续断种子方干预无精子症模型小鼠睾丸的精子发生

目的观察续断种子方对无精子症模型小鼠睾丸精子发生发育过程中c-kit/CFTR表达的影响,探索中药干预睾丸生精功能的影响。方法按照随机数字表法分为对照组,模型组,麒麟丸组,续断种子方高、中、低剂量组。采用白消安和环磷酰胺建立无精子症小鼠模型。各治疗组给予相应药物灌胃,对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水,每日1次,连续8周。检测小鼠附睾的精子质量、睾丸组织显微超微结构、睾丸组织c-kit/CFTR蛋白的表达。结果模型组偶见散在精子,睾丸生精上皮不同程度破坏,精原细胞、精母细胞线粒体空化明显,部分线粒体脊消失,核膜局部破损,c-kit/CFTR免疫组化棕黄色阳性表达的细胞散在;续断种子方高剂量组、麒麟丸组、对照组小鼠附睾精子浓度较高,睾丸生精上皮见精子、精子细胞、精母细胞,线粒体空化少,可见丰富的高尔基体、内质网结构,c-kit/CFTR免疫组化棕黄色阳性表达的细胞辉度大。与对照组相比,模型组α-葡糖苷酶、果糖浓度明显有差异性(P0.05);与模型组相比,续断种子方高剂量组、麒麟丸组、对照组丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、α-葡萄糖苷酶的活性、果糖浓度与模型组有差异性(P0.05)。结论续断种子方可以有效促进睾丸生精上皮的精子发生,增加精子的数量,达到"以通为用,和营生精"之效。     

续断种子方对小鼠精子发生发育及c-kit蛋白表达的影响

目的观察续断种子方对无精子症模型小鼠睾丸精子发生发育及c-kit蛋白表达的影响,探讨其相关作用机制。方法白消安和环磷酰胺腹腔注射建立无精子症小鼠模型。实验小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、麒麟丸组和续断种子方高、中、低剂量组。各治疗组予相应药物灌胃,对照组和模型组小鼠予等体积生理盐水,每日1次,连续8周。HE染色检测小鼠附睾精子质量,电镜观察睾丸组织显微、超微结构,免疫组化法检测睾丸组织c-kit蛋白表达。结果模型组偶见散在精子,睾丸生精上皮不同程度破坏,精原细胞、精母细胞线粒体空化明显,部分线粒体嵴消失,核膜局部破损,c-kit免疫组化结果显示棕黄色阳性表达的细胞散在;续断种子方高剂量组、麒麟丸组、对照组小鼠附睾精子浓度较高,睾丸生精上皮见精子、精子细胞、精母细胞,线粒体空化少,可见丰富的高尔基体、内质网结构,c-kit免疫组化结果显示棕黄色阳性表达的细胞灰度大。结论续断种子方可有效促进睾丸生精上皮的精子发生发育,增加精子数量,达到健脾益肾、活血生精之效。     

续断种子方对无精子症模型小鼠睾丸氧化损伤的干预

目的:观察续断种子方对无精子症模型小鼠睾丸氧化损伤的影响。方法:建立无精子症小鼠模型,给药8周干预后进行指标测定。结果:模型组小鼠精子稀少,生精上皮不同程度破坏。续断种子方高剂量组、麒麟丸组、对照组小鼠精子浓度较高,生精上皮见各级精子细胞,线粒体空化少;丙二醛、超氧化物歧化酶活性与模型组比较有差异性(P0.05)。结论:续断种子方可以有效修复生精上皮的氧化损伤,达到"健脾益肾,活血生精"之效。     

温肾生精饮治疗生精障碍的实验研究

目的：临床上利用温肾生精饮治疗男性生精障碍,已取得了显著疗效,本实验利用生精障碍小鼠模型探讨温肾生精饮促进精子生成的可能作用机制。方法：利用环磷酰胺对昆明小白鼠建立生精上皮损伤模型,对造模后的小鼠分别灌服温肾生精饮或等量生理盐水,灌服20天后检测小鼠附睾尾精子质量,并进行睾丸组织学检查和超微结构观察。结果：中药组小鼠附睾活精子的百分率和精子密度显著高于模型组;中药组小鼠睾丸生精小管结构规则,生精上皮排列整齐,上皮层数较模型组显著增多;中药组小鼠睾丸的超微结构与模型组相比,间质细胞胞质内脂滴较少,线粒体较多,溶酶体较多,间质细胞显示出旺盛的分泌能力。结论：温肾生精饮提高了间质细胞的分泌功能,维持着睾丸生精小管内高水平睾酮,以增加生精上皮层数,促进精子发生,提高正常精子的比率。     

益肾健脾方对少弱精子症小鼠模型睾丸生精功能和血清性激素水平的影响

目的观察益肾健脾方对雷公藤多苷诱导少弱精子症小鼠模型睾丸组织、精液质量和血清性激素水平的影响,探讨益肾健脾方治疗少弱精子症可能的作用机制。方法以雷公藤多苷诱导少弱精子症小鼠模型,随机平均分为正常组、模型组、左卡尼汀组、中药组(益肾健脾方低、高剂量组),每组10只,中药及左卡尼汀干预,睾丸组织病理切片、HE染色,观察小鼠睾丸组织病理学,应用伟力精子测试仪检测小鼠精液质量,应用酶联免疫夹心法检测小鼠血清性激素水平。结果左卡尼汀组、中药组的A级精子活力、总活力高于模型组(P0.05);左卡尼汀组低于中药低剂量组(P0.05);中药高剂量组与左卡尼汀组相比差异无统计学意义(P0.05)。左卡尼汀组、中药组的精子总数高于模型组(P0.05);左卡尼汀组、中药低、高剂量组之间相比差异无统计学意义(P0.05)。模型组小鼠血清卵泡刺激素、黄体生成素水平高于正常组及各药物干预组(P0.05);各药物干预组高于模型组(P0.05);各药物干预组之间相比差异无统计学意义(P0.05);模型组及各干预组血清睾酮低于正常组(P0.05);模型组与各干预组之间相比差异无统计学意义(P0.05)。结论益肾健脾方可能通过调节小鼠血清性激素水平从而改善精液质量达到治疗少弱精子症的目的。     

二仙补肾益精解毒方对弱精子症大鼠模型氧化应激损伤的保护机制研究

目的:证实二仙补肾益精解毒方提高弱精子症精子活动力的作用并探讨其可能的作用机制。方法:挑选72只弱精子症大鼠模型随机等分为:低、中、高剂量给药组,左卡尼汀对照组,模型对照组和正常对照组6组进行对照,4周后检测精子数量并计算精子活动力;对睾丸生精小管标本进行病理观察;测定MDA、SOD和GSH的含量。结果:低、中、高剂量给药组和左卡尼汀对照组B级精子百分率有改善的趋势;MDA含量均降低,SOD含量及GSH含量均增高;中剂量给药组及左卡尼汀对照组大鼠睾丸生精小管内可见大量各级生精细胞。结论:二仙补肾益精解毒方可以明显提高精子活动力,可以增加生殖细胞对ROS的抗性。     

龟鹿二仙胶对少弱精子症小鼠的保护作用及机制研究

目的：研究龟鹿二仙胶对少弱精子症模型小鼠的保护作用及其机制。方法：50只KM小鼠随机分为正常组(Control)、模型组(Model)、左卡尼汀组(L-car)、龟鹿二仙胶低剂量组(GLEXJ-L)和龟鹿二仙胶高剂量组(GLEXJ-H),每组10只，正常组注射等剂量生理盐水，其余各组按照75 mg/kg的剂量给予环磷酰胺进行腹腔注射，连续3 d,建立少弱精子症模型。模型建立后，各组按照临床等效剂量给予相应药物或等量生理盐水灌胃4周，观察各组动物一般情况；记录动物体质量、脾脏和睾丸质量，并计算脾指数和睾丸指数；取附睾进行精子数量和活动率计算；HE染色观察各组动物睾丸和脾脏病理变化；免疫组化法定位各组动物睾丸组织ZO-1、TGF-β3、Smad1和Smad4蛋白并检测其表达水平；ELISA法检测各组小鼠血清中黄体生成素(LH)和睾酮(T)的水平。结果：与正常组比较，模型组小鼠睾丸组织中生精细胞变性，数量减少，排列紊乱；睾丸指数、脾脏指数、精子数量和活动率、血清T水平和ZO-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),LH水平显著升高(P<0.05);与模型组比较，左卡尼汀组、龟鹿二...     

加味天雄散对少弱精子症模型大鼠附睾氧化损伤的保护作用

目的:观察加味天雄散对少弱精子症模型大鼠附睾内细胞氧化应激损伤的影响并研究其作用机制。方法:将腺嘌呤按80mg/ml浓度配制,并对Wistar大鼠进行灌胃,每日1次,连续灌胃2周,造模成功后按随机数字表法将大鼠分为模型组、中药组、正常对照组,中药组连续给药加味天雄散汤剂4周,实验结束后检测各组大鼠附睾精子密度和活率,取经固定的睾丸组织石蜡包埋切片,检测附睾组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结果:与模型组比较,加味天雄散能显著改善大鼠睾丸组织病理状态,显著提高生精障碍大鼠模型的精子密度和精子活率,同时提高生精障碍大鼠附睾内SOD活性,降低附睾组织中MDA水平。结论:加味天雄散能够提高附睾组织中的抗氧化水平,对腺嘌呤导致的大鼠生精功能障碍具有保护作用。     

淫羊藿总黄酮对环磷酰胺致小鼠生精障碍保护作用的研究

目的:研究淫羊藿总黄酮对环磷酰胺所致小鼠生精障碍的治疗作用。方法:腹腔注射环磷酰胺建立小鼠生精障碍模型,检测小鼠的睾丸及附睾重量、精子密度、活率,流式细胞术分析睾丸生精细胞周期,光、电镜观察睾丸组织学和超微结构的变化。结果:淫羊藿总黄酮能够显著增加模型小鼠的睾丸、附睾重量,提高精子密度、精子活率,恢复各级生精细胞百分比;并能改善环磷酰胺所致模型小鼠睾丸组织的病理性损害。结论:淫羊藿总黄酮可以显著改善环磷酰胺致生精障碍小鼠生殖功能。     

三才连梅颗粒通过Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病小鼠生精功能的影响

目的:探讨三才连梅颗粒通过核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路影响糖尿病小鼠生精功能的作用机制。方法:将2型糖尿病小鼠分为正常对照组、糖尿病模型组、三才连梅组、二甲双胍组。给药4周后,取小鼠附睾检测精子参数;透射电镜及HE染色观察睾丸病理改变,TUNEL染色检测睾丸生精细胞凋亡情况;qPCR及Western blot检测睾丸组织Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、P62的表达水平;ELISA检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的表达水平。结果:与糖尿病模型组比较,三才连梅组能显著提高大鼠精子密度、活力及存活率,上调糖尿病小鼠睾丸组织Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平,增加SOD生成,减少MDA的生成,下调自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、P62、Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达(均P<0.05)。与糖尿病模型组比较,三才连梅组可显著抑制生精细胞过度自噬,减轻生精细胞凋亡。结论:三才连梅颗粒能有效提高...     

从“脾肾两虚”论治少弱精子症58例

目的:观察健脾益肾法(续断种子方)治疗少弱精子症的疗效。方法:120例患者按简单数字随机分为两组,分别用续断种子方作为治疗组60例和黄精赞育胶囊作为对照组60例治疗,疗程均为3个月进行疗效观察。结果:治疗组总有效率为87.9%(51/58例),女方妊娠6例;对照组总有效率为78.8%(45/57例),女方妊娠3例,治疗组临床疗效优于对照组(P<0.05)。治疗组精子浓度、a+b级精子和精子活率治疗后提高幅度优于对照组(P<0.05)。结论:续断种子方能提高少弱精子症的临床疗效。     

不同剂量淫羊藿苷对冒公藤多苷模型小鼠睾丸病理损伤的影响

目的 探讨淫羊藿苷拮抗雷公藤多苷小鼠睾丸病理损伤的量效关系.方法 应用雷公藤多苷所致的睾丸生精障碍小鼠模型,观察不同剂量淫羊藿苷对小鼠睾丸病理形态学的影响.结果 模型组小鼠睾丸组织可见明显的病理损伤;3份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组小鼠睾丸生精小管管壁较厚,细胞层次较宽,各级生精细胞排列较规则,基底面至腔面可见精原细胞、初级精母细胞、精子细胞等各个发育阶段的细胞,细胞增殖旺盛,可见较多分裂期细胞,腔内可见成熟精子,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好.1份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组和9份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组小鼠睾丸病理表现相似,好于模型组,但差于3份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组.结论 在淫羊藿苷/雷公藤多苷的1∶1、3∶1、9∶1三种剂量配比中,3∶1配比具有最好的拮抗雷公藤多苷睾丸病理损伤的作用.     

大豆异黄酮对醋酸铅致小鼠睾丸组织损伤的影响

目的研究大豆异黄酮对醋酸铅致雄性小鼠生殖系统损伤的保护作用及作用机制。方法采用ip醋酸铅(20 mg/kg)连续7 d的方法制备雄性小鼠生殖系统损伤模型,造模第2天开始,大豆异黄酮低、中、高剂量(150、300、600 mg/kg)组分别ig给药,连续30 d。检测雄性小鼠的睾丸指数、精子密度、精子畸变率,血清中NO的量,睾丸组织中乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的量及Na+,K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶活性等指标,并观察睾丸、附睾组织的病理改变。结果与模型组比较,大豆异黄酮中、高剂量组的睾丸指数、精子密度增加,精子畸变率降低(P<0.05、0.01),睾丸组织中Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性增强(P<0.05、0.01),血清中NO的量降低(P<0.05、0.01);大豆异黄酮低、中、高剂量组睾丸组织中MDA的量降低(P<0.05、0.01),高剂量可提高睾丸组织中LDH的活性(P<0.05)。病理观察可见,模型组睾丸组织生精上皮明显变薄,生精细胞层次和数量减少,多数生精小管腔未见精子形成,附睾液内未见精子,可见大量圆细胞,而大豆异黄酮可改善醋酸铅所致生精细胞的损伤。结论大豆异黄酮对醋酸铅致小鼠睾丸组织损伤有一定保护作用,作用机制与抗氧化及降低NO的量有关。     

肝气郁结对雄性大鼠精子质量的影晌

目的：观察肝气郁结对雄性大鼠精子质量的影响,为临床从肝论治男性不育奠定一定的实验基础。方法：Wistar雄性大鼠40只,随机分正常组、模型组、五子衍宗丸组、逍遥丸组,每组10只。采用夹尾激怒法复制大鼠肝气郁结模型,造模完成后各组给予相应的处理,14天后观察各组大鼠睾丸和附睾脏器系数、精液参数、睾丸组织形态学等各项指标的变化。结果：与正常组比较,模型组大鼠精子数量、精子活率明显降低,精子畸形率明显升高;与模型组比较,逍遥丸组大鼠精子数量及精子活率显著升高（P〈0．05,P〈0．01）,精子畸形率无显著性差异（P〉0．05）。光镜观察,模型组大鼠较正常组大鼠呈现生精细胞排列疏松,生精细胞脱离基底部,支持细胞和生精细胞核染色质凝聚成絮状,管腔内精子减少;逍遥丸组大鼠睾丸曲细精管形状规整,生精上皮细胞排列紧密,管腔内有生精细胞,与模型组比较有显著改善;五子衍宗丸组改善不明显。结论：肝气郁结对大鼠精液参数、睾丸组织形态有一定影响,逍遥丸对其有明显的干预作用。     

雄黄灌胃给药对雄性大鼠精子质量的影响

目的观察雄黄对雄性成年大鼠精子质量的影响。方法利用部分雄黄灌胃给药生殖毒性Ⅰ段试验雄性大鼠进行精子质量分析。将SD雄性大鼠50只随机分为阴性对照组、阳性对照雷公藤多苷组（10 mg/kg）及雄黄低、中、高剂量组（50、125、250 mg/kg）。各给药组连续灌胃给予相应药物6周,每日1次。给药结束后,取大鼠一侧附睾用计算机辅助精子分析系统（CASA）做精子的数量、活力、运动能力检查,并取睾丸、附睾做HE染色,观察组织病理学变化。结果阳性对照雷公藤多苷组精子活率、精子活力、有效精子数、精子密度及各项运动参数（除鞭打频率外）均明显低于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。雄黄各剂量组精子活率、活力、有效精子数、精子密度及各项运动参数与阴性对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,且各剂量组间差异亦无统计学意义（P〉0.05）。组织病理学观察显示,阳性对照雷公藤多苷组的睾丸局部生精小管萎缩,生精细胞减少,附睾管腔内可见大量降解的生精细胞及细胞碎片,精子细胞减少,静纤毛缩短。雄黄高剂量组附睾、睾丸未见明显组织学病理改变。结论雄黄对雄性大鼠的精子没有明显的毒性作用。     

桦褐孔菌多糖对微波辐射致睾丸损伤的防护研究

目的探讨桦褐孔菌多糖对高功率微波辐射致大鼠睾丸损伤的影响。方法Wistar雄性大鼠30只,随机分为正常对照组、微波辐射模型组及治疗组、新微波辐射模型组及预防组,每组6只。除对照组外,其余组给予200 mW/cm2微波辐照6 min。对照组和模型组生理盐水灌胃,治疗组和预防组给予桦褐孔菌多糖2 mL（400 mg/kg）灌胃,每日1次,第11天处死各组大鼠,对各组大鼠精子密度、精子畸形率进行测定,以光镜和透射电镜观察睾丸的病理形态变化。结果短期高功率微波照射可引起大鼠精子密度减少,精子畸形率上升（P〈0.05）,同时睾丸发生明显的病理改变;而桦褐孔菌多糖灌胃后,治疗组和预防组与2个模型组比较,精子密度增加,精子畸形率下降（P〈0.05）,光镜下生精细胞和间质细胞损伤以及血管扩张充血情况都明显减轻,超微结构显示线粒体肿胀和内质网扩张也明显减轻,其中治疗组各级生精细胞损伤和炎症反应均比预防组轻。结论桦褐孔菌多糖对微波辐射致睾丸损伤具有显著防护效果,治疗性给药的效果较预防性给药更加显著。     

杜仲补天素胶囊对白消安诱导的生精障碍小鼠的影响

目的研究杜仲补天素胶囊(Duzhong Butiansu Capsule,DBC)对白消安致生精功能障碍的影响。方法Balb/c雄性小鼠腹腔注射白消安制备生精障碍模型。造模成功后,生精组给予0.8 g·kg^-1生精胶囊,褪黑素组给予10 mg·kg^-1褪黑素,杜仲补天素低剂量组和杜仲补天素高剂量组分别给予0.694 g·kg^-1、1.388 g·kg^-1杜仲补天素,共给药35 d。称量脏器,用精子分析仪检测精子活力及数目;采用流式细胞仪检测睾丸细胞周期;进行HE染色,观察睾丸、附睾和肝的形态学结构。同时,检测了血清促卵泡生成素(Follicle stimulating hormone, FSH)、促黄体生成素(Luteinizing hormone, LH)、睾酮(testosterone, T)、血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)、血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、肝中谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。采用免疫组织化学法测定了睾丸c-kit、Caspase-3、Cleaved Caspase-3的表达水平。结果与正常组比较,白消安模型组明显降低了精子活力及数目以及睾丸细胞单倍体、二倍体的比例(P<0.01),且破坏睾丸、附睾和肝的组织形态;显著降低血清T(P<0.01)水平,升高FSH、LH和氧化应激水平(P<0.05,P<0.01);明显降低c-kit的表达水平(P<0.05),并明显升高Caspase-3和Cleaved Caspase-3的表达(P<0.01)。与模型组比较,经DBC作用后,精子活力及二倍体、四倍体比例升高(P<0.05,P<0.01),同时保护睾丸、附睾和肝;改善血清性激素水平及氧化应激水平;升高c-kit表达水平(P<0.01),降低凋亡蛋白Caspase-3、Cleaved Caspase-3的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论杜仲补天素胶囊可改善白消安诱导的生精障碍,效果以低剂量为佳。     

松果菊苷对醋酸铅致生精功能损伤小鼠的治疗作用

目的探讨松果菊苷对醋酸铅致生精功能损伤小鼠的治疗作用。方法 60只雄性BALB/c小鼠以单纯随机抽样法分为对照组,模型组,松果菊苷低、中、高剂量组及阳性药物组,每组10只。除对照组外,其余5组小鼠每天腹腔注射醋酸铅20 mg·kg-1·d-1,连续7 d,制备小鼠生殖功能损伤模型。模型制备后,阳性药物组给予人绒毛膜促性腺激素(HCG)500 U·kg-1·d-1腹腔注射,松果菊苷低、中、高剂量组分别给予25 mg·kg-1、50 mg·kg-1、100 mg·kg-1松果菊苷灌胃,对照组和模型组给予等体积0.9%Na Cl溶液灌胃,连续30天;末次灌胃后24 h,分离附睾,观察精子密度、精子活率及精子畸形率;固定睾丸组织,观察组织病理改变;分离血清及匀浆睾丸组织,利用酶联免疫法检测睾丸组织睾酮(T)及血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)。结果与对照组比较,模型组精子密度、精子活率降低,精子畸形率升高,睾丸组织匀浆中T含量降低,血清FSH和LH水平升高,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,松果菊苷各剂量组精子密度、精子活率升高,精子畸形率降低,血清FSH和LH水平降低,睾丸组织匀浆中T含量升高,差异均有统计学意义(P0.01),且松果菊苷对生殖功能损伤的治疗作用呈剂量依赖性。组织学观察显示,松果菊苷各剂量组小鼠睾丸组织病理性损害均得到改善。结论松果菊苷对醋酸铅致生精障碍小鼠生精功能有明显的治疗作用,其作用机制可能与改善生殖激素水平,恢复下丘脑-垂体-性腺轴的调控功能有关。