电针大鼠足三里穴对脑干P物质基因表达的影响

目的观察电针足三里对大鼠脑干P物质 (SP)基因表达的影响及其规律 ,探讨脑肠肽参与针刺镇痛以及治疗胃肠疾病的机制。方法将 78只SD大鼠随机分成正常对照组以及针刺足三里、非经非穴以及束缚后各 2h、4h、6h、8h组。应用RT PCR方法结合计算机图像分析测定脑干SP的基因表达。结果正常情况下脑干内有一定的SPmRNA表达 ,足三里组、非经非穴组在电针 2h后脑干SP的基因表达增加 (P <0 .0 5 ) ,6— 8hSPmRNA的表达两组间有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论电针可以增加大鼠脑干SP的基因表达 ,而在不同的时间点电针足三里穴与非经非穴点SP基因表达的不同说明了针刺穴位点的作用 ,这可能是电针足三里穴SP参与针刺镇痛和调节胃肠运动的机理之一。     

大鼠脂肪条带结构与针刺镇痛效应的相关性

目的：观察大鼠胃经沿线脂肪条带结构与针刺镇痛效应的相关性。方法：实验于2003-10／2004-04在南通大学江苏省神经再生重点实验室完成。将24只SD大鼠随机分成脂肪酶预处理胃经脂肪条带结构组（A组）；脂肪酶预处理“足三里”穴组（B组）；脂肪酶预处理胃经脂肪条带旁结构组（C组）；生理盐水预处理胃经脂肪条带结构及穴位组（D组），每组6只。在运用脂肪酶、生理盐水预处理各组大鼠前后针刺“足三里”，进行针刺前后痛阈测定。结果：24只大鼠全部进入结果分析。①A，B组在预处理后50min，24h针刺前后的痛阈值比较，差异无显著性意义（t=1．328-2．094，P〉0．05）；与预处理前24h的针刺后痛阈值比较，差异有显著性意义（t=4．975-5．023，P〈0．01）。C组和D组预处理后50min针刺前后的痛阈值比较，差异有显著性意义（t=9．308，t=7．938，P〈0．001）。与预处理前24h针刺后痛阈值比较，差异无显著性意义（t=0．369，t=0．476，P〉0．05）。②在脂肪酶预处理后48h时针刺前后痛阈比较，差异有显著意义（t=10．413，P〈0．001）。在脂肪酶预处理后6h时未预处理侧针刺前后的痛阈值比较，差异有显著性意义（t=12．661，P〈．001），与50min，24h两时段针刺后痛阈相比，差异有显著性意义（F=12．68，P〈0．05）。结论：胃经沿线脂肪条带结构的连通与阻断对针刺镇痛效应的产生有着重要的依存关系，这种阻断作用是可逆的。     

针刺对急性脑缺血大鼠昼夜节律蛋白Clock和Bmal1的影响

目的 探讨不同时间点针刺对急性脑缺血大鼠缺血脑区Clock,Bmal1的影响。 方法 选取3月龄SD雌性大鼠80只,随机均分为正常组、模型组、6 h针刺组和24 h针刺组,每组20只大鼠。模型组、6 h针刺组和24 h针刺组采用开颅法电凝大脑中动脉复制急性脑缺血模型,6 h针刺组和24 h针刺组于对应的造模成功后时间点针刺百会、足三里和关元穴。造模成功24.5 h后,采用改良的神经功能量表(mNSS) 对4组大鼠进行神经功能评分。造模成功25 h后,4组大鼠均拉断脊髓处死,断头取脑组织,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定梗死面积,Western blot法检测缺血脑组织Clock和Bmal1蛋白含量。 结果 造模成功24.5 h后,6 h针刺组和24 h针刺组大鼠的神经功能评分均显著低于模型组同时间点,差异均有统计学意义(P<0.05);且6 h针刺组分的神经功能评分亦显著低于24 h针刺组同时间点(P<0.05)。造模成功25 h后,模型组、6 h针刺组和24 h针刺组的脑梗死体积显著大于正常组,模型组脑梗死体积显著大于6 h针刺组和24 h针刺组,且6 h针刺组脑梗死体积显著小于24 h针刺组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。造模25 h后,模型组、6 h针刺组和24 h针刺组大鼠梗死区域脑组织中Clock和Bmal1蛋白的含量较正常大鼠明显减少,差异均有统计学意义(P＜0.01);6 h针刺组和24 h针刺组大鼠梗死区域脑组织中Clock和Bmal1蛋白的表达显著高于与模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05),且6 h针刺组大鼠梗死区域Clock和Bmal1蛋白的表达亦显著高于24 h针刺组,差异有统计学意义(P＜0.05。 结论 针刺可以显著提高缺血脑组织Clock和Bmal1蛋白的表达,促进神经功能恢复,具有抗脑缺血损伤作用。     

应激后大鼠下丘脑磷酸化p38MAPK的变化及电针足三里穴的调节作用

目的 观察应激对大鼠下丘脑磷酸化p38MAPK的影响及电针足三里穴的调节作用。方法将28只Wistar大鼠随机分为对照组、束缚应激组和束缚应激 电针组，后2组再根据束缚解除后及电针足三里穴位治疗后不同时间点分别分为3个亚组。电针治疗采用频率为5～12Hz的疏密波，治疗总时间30min。于相应时间点处死各组大鼠，采用Western印迹杂交法观察其下丘脑内磷酸化p38MAPK的变化。结果束缚应激组大鼠下丘脑内p38MAPK磷酸化水平明显高于对照组，且在束缚应激解除后3h仍保持在较高水平；应激大鼠经电针足三里穴处理后，下丘脑内磷酸化p38MAPK与束缚应激组相比明显回落，这种调节作用可持续到电针治疗结束后3h。结论束缚应激能引起下丘脑应激信号转导系统中p38MAPK的磷酸化，这可能是应激活动过程中的重要事件之一。电针足三里穴对下丘脑内磷酸化p38MAPK的调节作用可能与下丘脑-垂体-肾上腺轴的活动有关。     

针刺足三里、悬钟对缺血性脑卒中神经功能的影响及其临床意义

目的：观察针刺足三里、悬钟2穴对缺血性脑卒中神经功能的影响，探讨其可能机制。方法：将合适病例随机分为针刺组与对照组，每组80例，两组均予以常规脑卒中治疗，针刺组在此基础上结合针刺足三里、悬钟二穴。并以治疗前后患者临床神经功能缺损评分的变化情况进行评价。结果：针刺组神经功能缺损评分明显降低，与治疗前相比差异有非常显著性（P〈0．01），与对照组相比差异有显著性（P〈0．05）；其临床疗效也优于对照组（P〈0．05）。结论：针刺足三里、悬钟2穴对缺血性脑卒中患者神经功能有明显改善作用，进而缩短患者的恢复期。     

针刺大鼠后三里穴脑fMRI成像的初步研究

目的：探讨针刺大鼠的功能性磁共振(fMRI)成像的动物实验方法。方法：利用4．7T磁共振对9例雄性SD大鼠行针刺右侧后三里穴及穴旁的fMRI成像，采用统计参数图(SPM)软件进行统计学处理。结果：针刺大鼠右侧后三里穴可以引起下丘脑外侧区、下丘脑前区、下丘脑腹内侧等脑区MRI信号增加(P=0．001)；两组第Ⅰ、第Ⅱ感觉运动皮质和尾壳核的MRI信号均增加，穴位组在P=0．001水平检出，穴旁组则在P=0．01或者P=0．05水平检出。结论：针刺大鼠后三里穴可引起下丘脑外侧区、下丘脑前区、下丘脑腹内侧区和丘脑室旁核等脑区MRI信号增加。fMRI是在活体动物实验中研究针刺中枢机制的可行方法之一。     

聚焦超声穴位照射对正常兔痛阈的影响

目的 探讨聚焦超声照射“足三里”穴位对正常兔痛阈的影响.方法 将30只新西兰大白兔随机分为实验组和假照组,每组15只.实验组用频率0.5 MHz,功率2W的聚焦超声照射兔左侧“足三里”穴位5 min,假照组照射方法 相同,但不打开电源.分别于照射前,照射后2、4、6、8、10、12、14和16 min,用电子压力测痛仪进行痛阈测定.结果 假照组照射后的痛阈值与基础痛阈相比无显著性差异(P＞0.05).实验组在照射后6 min,痛阈值(94.57±51.84)g出现高峰(P＜0.001);分别于14 min和16 min恢复至基础水平.在2、4、6、8、10和12 min,实验组的痛阈值均显著性高于假照组(P＜0.05).光镜观察实验组与假照组的皮肤组织图、肌肉组织图和坐骨神经组织图均无明显变化.结论 聚焦超声照射“足三里”穴位可以提高正常兔的痛阈,并且是安全的.     

基于小波变换脑磁图成像的针刺足三里穴镇痛特异性研究

目的:探讨针刺足三里穴是否在中枢神经存在相对功能特异性的生理表征。方法:采集28名健康被试针刺足三里及旁开假穴的脑磁图成像数据,引入基于小波变换时频分析方法,将大脑分为额叶、颞叶、中央区、顶叶和枕叶五大区域,观测不同频段的响应变化,对比针刺足三里及旁开假穴时频差别反应。结果:针刺足三里穴位和旁开假穴可引发大脑振荡信号活动的不同变化模式。针刺足三里后,位于大脑对侧半球的颞叶部位的MEG传感器显示delta频段能量的持续增强,而在大脑同侧半球响应部位则表现为能量降低,在其他频段则没有引起显著的变化。这一模式与旁开假穴显著不同。结论:针刺足三里穴具有调节对侧颞叶能量增强,同侧区域能量降低的功能特异性。     

Prdx2在促性腺激素预处理的小鼠卵巢中的表达

目的:探讨促性腺激素预处理的小鼠在卵泡发育及排卵过程中Prdx2在卵巢中的表达,为进一步研究Prdx2在调控卵泡生长、发育及成熟中的作用奠定基础。方法:将22～24d大小的75只C57/BL6雌性小鼠随机分成14组(生理盐水组10只,其余各组5只),分别为注射孕马血清促性腺激素(PMSG)后2、4、6、8、10、12、24、48h组和注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后5、8、10、12、24h组以及生理盐水组,其中生理盐水组分别于注射生理盐水后2h(C0,5只)及48h(C1,5只)取出卵巢。采用实时定量PCR及免疫印迹法检测Prdx2mRNA及蛋白在促性腺激素处理后不同时间点的动态表达。结果:小鼠腹腔注射PMSG后Prdx2表达均低于生理盐水组,于注射后2h表达量最低,随后表达逐渐增高,24h到达最高点,但表达仍低于生理盐水组。生理盐水组注射生理盐水后2h(C0)与注射PMSG后2、4、6、8、10、12、48h相比差异均具有统计学意义(P<0.05),而与注射PMSG后24h相比则差异无统计学意义(P=0.238)。注射PMSG后不同时间点两两比较结果表明2hPrdx2的表达同6h相比差异有统计学意义(P=0.00),其他时间点两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。小鼠腹腔注射PMSG后48h(P48)注射hCG促排卵,促排卵后不同时间点卵巢标本mRNA表达量同P48相比差异均无统计学意义(P>0.05)。同生理盐水组注射生理盐水后48h(C1)相比差异均有统计学意义(P<0.05)。Prdx2蛋白在小鼠腹腔注射PMSG后10h表达水平最低,其他各组间差异无统计学意义。注射hCG后各时间点同生理盐水组相比,表达差异均无统计学意义。结论:Prdx2可能在小鼠卵泡发育及排卵过程中发挥重要作用。     

针刺对胃经及其左右两侧旁开对照点微循环血流灌注量的影响

目的观察针刺对胃经及其两侧旁开的非经对照点的微循环血流灌注量的影响。方法应用激光多谱勒血流仪,检测8名健康成年志愿者胃经线上的阴市穴和梁丘穴深部组织的微循环血流灌注量,观察常态和电针足三里穴时2个穴位深部组织微循环灌注量的变化。结果①在常态下,胃经线上的阴市、梁丘2个穴位深部组织微循环血流灌注量均比其两侧旁开1cm的非经对照穴位高(P0.05);②电针足三里穴后,胃经线上的阴市、梁丘2个穴位深部组织微循环血流灌注量比针刺前高(P0.05)。结论电针可以增强胃经线上阴市、梁丘2个穴位深部组织的微循环血流灌注量。     

冷应激溃疡大鼠下丘脑和肾上腺一氧化氮合成酶2与内皮素-1表达及针刺保护机制的研究

目的观察针刺足三里穴对急性胃溃疡的保护效应，并探讨其作用机理。方法将SD雄性大鼠随机分为正常对照组、单纯应激组、针刺预防应激组，应用胃粘膜溃疡指数的计算和RT-PCR的方法研究针刺足三里对大鼠的冷应激性溃疡的保护和下丘脑及肾上腺一氧化氮合成酶(NOS)2和内皮素(ET)-1的表达情况，经图像分析系统照相并进行半定量。结果针刺足三里穴可以明显减少冷应激造成的溃疡指数。下丘脑NOS2和ET-1均参与了冷应激溃疡病理过程，针刺足三里穴可以下调其表达。在应激过程中，肾上腺中并无NOS2和ET-1的病理性表达。结论针刺对冷应激溃疡具有保护作用，该种保护作用是通过对抑制下丘脑NOS2和ET-1的病理性表达来实现的，NOS2和ET-1在肾上腺中不参与应激过程。     

针刺足三里穴中枢作用机制的研究

目的：探讨针灸足三里穴的中枢作用机制。方法：利用正电子发射断层摄影术（PET）对6例男性健康志愿者行针刺右侧足三里^18FDG-PFT脑功能成像检查，获得脑内葡萄糖代谢变化的实验数据，利用SPM软件进行统计学处理，获得脑功能变化的可视性实验依据。结果：针刺右侧足三里可以引起同侧视丘下部、延髓背侧，双侧岛叶，对侧旁中央小叶、中央前、后回上部、额叶及颞叶的岛盖部、扣带回中部、尾状核头部、中脑和桥脑背侧中部、小脑深部葡萄糖代谢率增加，同侧中央前、后回上部及小脑前叶外侧部葡萄糖代谢率减低。结论：针刺足三里的作用机制是通过皮层及皮层下内脏神经中枢的神经内分泌网络调节机制来实现的。     

大鼠脊髓横断早期比目鱼肌重量与肌球蛋白重链亚型mRNA表达的变化

目的观察大鼠脊髓横断后早期比目鱼肌重量及肌球蛋白重链（MHC）各亚型mRNA表达的变化规律.方法 40只雌性Wistar大鼠随机分为对照组（10只）与脊髓横断7 d组（ST7）、15 d组（ST15）、30 d组（ST30）,各10只,脊髓横断水平T8～T10.分别于横断后7、15、30 d取后肢比目鱼肌称重,采用半定量RT-PCR方法观察MHC各亚型mRNA表达的变化.结果脊髓横断各组比目鱼肌重量均较对照组下降（P＜0.05）.ST15、ST30组比目鱼肌绝对与相对重量均较ST7组下降（P＜0.05）.对照组比目鱼肌只表达MHC-Ⅰ与MHC-Ⅱa,脊髓横断各组在横断7 d后出现MHC-Ⅱx与MHC-Ⅱb的表达,横断后各时间点MHC-ⅠmRNA的表达持续下调;MHC-Ⅱa与MHC-Ⅱx mRNA的表达持续上调;MHC-Ⅱb mRNA的表达维持在低水平.结论脊髓横断主要在早期影响肌肉的重量;脊髓横断后MHC的表达发生由慢型向快型的转化,MHC随神经肌肉活动的减少表现出可塑性.     

Hyponatremia in rats induces downregulation of vasopressin synthesis.

Hyponatremia due to inappropriate secretion of vasopressin is a common disorder in human pathophysiology, but vasopressin synthesis during hypoosmolality has not been investigated. We used a new method to quantitate synthesis of vasopressin in rats after 3, 7, and 14 d of hyponatremia induced by administering dDAVP (a vasopressin agonist) and a liquid diet. Vasopressin synthesis was completely turned off by 7 d. Vasopressin mRNA levels in the hypothalamus paralleled the reduction in synthesis and were reduced to levels of only 10-15% of the content in control rats. When hyponatremia was corrected by withdrawal of dDAVP, vasopressin mRNA slowly returned to normal over 7 d. The observation that vasopressin synthesis can be so completely turned off leads to several conclusions: under normal physiological conditions the neurohypophysis is chronically upregulated; there must be an osmotic threshold for initiation of vasopressin synthesis (and release); the large store of hormone in the posterior pituitary is essential for vasopressin to be available during times of decreased synthesis; and, finally, some nonosmolar stimulus for synthesis must be present during clinical disorders when vasopressin is secreted (and synthesized) despite hypoosmolality.     

温和灸联合穴位按摩对气血虚弱型缺乳产妇泌乳启动的影响

目的探讨温和灸联合穴位按摩促进气血虚弱型缺乳产妇泌乳启动的可行性。方法2017年6月至2018年12月,便利抽样法选取在某院治疗的气血虚弱型产后缺乳产妇为研究对象,以分娩后入住母婴同室的先后顺序将其分为对照组(G1)、穴位按摩组(G2)、温和灸组(G3)、温和灸联合穴位按摩组(G4)。干预时间为3 d,比较四组产妇泌乳启动时间、产后乳汁分泌情况(12 h、24 h、72 h)及婴儿72 h体重下降幅度,评估其安全性(不良反应、血液指标及其皮肤情况)。结果G4组产妇的泌乳启动时间早于其他三组,在产后48 h和72 h的泌乳量多于其他三组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。G4组婴儿产后72 h体质量下降幅度小于其他三组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。所有产妇均无不适主诉及不良事件发生,干预前后血常规、肝肾功能检查及受试部位皮肤无异常变化(均P>0.05)。结论温和灸联合穴位按摩可有效促进气血虚弱型缺乳产妇泌乳启动,增加泌乳量,减少72 h婴儿体重下降幅度,操作方便、无创伤、痛苦小且能起到持续之疗效,产妇易于接受。     

fMRI探讨针刺足三里穴和下巨虚穴的大脑功能区分布

目的采用磁共振脑功能成像(fMRI)技术与针刺经络穴位相结合的方法来观察足阳明胃经上的足三里穴、下巨虚穴在大脑皮层功能区的分布位置。方法 64名健康志愿者,分为实验组和对照组,均按先后顺序针刺右侧足三里穴、上巨虚穴。使实验组处于得气状态,对照组处于不得气状态。针刺同时进行fMRI扫描。t检验分析得出刺激状态与静息状态信号对比的脑功能图像。结果 得气状态下fMRI图像显示两穴位的脑功能活动区定位无明显差别(P>0.05),主要位于双侧扣带回、岛叶、大脑外侧沟上壁及中央后回等部位。不得气状态下,fMRI图像显示两穴位的脑功能活动区定位亦无明显差别(P>0.05),主要位于左侧中央后回。同一穴位在得气和不得气两种状态下,脑功能活动区定位差别明显(P<0.01)。结论 针刺足三里、下巨虚两穴位治疗胃肠疾病有其科学基础;经络与中枢神经系统密切相关,针刺效应可能通过经络-大脑皮层-内脏这一途径完成。     

针刺足三里穴PET和fMRI脑功能成像的初步探讨

目的探讨针刺足三里穴脑功能成像的实验方法和针灸治疗的中枢机制。方法利用18FDG PET和fMRI BOLD脑功能成像方法 ,获取针刺足三里穴脑内葡萄糖代谢和脑血流变化有关的实验数据 ,利用SPM和感兴趣区图像分析方法 (ROI)获得脑功能变化的可视性实验依据。结果针刺右侧足三里穴引起视丘下部、同侧室旁核和双侧颞叶的葡萄糖代谢和脑血流增加。结论针刺足三里穴可引起植物神经中枢和颞叶功能变化 ,与足三里穴的治疗胃肠疾病和改善精神和睡眠状态的治疗作用密切相关     

冠心病患者全血中miR-126表达的临床意义

目的探讨微小RNA(miR-126)在不同类型冠心病患者中的表达情况,为冠心病早期诊断、治疗及治疗后检测提供实验依据。方法将实验分成健康对照组(n=6)及冠心病组(n=36),对冠心病组(分为稳定性心绞痛组,不稳定性心绞痛组,非ST段抬高性心肌梗死组,ST段抬高性心肌梗死组,每组9例)接受经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术前,术后第1天,术后第5天等时间点的观察。应用实时荧光定量PCR(qRT-qPCR)技术检测确诊为不同类型冠心病患者术前、术后全血标本中miR-126的表达量。结果 qRT-qPCR结果显示:①健康对照组、稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组3组miR-126的表达量无显著性差异,但在急性心肌梗死组(包括非ST段抬高性组、ST段抬高性组)患者中miR-126的表达量与上述三组明显减少,有显著性差异(P0.05)。②miR-126在不同时间水平有显著性差异(P0.05),ST段抬高或非ST段抬高型心肌梗死的miR-126的表达量术前明显低,术后随观察时间延长逐渐增加。③在不同时间时不同分组之间miR-126的表达量存在显著的交互效应(P0.05)。结论 miR-126在急性心肌梗死患者中及冠心病各组术前、术后的表达量明显不同,这为miR-126应用于不同类型冠心病诊断及术后疗效判断提供实验依据。     

Early vasopressin reduces incidence of new onset arrhythmias

Purpose

The objective of this study was to determine the effect of early vs late vasopressin therapy on catecholamine dose and duration.

Materials and methods

We conducted a single-center, retrospective chart review of adult patients admitted to the medical intensive care unit between January 2010 and December 2011 with septic shock requiring catecholamine and vasopressin therapy. Patients were included in the early group if vasopressin was initiated within 6 hours and the late group if vasopressin was initiated between 6 and 48 hours of catecholamine(s).

Results

Duration of catecholamine and vasopressin therapy was similar between the 35 patients in the early group and the 36 in the late group. Vasopressin therapy was associated with a decrease in catecholamine requirements in both groups. Early vasopressin was associated with fewer new onset arrhythmias (37.1% vs 62.9%, P < .001). There was no difference in mortality, hospital, or intensive care unit length of stay between the early and late group vasopressin groups (88.6% vs 88.9%, P = 1; 14 vs 10 days, P = .48; 9 vs 7 days, P = .71, respectively).

Conclusions

Early initiation of vasopressin therapy in adult critically ill patients with septic shock was associated with no difference in total catecholamine requirements but decreased incidence of new onset arrhythmias.     

穴位注射胞二磷胆碱对脑外伤大鼠生长相关蛋白-43 表达的影响

目的观察足三里穴位注射胞二磷胆碱疗法对脑外伤大鼠神经功能及生长相关蛋白(GAP-43)表达的影响。方法成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠40 只,除假手术组大鼠8 只(A组)外,其余大鼠采用改良Feeney 法建立大鼠脑损伤模型,造模成功大鼠分为穴位注药组(B 组)、穴位注水组(C 组)、腹腔给药组(D组)和腹腔注水组(E 组)各8 只,造模后每日分别给予足三里穴位注射胞二磷胆碱或生理盐水,腹腔注射胞二磷胆碱或生理盐水,连续14 d。于伤前及伤后第8、14、15、22 天分别行神经功能缺损评分及旷场实验,28 d 后采用免疫组化方法检测大鼠脑组织GAP-43 水平。结果B组大鼠神经缺损评分改善和旷场试验评分均优于C、D、E组(P<0.05)。B组大鼠脑组织GAP-43 阳性表达多于C、D、E组(P<0.05)。结论足三里穴位注射胞二磷胆碱可促进脑外伤大鼠GAP-43 蛋白表达,促进神经功能改善。