γ干扰素防治兔实验性后囊混浊的作用

目的:探讨γ干扰素对兔后囊混浊发生的防治作用。方法:将30只新西兰白兔60眼随机分为A、B和C三组,三组均行兔晶状体囊外摘除术,A组为对照组,术中晶状体囊袋内灌注BSS;B和C组为治疗组,术中晶状体囊袋内分别灌注106U/L、107U/Lγ干扰素。术后观察晶状体后囊膜变化。3mo后取角膜行光镜、扫描电镜观察角膜内皮变化及晶状体后囊膜铺片HE染色统计晶状体上皮细胞(LEC)的密度,并行免疫组化染色真彩色医学图象分析系统检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达积分光密度(IOD)。结果:①3mo后临床观察可见,B组、C组的后囊混浊(PCO)发生率较A组明显减少(P<0.05),C组较B组的发生率少(P<0.05)。统计学分析均有显著性差异。②B组(2972.11±156.47)、C组(2775.23±154.01)后囊膜LEC密度较A组(3297.53±105.60)小,且C组的LEC密度相似文献   

多聚赖氨酸与EDTA的交联物防治兔眼后囊膜混浊的研究

目的 观察在白内障术中应用多聚赖氨酸与EDTA的交联物对晶状体后囊膜混浊(PCO)的影响.方法 利用EDC将EDTA与多聚赖氨酸结合,制成交联物PLE.日本大耳白兔9只(18眼),随机分为3组.实验组在白内障囊外摘出术中分别于囊袋内注入药物:EDTA组注入EDTA 20 mmol/L;PLE组注入PLE其中含EDTA 10 mmol/L、NH2-10 mmol/L;对照组囊袋内不注入药物.术后用裂隙灯观察眼内组织的变化.28 d后处死兔子,摘除眼球,制作病理切片,光镜下观察晶状体上皮细胞(LECs)增生情况.结果 PLE组仅有少量细胞残留,未见细胞增生,其他组均可见不同程度的细胞残留及增生.结论 与EDTA相比,PLE可更有效地清除LECs.     

多聚赖氨酸-乙二胺四乙酸交联物抑制兔晶状体上皮细胞生长的研究

背景后囊膜混浊（PCO）是现代白内障囊外摘出术后引起视力下降的主要原因。研究证实多聚赖氨酸-乙二胺四乙酸（EDTA）交联物（PLE）能够降低兔PCO的发生率。目的研究PLE对体外培养的兔晶状体上皮细胞（LECs）生长的抑制作用及有效药物浓度。方法取3月龄新西兰白兔晶状体前囊膜进行体外植块培养获得兔LECs并进行传代,取第2～3代传代培养的LECs消化后按1×10^5个／ml密度接种于96孔培养板中。在培养皿中加入12．5、25．0、50．0、100．0μmol／L的PLE,培养皿中加入DMSO培养液作为对照组。PLE作用48h用MTT比色法测定PLE对兔LECs增生的抑制作用并计算各浓度PLE组的吸光度（A490）值及其抑制率。结果≤25．0μmol／LPLE组可见细胞生长及形态改变不明显。≥50．0μmol／LPLE各组可见细胞生长及形态有明显改变,增生缓慢,生长差,数量减少,贴壁能力减弱。12．5、25．0、50．0、100．0μmol／L的PLE组LECs的A490值分别为0．278±0．013、0．266±0．028、0．260±O．022和0．247±0．012,均明显低于DMSO对照组的O．311±0．038（P=0．035、0．011、0．009、0．013）,且呈明显的剂量一效应依赖关系。12．5、25．0、50．0、100．0μmol／LPLE组对兔LECs的抑制率分别为10．61％、14．47％、16．40％和20．58％。结论PLE可以浓度依赖的方式抑制兔LECs的生长,可为临床筛选出防治PCO的药物提供依据。     

多聚赖氨酸与EDTA的交联物清除晶状体上皮细胞的实验研究

目的研究多聚赖氨酸与乙二胺四乙酸二钠(EDTA)的交联物清除晶状体超声乳化吸出术中摘出的人晶状体囊的晶状体上皮细胞的效果。方法利用碳化二亚胺将EDTA与多聚赖氨酸结合起来,制成交联物——PLE。收集白内障晶状体超声乳化吸出术中取出的晶状体前囊24个,将其随机分为4组,分别用10mmol/LEDTA、PLE(含10mmol/LEDTA)、多聚赖氨酸(含10mmol/LNH2-)及生理盐水进行处理。将各组晶状体前囊进行HE染色、显微镜下观察。采集图像,利用图像分析系统进行分析并计算清除率。结果PLE组的清除率与EDTA组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论PLE清除晶状体上皮细胞的效果明显强于EDTA。     

蛇毒去整合素Kistrin对正常及糖尿病兔LECs增殖的抑制作用

目的观察高血糖对兔眼晶状体摘出术后后囊膜混浊(posterior capsular opacification,PCO)的影响,探讨蛇毒去整合素Kistrin对晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)增殖的抑制作用。方法制作正常血糖及糖尿病兔PCO模型,随机分组:正常血糖组分为A、B两组(每组3只兔3眼),糖尿病组分为C、D两组(每组3只兔3眼),A、C组为对照组(术毕前房注入林格氏液),B、D组为用药组(术毕前房注入80mg·mL-1的Kistrin2mL)。注药后在裂隙灯显微镜下观察4组PCO发生情况及形态并计算增殖指数(PI),注药后14d时取材,检测LECs增生细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果糖尿病兔PCO发生程度重于正常血糖兔;A组PI为0.25±0.05,B组0.03±0.01,C组0.86±0.04,D组0.65±0.08,A组PI明显小于C组(P=0.00),用药后B、D组PI均分别明显小于A、C组(均为P=0.01),但B组PI明显小于D组(P=0.00)。结论与正常血糖兔相比,糖尿病兔的PCO发生率较高,其LECs的增殖能力较强,Kistrin可明显抑制正常血糖及糖尿病兔的LECs增殖。     

双氯芬酸钠抑制兔后囊膜混浊的实验研究

目的 探讨双氯芬酸钠抑制兔后囊膜混浊(posterior capsule opacification,PCO)的安全性和有效性.方法 20只大耳白兔(40眼)随机分为空白对照组(A组),1 g·L-1双氯芬酸钠滴眼液组(B组),1g·L-1、5 g·L-1、10g· L-1双氯芬酸钠灌注液组(分别为C、D、E组),双眼均行透明晶状体囊外摘出术,B组术后使用1g·L-1双氯芬酸钠滴眼液滴眼,术中不进行双氯芬酸钠滴眼液前房灌注;C、D、E组术中分别使用1g·L-1、5g·L-1、10g· L-1双氯芬酸钠滴眼液前房灌注,术后使用1g·L-1双氯芬酸钠滴眼液滴眼.术后1周观察角膜及前房反应;1个月后用裂隙灯及检眼镜检查后囊膜情况,进行PCO分级;术后1个月,HE染色观察后囊膜病理改变情况,并用免疫组织化学SABC法检测后囊膜增殖的晶状体上皮细胞PCNA表达情况.结果 A、B组术后1周左右开始形成PCO并逐渐加重,1个月后出现明显PCO,C、D、E组PCO出现方式与A组相同,但出现时间晚、程度较轻.术后1个月A、B组PCO程度较C、D、E组重,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);A、B组之间和C、D、E组之间差异均无统计学意义(均为P＞0.05).术后1个月,各组后囊膜晶状体上皮细胞均有PCNA阳性表达,且PCNA阳性细胞数随药物浓度的提高而减少,分别为15.63±1.92、12.87±1.81、8.63±0.92、5.50±1.31、2.00±0.76.与A组相比,B、C、D、E组术后后囊膜PCNA阳性细胞数明显减少,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);B、C、D、E组间PCNA阳性上皮细胞数差异有显著统计学意义(P＜0.01).结论 术中双氯芬酸钠滴眼液前房灌注联合术后双氯芬酸钠滴眼液滴眼可有效延缓PCO的发生,对眼前段无明显毒性作用.     

无防腐剂的1%利多卡因对兔晶状体上皮细胞影响的组织病理学研究

目的探讨无防腐剂的1％利多卡因对兔晶状体上皮细胞（LECs）的影响,为寻求白内障术中清除上皮,预防囊膜混浊的有效药物提供实验依据。方法采集29只兔（58只眼）晶状体前囊膜及赤道部囊膜标本,分为3组,对照组囊膜不加药物处理、BSS组囊膜用BSS浸泡1min、利多卡因组囊膜用利多卡因浸泡1min,后行锥虫蓝-茜素红染色,显微镜照相,观察LECs活性同时对死亡细胞进行计数;并通过HE染色及透射电镜观察兔LECs的组织病理学改变。锥虫蓝．茜素红染色及死亡细胞计数15只兔（30只眼）：其中对照组5只兔（10只眼）,BSS组5只兔（10只眼）,利多卡因组5只兔（10只眼）;HE染色9只兔（18只眼）：其中对照组1只兔（2只眼）,BSS组4只兔（8只眼）,利多卡因组4只兔（8只眼）;透射电镜5只兔（10只眼）：其中对照组1只兔（2只眼）,BSS组2只兔（4只眼）,利多卡因组2只兔（4只眼）。结果对照组兔晶状体前囊膜上皮细胞死亡率（1．51±0．39）％,赤道部囊膜上皮细胞死亡率（1．52±0．32）％;BSS组兔晶状体前囊膜上皮细胞死亡率（1．78±0．50）％,赤道部囊膜上皮细胞死亡率（1．77±0．47）％;利多卡因组兔晶状体前囊膜上皮细胞死亡率（13．01±4．67）％,赤道部囊膜上皮细胞死亡率（9．59±3．35）％。经嵌套试验的方差分析,利多卡因组细胞死亡率明显高于对照组与BSS组（P〈0．05）。HE染色显示对照组与BSS组兔LECs仍贴附于囊膜上,未见明显病理改变。利多卡因组部分细胞与囊膜间产生空隙,并从囊膜上脱落,细胞空泡变性。透射电镜观察下对照组与BSS组细胞间及细胞与囊膜间连接完整。利多卡因组部分细胞间及细胞与囊膜间的连接被破坏,细胞脱落较多,排列松散。细胞膜塌陷,胞质内有大量的空泡形成,细胞结构被破坏。结论无防腐剂的1％利多卡因能松解兔LECs间及细胞与晶状体囊膜间的连接,并可导致LECs变性、死亡。     

糖尿病性白内障晶状体上皮细胞凋亡与增殖特性的实验研究

目的观察糖尿病性白内障晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)凋亡、增殖特性的变化,探讨糖尿病性白内障发生的相关机制.方法采用四氧嘧啶诱发兔糖尿病性白内障模型,定期监测血糖和观察晶状体的变化.TUNEL技术标记凋亡的LECs,测定凋亡百分率和晶状体上皮细胞密度,并用免疫组化SABC法检测LECs中增殖细胞核抗原的表达及积分光密度(A)值.结果TUNEL染色显示模型组兔晶状体上皮细胞中有凋亡阳性细胞,糖尿病性白内障模型组与同期正常对照组比较,其LECs凋亡百分率显著升高(P＜0.01),且随观察期内时间推移和晶状体混浊程度的加重呈明显上升趋势;早期2组晶状体上皮细胞密度和增殖细胞核抗原积分光密度(A)值的变化无显著性,但随着观察期内高血糖持续时间的延长(8周后),2组间差异日趋显著(P＜0.01).结论糖尿病性白内障的发生与晶状体上皮细胞凋亡及增殖特性的改变有关.     

γ干扰素对兔晶状体上皮细胞增殖细胞核抗原表达的影响

目的 :探讨γ干扰素 (interferon γ ,IFN γ)对兔晶状体上皮细胞增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearcntigen ,PCNA)表达的影响。方法 :采用新西兰白兔白内障囊外摘除模型 ,术中囊袋内灌注BSS为A组即对照组。B、C组为治疗组 ,分别灌注 10 3 IU/mlIFN γ和 10 4IU/mlIFN γ。术后 3个月运用免疫组化法和计算机图象分析技术检测晶状体上皮细胞PCNA表达。结果 :γ干扰素组PCNA阳性表达少 ,与对照组比较有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,高浓度抑制作用强。结论 :IFN γ有抑制兔晶状体上皮细胞PCNA表达的作用 ,IFN γ对PCNA表达的抑制作用具有浓度依赖性     

糖尿病兔晶状体后囊膜混浊模型的建立

背景实验性糖尿病动物模型的制作是对糖尿病性眼病进行实验研究的关键环节,目前国内普遍应用的方法是链脲佐菌素和四氧嘧啶（ALX）注射,但前者价格昂贵,后者造模过程中动物的死亡率较高。目的探讨ALX注射制作糖尿病兔晶状体后囊膜混浊（PCO）模型并降低死亡率的方法,并观察高血糖对晶状体PCO形成的早期影响。方法将清洁级健康新西兰雄性大白兔40只随机分为2组;其中20只兔经耳缘静脉一次性注射ALX90mg／kg建立糖尿病模型作为高血糖组,另20只兔以同样的方法注射等量生理盐水作为正常血糖组。药物注射后2周时高血糖组兔血糖升高到12．0mmol／L以上可判断为建模成功,2组分别行兔右眼透明晶状体囊外摘出术并对晶状体PCO进行分级。于术后第6、10、14天取眼球,应用免疫组织化学法观察增生细胞核抗原（PCNA）在后囊膜晶状体上皮细胞（LECs）中的表达情况。结果ALX注射后糖尿病兔的成模率为70％。术后第6、10、14天时,高血糖组兔体质量均明显低于正常血糖组,但血糖明显高于正常血糖组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。高血糖组术后14d时观察的3只兔中,2只兔出现后囊膜2级混浊,另1只兔出现1级混浊。正常血糖组术后14d时观察的3只兔后囊膜均出现1级混浊。免疫组织化学染色显示,术后第10天高血糖组可见PCNA在LECs的细胞核中表达,但正常血糖组未见PCNA的表达。术后第14天时高血糖组PCNA增生指数为0．86±0．04,明显高于正常血糖组的0．25±0．03,差异有统计学意义（t=-16．171,P=0．000）。结论90mg／kg的ALX静脉注射能形成稳定的糖尿病兔PCO模型;高血糖是促进PCO发生发展的重要因素之一。     

依地酸二钠预防后发性白内障的实验研究

目的 探讨应用依地酸二钠(EDTA)清除晶状体上皮细胞,预防后发性白内障的可行性.方法 白内障摘除术中连续环形撕囊后取得人晶状体前囊膜30例,随机分为五组,分别用平衡盐溶液(对照组、A组),5mmol/L、10 mmol/L、15 mmol/L、30 mmol/L的EDTA溶液(B、C、D、E组)进行处理,观察晶状体上皮细胞的清除情况.结果 A组未见明显细胞脱落;B组晶状体上皮细胞仅有少部分脱落;C组和D组晶状体上皮细胞大部分脱落;E组晶状体上皮细胞完全脱落.结论 合适浓度的EDTA可以作为白内障手术中清除晶状体上皮细胞的有效方法,为防治后发性白内障提供理论依据.     

Hepatocyte growth factor induces proliferation of lens epithelial cells through activation of ERK1/2 and JNK/SAPK

PURPOSE: Posterior capsule opacification (PCO) is caused by proliferation and migration of lens epithelial cells (LECs) remaining after cataract surgery. In this study, the effect of HGF in LECs and the signaling pathways that contribute to HGF-induced proliferation were investigated. METHODS: Capsular bags prepared from porcine eyes were maintained in serum-free DMEM. The human lens epithelial B3 cells (HLE B3) and rat lens epithelial explants were cultured in MEM supplemented with 20% FCS and medium 199 with 0.1% BSA, respectively. Cell proliferation was determined by MTT assay, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) expression, or flow cytometry. An antisense oligonucleotide was used to inhibit cyclin D1 expression. Activation of the mitogen activated protein kinase (MAPK) and phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) pathways was detected by immunoblot analysis. RESULTS: The proliferation of LECs in a capsular bag culture was significantly inhibited by treatment with the neutralizing antibody for HGF receptor. Stimulation of HLE B3 with hepatocyte growth factor (HGF) activated the MAPKs, ERK, and JNK/SAPK, but not p38. Activation of both ERK and JNK/SAPK was necessary for the HGF-stimulated induction of cyclin D1, which in turn was necessary for the HGF-induced proliferation of LECs. PI3K also participated in the regulation of cyclin D1 expression upstream of ERK and JNK/SAPK. CONCLUSIONS: The data indicate that HGF is a potent growth factor for LECs and may contribute to the development of PCO and suggest that the signaling pathways involved in HGF-stimulated proliferation may constitute potential therapeutic targets in the treatment of PCO.     

眼内应用丝裂霉素C抑制后囊膜混浊的组织病理学研究

目的：研究兔晶状体超声乳化术中眼内应用0．2mg／ml的丝裂霉素C(mitomycin-C，MMC)对术后后囊膜混浊的抑制作用，并比较不同给药方式对眼毒性的差异。方法：将32只新西兰白化兔随机分为A、B、C、D4组，进行晶状体超声乳化摘除术。A组为空白对照组，B组用0．2mg／ml的MMC溶液在环形撕囊后作水分离，C组在术中将混有MMC(0．2mg／ml)的粘弹剂注入空的囊袋中，D组将MMC(0．2mg／ml)溶于配好的灌注液中，在手术中应用。术后1个月对术眼进行组织病理学检查。结果：术后1个月时光镜下A组中赤道部及中央后囊膜均可见晶状体上皮细胞的明显增生、移行及大量排列紊乱的成纤维细胞和胶原纤维。B、C、D三组中可见赤道部少量残留的晶状体上皮细胞及皮质，中央后囊的表面未见品状体上皮细胞、成纤维细胞或珍珠样小体。透射电镜下，D组中虹膜上皮、睫状体上皮及视网膜各层均发生了不同程度超微结构的损伤，A、B、C三组间未见明显异常。结论：眼内应用0．2mg／ml的MMC明显抑制后囊膜混浊的发展。尽管眼内应用0．2mg／ml的MMC可以导致眼内组织的毒性，但通过改进用药方法和加强保护措施，可有效地避免或减少药物的眼毒性。在应用于临床之前，仍需进一步动物实验研究。     

Prevention of posterior capsule opacification by intraoperative single-dose pharmacologic agents

PURPOSE: To determine whether an intraoperative single dose of dexamethasone, diclofenac, ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), a combination of EDTA and RGD peptide (arginine-glycin-aspartic acid sequence), or mitomycin-C (MMC) is a pharmacological means of preventing or reducing the development of posterior capsule opacification (PCO). SETTING: Department of Ophthalmology, Celal Bayar University, School of Medicine, Manisa, and Department of Pathology, Dokur Eylül University, School of Medicine, Izmir, Turkey. METHODS: Fifty-four rabbits were randomly divided into 6 groups. Dexamethasone (4 mg/cc), diclofenac (2.5 mg/cc), EDTA (8 mg/cc), a combination of EDTA and RGD peptide (2.5 mg/cc), or MMC (0.04 mg/cc) was given, 0.1 cc by hydrodissection and 0.9 cc into the capsular bag after phacoemulsification. The sixth group served as a control group. After 3 months, the PCO was graded clinically and the proliferation of lens epithelial cells (LECs) was evaluated histologically. RESULTS: The drugs were significantly effective in preventing PCO compared with the control (P <.005). Dexamethasone had a weaker effect than the other drugs. In histological analysis, although monolayer LECs in the dexamethasone and diclofenac groups were observed, there was no proliferative activity on the posterior capsules in the EDTA, EDTA+RGD, and MMC groups in contrast to the multilayer cells in the control. CONCLUSIONS: Intraoperative single-dose application of EDTA, EDTA+RGD peptide combination, and MMC significantly prevented the development of PCO in rabbit eyes. Diclofenac was less effective but also reduced PCO. Although dexamethasone did not prevent the proliferation of LECs, it decreased PCO clinically.     

Comparison of posterior capsule opacification in rabbit eyes receiving different administrations of rapamycin

Background

Posterior capsule opacification (PCO) is a common complication after cataract surgery. The purpose of this study was to determine the effects of three administering ways of rapamycin (RAPA) on the formation of PCO in rabbit eyes for 12 weeks.

Methods

Eighty rabbits were divided into four groups, according to the different administrations of RAPA which they received. These were: (1) the control group, (2) the irrigation-treated group — 5 ng/ml intraoperative RAPA irrigation solution, (3) the eye-drop-treated group — 2 mg/ml RAPA eye drops, and (4) the IOL-treated group — RAPA–poly(lactic-co-glycolic) acid (PLGA) loaded on the surface of intraocular lens (IOLs) (RAPA-PLGA-IOLs). All right eyes were treated with lens extraction plus IOL implantation, receiving relative administrations of RAPA. RAPA concentrations in the aqueous humour were determined by high performance of liquid chromatography (HPLC). The anterior chamber (AC) response was observed through slit-lamp biomicroscopy. After 12 weeks, the degree of PCO was determined by clinical evaluation. The histological sections, immunohistochemistry expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in the lens capsule were conducted.

Results

In the early period, AC response for both experimental and control eyes were similar. In the IOL-treated group, RAPA reached its peak at 25.68?±?0.74 μg/ml on the 4th day, and it was detectable until 8 weeks afterwards. However, in the other groups, RAPA could not be detected all the time. Compared with other groups, in the IOL-treated group, PCO was greatly alleviated; only a few layers of the lens epithelial cells (LECs) and a little proliferative material around the posterior capsules, and a significantly weak expression of PCNA in the nuclei of LECs. By contrast, there was no significant statistical difference in eye-drop-treated or irrigation-treated eyes and control eyes respectively.

Conclusions

Intraocular RAPA-PLGA-IOL was a promising, effective, and safe administration to prevent PCO compared with other methods in the rabbit PCO model.     

小儿与老年白内障晶体上皮细胞密度及增殖细胞核抗原表达

目的 检测儿童和老年人晶体上皮细胞密度和增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ ｃｅｌｌ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）表明,探讨晶体上皮细胞与白内障术拍后囊混浊的关系。方法 用ＨＥ染色观察白内障小儿组（〈１２岁）及老年组（５１￣８０岁）喘区晶体上皮铺片的细胞密度,用免疫组化染色及真彩色医学图像分析系统检测ＰＣＮＡ的表达及积分吸光度（Ａ）值。结果 晶体上皮细胞密度在小儿组为５０２０     

热处理对STZ诱导糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞生物学特性的影响

目的 研究热处理对链脲佐菌素(streptozotoein,STZ)诱导的大鼠糖尿病性白内障的晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)生物学特性的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为3组A组为空白对照组,B组为STZ组,C组为热处理STZ组.每周用裂隙灯观察晶状体的变化,在实验6周后分别摘取眼球,取出晶状体.采用免疫组化技术检测热休克蛋白(heat shock protein,HSP)在各组LEC中的表达;运用考马斯亮兰与呈色法测定各组可溶性蛋白的浓度;呈色法测OD值,检测各组MDA、SOD及GSH的含量.结果 B、C组晶状体的混浊情况差异具有统计学意义(P＜0.05),B组混浊程度明显高于C组,A、C组差异不显著.C组HSP70的表达高于B组,差异具有统计学意义(P＜0.05);B组HSP70的表达高于A组,差异具有统计学意义(P＜0.05).B组可溶性蛋白含量明显低于A、C组,差异有统计学意义(P＜0.05),而A、C组差异不显著.A、B组晶状体MDA、SOD、GSH的含量均低于C组,差异具有统计学意义(P＜0.05);A、B组之间差异不显著.结论 热处理可以提高HSP70的表达,并可能对STZ诱导糖尿病性白内障大鼠的晶状体上皮细胞具有保护作用.