大鼠胎肺内表皮生长因子及其受体变化与先天性膈疝肺发育不良的关系

目的观察表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)在Nitrofen诱导的CDH模型胎肺中表达的情况,探讨CDH时肺发育不良的原因。方法实验组20只SD怀孕大鼠于孕9.5d时经胃管给予Nitrofen,正常对照组给食用油,孕21.5d时对所有孕鼠行剖宫产,取出胎鼠两侧肺组织进行EGF和EGFR免疫组化染色和图像分析。结果实验组死亡1只,致畸率46.7%;CDH肺发育不良,处于假腺体期和原始肺小管期,EGF表达上调而EGFR表达下调(P<0.05),膈疝侧与非膈疝侧肺组织EGF及EGFR表达差异没有统计学意义(P>0.05);实验组内产生CDH者胎肺内EGF和EGFR表达与无CDH者相差不大(P>0.05)。结论大鼠CDH模型中,腹腔内器官进入胸腔对肺组织的压迫可能并不是肺发育不良的主要原因,肺发育不良于膈疝形成前就已发生。CDH肺发育不良与EGF EGFR系统的变化密切相关。     

先天性膈疝肺动脉高压的实验研究

目的研究先天性膈疝（Congenital diaphragmatic hernia,CDH）肺发育不良中肺动脉高压（Dulmonary hypertension,PH）的量化指标,探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在CDH胎肺中的表达及在CDH肺动脉高压发生中的可能作用,探讨地塞米松（Dexamethasone,Dex）对VEGF和CDH肺发育的影响。方法采用Nitrofen诱导CDH模型胎鼠并分组：Dex组予以产前Dex治疗,CDH组未给予Dex,另取正常胎鼠为对照组。采用组织学测量、肺蛋白含量检测等方法,测定出平均肺泡面积、平均肺泡间隔厚度、每高倍视野肺血管数、动脉中膜厚度占外径比（MT％）、管壁面积占血管总面积比（WA％）、管腔面积占血管总面积比（LA％）、左肺与体重比、左肺蛋白含量与体重比等;实时荧光定量PCR（QPCR）和免疫蛋白印迹（Western blotting）方法检测各组胎肺中VEGF的表达及相对含量。结果与对照组相比,CDH组胎肺显著发育不良,包括肺微小动脉结构明显异常,表现为每高倍视野肺血管数减少、MT％增大、WA％增大,LA％减小（均P〈0．05）;另外VEGFmRNA及蛋白水平均明显升高（P〈0．05）。与CDH组相比,Dex组胎肺发育明显改善,表现为每高倍视野肺血管数增加、动脉中膜厚度占外径比减小、管腔面积占血管总面积比增大（均P〈0．05）;但VEGF mRNA及蛋白水平未发现明显变化（P〉0．05）。结论VEGF在CDH胎肺中的表达增高可能是CDH肺发育不良形成机制之一;产前地塞米松治疗可明显改善肺微小动脉结构异常及肺发育不良,但未发现对VEGF的表达有影响,提示Dex可能并非通过调节VEGF的表达而发挥改善肺动脉高压及肺发育不良的作用。     

表皮生长因子对先天性膈疝大鼠模型胎肺活性物质的影响

目的探讨表皮生长因子（EGF）对大鼠先天性膈疝（CDH）模型肺发育活性物质的影响，了解EGF的可能作用机制。方法建立大鼠CDH模型。随机分为正常、CDH、CDH加EGF组，采用免疫组织化学方法检测各组胎肺组织甲状腺转录因子-1（TTF-1）、转化生长因子（TGFβ1）表达情况。结果 TTF-1和TGFβ1在各实验组中均有表达，且二者在正常、CDH和CDH加EGF组的两两比较均有显著性差异（只〈0．05）。随EGF剂量增加，TTF-1表达增强，而TGFβ1表达减弱，各组间均有显著性差异（Pa〈0．05）。结论EGF对CDH大鼠胎肺组织TTF-1和TGFβ1表达部位和强度均有影响，可能是其影响CDH肺发育机制之一。     

汉防己甲素对先天性膈疝大鼠的保护作用

目的：探讨汉防己甲素（TET）产前干预对先天性膈疝（CDH）大鼠的保护作用及机制。方法：将妊娠Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、除草醚组与TET治疗组。后两组孕 9.5 d 时采用除草醚灌胃法建立 CDH 大鼠模型;治疗组自孕18.5 d 起给予 TET 灌胃（每日30 mg/kg,连续3 d）;21 d 对部分孕鼠行剖腹并抽取羊水,观察胎鼠膈疝形成情况。采用 ELISA 法、免疫组化染色法检测羊水和胎肺中 TNF-α 的表达情况。余孕鼠自然分娩,观察各组仔鼠出生后情况。结果：除草醚组胎鼠无论有无膈疝形成均存在肺发育不良,肺及羊水中 TNF-α 的表达均明显升高;TET治疗组胎鼠巨大膈疝的发生率低于除草醚组,肺与羊水中 TNF-α的含量明显较除草醚组少（P＜0.01）。在自然分娩的仔鼠中,TET治疗组仔鼠的 24 h存活率明显高于除草醚组（P＜0.01）。结论：产前应用 TET 能降低CDH大鼠模型胎肺与羊水中 TNF-α 的含量,改善因除草醚诱导的胎鼠肺发育不良,减少巨大膈疝的发生,提高仔鼠的存活率。     

大白鼠胎仔先天性膈疝模型的制做及其肺发育不良的病理改变

为研究先天性膈疝及肺发育不良的病理改变，对妊娠９．５天的大白鼠经胃管注入２．４—二氯苯基Ｐ硝基苯醚（Ｎｉｔｒｏｆｅｎ）诱发胎鼠先天性膈疝动物模型，致畸率５８．９％。其中巨大膈疝占６２％。实验组胎鼠的双肺重量降低，膈疝胎鼠肺重量显著低于对照组。组织学显示肺明显发育不良，停留在胚胎发育中期的假腺体状态。本文讨论了Ｎｉｔｒｏｆｅｎ诱发胎鼠膈疝的机制并指出本实验方法简便、致畸率高，是研究膈疝胚胎发育及病理     

成纤维细胞生长因子-7在除草醚诱导的先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达

目的研究成纤维细胞生长因子-7（FGF-7）在先天性膈疝（CDH）胎肺中的表达及探讨其在CDH肺发育不良中的作用。方法采用免疫组织化学和图像分析方法半定量地检测FGF-7在胎肺中的表达部位及表达相对含量。结果CDH肺发育不良，处于假腺体期。FGF-7在对照组显示强表达于支气管和细支气管上皮细胞，在除草醚（nitrofen）组中表达微弱，其表达的相对含量显著低于对照组，Nitrofen组中CDH组和noCDH组间差异没有显著性意义。FGF-7的表达与肺泡面积呈显著正相关性，与肺泡间隔呈显著负相关性。结论FGF-7在CDH胎肺中表达降低，且降低具有组织特异性；FGF-7可作为提示CDH胎肺成熟度的重要指标；FGF-7表达降低可能是CDH肺发育不良形成机制之一。     

汉防己甲素对先天性膈疝大鼠模型胎仔肺发育不良的影响及意义

目的 探讨产前应用汉防己甲素(TET)对先天性膈疝(CDH)大鼠模型胎仔肺内表面活性蛋白B(SP-B)和增殖细胞核抗原(PCNA)的影响及意义.方法 10只成年雌性SD大鼠配种后,于孕9.5 d随机分为3组:对照组(2只)、膈疝组(4只)和治疗组(4只),膈疝组和治疗组一次性灌胃给予除草醚125 mg/只(溶于2.5ml橄榄油中),对照组灌胃给予等量橄榄油.配种后18.5 d时,治疗组给予30 mg/kg汉防己甲素灌胃(1次/d,连续3 d),膈疝组和对照组给予等量生理盐水.孕21 d对孕鼠行剖宫产,观察胎鼠膈疝形成情况,取出肺组织行HE染色并行图像分析,采用免疫组化染色法检测胎肺内SP-B和PCNA的表达情况.结果膈疝组和治疗组共有48只胎鼠形成膈疝,其致畸率为64.9%,二组之间致畸率差别无统计学意义(P>0.05).膈疝组胎鼠存在肺发育不良,产前给予TET干预,肺组织在形态上有明显改善,外形接近于对照组.正常肺组织中,SP-B在肺泡上皮细胞及远端支气管上皮细胞的胞浆内表达,在膈疝组中未见SP-B表达.治疗组中可见SP-B表达,但低于对照组(P<0.01).PCNA阳性细胞率在对照组与膈疝组的差异无统计学意义(P>0.05),但在治疗组中其表达显著较前二组为低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 产前应用TET可诱导CDH胎鼠肺的成熟,促进肺内SP-B表达升高;同时,产前给予TET干预的CDH胎鼠,其肺内PCNA阳性细胞率明显降低,提示TET诱导CDH胎肺的成熟并不是依靠促进细胞增殖来完成的.     

汉防己甲素对于膈疝模型大鼠胎肺中血管内皮生长因子表达的影响北大核心CSCD

目的研究血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）在大鼠膈疝模型胎肺中的表达特点及规律,以及汉防己甲素（Tet）干预后的变化。方法20只健康怀孕的SD大鼠雌鼠在孕9．5d时用随机数字表法随机分为3组：即正常对照组（C组）6只;膈疝组（D组）7只;膈疝汉防己甲素组（DT组）7只。D组和DT组灌胃给予除草醚（Nitrofen125mg／只,溶于2ml橄榄油中）,C组接受等量的橄榄油,DT组于孕11--13d每天给予30mg·kg^-1·d^-1Tet灌胃,C组和D组仅给予生理盐水。分别于第16d、18d和21d麻醉下剖宫取胎鼠双肺,应用组织学观察及原位杂交方法研究VEGF在膈疝模型不同时段胎鼠肺的表达特点及规律,及应用汉防己甲素后VEGF在膈疝模型不同时段胎鼠肺的表达特点及变化规律。结果本组实验中D组18d（D18）和21d（D21）的膈疝发生率为85．2％和DT组18d（DT18）和21d（DT21）的膈疝发生率为76．7％,差异无统计学意义（P〉0．05）。C组16d（C16）、18d（C18）和21d胎龄胎鼠（C21）胎肺VEGFmRNA分光光密度（integralopticaldensity,IOD）分别为7493．4±3167．9、4024．7±2204．9和8697．4±1466．8。D组16d（D16）、18d（D18）和21d胎龄胎鼠（D21）ga肺VEGFmRNAIOD分别为15269．2±5307．5、5670．5±1588．5和8061．3±2245．7。DT组16d（DT16）、18d（DT18）和21d胎龄胎鼠（DT21）胎肺VEGFmRNAI（）D分别为10742．8±4803．5、5626．4±3231．3和11687．7±11628．7。D18与D16和D21与D16的IOD比较差异有统计学意义（P〈0．05）。VEGFmRNA阳性表达的分布特点：C16、D16与DT16的胎肺VEGFmRNA阳性表达位于呼吸道内皮细胞胞浆,尤以远端呼吸道出芽区域更为显著。C18、D18、DT18、C21、D21与DT21的胎肺支气管壁黏膜和血管壁内皮细胞、血管壁肌层可见VEGFmRNA的阳性表达。C21胎肺VEGFmRNA阳性表达部位主要位于肺泡壁和肺问质,呈网状,而D21胎肺肺泡壁和肺间质处VEGFmRNA阳性表达不明显。DT21胎肺VEGFmRNA阳性表达部位主要位于肺泡壁和肺间质,呈网状与C21近似。结论①Nitrofen可能通过抑制VEGF的表达阻碍CDH模型大鼠胎肺晚期肺泡及其血管的发育。②应用汉防己甲素对CDH大鼠进行产前干预后,可使其实验胎鼠肺内VEGFmRNA的阳性分布恢复正常。提示汉防己甲素可能通过调节VEGF的表达而改善肺的发育。③汉防己甲素可能不能阻止Nitrofen诱导大鼠膈疝形成。     

先天性膈疝动物模型制作及其肺部一氧化氮的改变

用Nitrofen致畸孕鼠，获取先天性膈疝鼠仔模型。共获得28只先天性膈疝（CDH）鼠仔，经Nitrofen处理未患CDH鼠仔34只，正常对照组鼠仔25只，对3组进行肺重/体重指数，肺蛋白定量、肺中一氧化氮合成酶（NOS）和一氧化氮（NO）研究。结果发现用Nitrofen致畸孕鼠，在鼠仔中能产生CDH；病侧肺组织中NO含量下降，NOS酶活性下降。由于NO能舒张血管平滑肌细胞。因此病侧肺组织中NO含量明显下降。和CDH肺高压病理生理有关。NO制剂量治疗CDH肺高压一种有希望的新途径。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ在Nitrofen诱导的先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达

目的 研究IGF-Ⅰ在先天性膈疝胎肺上的表达及探讨其在CDH肺发育不良中的作用。方法 采用免疫组化和图像分析方法检测IGF-Ⅰ在胎肺中的表达及相对含量。结果IGF-Ⅰ在对照组表达微弱或缺如，在实验组明显表达于细支气管上皮细胞的胞浆及部分神经丛，其相对含量显著高于对照组。IGF-Ⅰ与平均肺泡面积具有显著的负相关。结论 CDH肺发育不良可能是原发性；IGF-Ⅰ的表达增高，具有组织特异性；IGF-Ⅰ与肺泡面积呈负的直线相关性。     

Nitrofen对膜受体STRA6在先天性膈疝大鼠模型中表达的影响

目的 研究STRA6基因在先天性膈疝胎肺中的表达特点并探讨其在CDH肺发育不良发生机制中的可能作用.方法 采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,QPCR)方法检测在妊娠D 15.5、D 17.5、D21.5的Nitrofen诱导CDH大鼠模型胎肺及正常对照组大鼠胎肺中的STRA6基因mRNA相对表达量.结果 control组:STRA6 mRNA相对表达量呈下降趋势,各时期的相对表达量分别为14.800±5.155,4.061±2.765,1.000±0.449,D 15.5与D 17.5和D 21.5相比有统计学意义(P=0.000＜0.01);Nitrofen组:STRA6 mRNA相对表达量波动.各时期的相对表达量分别为1.191±0.351、7.552±3.716、0.951±0.942、D17.5表达升高,D17.5与D15.5和D21.5相比差异有统计学意义(P=0.000＜0.01);在D 15.5,controls组与Nitrofen诱导组相比有统计学意义(P=0.000＜0.01).结论 在实验动物模型胎鼠肺发育早期(D15.5),Nitrofen干扰肺细胞表面RBP受体STRA6的表达.可能引起肺细胞吸收Vit A障碍而导致CDH肺发育不良的发生;在实验动物模型胎鼠肺发育中期(D 17.5),STRA6的表达增高,这可能是维A酸信号途径对肺细胞内的VitA水平低下的一种负反馈反应.     

生物标记物粪便胆汁酸的测定在过敏性紫癜患儿诊治中的意义

目的 探讨生物标记物粪便胆汁酸浓度在过敏性紫癜(HSP)患者中的变化及其在诊治中的临床意义。方法 选取2014~2016年确诊为HSP的19例患儿为HSP组,另选取27例健康儿童为健康对照组。采集HSP组患儿急性期、恢复期及健康对照组儿童粪便标本,应用液相质谱技术检测各组儿童粪便胆汁酸水平。结果 HSP组患儿恢复期胆酸水平均高于健康对照组和HSP组急性期 (P < 0.016)。HSP组患儿恢复期鹅脱氧胆酸水平高于健康对照组 (P < 0.016)。HSP组患儿急性期和恢复期脱氧胆酸、石胆酸水平均低于健康对照组 (分别P < 0.05、P < 0.016)。各组间熊去氧胆酸水平比较差异均无统计学意义 (P > 0.05)。结论 HSP患儿急性期粪便次级胆汁酸脱氧胆酸和石胆酸低于健康对照组,这可能与HSP的发病或转归有关。     

A Study of Psychosocial Factors in the Psychosomatic Symptoms of Adolescents in Okinawa

High school students (N = 902) in Okinawa were asked to participate in a questionnaire survey which was designed to investigate the psychosocial factors in the psychosomatic symptoms of adolescents. The questionnaire focused on mental distress, perception of school and home environment and psychosomatic symptoms. The Japanese Edition Cornell Medical Index-Health Questionnaire (JCMI) for evaluating emotional instability and the New TK Diagnostic Test for Parent-Child Relationship were also utilized. Distress in relationships with family or friends, finding little pleasure in school and/or home, showing emotional instability as diagnosed according to regions III and IV of JCMI, or showing strained parent-child relationships according to the TK Test items were found to be closely associated with psychosomatic symptoms. In addition, students with human relations problems, especially family problems, tended to have a strained relationship with parents and tended to show autonomic hyperactivity represented by orthostatic dysregulation. Students with peer problems tended to have emotional instability and to find little pleasure in school; they had mental as well as urinary and bowel symptoms. The findings of this study suggest that distresses in family or peer relationships, emotional instability and a strained parent-child relationship are important factors in the onset of psychosomatic symptoms in adolescents.     

吸入型糖皮质激素治疗儿童哮喘有效性与安全性的临床研究

目的　吸入型糖皮质激素作为儿童哮喘预防性抗炎治疗的第一线药物,其效应性、安全性已成为 医患双方共同关注的焦点。但目前长期吸入治疗对肾上腺皮质功能和生长发育影响的国内研究为数不多,因此我 们进行一项对照研究以观察二丙酸倍氯米松(BDP)治疗儿童哮喘的疗效及副作用。方法　50例哮喘儿童根据病 情严重程度,在快速缓解后给予不同剂量二丙酸倍氯米松吸入,为期6月～2.5年。治疗期间定期随访,观察临床 疗效,监测最高呼气流速(PEFR)值,测量体重、身高及修改吸入剂量,并进行24小时尿游离皮质醇含量测定。结 果　临床总有效率90%(45/50),与对照组[70%(21/30)]相比差异有显著性意义(P<0.05),吸入BDP后6个 月时PEFR值和初诊时相比较差异有显著性意义(P<0.05),患儿身高、体重与同龄正常值比较无异常(P> 0.05);24h尿游离皮质醇在正常范围。结论　吸入二丙酸倍氯米松治疗不同严重程度的儿童哮喘,疗效好,而且 安全。     

Some Problems of Neonatal Infections in Japan

For the prosperity of Japan in the 21st century, we pediatricians play a very important role in securing the health of future adults. Although our infantile death rate has become one of the worlds lowest recently, the number of neonatal deaths can further be reduced by preventing infections and accidents. Because of the huge consumption of antibiotics in Japan for past decades, the drug resistance of pathogens has increased remarkably and we are forced to choose potent new antibiotics for saving neonatal lives. Some unsolved problems associated with GBS infection in Japan are mentioned and the necessity of development of immunopotentiators as well as chemotherapeutics and vaccines in treating neonatal infections is discussed.     

Variability of markers of inflammation and infection in induced sputum in children with cystic fibrosis

To determine reproducibility of inflammatory marker concentrations in induced sputum from subjects with cystic fibrosis (CF), 15 nonexpectorating children, 6 to 13 years of age with mild CF lung disease, underwent 3 weekly sputum inductions with 3% saline. Neutrophil elastase concentration and bacterial cultures were reproducible. This study provides useful information for investigators designing trials of anti-inflammatory therapies in CF involving sputum induction.     

Studies on Phagocytic Activity of Polymorphonuclear Leukocyte in Childhood Part 1. Phagocytic activity of PMNs in malnourished rabbits

To clarify the causes of reduced resistance to infection in children with malnutrition, the author carried out an experimental study. The phagocytic activity of PMNs, cyclic nucleotides in PMNs and plasma, total protein, IgG, total lipid, triglyceride, NEFA, and iron in sera were measured in starved rabbits and the following results were obtained:

• 1) After 4 weeks of starvation, the phagocytic activity of PMNs began to decrease and reached a minimum in the 5th week of starvation. Activity returned to normal with improving nutritional states.
• 2) The cyclic nucleotide levels in PMNs and serum abruptly increased in the 4th week of starvation and rapidly returned to normal with sufficient foot intake. The level of CAMP in PMNs and in serum was statistically inversely correlated with the phagocytic activity of PMNs during the experiment.
• 3) The levels of triglyceride and NEFA in serum were reduced in malnutrition. A positive correlation between the phagocytic activity of PMNs and serum triglyceride levels in serum was found.
• 4) A positive correlation between phagocytic activity of PMNs and IgG levels in serum was also observed.
• 5) The levels of total protein, iron, and total lipids in serum showed no change in malnutrition, so consequently no significant relationship between these levels and the phagocytic activity of PMNs was observed.
• 6) The serum of rabbits with malnutrition did not inhibit the phagocytic activity of control rabbits.

In brief, the present experiment revealed that reduction of the phagocytic activity of PMNs in starvation may be principally due to an increase in intracellular cAMP. (Acta Paediatr Jpn 23(2): 143–151 1981)     

早产儿支气管肺发育不良发生率及高危因素的多中心回顾调查分析

目的 了解国内早产儿支气管肺发育不良(BPD)的发生率,探讨影响其发病及其严重程度的因素,为早期预防BPD提供指导意见。方法 回顾性收集国内10家NICU2006年1月1日至2008年12月31日收治的胎龄＜37周且存活≥28 d早产儿临床资料,根据患儿出生后28 d是否用氧(＞21％)分为BPD组和非BPD组。生后28 d未用氧为非BPD组;生后持续用氧≥28 d为BPD组。计算各个胎龄BPD发病率;从数字表中随机选取360例非BPD早产儿做为对照组进行对比研究,对两组患儿临床资料进行对比研究;并对两组患儿生后10d内的总液体量、热卡摄入以及体重下降的百分比进行了组间比较。同时根据出生时胎龄在生后不同日龄进行评估疾病严重程度,即如胎龄＜32周,在校正胎龄36周或出院时进行评估;如胎龄≥32周,在生后56 d或出院时评估：①轻度：未用氧;②中度：FiO2＜ 30％;（③重度：FiO2≥30％或需机械通气。比较轻度BPD和中重度BPD两组患儿的临床资料。临床资料结果采用计量或计数资料描述,计量资料采取非参数检验法,计数资料采用卡方检验（fisher精确概率法）比较两组资料的差异;Logistic回归分析逐步向前引入法找出BPD发病及其病情程度的主要影响因素。结果 10家医院胎龄＜37周早产儿共12 351例,其中符合BPD诊断的156例,BPD发生率为1.26％。其中GA≤28、28～、30～、32～、34～、＜37周BPD发生率分别为19.3％、13.11％、5.62％、0.95％和0.09％,BPD发生率随胎龄增加明显降低。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,体重低于1.5 kg、动脉导管未闭、早产儿贫血、肺透明膜病、巨细胞病毒感染、机械通气、呼吸机持续时间≥7d及PaO2/FiO2＜ 300这8个因素为支气管肺发育不良患儿的高危因素。BPD组与非BPD组患儿生后5d内液体量摄入组间比较无差异,而BPD组患儿生后10d内热卡摄入以及生后前3d内体重下降的百分比明显减少(P＜0.01)。 156例BPD中,20份因资料丢失过多剔除,剩余136例病例中轻度支气管肺发育不良71例,中重度65例。住院天数、用氧时间及氧浓度大于0.3持续时间、院内感染、巨细胞病毒感染、羊水污染、生后是否使用CPAP、呼吸机持续时间≥7 d、生后第一次血气CO2共9个因素组间差异有统计学意义;多因素逐步Logistic回归分析结果显示,合并院内感染、巨细胞病毒感染、呼吸机持续时间≥7 d这三个因素为中重度支气管肺发育不良患儿的高危因素。结论国内10家医院早产儿BPD发生率为1.26％,发病率随胎龄增加而明显降低。极低生体重、动脉导管未闭、贫血、肺透明膜病、巨细胞病毒感染、机械通气、PaO2/FiO2＜ 300等是其高危因素,BPD组生后10 d内热卡摄入明显低于非BPD组。预防院内感染、巨细胞病毒感染及减少机械通气持续时间可降低BPD严重程度。