卵巢子宫内膜异位症异位和在位内膜组织中孕激素受体亚型的表达及意义

目的 研究子宫内膜异位症组织中孕激素受体亚型的表达,探讨其在内膜异位症发生、发展和治疗中的意义.方法 选取2005-01-2005-05山东大学齐鲁医院妇产科22例卵巢子宫内膜异位囊肿的囊壁组织,6例同时行子宫切除术患者的在位内膜组织和13例正常内膜组织,采用RT-PCR技术对孕激素受体(PR-A+B)和孕激素受体B亚型(PR-B)的基因表达进行半定量研究.结果 巧克力囊肿组织中PR-A+B和PR-B mRNA表达显著低于正常内膜组织和子宫内膜异位症(EM)患者在位内膜组织(P＜0.01);巧克力囊肿组织中PR-B/PR-A+B mRNA的比值低于正常子宫内膜组织PR-B/PR-A+B mRNA的比值,差异有显著性(P＜0.01).结论 PR-A+B和PR-B/PR-A+B mRNA的比值降低可能与EM发生、发展及治疗中"孕激素耐受"相关.     

孕激素受体和线粒体porin蛋白在子宫肌瘤组织中的表达

目的：检测新型孕激素受体M（PR-M）、PR-A、PR-B和线粒体porin蛋白在子宫肌瘤组织及肌瘤旁正常子宫平滑肌组织中的表达,并探讨3种孕激素受体与porin表达的相关性。方法：采用RT-PCR、Western blot法检测PR.M、PR_A、PR.B和porin在20例子宫肌瘤组织和肌瘤旁正常子宫平滑肌组织中的表达。结果：子宫肌瘤组织中PR-M、PR-A、PR-B和porin的表达水平均显著高于正常子宫平滑肌组织（P〈0.001）。子宫肌瘤组织中PR-M与porin表达呈正相关（mRNA：r=0.562,P=0.010;蛋白：r=0.467,P=0.038）,PR-A、PR-B与porin表达无关（P〉0.05）。正常子宫平滑肌组织中PR.M、PR.A、PR-B与porin均无相关性（P〉0.05）。结论：子宫肌瘤的发生和发展可能与核外PR.M的作用有关,孕激素可能通过基因组和非基因组两种途径参与子宫肌瘤的形成和生长。     

IL-10、IL-12在子宫内膜异位症组织中的表达

目的:检测IL-10、IL-12在子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜、异位内膜组织中的表达,为EMs发生发展机制的研究和临床靶向化治疗提供实验依据。方法:选取30例卵巢子宫内膜异位囊肿患者,取其异位内膜组织(EMs异位内膜组)和在位内膜组织(EMs在位内膜组)。选取同期在华北理工大学附属医院因其他原因行宫腹腔镜手术的30例患者的正常子宫内膜组织(对照组)。应用免疫组化法和Western blot法检测3组内膜组织中IL-10、IL-12表达。结果:与对照组比较,EMs组中IL-10表达升高,IL-12表达降低,差异均有统计学意义(P0.01)。EMs在位内膜中IL-10表达低于EMs异位内膜,IL-12表达高于EMs异位内膜,差异均有统计学意义(P0.01)。结论:EMs子宫内膜局部及种植部位中IL-12表达降低和IL-10表达升高与EMs的发生、发展有一定的相关性。     

LC3和VMP1在子宫内膜异位症在位内膜中表达的研究

目的：探讨子宫内膜异位症（EMs）患者在位内膜组织与正常子宫内膜组织中微管相关轻链蛋白3（LC3）和空泡膜蛋白1（VMP1）的表达及两者的相关性。方法：选择2010年1月-2016年6月于中国医科大学附属盛京医院手术治疗的患者子宫内膜组织,应用免疫组织化学方法检测LC3和VMP1在54例EMs患者的在位内膜组织和40例正常子宫内膜组织中的表达,并分析其相关性。结果：①EMs患者在位内膜组织中LC3（22/54,40.74%）和VMP1（26/54,48.15%）的阳性表达率均低于正常子宫内膜组织（36/40,90.00%;32/40,80.00%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;②Ⅲ～Ⅳ期EMs患者组中LC3（8/34,23.53%）和VMP1（10/34,29.41%）的阳性表达率均低于Ⅰ～Ⅱ期患者组（14/20, 70.00%;16/20,80.00%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;③LC3和VMP1在EMs患者在位内膜中的表达不存在相关性（P＞0.05）。结论：LC3和VMP1在EMs患者在位内膜中的表达降低,可能与EMs患者在位内膜自噬下调有关。     

子宫腺肌病中孕激素受体B表达及甲基化的研究

目的:探讨子宫腺肌病中孕激素受体B(progesterone receptor B,PR-B)表达及其甲基化在疾病发生中的作用。方法:用免疫组化法测定PR-B的表达,甲基化特异性基因扩增(methylation-specific PCR,MSP)方法检测50例子宫腺肌病患者在位与异位内膜和18例输卵管不孕或良性卵巢囊肿患者子宫内膜中PR-B的甲基化状态,并分析甲基化与PR-B表达的相关性。结果:子宫腺肌病患者在位和异位内膜PR-B表达明显低于对照内膜(P0.01);子宫腺肌病异位内膜中PR-B甲基化比率显著高于对照内膜(P0.05);且子宫腺肌病在位和异位内膜中PR-B甲基化状态与PR-B表达相关(P0.05)。结论:PR-B低表达及其甲基化可能与子宫腺肌病的发生有关。     

卵巢子宫内膜异位组织中胎盘蛋白14表达的研究

目的 探讨胎盘蛋白14(PP14)在卵巢巧克力囊肿异位子宫内膜组织中与在位子宫内膜中表达的差别.方法 2005年6月至2006年10月对上海市长宁区妇幼保健院和上海交通大学医学院附属第九人民医院妇科临床手术中证实为卵巢巧克力囊肿患者70例(卵泡期35例,黄体期35例),采用免疫组织化学方法 测定卵巢巧克力囊肿壁内子宫内膜异位组织细胞中PP14的表达情况,并与患者自身在位子宫内膜中PP14表达进行比较.结果 在位子宫内膜PP14的表达在卵泡期呈中度阳性和弱阳性,在黄体期主要呈强阳性表达;卵巢巧克力囊肿壁内子宫内膜异位组织细胞的PP14多数呈强阳性表达,并且基本不受卵巢周期激素变化的影响,呈基本相同的表达状态.结论 PP14在卵巢巧克力囊肿的异位子宫内膜组织中表达活跃,并且基本不受月经周期中卵巢激素的影响,这表明异位子宫内膜在PP14表达方面与在位子宫内膜不同,具有相对的自主性.     

β-catenin在子宫内膜异位症患者在位内膜中的表达

目的:探讨β-catenin在子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜的增殖与凋亡活性的关联,及其在EMs发病中的作用。方法:共收集68例EMs患者在位内膜组织(EMs组)和70例非EMs患者子宫内膜(对照组),采用免疫组织化学技术分析子宫内膜组织β-catenin的表达情况。TUNEL检测分析子宫内膜组织的凋亡活性,Ki67免疫组织化学染色分析子宫内膜组织的增殖活性。结果:与对照组比,EMs患者在位内膜Ki67表达明显增强,TUNEL阳性细胞明显减少(P<0.05)。在位内膜腺上皮及间质β-catenin表达明显高于对照组(P<0.05)。β-catenin在胞质及胞核的表达明显高于对照组(P<0.05)。直线相关分析结果显示无论是正常内膜还是EMs患者在位内膜,β-catenin的表达与Ki67表达均呈正相关,与TUNEL结果均呈负相关。结论:EMs患者在位内膜β-catenin的异常高表达可能通过上调内膜组织的增殖活性,下调其凋亡性而参与EMs的发病。     

ER与TrkB在子宫内膜异位症患者不同子宫内膜组织中的表达

目的:检测雌激素受体(ER)和酪氨酸激酶受体B(Trk B)在子宫内膜异位症(EMs)患者在位和异位内膜组织中的表达,评价ER和Trk B在EMs发病中的作用。方法:选择18例卵巢EMs病例,其中在位内膜增殖期9例、分泌期9例。采用实时聚合酶链反应(real time PCR)、蛋白质印迹法(Western blotting)和免疫组织化学法检测ERα、ERβ、Trk B和脑源性神经营养因子(BDNF)m RNA和蛋白质的表达。结果:EMs患者在位内膜ERαm RNA和蛋白表达高于异位内膜组织,而ERβ、Trk B m RNA和蛋白的表达均低于异位内膜组织,差异有统计学意义(均P0.05)。异位内膜组织中ERβ/ERαm RNA的比值高于在位内膜组。在EMs在位内膜中,ERα、ERβ、Trk B蛋白的表达在增殖期均高于分泌期(均P0.05)。ERα主要表达于在位内膜细胞核内;ERβ主要表达于异位内膜细胞质中;ERα与ERβ在EMs在位内膜的增殖期着色比分泌期更加明显。EMs的在位内膜和异位内膜组织中Trk B与BDNF都有表达,且主要集中于细胞质。EMs在位内膜中Trk B蛋白质在增殖期表达更明显。结论:ERβ和Trk B可能在EMs的发病机制中发挥作用。     

子宫内膜异位症中子宫内膜间质细胞血管生成能力的研究

目的:研究子宫内膜异位症(EMs)患者子宫内膜间质细胞环氧化酶2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白分泌及m RNA表达。方法:收集EMs患者的在位及异位病灶子宫内膜组织和子宫肌瘤患者在位内膜组织,原代消化培养子宫内膜细胞,取纯化的子宫内膜间质细胞进行研究,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白的分泌,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测COX-2、PGE2和VEGF的m RNA的表达。结果:EMs和子宫肌瘤患者分泌期在位子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白分泌及m RNA表达与增殖期比较差异均无统计学意义(P0.05);EMs患者在位及异位的子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白分泌及m RNA表达比子宫肌瘤患者在位细胞均升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);EMs患者异位的子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白分泌及m RNA表达比其在位细胞均升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:EMs患者在位及异位子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF的蛋白分泌及m RNA表达均升高,且异位病灶间质细胞升高更明显,提示在EMs发病中异位病灶子宫内膜间质细胞血管生成能力更强。     

子宫内膜异位症大鼠模型妊娠期孕激素受体及BKCa α表达

目的:探讨子宫内膜异位症(EM)大鼠妊娠模型子宫平滑肌子宫收缩相关因子的表达。方法:皮下种植法建立大鼠EM模型,雌雄合笼观察其受孕情况。留取妊娠期子宫平滑肌组织,qRT-PCR法检测BKCaα(大电导钙依赖的钾通道)、PR(孕激素受体)和PR-B(孕激素受体B亚型)表达情况。结果:造模成功率为16/20(80.00%),EM实验组和对照组的妊娠率分别为12/16(75.00%)和9/10(90.00%),两组比较差异无统计学意义(P=0.63)。内异症孕鼠模型中BKCaα、PR和PR-B mRNA表达分别为3.56±0.62、4.31±2.21和3.41±1.75,对照组分别为3.13±1.47、1.32±0.28和1.54±0.39,两组比较差异均无统计学意义。内异症孕鼠组的PR-B/PR比值显著高于对照组[(32.07±8.13)%vs (14.46±2.87)%,P0.05]。结论:内异症大鼠妊娠期孕激素受体亚型的异常分布可能与子宫异常收缩相关。     

Dienogest increases the progesterone receptor isoform B/A ratio in patients with ovarian endometriosis

Background

The resistance of endometriotic tissue to progesterone can be explained by alterations in the distribution of progesterone receptor (PR) and estrogen receptor (ER) isoforms. The aims of this study were to examine the expressions of PR-A, PR-B, ERα and ERβ in endometrioma and assess whether these expressions are affected by dienogest or leuprolide acetate (LA) treatment.

Methods

We enrolled 60 females, including 43 patients with endometriosis (14 who received no medical treatment, 13 who received dienogest and 16 who received LA before undergoing laparoscopic surgery) and 17 patients with leiomyoma. The expression levels of PR and ER isoforms in eutopic and ectopic endometrium were assayed with quantitative real-time PCR, and confirmed with immunohistochemistry.

Results

A decreased PR-B/PR-A ratio and an increased ERβ/ERα ratio were demonstrated in ectopic endometrium derived from females with endometriosis compared with the ratios observed in eutopic endometrium obtained from females without endometriosis. Although LA treatment did not affect the PR-B/PR-A and ERβ/ERα ratios, dienogest treatment increased the PR-B/PR-A ratio and decreased the ERβ/ERα ratio in patients with endometriomas.

Conclusions

Dienogest may improve progesterone resistance in endometriotic tissue by increasing the relative expressions of PR-B and PR-A, and decreasing the relative expressions of ERβ and ERα.

     

乙酰肝素酶和促血管生成素2与子宫内膜异位症发病的关系

目的探讨乙酰肝素酶（Hpa）和促血管生成素2（Ang-2）基因在子宫内膜异位症（内异症）发生、发展中的作用.方法采用逆转录PCR（RT-PCR）技术,检测86例内异症患者（内异症组,其中Ⅰ～Ⅱ期内异症患者25例,Ⅲ～Ⅳ期内异症患者61例）的异位和在位内膜组织及30例非内异症患者（对照组）的子宫内膜组织中Hpa mRNA和Ang-2 mRNA表达.结果（1）内异症组异位和在位内膜组织中,Hpa mRNA阳性表达率分别为62%（53/86）和55%（47/86）,两者比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;对照组内膜组织中Hpa mRNA阳性表达率为27%（8/30）,明显低于内异症组,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.（2）内异症组异位和在位内膜组织中Ang-2 mRNA的阳性表达率分别为71%（61/86）和65%（56/86）,两者比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;对照组内膜组织中Ang-2 mRNA的阳性表达率为33%（10/30）,明显低于内异症组,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.（3）Ⅰ～Ⅱ期内异症患者的异位及在位内膜组织中Hpa mRNA阳性表达率分别为44%（11/25）和32%（8/25）,明显低于Ⅲ～Ⅳ期内异症患者异位与在位内膜组织的阳性表达率[69%（42/61）和64%（39/61）],两者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.（4）Ⅰ～Ⅱ期内异症患者的异位及在位内膜组织中Ang-2 mRNA阳性表达率分别为60%（15/25）和64%（16/25）;Ⅲ～Ⅳ期患者异位与在位内膜组织的阳性表达率分别为75%（46/61）和66%（40/61）,不同期别内异症患者异位及在位内膜Ang-2 mRNA阳性表达率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.（5）内异症组的异位内膜组织中Hpa mRNA与Ang-2 mRNA的表达呈显著正相关（P＜0.05）.结论内异症患者异位和在位内膜组织中Hpa mRNA和Ang-2 mRNA均呈高表达,且二者呈正相关关系;推测Hpa和Ang-2可能与内异症的发生和发展有密切关系.     

KISS-1及MMP-9在子宫内膜异位症患者异位及在位内膜的表达及意义

目的:探讨KISS-1及MMP-9在子宫内膜异位症患者在位及异位内膜组织的表达及意义。方法:用免疫组化方法检测46例患者异位子宫内膜组织及其中16例在位内膜组织和33例正常子宫内膜组织中KISS-1及MMP-9的表达情况。结果:KISS-1在子宫内膜异位症患者异位/在位内膜及正常子宫内膜组织中阳性表达率分别为30.43%、31.25%和63.64%,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-9表达率分别为60.87%、56.25%和27.27%,差异有统计学意义(P<0.05);进一步比较KISS-1及MMP-9表达的阳性强度,3组间差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论:KISS-1在子宫内膜异位症的表达降低,MMP-9的表达增高可能与内异症的侵袭有关。     

Matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-3 mRNA expression in ectopic and eutopic endometrium in women with endometriosis: a rationale for endometriotic invasiveness

OBJECTIVE: To investigate mRNA expression of metalloproteinase-9 (MMP-9) and tissue inhibitor of metalloproteinase-3 (TIMP-3) in ectopic endometriosis tissue and uterine endometrium from women with and without endometriosis throughout the menstrual cycle. DESIGN: Molecular studies in human tissue. SETTING: Department of Gynecology and Obstetrics, Reproductive Immunology Laboratory, Stanford University Medical Center. PATIENT(S): Fifty-three premenopausal woman (23 women with endometriosis and 30 women without endometriosis undergoing laparoscopic surgery). Endometrium and ectopic endometriosis tissue were obtained at the time of surgery. INTERVENTION(S): None. MAIN OUTCOME MEASURE(S): mRNA expression from eutopic and ectopic endometrium was analyzed by quantitative, competitive PCR. RESULT(S): Both uterine endometrium and ectopic endometriotic tissue from women with endometriosis expressed significantly (P<.05) lower levels of TIMP-3 than endometrium from normal women. Also, ectopic endometrium expressed higher levels of MMP-9 and a higher ratio of MMP-9/TIMP-3 than eutopic endometrium from normal and endometriosis patients. CONCLUSION(S): These results suggest that ectopic and eutopic endometrium from endometriosis patients may be more invasive and prone to peritoneal implantation because of greater MMP and less TIMP-3 mRNA expression than endometrium from women without endometriosis. Thus, increased proteolytic activity may be one of the reasons for the invasive properties of the endometrium, resulting in the development of endometriosis.     

细胞间粘附分子-1在子宫内膜异位症在位内膜、腹腔液及异位灶中的表达及分析

目的:探讨ICAM 1与子宫内膜异位症的关系。方法:收集子宫内膜异位症患者(研究组)腹腔液30份、在位子宫内膜2 1份、异位病灶组织8份及非子宫内膜异位症患者中正常盆腔(对照组)腹腔液2 5份、子宫内膜2 0份。应用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法测定腹腔液sICAM 1和免疫组化方法测定在位内膜、异位灶内膜ICAM 1表达。结果:子宫内膜异位症患者腹腔液中sICAM 1水平明显高于对照组(P <0 .0 1 ) ,子宫内膜的ICAM 1表达低于对照组同期子宫内膜的表达(P <0 .0 5 ) ,异位灶组织ICAM 1表达明显高于其在位内膜(P <0 .0 1 )及对照组内膜(P <0 .0 5 )。结论:子宫内膜异位症患者子宫内膜、腹腔液、异位灶内膜细胞间粘附分子的异常表达可能与子宫内膜异位症的发生发展关系密切。     

乙酰肝素酶mRNA在子宫内膜异位症和子宫腺肌病中表达的研究

目的:检测子宫内膜异位症和子宫腺肌病在位及异位子宫内膜组织中乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)mRNA的表达,探讨Hpa在子宫内膜异位症和子宫腺肌病发生发展中的作用及意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测50例子宫内膜异位症患者和42例子宫腺肌病患者的异位及在位内膜中Hpa mRNA的表达,并与30例妇女的正常子宫内膜进行比较。结果:(1)子宫内膜异位症组和子宫腺肌病组患者的异位及在位内膜中Hpa mRNA表达差异无显著性(P>0.05)。对照组正常子宫内膜中Hpa mRNA表达明显低于两组患者异位及在位内膜的阳性表达率(P<0.05);(2)Ⅰ~Ⅱ期子宫内膜异位症的异位及在位内膜中Hpa mRNA表达明显低于Ⅲ~Ⅳ期的异位与在位内膜表达(P<0.05)。结论:(1)Hpa与子宫内膜异位症和子宫腺肌病发病有关;(2)Hpa与子宫内膜异位症病情进展有关,是促进子宫内膜异位症病情进展的一个因素。     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制剂TIMP-3在子宫内膜异位症的表达

目的 :探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)及其抑制剂TIMP 3在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法 :采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶染色法 (SP法 )检测 4 3例子宫内膜异位症的异位内膜和在位内膜中MMP 9、TIMP 3的表达 ,以 19例正常子宫内膜为对照组 ,并用银染法观察腺上皮基底膜的完整性。结果 :在异位内膜组织的腺上皮细胞MMP 9呈高表达状态 ,与子宫内膜异位症在位内膜和正常子宫内膜相比 ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1)。子宫内膜异位症的在位内膜和异位内膜TIMP 3均呈低表达 ,与正常内膜相比 ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ,异位内膜较在位内膜TIMP 3的表达降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。子宫内膜腺上皮的基底膜银染结果显示 :MMP 9与TIMP 3的染色强度比值与基底膜的阳性率呈负相关 (P <0 .0 1)。MMP 9、TIMP 3的表达强度与子宫内膜异位症的严重程度无显著相关性。结论 :异位内膜组织中MMP 9过度表达 ,而TIMP 3的表达下降 ,导致MMP 9/TIMP 3的比例增高 ,使子宫内膜异位症患者的异位内膜更具侵袭性 ,在子宫内膜异位症的发生发展中起重要作用     

Expression of heparanase and angiopoietin-2 in patients with endometriosis

OBJECTIVE: The objective was to investigate the expression of heparanase (Hpa) and angiopoietin-2 (Ang-2) in endometriosis. STUDY DESIGN: In ectopic and eutopic endometrium of patients undergoing laparoscopy for endometriosis (n=86) and in normal endometrium of patients undergoing laparoscopic tubal ligation or hysteroscopic resection because of uterus septus (n=30), we determined Hpa and Ang-2 gene expression by RT-PCR. To support the mRNA data, the expression of Hpa and Ang-2 protein was measured by Western blot analysis. Finally, Hpa and Ang-2 in these tissues was localized by immunohistochemical staining. RESULT(S): The positive rate of Hpa and Ang-2 mRNA in ectopic and eutopic endometrium in the study group was significantly higher than that in normal endometrium in the control group. In the study group, ectopic and eutopic endometrium expressed a higher positive rate of Hpa and Ang-2 protein, whereas in the control group, normal endometrium expressed a lower positive rate of Hpa and Ang-2 protein. In eutopic and ectopic endometrium, there was balanced expression between Hpa and Ang-2. Both Hpa and Ang-2 showed a balanced expression between eutopic and ectopic endometrium. In ectopic endometrium, strong staining for Hpa and Ang-2 was observed both in epithelial cells and in stromal cells, but in eutopic endometrium, Hpa and Ang-2 were mainly expressed in epithelial cells. CONCLUSION: The higher expression of Hpa and Ang-2 in ectopic and eutopic endometrium may play an important role in the pathogenesis and development of endometriosis.