交泰丸对利血平诱导小鼠抑郁模型的影响

[目的] 探讨交泰丸对利血平诱导小鼠抑郁模型的影响。[方法] 采用小鼠强迫游泳实验（FST）、小鼠悬尾实验（TST）和小鼠利血平拮抗实验,通过高效液相色谱（HPLC）测定小鼠海马和皮质组织中单胺类神经递质[去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）]含量的变化,探讨交泰丸的抗抑郁作用。[结果] 交泰丸组方各剂量组均能明显减少FST和TST的不动时间,并且均能拮抗利血平诱导的小鼠眼睑下垂和体温下降,而且可以逆转NE和5-HT的减少以及降低5-HIAA的含量。[结论] 交泰丸具有明显的抗抑郁作用,并且可以通过调节海马组织和皮质中NE和5-HT的含量而发挥抗抑郁作用。     

杭白菊、当归、丹参提取液抑制黄褐斑形成及机制研究

目的 观察杭白菊、当归、丹参提取液对im黄体酮及紫外（UV）照射导致的黄褐斑小鼠模型的抗氧化与抗黄褐斑形成作用。方法 将小鼠随机分成对照组、模型组、维生素C组、杭白菊组、当归组、丹参组共6组。采用im黄体酮及辅助UV照射方法建立黄褐斑小鼠模型。测定各组肝脏及皮肤组织中的谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、酪氨酸酶（TYR）活性与总抗氧化能力（T-AOC）,以及丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、肝脏脂褐质水平,并测定血液流变学指标,进行皮肤病理学检查。结果 杭白菊、当归、丹参提取液显著增强黄褐斑小鼠肝脏和皮肤中GSH-Px、SOD活性,降低MDA水平,抑制TYR增加,使黑素细胞（MC）生成减少,抑制黑色素合成,从而减轻皮肤色素沉着。结论 杭白菊、当归、丹参提取液有一定的防治黄褐斑的功效,其作用与提高机体抗氧化能力,抑制TYR活性,减少黑色素的合成以及改善机体的血液流变学有关。     

利用CRISPER/Cas9技术构建肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠

目的：通过 CRISPR/Cas9 介导的基因编辑技术构建卵磷脂胆固醇脂酰转移酶（lecithin-cholesterol acyltransferase， LCAT）基因敲入C57BL/6小鼠并与肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠配繁得到肝脏特异性敲入Lcat基因C57BL/6小鼠模型。 为Lcat基因在肝脏相关代谢疾病发生机制的研究提供动物模型。方法：利用CRISPR/Cas9技术构建Lcat基因敲入小鼠；利用肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠与Lcat基因敲入小鼠交配得到肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠；通过PCR法鉴定小鼠的基因型 ；利用实时荧光定量 PCR（real-time quantitative PCR，qPCR）和 Western blot 技术验证 Lcat 基因的 mRNA 水平和蛋白水平。 结果：PCR结果显示肝脏特异性敲入Lcat基因的小鼠模型构建成功；qPCR结果显示Lcat基因在肝脏中特异性高表达；WB结果显示，与对照组小鼠相比，LCAT蛋白在肝脏特异性敲入Lcat的小鼠肝脏中有明显更高的表达。结论：成功构建肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠，为在动物水平探索Lcat基因在肝脏相关代谢疾病中的功能及相关发病机制提供研究平台。     

高脂血症小鼠铁调素表达与肝功能损伤的关系

目的 观察高脂血症小鼠血清铁调素表达变化,探讨肝功能损伤与高脂血症小鼠铁调素的相关性。方法 60只4周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为6组,每组10只,分别为0、2、4、6、8周组以及8周正常对照组,造模组40只给予脂肪乳灌胃,分别在2、4、6、8周处死,复制高脂血症伴有肝脏损伤模型。对照组给予等体积生理盐水,造模成功后,取血分离肝脏。全自动生化分析仪检测血脂（TC、TG、LDL-C、HDL-C）、肝功能（ALT、AST）、血清铁（FER、TRF）。血清酶联免疫吸附法测：血清铁调素（hepcidin）水平。结果 与空白组比较,模型组TC、TG水平明显升高（P<0.05）造模成功,2周组小鼠hepcidin表达水平明显下降（P<0.05）。与空白组比较,小鼠铁调素（hepcidin）表达水平随高脂喂养时间延长,铁调素表达有升高趋势,以8周组下降差异有统计学意义（P<0.05）。血清铁调素与肝功能损伤程度间呈负性相关（r=0.878,P<0.01）。结论 高脂血症小鼠血清铁调素表达随血脂水平升高而增多。伴随肝功能受损程度加重,铁调素表达下降,表明铁调素水平能反映肝脏损害程度。     

泻肝安神法对睡眠剥夺大鼠单胺类神经递质影响的研究

[目的] 探讨泻肝安神法对睡眠剥夺大鼠脑干及海马脑区单胺类神经递质含量的干预效应。[方法] 采用水平台睡眠剥夺法造模后,给予泻肝安神法干预7 d后取材,高效液相色谱法检测脑干及海马脑区7种单胺类神经递质的含量。[结果] 大鼠剥夺睡眠后脑干单胺类神经递质5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、5-羟色胺(5-HT)明显下降,多马胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、3-甲氧基4-羟基苯乙酸(HVA)明显升高,二羟苯乙酸(DOPAC)无明显变化。而在海马区域各单胺类神经递质含量变化不显着。采取泻肝安神法治疗后大鼠脑干5-HT、5-HIAA含量显着升高,DA含量明显下降;而在双侧海马5-HT、5-HIAA、DA、HVA升高,NE下降。采用地西泮片治疗后大鼠在海马区的单胺类神经递质变化与中药组结果一致,但在脑干仅有5-HIAA升高,而5-HT、DA则没有明显变化。[结论] 泻肝安神法可调节睡眠剥夺大鼠的单胺类神经递质,且影响靶点要多于地西泮片,机制可能与综合的调节单胺类神经递质水平,纠正其紊乱相关。     

四君子汤对脾虚大鼠不同脑区单胺类神经递质含量的影响

[目的]研究脾虚大鼠不同脑区单胺类神经递质含量的变化和四君子汤干预的途径。[方法]将60只大鼠分为空白对照组、脾虚组和四君子汤组,使用高效液相色谱法检测大鼠海马、下丘脑和纹状体中5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)的含量。[结果]与对照组比较,脾虚组大鼠各脑区内5-HT水平显著升高,DA水平显著下降(P<0.05);使用四君子汤干预后,5-HT和DA水平基本恢复正常,与空白对照组比较,无显著性差别,而与脾虚组大鼠比较,差异有显著性(P<0.05)。[结论]四君子汤可通过改善中枢单胺类神经递质含量的途径达到健脾治疗的目的。     

1，3-二苯-1，3-丙二酮对可卡因致小鼠神经递质含量变化的影响

目的：探讨1,3-二苯-1,3-丙二酮（1,3-diphenyl-1,3-propanedione,DPPD）对可卡因所致小鼠神经递质含量变化的影响。方法： 36只雄性健康的ICR小鼠随机分为对照组、可卡因组、3个DPPD预给药组（200、400、800 mg/kg）和DPPD单独给药组（800 mg/kg）。对照组灌胃给予1%（体积分数）吐温3 d;可卡因组灌胃给予1%吐温2 d,第3天皮下注射可卡因;3个DPPD预给药组小鼠分别灌胃给药（DPPD 200、400、800 mg/kg）3 d,第3天给药30 min后皮下注射可卡因;DPPD单独给药组用DPPD 800 mg/kg灌胃给药3 d。给予可卡因20 min后处死小鼠,采用高效液相色谱法 荧光检测器检测小鼠脑组织中多巴胺（dopamine,DA）和5-羟色胺（5-hydroxytryptamin,5-HT）的含量,采用高效液相色谱法 紫外检测器检测小鼠脑组织中谷氨酸（glutamic acid,Glu）和γ 氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）的含量,比较各组间神经递质的水平。结果： 与对照组相比,可卡因组小鼠脑中DA和GABA含量明显升高（P<0.01和P<0.05）,Glu含量显著降低（P<0.05）。与可卡因组相比,DPPD预给药组（200、400、800 mg/kg）小鼠脑中DA含量明显下降（P<0.01）,DPPD预给药200 mg/kg组小鼠脑中GABA含量明显下降（P<0.05）。DPPD预给药200 mg/kg组小鼠脑中DA、5-HT、Glu和GABA含量与对照组的差异均无统计学意义。结论： 低剂量DPPD可逆转可卡因致小鼠神经递质含量的改变。     

小分子化合物I942对黑素细胞黑素合成的促进作用

目的 研究小分子化合物I942对黑素细胞黑素合成的作用及相关机制。方法 采用多巴染色法对正常人永生化黑素细胞系PIG1进行鉴定,用不同浓度的小分子化合物I942处理黑素细胞PIG1。用CCK-8法检测小分子化合物I942对细胞活力的影响,用氢氧化钠裂解法检测细胞中黑素含量,用多巴氧化反应法检测细胞中酪氨酸酶活性,用qRT-PCR检测细胞中黑素合成相关蛋白小眼畸形相关转录因子（MITF）、酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白1（TRP1）、酪氨酸酶相关蛋白2（TRP2）mRNA的表达量,用蛋白质印迹法检测TYR、TRP2的蛋白表达情况。结果 在0～50 μmol/L的浓度范围内,小分子化合物I942对黑素细胞PIG1细胞活力的影响差异无统计学意义（P>0.05）。小分子化合物I942可增加黑素细胞PIG1中黑素含量（P<0.01）,升高细胞内酪氨酸酶活性（P<0.01）。使用小分子化合物I942处理后,黑素细胞PIG1中MITF、TYR、TRP1、TRP2 mRNA表达均上升（P<0.01,P<0.05）,TYR、TRP2蛋白表达无明显变化。结论 小分子化合物I942在对细胞活力无明显抑制作用的基础上,可通过升高酪氨酸酶活性增加黑素细胞PIG1中黑素含量,同时黑素合成相关蛋白MITF、TYR、TRP1、TRP2的mRNA表达也升高。     

蛇麻草精油香薰法对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠的助眠作用研究

目的 探究蛇麻草精油香薰法对氯苯丙氨酸（PCPA）诱导失眠大鼠的行为学、部分神经递质含量及松果体的影响。方法 腹腔注射PCPA复制失眠大鼠模型,随机分为模型组、薰衣草精油组（0.2%）、蛇麻草精油低浓度组（0.05%）、蛇麻草精油中浓度组（0.10%）及蛇麻草精油高浓度组（0.20%）,每组12只,另设空白组12只。模型复制后,各治疗组分别以相应浓度精油香薰治疗,空白组和模型组熏蒸馏水。每天8 h,连续5 d。观察并记录各组大鼠一般状况;戊巴比妥钠协同睡眠实验观察大鼠睡眠潜伏期和睡眠持续期;旷场实验检测大鼠自发活动;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠血清褪黑素（MT）、γ-氨基丁酸（GABA）、谷氨酸（Glu）含量;高效液相色谱仪测定各组大鼠下丘脑中去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、五羟色胺（5-HT）含量;HE染色观察大鼠松果体病理学改变。结果 与空白组比较,模型组睡眠潜伏期延长、睡眠持续期缩短（P <0.05）;水平运动和垂直运动均减少（P <0.05）。与模型组比较,蛇麻草精油高浓度组睡眠潜伏期缩短、睡眠持续期延长（P <0.05）;水平运动和垂直运动增加（P <0.05）;血清MT、GABA含量上升,Glu含量下降,Glu/GABA下降（P <0.05）;下丘脑中5-HT含量上升,NE和DA含量下降（P <0.05）。松果体细胞和神经胶质细胞形态结构正常、排列均匀、数目明显恢复。结论 蛇麻草精油香薰法对失眠大鼠具有一定助眠作用,可能与改善松果体结构,促进MT、抑制性递质GABA及5-HT的分泌,以及抑制兴奋性递质Glu、NE、DA的分泌有关。     

山茱萸总苷对小鼠免疫性肝损伤治疗作用的初步研究

[目的] 研究山茱萸总苷（TGCO）对刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠急性免疫性肝损伤的治疗作用及其机制。[方法] C57BL小鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、TGCO高、中、低剂量组（920、460、230 mg/kg）和联苯双酯组（0.1 g/kg）,每组10只。除正常对照组外,各组均采用尾静脉注射ConA 15 mg/kg制备急性免疫性肝损伤模型,正常对照组注射等量生理盐水。建模后2 h,正常对照组和模型组以0.02 mL/g生理盐水灌胃,阳性对照组给予联苯双酯0.1 g/kg灌胃,TGCO高、中、低剂量组分别给予TGCO溶液920、460、230 mg/kg灌胃,每6 h灌胃1次,连续给药5次。末次灌药2 h后,称质量后处死小鼠,比较各组小鼠的肝脏、脾脏系数,测定小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天门冬氨酸转氨酶（AST）及肝匀浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、鸟氨酸氨基甲酰转移酶（OCT）、γ干扰素（IFN-γ）、白介素-1（IL-1）、白介素-6（IL-6）及超氧化物歧化酶（SOD）含量,苏木精伊红（HE）染色观察肝脏病理学变化。[结果] TGCO各剂量组和联苯双酯均能降低免疫性肝损伤小鼠增加的肝脏指数、脾脏指数（P<0.05）,改善肝组织病理学变化和肝脏组织病理学分级,减轻ConA所致肝损伤的炎性反应,抑制血清ALT、AST的升高,降低肝匀浆中TNF-α、OCT、IFN-r、IL-1和IL-6含量及提高SOD的活性。[结论] TGCO对免疫性肝损伤具有一定治疗作用,并且在实验剂量范围内呈显著的剂量依赖性,其保肝机制可能与减少炎性因子的生成、抗氧化、清除自由基能力的提升以及免疫调节有关。