Bloodletting Puncture at Hand Twelve Jing-Well Points Relieves Brain Edema after Severe Traumatic Brain Injury in Rats via Inhibiting MAPK Signaling Pathway

Objective:To investigate whether blood-brain barrier(BBB)served a key role in the edema-relief effect of bloodletting puncture at hand twelve Jing-well points(HTWP)in traumatic brain injury(TBI)and the potential molecular signaling pathways.Methods:Adult male Sprague-Dawley rats were assigned to the shamoperated(sham),TBI,and bloodletting puncture(bloodletting)groups(n=24 per group)using a randomized number table.The TBI model rats were induced by cortical contusion and then bloodletting puncture were performed at HTWP twice a day for 2 days.The neurological function and cerebral edema were evaluated by modified neurological severity score(mNSS),cerebral water content,magnetic resonance imaging and hematoxylin and eosin staining.Cerebral blood flow was measured by laser speckles.The protein levels of aquaporin 4(AQP4),matrix metalloproteinases 9(MMP9)and mitogen-activated protein kinase pathway(MAPK)signaling were detected by immunofluorescence staining and Western blot.Results:Compared with TBI group,bloodletting puncture improved neurological function at 24 and 48 h,alleviated cerebral edema at 48 h,and reduced the permeability of BBB induced by TBI(all P<0.05).The AQP4 and MMP9 which would disrupt the integrity of BBB were downregulated by bloodletting puncture(P<0.05 or P<0.01).In addition,the extracellular signal-regulated kinase(ERK)and p38 signaling pathways were inhibited by bloodletting puncture(P<0.05).Conclusions:Bloodletting puncture at HTWP might play a significant role in protecting BBB through regulating the expressions of MMP9 and AQP4 as well as corresponding regulatory upstream ERK and p38 signaling pathways.Therefore,bloodletting puncture at HTWP may be a promising therapeutic strategy for TBI-induced cerebral edema.     

如何学好药理学

药理学是研究药物与机体相互作用、作用机制及规律的科学,是连接基础医学与临床医学、医学与药学的一门重要课程.许多学生在初次学习药理学时,认为药理学不好学,内容复杂、抽象,药物种类较多,抓不住重点,难以记忆,不知道怎样学习药理学,现就这些问题谈谈学习药理学的方法.     

昆虫抗冻蛋白及其在医学领域中的应用

抗冻蛋白(antifreeze protein,AFP)是一类结构多样的蛋白质,具有热滞效应(thermal hysteresis,TH,降低冰点而不改变熔点)和重结晶抑制效应(recrystalization inhabition,RI).通过非共价吸附抑制机制吸附到冰核表面,限制冰晶生长和抑制冰晶重结晶,从而保护有机体免受结冰引起的伤害.由于抗冻蛋白具有阻止冰晶生长而不破坏细胞的特点,因而利用抗冻蛋白在低温中长期保存各种细胞、组织和器官,特别在器官移植中可能具有很好的应用前景.     

Sternal Reconstruction of Deep Sternal Wound Infections Following Median Sternotomy by Single-stage Muscle Flaps Transposition

Objective To assess clinical effectiveness of using bilateral pectoralis major or plus rectus abdominis muscle flaps in treating deep sternal wound infection （DSWI） following median sternotomy. Methods Between January 2009 and December 2013, 19 patients with DSWI after median sternotomy for cardiac surgery were admitted to our hospital, including 14 males （73.7%） and 5 females （26.3%）, aged 55±13 （18-78） years. According to the Pairolero classification of infected median sternotomies, 3 （15.8%） patients were type II, and the other 16 （84.2%） were type III. Surgical procedure consisted of adequate debridement of infected sternum, costal cartilage, granulation, steel wires, suture residues and other foreign substances. Sternal reconstruction used the bilateral pectoralis major or plus rectus abdominis muscle flaps to obliterate dead space. The drainage tubes were placed and connected to a negative pressure generator for adequate drainage. Results There were no intraoperative deaths. In 15 patients （78.9%）, bilateral pectoral muscle flaps were mobilized sufficiently to cover and stabilize the defect created by wound debridement. 4 patients （21.0%） needed bilateral pectoral muscle flaps plus rectus abdominis muscle flaps because their pectoralis major muscle flaps could not reach the lowest portion of the wound. 2 patients （10.5%） presented with subcutaneous infection, and 3 patients （15.8%） had hematoma. They recovered following local debridement and medication. 17 patients （89.5%） were examined at follow-up 12 months later, all healed and having stable sternum. No patients showed infection recurrence during the follow-up period over 12 months. Conclusion DSWI following median sternotomy may be effectively managed with adequate debridement of infected tissues and reconstruction with bilateral pectoralis major muscle or plus rectus abdominis muscle flap transposition.     

植皮区域局限性皮肤松弛症1例

病人,女,81岁.40年前在工作时双上肢不慎被火烧伤,当年在大连化工厂医院烧伤科给予取自体腹部皮肤行前臂植皮术,术后植皮区域皮肤成活修复良好.4年前无明显诱因双侧前臂植皮区域肤色逐渐变深,无意中发现皮肤明显松弛,无不适感.近3个月自觉植皮区域疼痛不适,局部无红肿等,轻微牵拉皮肤时疼痛明显.自发病起4年皮损未见扩大.患者既往体健,否认家族有类似病患者.     

对症喝汤好处多

夏季多喝汤不仅能调节口味,补充体液,增强食欲,而且能防病抗病,对健康有益. 日常人们常喝的汤有荤、素两大类.荤汤有鸡汤、肉汤、骨头汤、鱼汤、蛋花汤等,素汤有海带汤、豆腐汤、紫菜汤、番茄汤、冬瓜汤和米汤等.无论是荤汤还是素汤,都应根据各人的喜好与口味来选料烹制,加之"对症喝汤",就可达到抗衰治病、清热解毒的"汤疗"效果.     

第16届欧洲呼吸学会年会会议纪要

第16届欧洲呼吸学会年会(The European Respiratory Society 16th Annual Congress)于2006年9月1日～6日在德国慕尼黑市国际会议中心(ICM)召开,来自100多个国家和地区的16 888名代表参加了会议,大会共收到论文5277篇,接收论文4221篇,其中来自中国(包括香港、澳门和台湾)84篇(图1).现将会议内容扼要介绍如下.     

POCT的信息管理

POCT是在医疗条件下,由非实验室的卫生保健人员,在实验室的质控指导下,于病人身边进行的检验。它广泛适用于医院(如外科,儿科)、监护病房、急救单位、保险公司、社区医疗、家庭保健网络等领域。当今,POCT在全球方兴未艾,据调查,现今已有10%的诊断实验是在POCT仪器上完成的,究其原因,无非是POCT兼具医学上的有效性及经济两个方面的优势。当然,随着POCT设备的投放不断增加,使用范围不断拓展,POCT的管理问题也日益凸现,本文将对POCT实施中的信息管理的若干问题进行初步探讨。     

维生素B1和维生素B12肌注致过敏性休克1例报告

1 临床资料 患者,男,23岁,因左下肢疼痛20 d来医院就诊.询问病史:患者2 d前在上级医院诊断为坐骨神经痛.既往健康,无药物过敏史.门诊当日给予维生素B1 100 mg,维生素B12 250靏肌注,用药约5 min时患者感到头晕、胸闷、呼吸困难、寒战,面色苍白,脉搏105次·min-1,血压80/50 mmHg,考虑为药物所致过敏性休克,立即给予平卧,氧气吸入,肾上腺素1 mg肌注,地塞米松10 mg静注,5 min后患者恢复正常.     

双模态对比剂Fe3O4-Cy5.5-NGR在卵巢癌的体外靶向效能研究

目的 合成并验证磁共振-荧光双模态对比剂Fe₃O₄-Cy5.5-NGR对卵巢癌ES-2细胞的体外靶向效能情况。方法 化学方法合成Fe₃O₄-Cy5.5-NGR颗粒作为实验组对比剂,Fe₃O₄-Cy5.5颗粒作为对照组对比剂,在透射电镜（transmission electron microscopy,TEM）、红外光谱仪（far infrared spectrometer,FITR）和紫外分光光度仪（ultraviolet spectrophotometer-2600,UV-2600）等设备下检测对比剂的普通物理化学性质是否满足成像需要;选取ES-2人卵巢癌透明细胞株传代培养,细胞生长稳定后进行CD13免疫组织化学染色,观察细胞膜表面CD13表达量;两种对比剂与ES-2细胞共同孵育后检测粒子的细胞毒性,并用流式细胞仪验证细胞与粒子的体外特异性结合情况。在7.0TMR下验证磁性纳米颗粒Fe₃O₄-Cy5.5-NGR和Fe₃O₄-Cy5.5作为MR对比剂的磁敏感性。结果 TEM观察两种对比剂形态规则,水溶液中分散性良好,通过连接NGR短肽,实验组对比剂的平均直径达（8.930±0.773）nm,对照组对比剂直径约（7.480±0.695）nm;Fe₃O₄-Cy5.5-NGR和Fe₃O₄-Cy5.5激发波为628.0 nm,发射波为675.2 nm;FITR中Fe₃O₄-Cy5.5-NGR和Fe₃O₄-Cy5.5在2 882 cm^-1、1 632 cm^-1处出现特征性波峰,实验组对比剂在841 cm^-1处另外出现了波峰。细胞毒性实验（CCK-8）中对比剂与细胞共孵育后,细胞活性保持在90%左右。细胞免疫组织化学染色,荧光显微镜观察细胞呈侵袭性生长,细胞膜位置CD13高表达,细胞核及周围间质表达量很低。Fe₃O₄-Cy5.5-NGR和Fe₃O₄-Cy5.5对比剂r2值分别为155.49 mmol·L^-1·s^-1,180.74 mmol·L^-1·s^-1。流式细胞仪下观察到Fe₃O₄-Cy5.5-NGR较Fe₃O₄-Cy5.5对比剂的荧光强度高,在不同浓度（40、80和160μmol）分别为后者的3.1、1.65和1.26倍。结论 Fe₃O₄-Cy5.5-NGR作为磁共振-荧光双模态对比剂在ES-2细胞的体外靶向性能良好,可以满足体外成像需求,为进一步的裸鼠卵巢癌在体实验提供了实验基础。     

自模板法制备中空介孔硅球及其载药释药性能的研究

目的: 采用自模板法合成中空介孔硅球（HMSNs）,并对其载药释药性能进行研究。方法: 采用自模板法,通过控制反应物摩尔数、温度、时间等反应条件制备HMSNs,并进行载药研究,计算载药率、包封率与释药率。结果:合成的HMSNs球形度良好,具有典型的介孔分子筛特征及硅基骨架特征峰,可以进行结构确证,药物在42 h的累积释药百分数达70%以上。结论:HMSNs可用于抗癌药物伊马替尼的装载,达到缓释的目的。     

介孔TiO2纳米粒在声动力学治疗肝细胞肝癌应用的生物相容性评估

 目的 评估介孔二氧化钛（titanium dioxide，TiO₂）纳米粒在声动力学抗人肝癌HepG2肿瘤的生物安全性。方法 采用软模版法合成介孔TiO₂纳米粒，与HepG2细胞共培养后通过噻唑蓝还原法评估毒性，应用荧光探针测定其介导声动力学治疗在HepG2细胞内产生活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）的情况。采用血液凝集实验测评血液相容性，并通过静脉注射后小鼠血液生化指标及脏器组织切片HE染色来评估安全性。昆明小鼠与HepG2种植瘤裸鼠静脉给药后，在指定时间取脏器及肿瘤于王水中消化，应用电感耦合等离子体发射光谱绘制药物脏器分布图。结果 介孔TiO₂纳米粒具有高度分散性和均一性，细胞共培养后显示无毒性，联合超声在HepG2细胞中产生ROS。血液凝集实验所有指标、小鼠血液生化指标及脏器组织切片（最高剂量150 mg/kg）与对照组差异均无统计学意义。静脉给药后主要分布于肝脾，8 h达峰（含51.32%），1 h时肿瘤组织的药物分布达6.74%，并于24 h内显现出维持浓度。结论 介孔TiO₂纳米粒作为声敏剂能有效产生ROS，具有良好静脉注射安全性，主要通过网状内皮系统代谢，能蓄积于肿瘤组织内为声动力学治疗提供良好时间窗口。     

组织蛋白酶B通过瞬时受体电位黏蛋白-1对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体活化的影响

目的 探索在细胞氧化应激模型和特异性基因沉默细胞模型中,组织蛋白酶B(CTSB)通过瞬时受体电位黏蛋白-1(TRPML1)对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的影响。方法 对体外培养的BV2细胞分别用H₂O₂、钙敏感性受体激动剂GdCl₃、CTSB抑制剂CA-074Me单独或同时处理,用酶联免疫吸附实验方法检测白细胞介素-1β(IL-1β)和半胱天冬酶-1-蛋白;用定量PCR方法检测各组BV2细胞的NLRP3 mRNA。用MTT法检测各组BV2细胞生长活力。用定量PCR方法检测BV2细胞中胱抑素C和TRPML1的mRNA,用Western blot检测TRPML1、CTSB、组织蛋白酶D(CTSD)、组织蛋白酶L(CTSL)、组织蛋白酶V(CTSV)蛋白。针对TRPML1基因靶序列设计特异性小干扰RNA(siRNA),在BV2细胞中建立TRPML1基因沉默细胞株(命名为Tr-si-BV2细胞),通过H₂O₂处理,再用Western blot检测Tr-si-BV2细胞或对照组细胞中的TRPML1、CTSB和转录因子EB(TFEB)蛋白。结果 用H₂O₂处理后,BV2细胞中半胱天冬酶-1蛋白和NLRP3 mRNA表达增加,加用GdCl₃处理后,BV2细胞中IL-1β显著增加(P=0.0036);使用CA-074Me处理后,NLRP3 mRNA(P=0.037)、半胱天冬酶-1(P=0.021)、IL-1β(P= 0.036)均显著减少。H₂O₂组和H₂O₂+GdCl₃组的细胞生长较慢。在H₂O₂浓度为200 μmol/L的处理组,BV2细胞中CTSB mRNA与TRPML1 mRNA、或CTSB与TRPML1蛋白的表达均有相似的变化;沉默TRPML1基因表达水平后能够抑制H₂O₂诱导的CTSB蛋白表达。组织蛋白酶CTSD、CTSL、CTSV的变化不受H₂O₂处理浓度高低的影响。在进行TRPML1基因沉默处理的BV2细胞中,H₂O₂ +siRNA处理组与H₂O₂处理组比较,CTSB蛋白的表达显著减少(P=0.021)。结论 在小胶质细胞的氧化应激模型中,CTSB具有调节NLRP3炎症小体活化的作用,这种作用有可能通过钙离子通道蛋白TRPML1介导。     

黄杞苷对H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的保护作用

目的 探讨黄杞苷对H₂O₂诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用与分子机制。方法 黄杞苷(5、10、20、40、80和160 μmol·L^-1)预处理SH-SY5Y细胞12 h,MTT法检测黄杞苷对H₂O₂诱导损伤后细胞活力的影响;通过氮蓝四唑(NBT)法总超氧化物歧化酶(SOD)活力检测试剂盒和总谷胱甘肽过氧化物酶(NADPH)检测试剂盒测定黄杞苷对H₂O₂诱导损伤后SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响;通过流式细胞术对SH-SY5Y细胞进行活性氧(ROS)水平的测定。黄杞苷(20 μmol·L^-1)预处理SH-SY5Y细胞12 h,H₂O₂孵育6、12和24 h或用黄杞苷(5、10和20 μmol·L^-1)预处理细胞12 h,H₂O₂孵育12 h,采用Western blot法分别检测Nrf2及HO-1表达情况。结果 与模型组比较,黄杞苷能够提高SH-SY5Y细胞的活力,显著提高SOD和GSH水平,减少ROS产生(P<0.05)。黄杞苷能够促进Nrf2蛋白由细胞质向细胞核内转移,黄杞苷(20 μmol·L^-1)预处理SH-SY5Y细胞12 h时转移达到顶峰。H₂O₂损伤模型下,黄杞苷浓度依赖性地促Nrf2的核内转移(P<0.05),并促进下游蛋白HO-1的表达(P<0.05)。结论 黄杞苷对H₂O₂诱导SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其作用机制与抗氧化,促进Nrf2、HO-1的表达有关。     

去甲乌药碱对过氧化氢引起的PC12细胞损伤的保护作用研究

目的 探讨去甲乌药碱对过氧化氢(H₂O₂)引起的PC12细胞损伤的保护作用。方法 将PC12细胞分为对照组、H₂O₂组(100 μM H₂O₂)、去甲乌药碱组(50 μM去甲乌药碱+100 μM H₂O₂),CCK8法检测细胞活力,TUNEL染色检测细胞凋亡情况,流式检测ROS水平,氧化应激标志物MDA、SOD分别采用TBA法和WST法检测,蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白Caspase3、Bax和Bcl-2的表达情况。结果 与H₂O₂组比较,去甲乌药碱组细胞活力显著提高,ROS、MDA含量显著降低,SOD活性显著升高,Caspase3、Bax表达量减少,Bcl-2表达量增加。结论 去甲乌药碱能通过抗氧化及抗凋亡抑制H₂O₂引起的PC12细胞损伤。     

三氧化二砷对小鼠B16细胞p53、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨三氧化二砷(As₂O₃))对小鼠B16细胞的生长抑制作用,对p53、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响,为临床治疗恶性黑素瘤提供理论和实验依据。方法 将不同剂量的As₂O₃作用于小鼠B16细胞后,吉姆萨染色和荧光染色观察B16细胞的凋亡变化;Western blot检测p53、Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 染色后镜下可见As₂O₃可致B16细胞出现凋亡现象; As₂O₃能诱导p53、Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达(P＜0.01)。结论 As₂O₃能诱导B16细胞凋亡,这一现象可能是通过诱导B16细胞的p53、Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下降来实现。     

三氧化二砷对红细胞毒性及能量代谢的影响*

目的: 研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As₂O₃)对红细胞(red blood cells,RBCs)毒性及能量代谢的影响。方法: 用终浓度为0.2 mmol/L、0.4 mmol/L、0.8 mmol/L、1.6 mmol/L、3.2 mmol/L As₂O₃分别在37 ℃培养箱孵育红细胞48 h,利用酶标仪分别检测红细胞存活率及红细胞溶血率;用终浓度为2.5 mmol/L As₂O₃孵育红细胞5 h,利用液相色谱串联质谱法进行红细胞内靶向能量代谢产物相对定量分析。结果: 0.2 mmol/L As₂O₃可提高红细胞存活率(P＜0.05),0.4 mmol/L和0.8 mmol/L As₂O₃对红细胞存活率无明显影响(P＞0.05),但高浓度(1.6 mmol/L和3.2 mmol/L)As₂O₃可降低红细胞的存活率(P＜0.05);As₂O₃致红细胞IC₅₀为5 202 μmol/L;红细胞溶血率随As₂O₃浓度增高逐渐升高,但低浓度As₂O₃(0.2 mmol/L和0.4 mmol/L)对溶血率几乎没有影响(P＞0.05),0.8 mmol/L组、1.6 mmol/L组和3.2 mmol/L组溶血率增高(P＜0.05),但溶血率＜6 %,红细胞破坏不严重;能量代谢产物的检测结果表明,2.5 mmol/L As₂O₃ 37 ℃孵育红细胞5 h后,红细胞内的三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)、丙酮酸(pyruvic acid,PA)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)含量均增高(P＜0.05)。结论: 低浓度As₂O₃可能通过促进红细胞糖酵解与磷酸戊糖途径保护红细胞。     

巯嘌呤/维拉帕米-介孔氧化硅释药系统的构建及逆转耐药活性研究

目的制备巯嘌呤/维拉帕米-介孔氧化硅释药系统并评价其逆转耐药作用。方法采用共缩聚法合成介孔氧化硅纳米粒并载药,制备巯嘌呤/维拉帕米-介孔氧化硅释药系统;动态透析法研究该释药系统的体外释药特性;噻唑蓝比色法(MTT法)评价该释药系统的逆转耐药作用及可能机制。结果所制备释药系统的粒径在170~250 nm左右,Zeta电位在-30 m V~-40 m V,微观形态呈球形,均匀分布,具有规则介孔孔道。体外释放显示维拉帕米缓慢释放,6-巯嘌呤加入诱导剂之前无释放,加入诱导剂后释药过程呈现先突释后缓释。MTT法检测显示所制备释药系统与阳性药维拉帕米及同浓度物理混合物相比,具有显著逆转耐药作用。结论所制备的巯嘌呤/维拉帕米-介孔氧化硅释药系统有较好的抗肿瘤活性及逆转耐药作用。     

PML蛋白参与三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病的分子生物学机制研究

PML蛋白作为一种肿瘤抑制因子,在三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）的过程中发挥重要作用。绝大多数APL患者的典型特征是细胞内PML基因和RARα基因发生融合,该融合基因所表达的PML-RARα融合蛋白是APL发病的主要原因。三氧化二砷作为临床治疗APL的一线药物,通过直接作用于PML-RARα融合蛋白的PML部分,诱导相关蛋白多聚化,并招募多种功能蛋白,促进PML核小体重构,使PML-RARα蛋白发生小泛素修饰蛋白（SUMO）化和泛素化,最终经蛋白酶体途径降解,达到治疗APL的目的。PML蛋白发生点突变会导致APL复发及三氧化二砷耐药。本文阐述了PML蛋白的结构和功能、PML-RARα融合蛋白诱导APL发病的机制、PML蛋白参与三氧化二砷治疗APL的分子机制以及PML蛋白发生突变导致APL患者发生三氧化二砷耐药的现象,以期为目前治疗方案的优化及针对耐药患者有效治疗手段的开发提供理论指导。