．1)μV，(1．7&;#177;1．3)μV]比较差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；病例组BAEPⅠ-ⅢIPL[(2．27&;#177;0．33)ms]、Ⅲ-ⅤIPL[(1．96&;#177;0．24)ms、Ⅰ-Ⅲ／Ⅲ-Ⅴ比值(0．88&;#177;0．13)与对照组[(2．21&;#177;0．16)ms，(1．89&;#177;0．18)ms]，0．86&;#177;0．10)]比较差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；病例组PR—VEP的P100PL[(97．85&;#177;11．6)ms]与对照组[(95．13&;#177;5．16)ms]比较差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：在帕金森病的早期，皮质感觉处理过程已受到干扰；体感诱发电位中央前成分以及顶成分P25是一个敏感的诊断指标。