Sabin IPV基础免疫后不同时间的中和抗体水平研究

目的 探讨不同剂量配比的Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin IPV)基础免疫后中和抗体的持续时间及加强免疫前后中和抗体水平的变化.方法 用不同配比的Ⅰ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒原液制备两批Sabin IPV,并使用GSK制备的DTaP-w IPV作为阳性对照组,对18只Wistar大鼠进行3针基础免疫后,每间隔3个月采血直到加强免疫前,并同时于加强免疫后1个月采血,并对血清中抗脊髓灰质炎病毒3个型别的中和抗体效价进行初步研究.结果 大鼠采用0、1、2月免疫程序进行3针免疫后,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体的几何平均滴度随着时间的变化均有所下降,但绝大部分组大鼠的血清中和抗体阳转率仍维持在100％,在加强免疫后,各组的三个型别的中和抗体水平在短期内明显升高.结论 Sabin IPV有良好的免疫持久性,并在加强免疫后,可产生更高水平的中和抗体.     

DTaP-sIPV联合疫苗中SabinIPV 免疫原性研究

目的 探讨吸附无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）的制备工艺,并比较不同配比的DTaP-sIPV中Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（SabinIPV）三针基础免疫大鼠的中和抗体效价,为确定联合疫苗的最佳制备工艺及抗原剂量配比提供参考.方法 用不同配比的SabinIPV,制备两批DTaP-sIPV,进行各项指标的检定及稳定性试验,并联合单独的Sabin IPV和GSK制备的DTaP-wIPV对56只Wistar大鼠进行3针免疫,每针间隔1个月,每次免疫后30 d采血并分离血清,采用微量中和试验测定血清中抗脊髓灰质炎病毒3个型别的中和抗体效价.结果 两批DTaPsIPV的各项检定指标均符合〈中国药典〉三部（2005版）要求,且稳定性良好.大鼠经3针基础免疫后,其Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体的几何平均滴度均显著上升,3针免疫后抗体阳转率已经达到100%.结论 经此制备的DTaP-sIPV安全、稳定、有效,且DTaP-sIPV中的SabinIPV在大鼠中有良好的免疫效果,经3针免疫可产生高水平的中和抗体.     

重组金黄色葡萄球菌肠毒素A协同增强破伤风类毒素的免疫原性研究

目的重组超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A（SEA）与AI（OH）,佐剂联合应用协同增强破伤风类毒素（TT）的免疫原性观察。方法将高、低两个剂量的TT分别与高、中、低3个剂量的重组SEA同时吸附一定浓度的AI（OH）3作为样品组,同时设置高、低剂量TT分别与同样浓度AI（OH）3的吸附组作为对照;各组分别腹部皮下免疫NIH小鼠8只,0．5ml／只：免疫4周后,摘眼球采血,分离血清,检测各组抗TT抗体的IgG水平。结果在TT高剂量组,高、中剂量的SEA均能增强抗TT抗体的IgG水平（P〈0．05）,而低剂量SEA组与对照组相比未能增强TT的免疫原性;在TT低剂量组,3个剂量的SEA均能显著增强TT的免疫原性,P〈0．05。结论TT联合重组SEA及AI（OH）3佐剂能诱导免疫后小鼠产生更强的体液免疫应答,SEA及AI（OH）3佐剂对TT具有协同免疫增强效应。     

灭活SARS病毒的免疫原性的实验研究

研究灭活SARS病毒的免疫原性。SARS病毒F6 9株经甲醛灭活后 ,加入氢氧化铝佐剂 ,以 3种剂量接种BALB/c小鼠 ,定时采血 ,测定特异性抗体的滴度及其中和活性 ,同时用化学发光酶联免疫法测定抗血清与SARS病毒结构蛋白的反应特异性及其相对强度。结果发现 ,小鼠接种疫苗 4d后 ,血清中可检测到IgM抗体 ,直至 2 6d后逐渐下降 ;IgG抗体在初次免疫 8d后出现 ,4 7d时达最高峰 ,6 3d后进入稳定期 ;不同剂量组的抗体滴度具有明显剂效关系 ,低剂量组和中剂量组滴度峰值为 1∶192 0 0 ,高剂量组滴度峰值为 1∶384 0 0。中和实验结果表明 ,小鼠所产生的抗体具有中和病毒活性 ,在 6 3d时 ,低剂量组和中剂量组血清的中和效价为 1∶12 80 ,高剂量组血清的中和效价为 1∶5 12 0。抗体分类结果表明 ,小鼠抗血清中含有针对多种SARS病毒结构蛋白的特异性抗体 ,其中 ,针对N蛋白、S4蛋白和S2蛋白的抗体水平相对较高 ,而抗M抗体、抗 3CL抗体的水平相对较低。上述结果说明 ,SARS病毒F6 9株经甲醛灭活后 ,各主要结构蛋白仍保持较强免疫原性 ;免疫小鼠后 ,可以诱导产生高滴度的特异性混合抗体 ,在体外可以保护敏感细胞不受SARS病毒攻击     

二苯氧乙醇对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗效力的影响及安全性研究

目的检测二苯氧乙醇对3价减毒株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin IPV)效力的影响及其毒性。方法将每毫升(每剂量)含二苯氧乙醇5、7mg的Sabin IPV分别放在4℃、37℃2和7d,用ELISA方法检测病毒D抗原含量,并进一步测定小鼠和豚鼠的免疫反应。按《中国生物制品规程通则异常毒性试验规程》检测其毒性。结果含两种浓度二苯氧乙醇的Sabin IPV于37℃保存2、7d,两种疫苗中的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原含量、中和抗体的效价与不含二苯氧乙醇的对照组相比,无明显差异。观察期内,小鼠和豚鼠全部健存,没有异常反应。结论二苯氧乙醇对Sabin IPV效力没有影响,安全性好,可以作为Sabin IPV的防腐剂。     

铝佐剂类型及吸附率对吸附无细胞百白破联合疫苗免疫原性的影响

目的研究铝佐剂类型及吸附能力对吸附无细胞百白破联合疫苗免疫原性的影响,筛选最佳佐剂。方法用磷酸铝(AP)、不同浓度磷酸盐处理的氢氧化铝(PTAH)以及氢氧化铝(AH)佐剂吸附百白破抗原,检测不同佐剂对各抗原的吸附率。制备不同佐剂类型和吸附率的制剂,腹腔免疫NIH小鼠,ELISA法测定免疫后各组小鼠血清抗体滴度。结果百日咳丝状血凝素(FHA)在所有佐剂中吸附率≥95%,百日咳类毒素(PT)、百日咳溶血素(PRN)、精制白喉类毒素(DT)和破伤风类毒素(TT)则随着铝佐剂中磷酸根增多吸附率降低。动物实验产生PT抗体水平大小关系:AP/AHPTAH/无佐剂组;产生FHA抗体水平大小关系:AP/PTAH-3/AHPTAH-2/PTAH-3无佐剂组;产生PRN抗体水平大小关系:PTAH/AP/AH无佐剂组;产生DT抗体水平大小关系:APPTAHAH无佐剂组;产生TT抗体水平大小关系:PTAHAH/AP/无佐剂组。结论铝佐剂吸附力不影响抗原(DT除外)免疫原性,磷酸铝更适合作吸附无细胞百白破联合疫苗的佐剂。     

CpG ODN佐剂对乙肝疫苗抗原免疫原性的影响

目的探究CpG ODN佐剂对不同抗原含量乙肝疫苗免疫效果的影响。方法在体液免疫方面不同抗原浓度的CpG ODN与Al(OH)3佐剂乙肝疫苗免疫Balb/c小鼠,于免疫后第2、4、6、8、10周收集血清,检测小鼠体内相对效力ED50和血清中的anti-HBs抗体水平;在细胞免疫方面测定诱导产生IFN-γ水平及IgG2a应答水平。结果 CpG ODN与Al(OH)3佐剂可以有效协同HBs Ag诱导机体产生的抗体滴度达49 427 mIU/ml,抗体效价随时间延长而增加。乙肝抗原减半后双佐剂乙肝疫苗诱导机体产生的特异性抗体滴度可达41 225 mIU/ml,高于无CpG ODN佐剂的铝佐剂疫苗。在诱导细胞分泌方面,对照组诱导产生IFN-γ水平及IgG2a应答水平明显低于所有双佐剂疫苗组。结论 CpG ODN对HBsAg具有良好佐剂活性,并与铝佐剂有协同作用,二者联合应用可以降低乙肝抗原用量并提高疫苗免疫原性。     

抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原单克隆抗体的研制

目的应用杂交瘤技术制备抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原的单克隆抗体。方法用脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原免疫雌性Balbc小鼠,取其致敏脾脏淋巴细胞与SP20小鼠骨髓瘤细胞融合。间接ELISA法筛选阳性克隆,制备腹水。检测McAb效价、抗体亚类和杂交瘤细胞核型。结果获得4株阳性杂瘤细胞株,选择一株制备腹水,ELISA效价为1∶2.4×106,中和试验效价1∶1.3×104,蛋白浓度为27.2mgmL。McAb与Ⅱ型Sabin株C抗原(ⅡC)、Ⅰ型Sabin株及Ⅲ型Phizer株D抗原(ⅠD、ⅢD)不发生交叉反应,具有高度特异性。结论成功的制备了针对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原的McAb,为进一步研究IPV效力检测奠定了基础。     

CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂对流感病毒裂解疫苗免疫效果的影响

目的 研究CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂对流感病毒裂解疫苗体液免疫和细胞免疫效果的影响,为今后研制新佐剂流感疫苗和解决流感疫苗产能不足的问题提供依据.方法 以不同剂量的2009 H1N1流感病毒裂解疫苗为抗原,分别以CpG-ODN、氢氧化铝以及CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂为疫苗佐剂免疫BALB/c小鼠,通过ELISA、血凝抑制试验和假病毒中和试验等方法评价体液免疫效果,通过ELISPOT、胞内细胞因子染色和体内CTL杀伤等方法评价细胞免疫效果.结果 与无佐剂对照组相比,CpG-ODN或氢氧化铝单独使用能够在一定程度上增强体液免疫,2针免疫后不同抗原剂量组中抗原特异性IgG抗体滴度、血凝抑制抗体滴度和中和抗体滴度分别提高3～6倍、2～4倍和4～8倍.CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂具有更强的佐剂效应,2针免疫后不同抗原剂量组中抗原特异性IgG抗体滴度、血凝抑制抗体滴度和中和抗体滴度分别提高23～ 57倍、9～20倍和16～64倍.根据体液免疫结果,复合佐剂能够使流感病毒裂解疫苗的抗原用量降低至少16倍.此外,复合佐剂能够显著增强流感病毒裂解疫苗的细胞免疫应答,不但能够促进抗原特异性CD4+T细胞的IFN-γ分泌,而且能够促进抗原特异性CD8+T细胞的CTL杀伤活性.结论 CpG-ODN和氢氧化铝复合佐剂能够增强流感病毒裂解疫苗的体液免疫和细胞免疫应答并显著降低抗原用量.     

登革病毒重组亚单位疫苗的构建及免疫原性分析

目的 构建登革病毒1～4型重组亚单位疫苗,分析重组疫苗的免疫原性.方法 利用连接肽将登革病毒1型与2型,3型与4型的外膜蛋白DⅢ基因片段连接在一起,克隆人原核表达载体pET-30a,在大肠埃希菌中表达DEN1/2型、DEN3/4型融合重组蛋白.重组蛋白经高效液相色谱柱分离纯化后,混和免疫小鼠,采用中和实验法测定血清中和抗体效价,同时进行乳鼠体内中和实验,观察中和抗体对乳鼠的免疫保护作用.结果 重组蛋白能诱导小鼠产生针对登革病毒1～4型的中和抗体,平均中和效价分别为1：34.9、1：45.3、1：24.7和1：38.4.中和抗体能保护新生乳鼠免受致死剂量DEN1～4的攻击,保护率分别为100%,100%,83%,83%.结论 构建的重组亚单位疫苗具有良好的免疫原性,能诱导小鼠产生中和抗体,为构建单一四价疫苗提供了实验室依据.     

湖南农村土家族成人的体型特征

目的 探讨湖南农村土家族成人的体型特征。 方法 采用Heath-Carter人体测量体型方法,对976名（男性528人,女性448人）湖南农村土家族成人的体型进行评价。 结果 土家族平均体型男性为偏内胚层的中胚层体型(3.43-5.35-1.61),女性为内胚层 中胚层均衡体型(5.18-5.38-1.01);随着年龄增长,男女性的内因子值和中因子值均先增加后下降,而外因子值先下降后递增;各年龄组男性内因子值均明显低于女性,中因子值男女性差异无显著性,多个年龄组男性的外因子值明显高于女性。 结论 湖南农村土家族成人骨骼、肌肉系统较发达,男性体型较为修长,女性皮下脂肪较发达,体态丰满。30个乡村族群中,土家族成人的中因子值较大,外因子值和内因子值较小,体型与木雅人、尔苏人等接近。     

宁夏枸杞叶对去势模型大鼠雌激素受体表达的影响

BACKGROUND: Lycium barbarum polysaccharide, the main active component of leaves of lycium barbarum, has a remarkable therapeutic effect on osteoporosis in adult ovariectomized female rats. OBJECTIVE: To explore effects of leaves of Lycium barbarum on serum estradiol and bone estrogen receptor expressions in adult oxariectomized female rats． METHODS: Thirty-two 6-month-od female rats were randomized into sham-surgery, model, and treatment groups, respectively. Rat models of postmenopausal osteoporosis were induced by ovariotomy followed by orally administration of water solution of leaves of Lycium barbarum (500 or 1 000 mg/kg) or distilled water once daily for consecutive 12 weeks in treatment and model groups, respectively. Serum estradiol level was detected by radiation immunoassay method. Estrogen receptor α, β immunoreactivities in bone tissue were determined by immunohistochemical staining． RESULTS AND CONCLUSION: Serum estradiol level in the model group was significantly decreased compared with the sham-surgery group (P < 0.01), but that was significantly increased in the treatment groups, particularly at high dose, compared with the model group (P < 0.01). Estrogen receptor α, β immunoreactivities were weaker in the model group than the sham-surgery group (P < 0.01), and those were stronger in the treatment groups than the model group (P < 0.01). Our results suggest that leaves of Lycium barbarum treat osteoporosis through enhancing serum estradiol and estrogen receptor expressions in adult ovariectomized rats． 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

建立复发性口疮大鼠模型和黄芩苷的干预

背景：细胞外基质的降解与重构是多种病理及生理过程的共同通路,参与了多种口腔疾病的发病过程。目的：分析复发性口疮大鼠细胞凋亡的细胞外基质重构参与作用及黄芩苷的干预作用,为相关新药开发和临床治疗提供参考。方法：40只SD大鼠随机分为4组：对照组、复发性口疮模型组、小剂量黄芩苷组和大剂量黄芩苷组。后3组大鼠采用口腔黏膜匀浆组织加弗氏免疫佐剂建立大鼠复发性口疮模型。小剂量黄芩苷组和大剂量黄芩苷组大鼠分别给予10 mg/kg和100 mg/kg黄芩苷灌胃,1次/d,连续14 d。结果与结论：与对照组相比,模型组大鼠血清超氧化物歧化酶水平明显降低,而丙二醛水平明显增高,口腔黏膜中Bax、Caspase3和基质金属蛋白酶2/9表达水平增加,而Bcl-2表达水平降低。而小剂量黄芩苷组和大剂量黄芩苷组大鼠上述指标明显恢复,且不同剂量黄芩苷的影响差异有显著性意义。提示黄芩苷主要通过抑制细胞外基质降解与重构过程治疗复发性口疮。中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程     

Practice parameters for the treatment of narcolepsy and other hypersomnias of central origin

These practice parameters pertain to the treatment of hypersomnias of central origin. They serve as both an update of previous practice parameters for the therapy of narcolepsy and as the first practice parameters to address treatment of other hypersomnias of central origin. They are based on evidence analyzed in the accompanying review paper. The specific disorders addressed by these parameters are narcolepsy (with cataplexy, without cataplexy, due to medical condition and unspecified), idiopathic hypersomnia (with long sleep time and without long sleep time), recurrent hypersomnia and hypersomnia due to medical condition. Successful treatment of hypersomnia of central origin requires an accurate diagnosis, individual tailoring of therapy to produce the fullest possible return of normal function, and regular follow-up to monitor response to treatment. Modafinil, sodium oxybate, amphetamine, methamphetamine, dextroamphetamine, methylphenidate, and selegiline are effective treatments for excessive sleepiness associated with narcolepsy, while tricyclic antidepressants and fluoxetine are effective treatments for cataplexy, sleep paralysis, and hypnagogic hallucinations; but the quality of published clinical evidence supporting them varies. Scheduled naps can be beneficial to combat sleepiness in narcolepsy patients. Based on available evidence, modafinil is an effective therapy for sleepiness due to idiopathic hypersomnia, Parkinson's disease, myotonic dystrophy, and multiple sclerosis. Based on evidence and/or long history of use in the therapy of narcolepsy committee consensus was that modafinil, amphetamine, methamphetamine, dextroamphetamine, and methylphenidate are reasonable options for the therapy of hypersomnias of central origin.     

Immunopathogenesis of reactive arthritis:Role of the cytokines

Reactive arthritis(Re A), also known as sterile postinfectious arthritis, belongs to the group of related arthropathies known as spondyloarthritis(SpA). ReA can arise 1-4 wk after a gastrointestinal or genitourinary infection, but once arthritis develops, the microorganism is not found in the joint. The classical microbes associated with ReA development include Gram-negative aerobic or microaerophilic bacteria containing LPS in their outer membrane. The immunopathogenic mechanisms involved in ReA development are still unknown. A hypothesis suggested that the bacteria probably persist outside the joint, at sites such as gut mucosa or lymph nodes, and bacterial antigens might then be transported to the joints. On the other hand, an altered immune response and the unbalanced production of cytokines have been reported in subjects with ReA. Cur-rently, there is increased evidence to suggest that both mechanisms would operate in the immunopathogenesis of ReA. In this review we highlight recent advances on the role of cytokines in the ReA. Particularly, we discuss the roles of some pro- and anti-inflammatory cytokines involved in the immunopathogenesis of ReA.     

国人股骨远端形态测量在全膝关节置换与假体设计中的意义

背景：详细了解国人的膝关节形态,从而实现国人个性化、性别差异化全膝关节置换,并设计研究符合国人特征的膝关节假体,已越来越受到业界关注。 目的：通过CT断层扫描及三维重建测量正常成年国人股骨远端的解剖形态并比较其性别差异。 方法：对70名正常成年国人双侧膝关节行CT扫描,男、女各35名,年龄21-60岁,通过三维重建或使用Picasa 3.0图像处理软件对其进行拼贴及重叠曝光等处理。在经过处理的图像上分别测量股骨远端前髁角、后髁角、滑车沟角的大小,股骨远端横径与外侧髁高度及两者之间的比值。 结果与结论：①国人股骨远端后髁角女性大于男性(P < 0.05);国人股骨远端前髁角男性大于女性(P < 0.05);国人滑车沟角性别间无明显差异。②国人男性的股骨远端横径、股骨远端外侧髁高度及股骨面率(横径/外上髁高度)均大于女性(P < 0.05)。结果可见国人股骨远端的形态与西方人种不同,存在性别差异。在全膝关节置换中假体的选择及其放置、股骨远端假体在设计时应体现出这些差异,使之与国人的膝关节形态相匹配。     

组织工程化成年心肌细胞的构建

背景：采用成年心肌细胞构建组织工程细胞已成为心脏疾病领域新的科研热点。 目的：探讨简单、快捷的成年大鼠心肌细胞分离方法,并初步探索组织工程化成年心肌细胞的构建方式。 方法：采用分段式酶消化方法消化成年大鼠心室肌心肌细胞。分别转染腺病毒和脂质体介导的红色荧光蛋白基因,倒置荧光显微镜、流式细胞仪检测组织工程细胞的构建效率。转染腺病毒介导的缺氧诱导因子1a,采用Western blot检测目标蛋白的表达。 结果与结论：采用分段式酶消化方法可获得大量心肌细胞。流式细胞分析表明所获得的成年心肌细胞的存活率为(87.03±0.70)%。与脂质体转染相比(转染效率为0),腺病毒感染效率高,为(70.31±1.39)%,荧光显微镜下细胞发出红色荧光。在腺病毒转染第4天后,可有效表达目标蛋白缺氧诱导因子1a。以上结果表明分段式酶消化法是成熟心肌细胞的快速分离方式,并明确重组腺病毒载体是转染心肌细胞的最佳基因载体。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

小腿后外侧穿支皮支链的解剖学研究

目的　探讨小腿后外侧穿支皮支链形成的具体区域，为临床切取小腿后外侧穿支皮支链皮瓣提供解剖学基础。 方法　新鲜成人尸体下肢标本15侧，（女性2侧，男性13侧），皮肤无外伤及手术史。13侧下肢经股动脉行红色乳胶灌注，手术显微镜下进行精细解剖，充分显示各穿支间的链状吻合，并于穿深筋膜处测量各穿支的外径。2侧下肢制做血管铸型标本，观察皮支链的构筑。 结果　小腿后外侧穿支数为67支，每侧(5.15±1.86)支，穿深筋膜处的直径为（0.92±0.25）mm；腓骨长度为（34.78±17.78）cm，参与构成小腿后外侧皮支链的穿支数为34支，每侧为（3.31±1.65）支，直径为（0.99±0.23）mm，占所在区域穿支的（28.33±17.79）%～(64.04±19.48) %。 结论　根据小腿后外侧穿支皮支链分布规律和形式切取皮瓣，不但可适当扩大皮瓣的切取面积，也使皮瓣的血供更加安全。     

三组件式全踝关节置换假体的设计及应用现状

背景:早期的全踝关节置换假体,由于对踝关节生物力学的认识不足,较高的置入失败率和并发症发生率使得外科医生放弃了这种治疗方案。随着踝关节假体设计理念的不断更新,全踝关节置换越来越受到外科医生的青睐。目前,三组件式全踝关节置换假体被认为更符合正常踝关节生物力学的要求,并且被逐步推广应用于临床。目的:了解踝关节生物力学,总结3种三组件式全踝关节置换假体的设计特点,为进一步的假体设计总结经验。方法:由第一作者应用计算机检索CNKI、Pub Med等数据库建库至2020年2月有关全踝关节置换假体的文献,中文检索词为"全踝关节置换假体设计,STAR假体,HINTEGRA假体,BOX假体",英文检索词为"Total ankle replacement prosthesis design,STAR prosthesis,HINTEGRA prosthesis,BOX prosthesis"。结果与结论:(1)STAR假体、HINTEGRA假体、BOX假体在临床应用中表现出了可接受的生存率及临床结果,但仍然需要大量病例和长时间的随访进行验证;(2)3种全踝关节置换假体的设计都着重于恢复生理踝关节的解剖结构,再现踝关节的运动轴,兼容韧带的几何形状、减少踝关节周围组织的应力和机械对准;(3)要实现最大化的韧带兼容,假体组件的关节面设计必须是2个生理解剖形状或2个非生理解剖形状的关节面;(4)国人踝关节的形态和高加索人踝关节的形态有差异,期待设计研发符合国人踝关节要求的假体。