3－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

探讨用３－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶（ＡＬＤ）活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度：ＴＥＡ１００ｍｍｏｌ／Ｌ，ＦＤＰ４ｍｍｏｌ／Ｌ，碘乙酸０．２２ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＡＤＨ０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＤＨ≥１０００Ｕ／Ｌ，ＴＰＩ≥１５００Ｕ／Ｌ，ＬＤ≥１０００Ｕ／Ｌ。最适ｐＨ在７．８～８．０，Ｋｍ为７．２×１０－３ｍｍｏｌ／Ｌ。批内ＣＶ：酶活性在７．３４Ｕ／Ｌ和６５．０６Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为５．７％和１．４％；批间ＣＶ：酶活性在１１．８９Ｕ／Ｌ和１００．０８Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为６．０％和３．３％，酶活性线性范围至少可达１８０Ｕ／Ｌ。健康人６０名，ＡＬＤ活性为４．５３±１．１７（ｘ±ｓ）Ｕ／Ｌ，男女两组均值无显著性差异。本文对ＴＥＡ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ－ＨＣｌ（ｐＨ７．５）三种缓冲液用于ＡＬＤ活性测定效果进行了评价，结果表明在ＴＥＡ缓冲液中所测ＡＬＤ活性最高；ＴＥＡ和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ两种缓冲液的浓度在２５～１５０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内对ＡＬＤ活性无影响，Ｔｒｉｓ缓冲液在５０ｍｍｏｌ／Ｌ时测得酶活性较高，缓冲液浓度过高或过低，酶活性均有所下降     

葡萄糖激酶法测定镁离子

建立用葡萄糖激酶法测定镁离子的方法，通过实验对反应条件进行了选择，并对本不进行评价。用双试剂两点法； 缓冲液为Ｔｒｉｓ－ＨＣＩ（ｐＨ８．５，０．１ｍｏｌ／Ｌ）；试剂Ｉ：含Ｄ－葡萄糖１５ｍｍｏｌ／Ｌ、ＡＴＰ２ｍｍｏｌ／Ｌ、ＮＡＤＰ＾＋０．７ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｔｒｉｔｎ－Ｘ－１００ １．０ｇ／Ｌ；试剂Ⅱ：含葡萄糖激酶４ｋＵ／Ｌ、Ｇ６ＰＤＨ８ｋＵ／Ｌ。线性范围为０．２５～２．５ｍｍｏｌ／Ｌ，平均回收率为９９     

选择性抑制法测定淀粉酶同工酶

本文报道用选择性抑制法结合酶偶联法测定淀粉酶（Ａｍ）同工酶。通过数学推导和实验，建立了结果计算公式和标准曲线。方法线性范围０－１１００Ｕ／Ｌ。批内，批间ＣＶ＜９．９％。参考范围：血清Ｐ－Ａｍ７－５５Ｕ／Ｌ，Ｓ－Ａｍ１．８－６８．３Ｕ／Ｌ；尿Ｐ－Ａｍ２．５－２２．６Ｕ／ｍｍｏｌＣｒ，Ｓ－Ａｍ２．２－３１．３Ｕ／ｍｍｏｌＣｒ。本法制备的抑制剂溶液稳定期长，保存，使用方便。     

聚乙二醇修饰酶法直接测定高密度脂蛋白胆固醇的评价

本文用德国Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ公司生产的高密度脂蛋白胆固醇试剂盒在Ｄｌｙｍｐｕｓ ＡＵ－５６０型生化仪上建立了直接法测定血清ＨＬＤ－Ｃ的程序，并对此方法作了初步评价。ＨＤＬ－Ｃ浓度在２．６ｍｍｏｌ／Ｌ范围内线性良好，ｒ＝０．９９９；两组低，中，高浓度的标本批内ＣＶ２．１％－３．３％，批间ＣＶ２．２％－３．６％，平均回收率为９７．５％，浓度为６．２ｍｍｏｌ／Ｌ甘油三酯，１０５．６μ     

3-磷酸甘油醛脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

建立血清醛缩酶活性的３－磷酸甘油醛脱氢酶偶联剂测定法。用底物１，６－二磷酸果糖妄动酶促反应，连续监测ＮＡＤＨ生成速率。反应条件：温度３７℃，ｐＨ８．３，各反应物的终末浓度：三乙醇胺５０ｍｍｏｌ／Ｌ，１，６－二磷酸果糖４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，砷酸钠１０ｍｍｏｌ／Ｌ，氧化型辅酶１６ｍｍｏｌ／Ｌ，３－磷酸甘油醛脱氢酶２５００Ｕ／Ｌ，磷酸丙糖异构酶５００Ｕ／Ｌ，乳酸脱氢酶１５００Ｕ／Ｌ，血清与试剂容积比０．４     

高效液相色谱法测定香草扁桃酸、高香草酸、肌酐含量

目的建立高效液相色谱法同时测定尿中的香草扁桃酸（ＶＭＡ）、高香草酸（ＨＶＡ）和肌酐（Ｃｒ）含量的方法。方法以０．０２ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４缓冲液（ｐＨ５．７）为流动相；色谱柱采用ＹＷＧ－Ｃ１８柱；电化学和紫外检测器联合检测。尿样经适当稀释后直接进样测定，最后以ＶＭＡ和ＨＶＡ与Ｃｒ的比值表示含量。对１５例正常成人和１０例嗜铬细胞瘤患者进行了测定。结果方法的平均批内变异系数（ＣＶ）值ＶＭＡ／Ｃｒ为２．４％，ＨＶＡ／Ｃｒ为６．１％。正常成人的ＶＭＡ／Ｃｒ和ＨＶＡ／Ｃｒ分别为３．８４×１０－３±０．９１×１０－３（ｍｍｏｌ／ｍｍｏｌ）和３．３１×１０－３±１．１３×１０－３（ｍｍｏｌ／ｍｍｏｌ）；嗜铬细胞瘤患者的ＶＭＡ／Ｃｒ和ＨＶＡ／Ｃｒ分别为２８．７０×１０－３±２５．４６×１０－３和４．３８×１０－３±２．０８×１０－３（ｍｍｏｌ／ｍｍｏｌ）。结论方法能满足临床诊断嗜铬细胞瘤和神经母细胞瘤的需要     

连续监测法测定血清山梨醇脱氢酶

以ＮＡＤ＋、山梨醇为底物，３７℃ｐＨ１０的甘氨酸／氢氧化钠为缓冲体系，建立血清山梨醇脱氢酶（ＳＤＨ）的连续监测法。ＮＡＤ＋、山梨醇和Ｚｎ２＋的最终浓度分别为０．４７、１９和１．９ｍｍｏｌ／Ｌ，ＫＮＡＤ＋、Ｋ山梨醇分别为０．０９和１．２ｍｍｏｌ／Ｌ。在此条件下，确定ＳＤＨ线性范围为０～１８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ为３．９％，批间ＣＶ为５．２％，６０例健康成人血清ＳＤＨ正常参考值为０～３．１Ｕ／Ｌ。初步临床观察表明，急性肝损伤时该酶明显升高，肝外梗阻、心肌梗塞等非肝病患者血清ＳＤＨ一般不增高。     

连续监测法测定血清中异柠檬酸脱氢酶

采用连续监测法测定以ＮＡＤＰ为辅酶的异柠檬酸脱氢酶（ＩＣＤ），并对酶促反应条件进行了研究。以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ为缓冲体系，酶促反应最适ｐＨ为７．５，Ｍｎ＾２＋为２ｍｍｏｌ／Ｌ，在最佳条件下测定ＩＣＤ的线性范围为０￣８５Ｕ／Ｌ，批内变异系数２．０６％￣５．８５％，批间变异系数为３．７１％￣８．７２％，１００例健康人血清参考范围为２．０￣１１．２Ｕ／Ｌ，初步临床应用表明各类肝炎及肝癌均显著升高，ＩＣＤ／     

两点法测定腺苷脱氨酶及临床初步应用

应用Ｔｒｉｎｄｅｒ反应建立了两点法测定体液中腺苷脱氨酶。该方法应用方便，测定快速，灵敏，准确。对酶反应最佳条件进行了实验探讨，底物Ｋｍ为０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，最佳ｐＨ７．４，延滞期５分钟，５－１５分钟测得酶活性基本一致。批内ＣＶ２．０３％，批间ＣＶ３．６８％。５５例健康人血清腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）２１．３９±４．１７Ｕ／Ｌ（ｘ±ｓ），３５例结核性胸腹水ＡＤＡ活性为６５．８３±１８．９２Ｕ／Ｌ（ｘ±ｓ     

脂蛋白电泳结合酶显色测定血清各脂蛋白中甘油三酯及临床应用

采用琼脂糖脂蛋白电泳分离脂蛋白结合甘油三酯（Ｔｇ）酶试剂呈色，扫描出各种脂蛋白区带中Ｔｇ所占比例，同血清总Ｔｇ浓度相乘计算各脂蛋白组份中Ｔｇ的含量。结果示本法与参考法比较相关系数：ＨＤＬ－Ｔｇ、ＶＬＤＬ－Ｔｇ、ＬＤＬ－Ｔｇ分别为０．８７３、０．９５５、０．９１２。方法的批内ＣＶ：ＨＤＬ－Ｔｇ、ＶＬＤＬ－Ｔｇ、ＬＤＬ－Ｔｇ分别为８．０％～１０．２％、３．８％～６．５％、４．３％～７．０％；批间ＣＶ分     

高密度脂蛋白胆固醇的直接测定法

基于选择性抑制法的原理，通过对聚阴离子和表面活性剂的筛选实验，以及试剂配方和实验条件优化实验，建立了直接测定高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）的方法。本法的线性范围达３．９ｍｍｏｌ／Ｌ，批内ＣＶ为１．４５％～２．０２％；总ＣＶＯ １．７１％～３．１４％，和ＴＰＡ法比较：Ｙ＝０．９９２３Ｘ＋０．０５２，ｒ＝０．０９８３４，ｎ＝６６。加入ＨＤＬ组份的回收率为１００．１％，本法的特异性好，加入ＬＤＬ－Ｃ达     

两点法测定腺苷脱氨酶及临床初步应用

应用Ｔｒｉｎｄｅｒ反应建立了两点法测定体液中腺苷脱氨酶。该方法应用方便，测定快速、灵敏、准确。对酶反应最佳条件进行了实验探讨，底物Ｋｍ为０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，最佳ｐＨ７．４，延滞期５分钟，５～１５分钟测得酶活性基本一致。批内ＣＶ２．０３％，批间ＣＶ３．６８％。５５例健康人血清腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）２１．３９±４．１７Ｕ／Ｌ（±ｓ），３５例结核性胸腹水ＡＤＡ活性为６５．８３±１８．９２Ｕ／Ｌ（±ｓ）。     

高密度脂蛋白胆固醇直接测定法与硫酸葡聚糖50-镁法比较

目的评价高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）直接测定法在临床应用的可行性。方法将直接测定法与硫酸葡聚糖（ＤＳ５０）－氯化镁沉淀法进行比较，并分析其线性范围、准确度和干扰因素。结果直接法与ＤＳ５０沉淀法相关良好，Ｙ＝０．９２７Ｘ＋０．２１４，ｒ＝０．９６４，ＨＤＬ－Ｃ浓度为２．４５ｍｍｏｌ／Ｌ范围内线性良好，ｒ＝０．９９９，ＨＤＬ－Ｃ浓度两组低、中、高值血清标本（０．８４、１．３１、２．３１；０．９２、１．４２、２．５３ｍｍｏｌ／Ｌ）的批内和批间ＣＶ值分别为２．３８％、１．１５％、２．４７％和３．４８％、０．９９％、２．０６％。浓度为１０．５８ｍｍｏｌ／Ｌ甘油三酯并不影响ＨＤＬ－Ｃ直接测定法。结论ＨＤＬ－Ｃ直接测定法简易快速，结果准确，适于自动化分析。     

连续监测法测定胆红素氧化酶

为了建立连续监测法测定胆红素氧化酶活性的方法。该文以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ为缓冲体系，酶促反应的最适ｐＨ为８．２，底物浓度为３４μｍｏｌ／Ｌ，胆红素的最大吸收波长在４４０ｎｍ，摩尔吸光系数为５．６３×１０＾４Ｌ．ｍｏｌ＾－１．ｃｍ＾－１；在最佳条件下测定ＢＯＤ的线性范围是０－８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ〈３．８１％，批间ＣＶ〈４．６７％。     

LDL—C直接测定法与Friedewald计算结果的比较

用ＤＡ－６１０１ＬＤＬ－Ｃ试剂盒及日立７１７０Ａ生化自动分析仪直接测定血清ＬＤＬ－Ｃ含量。方法批内变异ＣＶ在０．５％～１．４７％，批间变异ＣＶ在２．６０％～３．７３％。平均回收率为１０２．１％，在６．６０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度内呈良好的线性关系。ＬＤＬ－Ｃ＜４．５２ｍｍｏｌ／Ｌ时与Ｆｒｉｅｄｅｗａｌｄ公式计算的结果相关良好。方法简单，勿需沉淀分离和其他处理，适宜自动分析。     

尿液丙氨酸氨基肽酶连续监测法

建立了用丙氨酸对硝基苯胺（Ａｌａ－ｐＮＡ）为底物测定尿液丙氨酸氢基肽酶（ＡＡＰ）的连续监测法。此酶的最适ｐＨ８．０～８．３（２５℃），Ｋｍ值０．６０ｍｍｏｌ／Ｌ，Ａｌａ－ｐＮＡ的最终浓度６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，批内，批间ＣＶ分别为４．２％，线性范围高达４００Ｕ／Ｌ。健康成人（ｎ＝７４）尿ＡＡＰ活性内１．９１～１４．４Ｕ／ｇ．ｃｒ。同时还对其重复性、尿中共存物质的干扰、尿ＡＡＰ的稳定性进行了初步观察。此     

考马民斯亮蓝显以法测定精浆蛋白水解酶

用酪蛋白作底物，考马斯亮蓝显色，建立了精浆蛋白水解酶的测定方法。本法以０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．６Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ作缓冲液，底物浓度为１ｍｇ／ｍｌ，线性范围在５３５￣４２８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ为２．６％，批间ＣＶ３．３％。健康人精浆蛋白水解酶活力为１４２０￣２８７０Ｕ／Ｌ，不育患者（精液液化正常，ｎ＝４０）精浆蛋白水解酶活力为１３２６￣２６２８Ｕ／Ｌ，液化异常或粘稠度增高的不育患者精浆蛋白水解酶     

邻甲酚酞络合剂速率法测定血清胆碱酯酶

以邻甲酚酞络合剂作指示剂，速率法测定血清胆碱酯酶。最适底物浓度为２０ｍｍｏｌ／Ｌ的氯化酰胆碱，最适ＰＨ８．１，最适邻甲酚酞络合剂浓度２．５ｍｍｏｌ／Ｌ。线性范围０－１０Ｕ／ｍｌ（γ＝０．９９８７）。批内ＣＶ２．６％，批间ＣＶ３．９％。     

血清结合胆红素的酶法测定

目的 建立用胆红素氧化酶（ＢＯＤ）作为催化剂，选择性地测定血清结合胆红素（ＣＢ）的新方法。方法 测定条件为：０．１ｍｏｌ／Ｌ甘氨酸缓冲液、ｐＨ１０．０，ＢＯＤ活性０．５～０．８Ｕ／反应管，反应时间２分钟。结果 线性至少可达到２２０μｍｏｌ／Ｌ；精密度为批内ＣＶ１．７１～３．９８％、批间ＣＶ８．０～９．７２％；正常参考值范围为０～３．１４μｍｏｌ／Ｌ；与偶氮法所测结果相关性较好。结论 本文所建立的Ｃ     

血清α—L—岩藻糖苷酶自动分析法

本文报道了血清ａ－Ｌ－岩藻糖苷酶的自动分析法。酶促反应的最适ＰＨ５．０－５．１，Ｋｍ－０．１８０ｍｍｏｌ／Ｌ，用柠檬酸－磷酸盐缓冲液可发挥酶的最大催化活性。线性范围为０－５０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ１．５３％－１．７１％，批间ＣＶ３．０％－３．２％。本法具有简单、快速、灵敏等特点。