安莎类抗生素电喷雾多级质谱裂解规律的研究

目的 研究苯安莎类抗生素(格尔德霉素、除莠霉素A)和萘安莎类抗生素(利福平、利福喷丁)的电喷雾多级质谱裂解规律.方法 采用电喷雾离子化源(Electron Spray Ionization Source,ESI源)多级质谱,极性检出模式为正/负离子模式(+/-MS).结果 初步归纳总结苯安莎类抗生素和萘安莎类抗生素电喷雾多级质谱裂解规律.结论 该质谱裂解规律可应用于安莎类抗生素的快速结构解析、定量分析和药代动力学研究.     

格尔德霉素衍生物研究进展

苯安莎类抗生素格尔德霉素以热休克蛋白Hsp90为靶点 ,具有较好的抑制肿瘤和抗病毒活性。本文综述了格尔德霉素衍生物的研究进展。对格尔德霉素衍生物进行构效关系分析 ,认为 17位是格尔德霉素最佳修饰位点 ,8,9位、11位、19位等位点的改造也有可能发现高活性衍生物。     

4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素及其与格尔德霉素生物合成PKS后修饰的关系

目的在吸水链霉菌17997格尔德霉素生物合成PKS后修饰gdmN-变株发酵产物中寻找新格尔德霉素衍生物。方法 gdmN-变株发酵上清液乙酸乙酯提取后,进行硅胶板TLC分析;对一个红色目标化合物进行了HPLC和高分辨质谱分析,并对其进行了1H-和13C-核磁共振(NMR)分析;对红色目标化合物在吸水链霉菌17997格尔德霉素PKS基因阻断变株中进行了生物转化实验。结果在gdmN-变株发酵产物中发现了1个预期的红色目标化合物(4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素);该目标化合物可被格尔德霉素生物合成PKS后修饰系统7-O-氨甲酰化,生成4,5-双氢-19-S-甲基格尔德霉素。结论在gdmN-变株中发现了4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素;该化合物可被格尔德霉素PKS后修饰系统继续7-O-氨甲酰化,但不能C-4,5氧化。     

吸水链霉菌17997产生的4，5-双氢格尔德霉素的鉴别与检测

本文对从吸水链霉菌17997发酵提取获得的格尔德霉素精制品进行了LC-MS-MS分析,发现其中含有4,5-双氢格尔德霉素组分.对吸水链霉菌17997摇瓶发酵产物的硅胶板薄层层析分析表明,4,5-双氢格尔德霉素组分在发酵中期有积累.已知4,5-双氢格尔德霉素的抗肿瘤活性比格尔德霉素差,因而需要限制其在格尔德霉素制品中的含量.本文研究结果对以吸水链霉菌17997等为产生菌研究格尔德霉素发酵,促进4,5-双氢格尔德霉紊转化为格尔德霉素以提高发酵液的品质,以及检测格尔德霉素制品中的4,5-双氢格尔德霉素组分具有实际意义.     

吸水链霉菌17997产生氢醌型格尔德霉素及其生物合成中间产物

目的 了解格尔德霉素生物合成PKS后修饰过程中的一些细节.方法 对格尔德霉素产生菌吸水链霉菌17997及其格尔德霉素生物合成聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)后修饰基因阻断变株(gdmP-和gdmN-)在ISPII平板不同时间的培养物进行乙酸乙酯提取,硅胶板TLC和NaOH显色分析,检测GDM及其生物合成中间产物,并利用LC-MS对中间产物进行鉴定.结果 吸水链霉菌17997原株、gdmN-和gdmP-变株在培养时间72～96h,发现氢醌型格尔德霉素(GQH2)、氢醌型4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基格尔德霉素(H2GQH2-dC)和氢醌型4,5-双氢格尔德霉素(H2GQH2)分别为主要组分,相应的醌型化合物为次要组分;之后,这些氢醌型化合物随培养时间延长逐渐消失,相应的醌型化合物成为主要组分.双向硅胶板TLC分析证实GQH2、H2GQH2-dC和H2GQH2均可在空气中自发氧化为相应的醌型化合物.结论 在吸水链霉菌17997的GDM生物合成PKS后修饰过程中,首次提出GQH2自发氧化为GDM可能是氢醌型向醌型转变的位点,同时它也是GDM生物合成最后一步.     

5种四环素类抗生素快速鉴别方法的建立

目的：建立四环素、米诺环素、多西环素、关他环素和土霉素等5种四环素类抗生素的快速鉴别方法。方法：样品的固体粉末和提取液分别采用颜色反应鉴别和薄层色谱鉴别方法,并进行系统的试验验证。结果：分别筛选出颜色反应和薄层色谱鉴别方法的条件,确立了四环素等5种四环素类抗生素的快速鉴别方法。结论：对此5种四环素类抗生素可以使用以颜色反应鉴别为初筛,薄层色谱鉴别为确证的快速鉴别方法。     

格尔德霉素发酵工艺研究

格尔德霉素(Geldanamycin,GA)作为一种苯醌安莎霉素类抗生素,能与热休克蛋白90特异性结合,具有抗肿瘤、广谱抗病毒、抗原虫作用,同时还具有免疫调节等多种生物学活性[1]。本课题以吸湿链霉菌(streptomyces hygroscopicus)自然选育菌株N5300作为发酵试验菌株,在10L和30L发酵罐上通过发酵罐工艺条件的优化,提高发酵水平,为工业化生产提供可靠的理论依据。     

热休克蛋白90抑制剂Geldanamycin的抗肿瘤作用研究进展

Ｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎ(ＧＤＭ )属于苯醌安莎霉素类抗生素 ,其衍生物 17 烯丙胺 17 脱甲氧格尔德霉素 (17 ａｌｌｙｌａｍｉｎｏ 17 ｄｅｓｍｅｔｈｏｘｙｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎ ,17 ＡＡＧ ) ,目前正进行治疗肿瘤的Ｉ期临床试验 ,这类抗生素还包括ｈｅｒｂｉｍｙｃｉｎＡ和ｍａｃｂｅｃｉｎ。它们的结构特征是一个苯醌部分与一个平面性大环安莎桥相连 (图 1)。现发现苯醌安莎霉素类抗生素的生物活性与分子伴侣 (ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｈａｐｅｒｏｎｅ)热休克蛋白 90 (ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ 90 ,Ｈｓｐ90 )有关。Ｈｓｐ…     

利福霉素类及化学类抗结核药物的快速薄层鉴别方法

利福霉素是主要用于治疗结核病的一类抗生素，人们在与结核病作斗争的过程中，先后发现了异烟肼、对氨基水杨酸、吡嗪酰胺、乙胺丁醇等化学合成药物以及氨基糖甙类、肽类抗生素。特别是利福霉素类抗生素中的利福平、利福喷汀等的研制成功，使结核病的危害得到了很大的控制。这一类利福霉素类抗生素的鉴别方法已有报道。主要是颜色反应和薄层色谱鉴别。     

蒽环类抗生素初筛、早期鉴别及抗生素14A的研究

为了寻找新的蒽环类抗肿瘤抗生素产生菌,本文对蒽环类抗生素的初筛方法和早期鉴别方法进行了研究。运用微生物模型、菌株形态鉴别、紫外光谱、硅胶薄层层析等方法对土壤中获得的5800余株链霉菌进行了筛选,得到11株蒽环类抗生素产生菌。结果表明:抗噬菌体模型与蔥环类抗生素产生菌之间有一定的相关性。根据E553±nm/E 596±nm值与蒽环类抗生素结构中蒽醌部分α-羟基数之关系。将蒽