被动运动与电刺激失用性骨质疏松症大鼠模型神经生长因子基因的表达

背景:研究显示,被动运动与电刺激均能减缓失用性骨质疏松的症状,对骨代谢有改善作用。目的:探讨神经生长因子在失用性骨质疏松形成中的影响地位及预防过程的作用机制。方法:将50只SD大鼠按等体质量原则随机分为假手术组,坐骨神经切除组,坐骨神经切除+被动运动组(简称被动运动组),坐骨神经切除+电刺激组(简称电刺激组),坐骨神经切除+被动运动+电刺激组(简称联合干预组),每组10只。造模各组大鼠均行坐骨神经及股神经切断术(神经切断5mm),手术后24h,开始作被动运动、电刺激等治疗。假手术组与其余4组手术路径相同,但不切除坐骨神经与股神经。结果与结论:①电刺激组、联合干预组体质量高于坐骨神经切除组,差异有非常显著性意义(P<0.01)。②实时荧光定量PCR检测坐骨神经切除组神经生长因子表达低于假手术组,差异有显著性意义(P<0.05);坐骨神经切除组低于电刺激组和被动运动组,差异有显著性意义(P<0.05);联合干预组高于坐骨神经切除组,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结果提示:①经过电刺激和被动运动干预后,大鼠胫骨组织中内源性神经生长因子基因表达水平显著提高。②提高骨组织中神经生长因子基因的表达是预防骨质疏松的重要机制之一,适宜的电刺激与被动运动均能促进这一过程。     

婴儿痉挛症患儿智能结构变化对综合康复训练效果的判断价值

目的探讨婴儿痉挛症(IS)患儿智能结构变化对综合康复训练效果的判断价值,为指导临床康复治疗、判断IS患儿预后提供理论依据。 方法2009年2月至2013年2月收治的27例IS患儿,依据监护人是否同意进行康复训练分为康复训练组(康复组)和拒绝行康复训练组(对照组),其中康复组19例,对照组8例;两组患儿均给予抗癫痫药物控制痉挛发作,康复组患儿再根据病情给予康复训练,记录治疗3月前后粗大运动、精细动作、言语能、适应性、社交行为5项指标发育月龄(DA)的差值和发育商(DQ)及其差值。应用SPSS 17.0软件进行数据处理,康复治疗前后发育商值的对比采用自身配对t检验,发育商值的组间两两比较采用两独立样本t检验。 结果两组患儿治疗后的DQ值[康复组：(59.40±7.85)分,对照组：(52.88±9.50)分]均明显低于治疗前[(康复组：(67.32±7.61)分,t＝6.861,P<0.05;对照组：(67.86±8.39)分,t＝8.875,P<0.05],康复组患儿的适应性[(0.89±0.52)分]和社交行为[(0.79±0.54)分]较对照组[适应性：(0.50±0.38)分,t＝1.946,P>0.05;社交行为：(0.56±0.42)分,t＝1.066,P>0.05]有所好转,但差异无统计学意义,精细动作[(1.34±0.62)分]评分高于对照组[(0.81±0.53)分,t＝2.095,P<0.05],差异有统计学意义,粗大运动[(1.42±0.56)分]、言语能[(1.32±0.48)分]和DQ差[(－7.92±5.03)分]较对照组[粗大运动：(0.75±0.38)分,t＝3.091,P<0.05;言语能：(0.69±0.59)分,t＝2.907,P<0.05;DQ差：(－14.99±4.78)分,t＝3.379,P<0.05]差异有统计学意义。 结论IS患儿智能结构变化能反映综合康复训练的临床效果,综合康复训练可改善IS患儿精神发育迟滞症状,尤其是粗大运动、精细动作和言语能方面。     

单独皮层电刺激对脑卒中大鼠MAP-2表达水平的影响研究

目的观察植入式皮层电刺激对缺血性脑卒中模型大鼠微管相关蛋白-2表达的影响。方法选择105只健康成年SPF级雄性SD大鼠,采用线栓法制作大脑中动脉阻塞模型后,MRI筛选24只Bederson评分为1-4分的皮层梗死大鼠。随机分为电刺激组13只和非刺激组11只。造模1周后,两组大鼠均植入电刺激器,电极放置在脑梗死区边缘皮层表面。非刺激组大鼠植入刺激器后不施加电刺激,电刺激组大鼠给予电刺激,电刺激组大鼠在植入电刺激器2周后终止电刺激。6周后,采用免疫荧光染色法和免疫荧光图像分析系统定量分析比较两组大鼠梗死灶周边及梗死对侧皮层微管相关蛋白-2的表达水平。结果电刺激组大鼠梗死灶周边及梗死对侧皮层微管相关蛋白-2的表达水平均高于非刺激组（t=12．189、2．454,P％0．05）。结论单独植入式皮层电刺激治疗缺血性脑卒中大鼠,能够增加梗死灶周围及梗死灶对侧皮层微管相关蛋白-2的表达水平,诱导双侧皮层神经元的可塑性改变。     

细胞角蛋白14与表皮钙黏蛋白在食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨人食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中细胞角蛋白14(CK14)和表皮钙黏蛋白(E-cadherin)的表达及临床意义。 方法回顾性分析2010年1月至2014年12月泰山医学院附属医院病理科存档食管石蜡包块160例,其中130例人食管鳞癌组织石蜡包块(观察组)及30例正常食管组织石蜡包块(对照组),根据组织病理学分化程度、肿瘤TNM临床分期、肿瘤浸润深度分别分组,其中高中分化组104例,低分化组26例;Ⅰ、Ⅱ期51例,Ⅲ、Ⅳ期79例;有纤维膜浸润57例,无纤维膜浸润73例。应用免疫组织化学染色方法检测160例食管组织中CK14、E-cadherin的表达情况;统计分析食管鳞癌组织中CK14、E-cadherin的表达特征及其相互关系。 结果CK14的表达：(1)观察组和对照组CK14的表达强度比较,观察组(165.47±19.15)高于对照组(141.14±14.59),差异具有统计学意义(t＝3.29,P<0.05);(2)不同分化程度食管鳞癌组织CK14的表达强度比较,高中分化组(144.99±10.16)低于低分化组(169.25±20.11),差异具有统计学意义(t＝1.72,P<0.05);(3)不同TNM临床分期食管鳞癌组织中CK14表达强度比较,Ⅰ、Ⅱ期癌(140.91±15.43)低于Ⅲ、Ⅳ期癌(169.36±21.44),差异具有统计学意义(t＝3.06,P<0.05)。E-Cadherin的表达：(1)观察组和对照组E-Cadherin的表达强度比较,观察组(156.25±16.08)低于对照组(169.23±15.21),差异具有统计学意义(t＝1.71,P<0.05);(2)不同分化程度食管鳞癌组织E-Cadherin的表达强度比较,高中分化组(160.48±7.72)高于低分化组(130.01±13.06),差异具有统计学意义(t＝3.43,P<0.05);(3)不同TNM分期食管鳞癌组织E-Cadherin的表达强度比较,在Ⅰ、Ⅱ期癌(158.86±6.88)高于Ⅲ、Ⅳ期癌(140.02±9.30),差异具有统计学意义(t＝1.78,P<0.05);(4)E-Cadherin表达强度与ESCC肿瘤浸润深度有关,未及纤维膜组(59/73)显著高于侵及纤维膜组(0/57),差异具有统计学意义(χ²＝6.722,P<0.05)。观察组中CK14与E-Cadherin的阳性表达率比较,CK14(54.6%)高于E-Cadherin(45.4%),差异无统计学意义(χ²＝1.756,P>0.05)。 结论CK14的过表达、E-Cadherin的表达缺失与食管鳞癌的发生及进展有关;CK14与E-cadherin可以作为检测食管鳞癌的独立诊断指标。CK14与E-cadherin可能成为食管鳞癌的新治疗靶点。     

Apelin-36通过中枢途径对大鼠摄食、胃肠运动调节作用的研究

目的探讨Apelin-36对大鼠摄食行为、胃肠运动的影响以及可能的途径。 方法健康成年雄性SD大鼠共88只。采用随机数字表法从中随机选取32只大鼠,侧脑室埋管并注射生理盐水或Apelin-36(10 nmol/L) 3 μl、6 μl、9 μl,每组8只,测定48 h摄食量。采用随机数字表法选取16只大鼠侧脑室埋管并注射生理盐水或Apelin-36(10 nmol/L) 9 μl,每组8只,计算胃排空率。采用随机数字表法选取16只大鼠,麻醉后在十二指肠降部放置水囊,连接压力感受器,在体检测侧脑室注射生理盐水或Apelin-36后十二指肠运动变化情况,每组8只。随机数字表法选取16只大鼠,在体检测结肠的运动变化情况,每组8只。另外,随机数字表法选取8只大鼠,剖离胃体、十二指肠、结肠平滑肌条,离体条件下检测生理盐水或Apelin-36对平滑肌运动的影响。 结果48 h累计单位体重摄食结果显示,Apelin-36 3 μl、6 μl、9 μl组摄食量分别为(147.75±33.06)g/Kg、(127.69±23.94)g/Kg、(99.91±18.48)g/Kg,少于生理盐水组[(160.84±28.51)g/kg],并依次递减,差异有统计学意义(F＝7.99,P<0.01),Apelin-36 9 μl组摄食量较生理盐水组、Apelin-36 3 μl组降低,均差异有统计学意义(t＝6.49, 5.10;均P<0.01);Apelin-36 9 μl组黑夜(24 h)累计单位摄食量[(45.08±11.86)g/Kg],明显少于生理盐水组[(70.77±23.23)g/Kg](t＝4.44,P<0.05)。侧脑室注射Apelin-36后大鼠胃排空率为(68.10±6.03)%,较生理盐水组[(79.21±7.94)%]降低,差异有统计学意义(t＝3.15,P<0.01)。侧脑室注射Apelin-36后十二指肠降部平滑肌运动幅度降低至(0.29±0.08)g,明显低于生理盐水组[(0.81±0.16)g](t＝8.36,P<0.01);而远端结肠的运动幅度[(0.20±0.09)g],较生理盐水组[(0.22±0.08)g]差异无统计学意义(t＝0.31,P>0.05)。离体条件下Apelin-36对胃体[(0.19±0.06)g]、十二指肠[(0.09±0.02)g]、结肠平滑肌运动[(0.07±0.01)g]均无显著影响,与生理盐水组[(0.19±0.06)g、(0.08±0.01)g、(0.06±0.02)g]比较,均差异无统计学意义(t＝0.13, 0.22, 0.41;均P>0.05)。 结论侧脑室注射Apelin-36可减少摄食,抑制胃排空、十二指肠运动,但离体条件下Apelin-36对胃肠道平滑肌运动无直接影响。     

大鼠侧脑室注射Apelin-13对急性痛的调节作用及机制

目的探讨Apelin-13对大鼠急性痛的调制作用及可能机制。 方法简单随机抽样将50只大鼠分为生理盐水组、Apelin-13 0.05μg/g组、Apelin-13 0.1μg/g组、Apelin-13 0.5μg/g组及吗啡组(阳性对照组),每组10只,采用辐射热甩尾法连续监测60 min内大鼠痛阈的变化;同样采用简单随机抽样将40只大鼠分为生理盐水组、Apelin-13 0.5 μg/g组、酪蛋白激酶2(CK2)抑制剂四溴苯三唑(TBB)组及Apelin-13＋TBB组,每组10只,监测其痛阈的变化。Western Blot法检测海马内CK2表达量及N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体NR2B亚单位(P-NR2B S1480)磷酸化水平,研究Apelin－13对急性痛调制作用可能的机制。 结果Apelin-13可显著升高急性痛痛阈,0.5 μg/g组给药10 min时甩尾潜伏期变化率(TWL%)达峰值[(50.03±2.71)%],与生理盐水组比较差异有统计学意义(q＝18.054,P＝0.003),并且此效应呈剂量和时间依赖(F_Group＝47.729,P＝0.000;F_Time＝205.301,P＝0.000)。同时给予CK2抑制剂TBB10 min时TWL%降至(17.75±1.67)%,低于Apelin-13组,差异有统计学意义(q＝6.976,P＝0.005)。Western Blot结果显示TBB可明显减弱Apelin-13的作用,CK2α表达量、NR2B亚单位磷酸化水平均下降[(26.92±4.38)%,(39.90±7.40)%],与Apelin-13组[(41.60±6.65)%,(70.83±3.52)%]比较差异有统计学意义(q＝5.246,P＝0.010;q＝9.757,P＝0.010)。 结论Apelin-13可能通过CK2促进NMDA受体NR2B亚单位磷酸化,进而在热甩尾急性痛模型中起镇痛作用。     

7，8-二羟基黄酮对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响

目的探讨7,8-二羟基黄酮(7,8-DHF)对自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响。 方法用Western blotting法检测清洁级雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠及SHR胸主动脉和VSMCs中平滑肌肌动蛋白(SM-α-actin)及增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达水平;用不同浓度7,8-DHF和(或)TrkB特异性抑制剂ANA-12处理SHR胸主动脉源性VSMCs,用CCK-8法检测VSMCs活性;用Western blotting法检测7,8-DHF和(或)ANA-12处理SHR胸主动脉源性VSMCs后SM-α-actin和PCNA的蛋白表达水平。使用Prism 5统计软件,应用独立样本t检验或单因素方差分析进行统计学分析。 结果同WKY大鼠比较,SHR胸主动脉组织中SM-α-actin的蛋白表达水平显著降低[(0.72±0.06),(0.41±0.08);t＝6.35,P<0.05],PCNA的蛋白表达水平则明显升高[(0.51±0.09),(0.99±0.15);t＝6.43,P<0.05]。SHR胸主动脉源性VSMCs中SM-α-actin的蛋白表达水平较WKY大鼠显著降低[(0.71±0.05),(0.36±0.04);t＝11.12,P<0.01], PCNA的蛋白表达水平则明显升高[(0.69±0.07),(1.05±0.08);t＝8.49,P<0.05]。7,8-DHF能明显抑制SHR胸主动脉源性VSMCs增殖活性,并呈浓度依赖性(F＝17.49,P<0.01),给予ANA-12(10μmol/L)处理后,SHR胸主动脉源性VSMCs的增殖活性较单独给予7,8-DHF组显著升高[(0.52±0.08),(0.86±0.14);t＝5.13,P<0.01];ANA-12能够显著消除7,8-DHF引起的SHR胸主动脉源性VSMCs中SM-α-actin蛋白表达水平的升高[(0.85±0.13),(0.35±0.15);t＝4.37,P<0.01]及PCNA蛋白表达水平的降低[(0.42±0.13),(0.76±0.10);t＝3.54,P<0.05]。 结论7,8-DHF能够有效抑制SHR胸主动脉源性VSMCs由收缩型向增殖型转化,其作用可能是由TrkB受体介导。     

抚触联合小脑电刺激仪治疗早期脑损伤的疗效

目的观察抚触联合小脑电刺激仪对早期脑损伤的治疗效果。方法将50例脑损伤患儿随机分为2组:观察组25例在实施抚触的基础上联合小脑电刺激仪治疗;对照组25例实施单纯抚触治疗。观察其运动发育、智能发育改善状况及室管膜下囊肿消退时间。结果治疗1～3个月观察组室管膜下囊肿消退23例,占92.0%(23/25),对照组消退4例,占16.0%(4/25),2组相比差异有统计学意义(P<0.01)。经过3个月治疗,智能发育指数(MDI)与运动发育指数(PDI)观察组分别为(97.44±6.95)﹑(94.32±5.69)分,对照组分别为(77.12±5.60)﹑(77.56±5.92)分;观察组MDI和PDI分数均明显高于对照组,2组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论抚触联合小脑电刺激仪治疗可促进患儿正常运动模式的建立及智能的发育,减轻或阻止后遗症的发生,且安全﹑可靠﹑无创,适宜在临床广泛应用。     

大鼠脑缺血后树突状细胞参与脑损伤过程的作用及其免疫活性

目的:证明大鼠脑缺血后树突状细胞(dendriticcell,DC)是否参与脑损伤过程和所具有的免疫活性。方法:用线栓方法封闭大鼠右侧大脑中动脉制作动物模型。用免疫组化染色方法检测脑缺血1h到第6天时,缺血脑组织中DC(OX62+)的存在,以及胶质细胞/巨噬细胞(OX42+)转化成DC(OX62+)的情况。同时检测活化后的DC样细胞表达MHC-Ⅱ类分子的水平。结合免疫组化和寡核苷酸探针杂交方法,检测DC样细胞的功能。结果:缺血脑半球和假手术的脑半球相比较,在1hDC的数量明显增加(t=7.143,P<0.001)。在脑缺血组中,缺血脑半球与非缺血脑半球相比较,DC的数量也增多(t=10.295,P<0.001)。脑缺血第6天,缺血组与假手术组进行比较,DC表达MHC-Ⅱ类分子(OX62+OX6+)显著升高(t=2.975,P<0.05)。缺血脑半球与非缺血脑半球相比较,在12,24和48h,DC表达白介素-6(interleukin-6,IL-6)mRNA,P值均<0.05,而DC表达白介素-10(interleukin-10,IL-10)mRNA在12h时,t=11.258,P<0.01,24h时,t=12.124,P<0.001。脑缺血1h到第6天,缺血脑半球与非缺血脑半球相比较,DC表达肿瘤坏死因子-α(tumornecroticfactor-α,TNF-α)mRNA有两个-α,TNF-α)mRNA有两个2.696,P<0.05)和12h(t=4.793,P<0.01),第二个高峰期是在48h(t=3.072,P<0.05)和第6天(t=2.715,P<0.05)。脑缺血     

功能性电刺激对脑梗死大鼠梗死周边区谷氨酸受体表达的影响

目的探讨功能性电刺激（FES）是否是通过增加局灶性脑缺血大鼠梗死周边区突触谷氨酸通路相关蛋白的表达，增加突触可塑性，促进运动功能和感觉功能改善。 方法选择雄性Wistar大鼠81只，采用随机数字表法分为假手术组、安慰刺激组及FES组，每组27只。安慰刺激组和FES组采用光化学诱导法制作Wistar大鼠右侧脑局灶缺血模型，假手术组予以冷光源照射但不注射玫瑰红。造模成功3d后，FES组给予功能性电刺激，每日1次，每次刺激10min，间歇10min后再刺激10min；安慰刺激组连接电刺激器，但不打开电源；假手术组常规饲养，不予任何处理。3组大鼠均于干预3、7、14d后测定其运动和感觉功能，于测定结束后处死对应时间点大鼠，取梗死周边区皮质行Western blot检测，测定NMDAR1，pGluR1和GluR1的含量，并采用单因素方差分析比较3组大鼠不同时间点的感觉、运动功能和蛋白定量。 结果干预7、14d后，FES组大鼠的运动功能评分分别为（0.30±0.08）分和（0.20±0.07）分，与安慰刺激组同时间点比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；干预7、14d后，FES组大鼠的贴纸去除时间分别为（15.1±7.2）s和（10.3±4.7）s，与安慰刺激组同时间点比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。干预7d后，FES组大鼠的NMDAR1含量与安慰刺激组同时间点比较，差异有统计学意义(P<0.05)；干预14d后，FES组大鼠的GluR和pGluR1含量与安慰刺激组同时间点比较，差异均有统计学意义 (P<0.05)。 结论功能性电刺激可促进脑缺血大鼠运动和感觉功能的恢复，其可能机制可能与功能性电刺激可促进梗死周边区NMDAR1，pGluR1和GluR1通路中相关蛋白的表达以及沉默突触的去沉默化有关。     

VEGF/VEGFR在脑缺血再灌注损伤中的神经保护作用

目的:研究VEGF/VEGFR在脑缺血再灌注损伤中的神经保护作用。方法:SD大鼠108只,随机分为假手术组、对照组与VEGFR抗体组,每组36只,制备大脑中动脉缺血再灌注损伤(MCAO)模型,假手术组不造成缺血。VEGFR抗体组在造模前20 min侧脑室注射VEGF抗体,假手术组、对照组侧脑室注射等量生理盐水。比较3组在造模后1、3、7 d Bederson评分、VEGFR及缺血半暗带VEGFR2的变化。结果:VEGFR抗体组的Bederson评分在第1、3天高于对照组(P<0.05),VEGFR的表达在第1、3天低于对照组(P<0.01),但较假手术组高;VEGFR抗体组VEGFR2表达在第1、3天低于对照组(P<0.01)。结论:脑缺血再灌注损伤时,VEGF活化刺激VEGFR表达上调,促进血管内皮细胞增殖,加速新生血管形成。     

运动训练对脑梗死大鼠行为学及NF200表达变化的影响

目的：研究运动训练对脑梗死大鼠行为学的影响并从神经可塑性角度探讨其机制。方法：用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）脑梗死模型，56只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和康复组。康复组于手术后5天开始进行滚筒、转棒、平衡木、网屏训练，每日40min，每周6次，共5周，假手术组与模型组则维持原来生活状态。对大鼠进行神经功能、运动能力和学习记忆能力测评观察其行为学变化，免疫组化法观察缺血区神经丝蛋白200（NF200）的表达变化。结果：康复组大鼠神经功能、运动能力、学习记忆能力优于模型组，神经功能在3周差异有显著性意义（P〈0．05），其转棒实验和平衡木实验在3周、5周（P〈0．01—0．05）差异有显著性意义，网屏实验在3周、5周差异有显著性意义（P〈0．05），学习记忆能力在5周有极显著性意义（P〈0．01）。康复组大鼠缺血区NF200蛋白质阳性表达较模型组增多，在3周时差异有显著性意义（P〈0．05），5周时有极显著性意义（P〈0．01）。结论：运动训练促进脑梗死大鼠神经功能、运动能力、学习记忆能力的恢复，其机制可能与缺血区NF200蛋白质表达上调有关。     

局灶性脑梗死模型大鼠相对体质量、Bederson评分与梗死类型的鉴别

背景:采用MCAO法制作大鼠脑缺血模型时,通过分析Bederson评分结果并不能完全可靠的诊断皮质下梗死。目的:对SD大鼠皮质梗死和皮质下基底核区梗死在不同时间点的体质量与Bederson评分结果进行比较。方法:参照ZeaLonga的线栓造模方法制作大脑中动脉闭塞模型SD大鼠,栓塞100min后拔出线栓。术后将大鼠进行磁共振成像扫描,根据有无梗死灶及梗死部位的不同将大鼠分为:皮质下基底核区梗死组(n=13)、皮质梗死组(n=25)、未出现梗死组(n=10)。对3组大鼠大脑中动脉闭塞后7周内的体质量与Bederson评分结果进行监测。结果与结论皮质下梗死组与无梗死组在各时间点大鼠相对体质量相比无显著性意义(P>0.05)。皮质梗死组大鼠的相对体质量在大脑中动脉闭塞后2周内明显小于皮质下梗死组,在大脑中动脉闭塞后3周内明显小于无梗死组(P<0.05)。皮质下梗死组大鼠造模后第1天Bederson评分结果与皮质梗死组相比差异无显著性意义,但都明显高于无梗死组(P<0.05)。提示可结合大鼠大脑中动脉闭塞后第1天的相对体质量与Bederson评分结果对大鼠的梗死类型进行鉴别。     

远端肢体缺血后处理通过线粒体自噬减轻大鼠局灶型脑缺血再灌注损伤的研究

目的探讨远端肢体缺血后处理通过线粒体自噬减轻大鼠局灶型脑缺血再灌注损伤的作用。 方法将105只成年雄性Sprague-Dawley大鼠分为假手术组、缺血再灌注组（A组）、缺血再灌注+远端缺血后处理组（B组）、缺血再灌注+远端缺血后处理+等渗NaCl溶液组（C组）和缺血再灌注+远端缺血后处理+线粒体分裂抑制剂（Mdivi-1）组（D组）,每组各21只大鼠。假手术组仅暴露和游离右侧颈动脉,A、B、C、D组采用大脑中动脉阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。B、C、D组大鼠于再灌注开始夹闭双侧股动脉实行3个循环的10 min缺血/10 min再灌注,C、D组大鼠在缺血前5 min分别腹腔注射等容量的等渗NaCl溶液和3 mg/kg的Mdivi-1。比较各组大鼠神经功能缺陷量表（NDS）评分、脑梗塞体积百分比、脑缺血半暗区细胞凋亡率、微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/Ⅰ比值、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛及15-F_2t-Isoprostane的表达水平。 结果假手术组大鼠未发生神经功能缺损和脑梗塞。A、B、C、D组大鼠NDS评分[（2.8±0.6）、（1.6±0.4）、（1.6±0.5）、（2.5±0.5）分]和脑梗塞体积百分比[（48±3）%、（28±4）%、（28±4）%、（41±3）%]比较,差异均有统计学意义（F = 39.237、53.278,P均< 0.001）,且B、C组大鼠NDS评分和脑梗塞体积百分比均较A、D组显著降低（P均< 0.05）。假手术组、A组、B组、C组及D组大鼠脑缺血半暗区细胞凋亡率[（2.3±0.8）%、（54.6±5.2）%、（29.3±3.1）%、（29.8±3.3）%、（51.2±4.5）%]、LC3-Ⅱ/Ⅰ比值[（0.13±0.03）、（0.32±0.05）、（0.53±0.06）、（0.48±0.08）、（0.35±0.06）]、SOD [（168±19）、（92±13）、（162±21）、（165±23）、（94±15）U/mg]、丙二醛[（4.22±0.28）、（8.41±0.42）、（5.14±0.27）、（5.26±0.31）、（7.93±0.44）nmol/mg]及15-F_2t-Isoprostane [（179±86）、（389±105）、（208±89）、（215±85）、（364±103）mg/g]的表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 54.658、32.358、59.677、46.195、193.962,P均< 0.001）。进一步两两比较发现,A、B、C、D组大鼠脑缺血半暗区细胞凋亡率、LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、丙二醛及15-F_2t-Isoprostane表达水平均较假手术组显著升高,A、D组大鼠SOD表达水平均较假手术组显著降低（P均< 0.05）;与A、D组比较,B、C组大鼠LC3-Ⅱ/Ⅰ比值和SOD表达水平均显著升高,脑缺血半暗区细胞凋亡率、丙二醛及15-F_2t-Isoprostane表达水平均显著降低（P均< 0.05）。 结论远端肢体缺血后处理可能通过增加线粒体自噬水平抑制氧化应激反应,从而减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤。     

脑梗死大鼠康复训练后脑功能恢复及病理学改变

目的探讨康复对急性脑梗死大鼠脑功能恢复的作用机制及其病理学变化。方法采用抽签法将 3 0只Wistar大鼠随机分为 3组 :A组 (假手术组 )、B组 (造模组 )、C组 (康复组 )。运用血管内线栓法制备脑梗死动物模型 ,术后 2 4h、3d及 7d分别进行Bederson神经功能评分 ,平衡木、转棒、网屏测评 ,并于术后第 7d观察脑组织病理学变化。结果与A组比较 ,B、C组Bederson神经功能评分各时间点均有高度显著性差异 (P <0 0 1) ;各组大鼠术后 2 4h均出现抓握、行走及协调能力障碍 ,随着时间的延长 ,A组的各项功能很快恢复 ,B、C组功能改善远不及A组 ,有高度显著性差异 (P <0 0 1) ;与B组比较 ,缺血后 3d ,C组平衡木试验有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;缺血后 7d ,除Berderson评分外 ,均有显著性差异 (P <0 0 5或P <0 0 1)。脑缺血第 7d ,与A组比较 ,B组大鼠缺血区脑组织明显水肿 ,周围区神经细胞数目明显减少 ;与B组比较 ,C组大鼠脑缺血区脑组织水肿减轻 ,神经细胞数目增多。结论康复能提高脑梗死大鼠平衡、行走及抓握能力 ;减轻大鼠脑缺血区脑组织水肿 ,增加周围区神经细胞数目。     

超短波对大鼠脑缺血再灌注后肿瘤坏死因子-α和Bcl-2 表达的影响

目的观察超短波对脑缺血再灌注后大鼠海马、纹状体和运动皮质内肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及Bcl-2 蛋白表达的影响。方法应用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,分为假手术组、造模组、超短波治疗组,每组6 只。脑组织切片行免疫组织化学染色(SABC 法),观察TNF-α和Bcl-2 在脑组织中表达的变化。结果造模组大鼠海马、纹状体和运动皮质TNF-α和Bcl-2 的表达明显高于假手术组(P<0.01);超短波治疗组TNF-α表达低于造模组,Bcl-2 表达高于造模组(P<0.05)。结论超短波治疗通过影响TNF-α和Bcl-2 的表达对缺血再灌注脑组织产生一定的保护作用。     

不同环境干预对局灶性脑梗死大鼠行为学恢复的影响

目的：研究独居、社会交往、探索学习和丰富环境对局灶性脑梗死大鼠行为学恢复的影响。方法：SD大鼠65只．采用开颅电凝法制作右侧大脑中动脉缺血（MCAO）模型，假手术组不电凝大脑中动脉，其余步骤与手术组相同。术后24h随机分为独居组（n=15）、社交组（n=15）、探索学习组（n=15）、丰富环境组（n=15）和假手术组（n=5），分别于术后第1、3、7、14、21、28d对大鼠采用Bederson神经功能评分及修订的神经功能评分（mNSS）进行评定。结果：Bederson神经功能评分及mNSS评分均显示探索学习组及丰富环境组在术后14—28d后明显优于独居组和社交组（P〈0．05）。结论：环境对局灶性脑梗死大鼠的行为学恢复有明显影响，丰富环境及探索学习均能改善大鼠的预后。     

局灶性脑梗死模型大鼠相对体质量、Bederson评分与梗死类型的鉴别

背景：采用MCAO法制作大鼠脑缺血模型时,通过分析Bederson评分结果并不能完全可靠的诊断皮质下梗死。目的：对SD大鼠皮质梗死和皮质下基底核区梗死在不同时间点的体质量与Bederson评分结果进行比较。方法：参照ZeaLonga的线栓造模方法制作大脑中动脉闭塞模型SD大鼠,栓塞100min后拔出线栓。术后将大鼠进行磁共振成像扫描,根据有无梗死灶及梗死部位的不同将大鼠分为：皮质下基底核区梗死组（n=13）、皮质梗死组（n=25）、未出现梗死组（n=10）。对3组大鼠大脑中动脉闭塞后7周内的体质量与Bederson评分结果进行监测。结果与结论皮质下梗死组与无梗死组在各时间点大鼠相对体质量相比无显著性意义（P〉0.05）。皮质梗死组大鼠的相对体质量在大脑中动脉闭塞后2周内明显小于皮质下梗死组,在大脑中动脉闭塞后3周内明显小于无梗死组（P〈0.05）。皮质下梗死组大鼠造模后第1天Bederson评分结果与皮质梗死组相比差异无显著性意义,但都明显高于无梗死组（P〈0.05）。提示可结合大鼠大脑中动脉闭塞后第1天的相对体质量与Bederson评分结果对大鼠的梗死类型进行鉴别。     

Effects of running wheel exercise and skilled reaching training on the cognitive function in rats with transient middle cerebral artery occlusion at the recovery stage北大核心CSCD

Objective: To compare effects of running wheel exercise and skilled reaching training on the cognitive function in rats with middle cerebral artery occlusion (tMCAO) at the recovery stage. Method: Fifty adult male Sprague- Dawley rats after pre- training and handedness filtering were divided into four groups: skilled reaching group (n=7), running wheel group (n=8), control group (n=6) and sham group (n= 6) were included in the final behavioral study according to Bederson score. Each group was assessed with mNSS on day 1, 14, 28, 42, 56 and Morris water maze test was carried out on day 56 after operation. Result: The mNSS was higher in control group than exercise groups(P<0.001) and running wheel group's scores were higher than skilled reaching group(P<0.05) from day 28. The swimming distance at the first, the second and the fourth day of water maze test were longer in the control group and the running wheel group as compared with that in the sham group(P<0.05). And the swimming distance in the skilled reaching group was shorter than that in the control group and running wheel group at the first and the fourth day of water maze test(P<0.05). The times of crossing the platform in the tMCAO groups were less than that in the sham group(P<0.05). The crossing times in the skilled reaching group and the running wheel group were more than that in the control group(P<0.05). In addition, the times in the skilled reaching group was higher than that in the running wheel group(P<0.05). Conclusion: Exercise training can improve cognitive function of tMCAO rats at recovery stage. In addition, skilled reaching training is superior to running wheel exercise in promoting cognitive rehabilitation. © 2018, Editorial Board of Chinese Journal of Rehabilitation Medicine. All right reserved.     

CD8 ＋ T淋巴细胞在急性脑梗死后肺炎发病中的作用

目的采用实验室检测结合临床评估手段,探索CD8^＋ T淋巴细胞在急性脑梗死后肺炎发病中的作用。 方法收集2014年12至2016年12月在同济大学附属上海东方医院神经内科和东南大学医学院附属江阴市人民医院神经内科住院治疗的急性脑梗死患者60例为研究对象。在脑梗死发病48 h内收集患者静脉血,分离外周血单核细胞,检测细胞表面CD107a,细胞内干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）。依据入组后住院期间是否发生肺炎将60例病例分为发生肺炎组和未发生肺炎组,采用t检验比较肺炎组混合病毒多肽干预及未干预患者、未发生肺炎组混合病毒多肽干预及未干预患者四者之间的外周血单核细胞层细胞表面CD107a脱颗粒、细胞内IFN-γ和TNF-α表达的差异。 结果在混合病毒多肽刺激CD8^＋ T淋巴细胞后,肺炎组细胞表面CD107a^＋表达低于未发生肺炎组［（10.6±3.7）% vs （15.6±4.3）%）］,细胞内IFN-γ^＋表达低于非肺炎组［（15.3±4.3）% vs （20.0±5.1）%］,TNF-α^＋表达低于未发生肺炎组［（15.1±4.4）% vs （19.3±4.7）%］,差异均具有统计学意义（t=3.192,P=0.004;t=4.127,P<0.001;t=3.621,P<0.001）;在未经混合病毒多肽刺激时,肺炎组细胞内IFN-γ^＋表达低于非肺炎组［（3.0±1.2）% vs （3.6±1.7）%）］,TNF-α^＋表达低于未发生肺炎组［（3.3±1.4）% vs （4.1±2.1）%］,差异也具有统计学意义（t=3.734,P<0.001;t=3.189,P=0.004）。 结论CD8^＋ T淋巴细胞的细胞毒性作用抑制可能是急性脑梗死患者发生肺炎的重要机制之一。