花生四烯酸甘油酯水平对孤独症模型鼠海马神经炎性反应的影响

目的 分析花生四烯酸甘油酯(2-AG)水平升高对孤独症模型鼠海马神经炎性反应的影响,为孤独症谱系障碍(ASD)病因研究提供理论依据。 方法 以丙戊酸钠(VPA)诱导的孤独症模型鼠为研究对象,分为对照组(CON组)、VPA组、VPA+1 mg/kg JZL184组(VPA+1RJ组)、VPA+3 mg/kg JZL184组(VPA+3RJ组)、VPA+10 mg/kg JZL184组(VPA+10RJ组)。采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)检测海马组织中2-AG水平;实时荧光定量PCR(RT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测海马组织中促炎因子TNF-α、iNOS、IL-1β和抗炎因子Arg-1、IL-4、IL-10和IL-13的mRNA表达水平和组织含量。 结果 LC-MS/MS结果显示:VPA组海马组织中2-AG水平显著低于CON组(P＜0.05);VPA+10RJ组2-AG水平显著高于VPA组(P＜0.05)。RT-PCR结果显示:与CON组相比,VPA组中iNOS表达增加(P＜0.05)。与VPA组相比,VPA+1RJ组中IL-1β、Arg-1、IL-10、IL-13表达增加,iNOS表达降低(P<0.05);VPA+3RJ组中TNF-α和iNOS表达降低(P<0.05);VPA+10RJ组中iNOS表达降低,IL-10表达增加(P＜0.05)。ELISA结果显示:与CON组相比,VPA组中iNOS表达上调,Arg-1、IL-10表达降低(P＜0.05)。与VPA组相比,VPA+1RJ组中IL-4表达上调;VPA+3RJ组中iNOS表达降低,IL-10表达上调;VPA+10RJ组中iNOS表达降低,Arg-1、IL-10表达上调(P＜0.05)。 结论 2-AG水平的升高可缓解孤独症模型鼠海马组织中存在的异常神经炎性反应。     

天津市3~7岁孤独症谱系障碍儿童体格发育和营养状况研究

目的 了解天津市3~7岁孤独症谱系障碍(ASD)儿童生长发育状况,为改善ASD儿童生长发育提供参考依据。方法 2016-2019年整群抽取天津市221名3~7岁ASD儿童进行体格测量,各项指标依据2015年中国九市7岁以下儿童体格发育和2008年WHO儿童生长发育标准转化为Z评分,以评价ASD儿童的体格和营养状况,采用儿童孤独症评定量表(CARS)评估ASD儿童症状严重程度。结果 天津市ASD儿童超重/肥胖率为19.0%,年龄别体重Z评分(WAZ)、年龄别身高Z评分(HAZ)、年龄别体重指数Z评分(BAZ)分布曲线向右偏移,胸围及腰围的Z评分分布曲线向+3s外延伸,坐高的Z评分分布曲线向左偏移,呈现生长偏离趋势。男童WAZ(Z=2.053,P<0.05)及超重/肥胖率(χ²=6.572,P<0.05)高于女童,6~7岁组超重/肥胖率高于3~岁和4~岁组(P<0.05),不同ASD症状严重程度间营养状况的差异无统计学意义(χ²=5.321,P>0.05)。结论 天津市ASD儿童超重/肥胖检出率较高,存在体格生长偏离,应加强ASD儿童生长发育监测和肥胖的早期干预。     

肥胖主效基因SH2B1与孤独症谱系障碍认知社交功能的关联研究

目的 研究肥胖主效基因SH2B1与孤独症谱系障碍(ASD)认知和社交功能的关联,为ASD病因学研究提供思路。方法 应用动物行为学实验和转录组测序技术,比较BTBR小鼠(n=6)与对照小鼠(n=6)认知、社交水平差异及SH2B1基因表达水平的差异。构建SH2B1基因敲除小鼠(SH2B1^-/-小鼠)(n=6),比较其与对照小鼠之间认知水平及社交功能的差异,并使用Western-Blot实验探究SH2B1^-/-小鼠海马组织中认知相关蛋白磷酸化水平的改变。结果 BTBR小鼠较对照小鼠认知水平显著降低(P<0.05),社交能力显著下降(P<0.05),SH2B1基因表达水平下调(P<0.05)。SH2B1^-/-小鼠较对照小鼠表现出认知水平降低(P<0.05)以及社交功能损害(P<0.05)。SH2B1^-/-小鼠认知相关蛋白CREB和CaMKⅡ磷酸化水平低于对照组小鼠,差异有统计学意义(t=2.74、3.62,P<0.05)。结论 SH2B1基因可能与ASD认知和社交功能损伤高度相关。     

父母团体认知行为干预对孤独症谱系障碍儿童及家庭治疗效果的影响

目的 对孤独症谱系障碍(ASD)儿童的父母进行团体认知行为干预,分析该干预措施可能对ASD儿童及家庭治疗效果产生的影响。方法 2014年6月-2015年10月从康复机构抽取实验组、对照组各30例ASD儿童,对实验组儿童的父母进行为期10周的团体认知行为干预;收集并比较干预前后两组父母填写的孤独症治疗评估量表(ATEC)、特质应对方式问卷(TCSQ)相关数据。结果 实验组与对照组的ATEC得分比较,在社交项目、总分上的差异有统计学意义(t=2.595、2.808,P<0.05或<0.01);两组TCSQ得分差异对比,积极应对的得分差异有统计学意义(t=-2.174,P＝0.036);ATEC感知觉项目得分与TCSQ积极应对得分呈负相关(r=-0.202,P＝0.027)。结论 团体认知行为干预可能使ASD儿童的父母更多采用积极应对方式,从而影响ASD儿童的社交、感知觉方面的治疗效果。     

孤独症谱系障碍男童注意能力及社交发展特征的初步研究

目的 了解孤独症谱系障碍(ASD)男童注意能力特征,探索注意能力与社交发展的关系。方法 收集2015年7月—2016年7月在上海交通大学医学院附属精神卫生中心儿少门诊就诊的ASD男童37例,采用孤独症行为量表(ABC)对男童症状进行评定,采用长处与困难问卷(SDQ)由父母对男童进行评定,运用孤独症诊断访谈量表修订版(ADI-R)中的社交发展和游戏部分,对ASD男童的自发性共同注意和社会特征进行评定。结果 ASD男童ABC量表的感觉能力、交往能力、运动能力、语言能力、自我照顾能力和症状严重度与SDQ量表的情绪问题、注意不能、同伴交往和总困难程度呈正相关(P<0.01);ADI-R社交发展和游戏部分的表情丰富程度、与同伴一起的想象性游戏、对其他儿童的兴趣、安慰他人、社会性主动提议和不恰当的面部表情得分和SDQ社会化行为因子分呈负相关(P<0.01)。结论 ASD男童在目光对视、社交性微笑、与同伴一起想像性游戏、引导别人注意等自发性共同注意能力存在缺陷,早期发现有助于ASD儿童的早期筛查、早期干预。     

孤独症模型鼠海马N-酰基乙醇胺相关受体及代谢酶的表达研究

目的 检测N-酰基乙醇胺(NAEs)相关受体及其代谢酶在孤独症谱系障碍(ASD)模型鼠海马中的表达,分析NAEs信号与ASD的关联性,为ASD的病因研究提供新的思路。方法 以丙戊酸钠(VPA)诱导的ASD模型鼠为研究对象,进行生长发育和行为学检测;采用Western Blot和RT-PCR检测其海马组织中NAEs相关受体,即内源性大麻素受体(CB1R和CB2R)及其代谢酶花生四烯酸磷脂酰乙醇胺特异性磷脂酶D(NAPE-PLD)和酰胺水解酶(FAAH)的蛋白及mRNA表达水平。结果 自梳实验、三箱实验及水迷宫实验结果显示:与对照组鼠相比,VPA鼠存在重复的行为模式、社会交互能力障碍及学习、记忆能力障碍;Western Blot结果显示:与对照组鼠相比,VPA鼠海马CB1R与FAAH蛋白表达上调(t=3.033、2.865,P＜0.05),CB2R以及NAPE-PLD蛋白表达在两组大鼠间差异无统计学意义(t=1.034、0.290,P＞0.05),且RT-PCR结果显示:CB1R、CB2R、FAAH和NAPE-PLD的mRNA表达水平在两组大鼠海马中差异均无统计学意义(t=2.239、0.747、0.748、0.012,P＞0.05)。结论 ASD模型鼠海马中NAEs受体及水解酶蛋白表达上调,提示低NAEs信号可能与ASD发病存在关联。     

用于孤独症儿童词汇教学的词表设计与其有效性探究

目的 开发一套适合于中国孤独症(ASD)儿童群体进行名词学习的词表,评估其有效性,以期为ASD儿童的语言训练提供材料。方法 筛选出生活中不同类别的最常用的480个名词,并按照难度分为低、中、高3个等级。从中筛选出121个代表性词汇,在3位专家进行内容合理性评估后,通过家长自评报告,评定195名2~8岁ASD儿童和130名正常发育儿童对这些词汇的理解和表达水平,并检验该词表中词汇难度分级的合理性。结果 1)本研究开发的词表经专家评定,词汇选择合适,难度设置合理;2)在组水平,正常儿童理解与表达能力差异无统计学意义(t=1.748,P=0.083),孤独症儿童理解能力显著优于表达能力(t=18.31,P<0.001);在个体水平,两组被试的理解和表达能力发展都有个体异质性;3)多元方差分析结果表明,在正常儿童组,难度主效应显著(F=204.67,P<0.001),年龄主效应显著(F=37.40,P<0.001),二者交互作用显著(F=12.20,P<0.001);在孤独症儿童组,难度主效应显著(F=234.48,P<0.001),年龄主效应显著(F=17.20,P<0.001),二者交互作用显著(F=4.95,P<0.001)。结论 本研究首次设计了适合于孤独症儿童语言教学的名词词表,其内容与难度设置合理,能很好地评估儿童词汇表达与理解水平是否同步,并在正常儿童和孤独症儿童内部区分出词汇发展在不同能力水平的儿童。     

用于孤独症儿童词汇教学的词表设计与其有效性探究

目的 开发一套适合于中国孤独症(ASD)儿童群体进行名词学习的词表,评估其有效性,以期为ASD儿童的语言训练提供材料。方法 筛选出生活中不同类别的最常用的480个名词,并按照难度分为低、中、高3个等级。从中筛选出121个代表性词汇,在3位专家进行内容合理性评估后,通过家长自评报告,评定195名2~8岁ASD儿童和130名正常发育儿童对这些词汇的理解和表达水平,并检验该词表中词汇难度分级的合理性。结果 1)本研究开发的词表经专家评定,词汇选择合适,难度设置合理;2)在组水平,正常儿童理解与表达能力差异无统计学意义(t=1.748,P=0.083),孤独症儿童理解能力显著优于表达能力(t=18.31,P<0.001);在个体水平,两组被试的理解和表达能力发展都有个体异质性;3)多元方差分析结果表明,在正常儿童组,难度主效应显著(F=204.67,P<0.001),年龄主效应显著(F=37.40,P<0.001),二者交互作用显著(F=12.20,P<0.001);在孤独症儿童组,难度主效应显著(F=234.48,P<0.001),年龄主效应显著(F=17.20,P<0.001),二者交互作用显著(F=4.95,P<0.001)。结论 本研究首次设计了适合于孤独症儿童语言教学的名词词表,其内容与难度设置合理,能很好地评估儿童词汇表达与理解水平是否同步,并在正常儿童和孤独症儿童内部区分出词汇发展在不同能力水平的儿童。     

早期介入丹佛模式对孤独症谱系障碍婴幼儿的疗效分析

目的 探讨早期介入丹佛模式(ESDM)对孤独症谱系障碍(ASD)婴幼儿干预效果,为改善ASD预后提供依据。 方法 招募2015年6月—2017年6月中山大学附属第三医院儿童发育行为中心临床诊断为ASD的婴幼儿60例。随机分为两组:实验组30例,均接受ESDM干预;对照组30例,为干预等待的ASD婴幼儿。干预时间为每周1次,每次1 h,持续24周。干预前进行基线系统评估,干预后两组均完成儿童心理教育评估(PEP-3)、Gesell量表评估。 结果 ESDM组和对照组月龄、性别差异无统计学意义,干预前两组沟通、社交互动、重复刻板行为、认知、语言、精细动作差异亦无统计学意义(P>0.05)。干预后ESDM组语言、个人-社交较对照组明显提高,差异具有统计学意义(t=2.215、2.379, P＜0.05);ESDM组认知、语言表达、语言理解、小肌肉、模仿、行为特征-非语言的原积分较对照组明显提升,差异有统计学意义(t=2.336、2.510、2.416、2.578、2.017、2.150,P<0.05)。此外,ESDM组Gesell量表中的语言发育商干预前后的差值高于对照组,差异有统计学意义(Z=2.105,P<0.05)。 结论 经ESDM模式干预后,ASD婴幼儿语言、社交明显改善,认知、语言表达、语言理解、小肌肉、模仿能力明显提升,行为特征-非语言的刻板行为明显减少。     

听觉统合训练对孤独症谱系障碍儿童治疗效果的持续时间研究

目的 研究听觉统合训练对孤独症谱系障碍(ASD)儿童治疗效果的持续时间,为确定听觉统合训练的最佳频率提供依据。方法 2016年7月-2017年12月选取符合ICD-10孤独症诊断标准的65名儿童,分为研究组(n=33)和对照组(n=32),两组均进行一般康复训练,研究组在康复训练时给予1个疗程听觉统合训练。分别用ABC量表及韦氏幼儿智力量表在训练前、训练后1个月、3个月及6个月评估患儿ASD行为及智力水平。结果 训练后1个月,ABC总分及交往、语言因子得分显著下降(P<0.05)。训练后3个月,ABC总分及各因子得分均显著下降,IQ得分显著增加(P<0.01)。训练后6个月,ABC总分、各因子得分较3个月时有所上升(P<0.05),但与治疗前相比,仍有显著下降(P<0.05)。与对照组相比,ABC总分及IQ得分在训练后3个月及6个月时差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 听觉统合训练对于ASD儿童治疗有效,1个月开始起效, 3个月时效果最好,6个月时仍有效果,但略有下降。     

脐血单个核细胞对脑白质损伤低龄大鼠少突胶质细胞及髓鞘碱性蛋白的影响

目的 探讨脐血单个核细胞(umbilical cord blood monocytes,UCBMC)移植对低龄大鼠脑白质损伤(white matter damage,WMD)中少突胶质细胞及髓鞘碱性蛋白表达的影响。方法 将3日龄健康Sprague-Dawley新生大鼠80只随机分为正常对照(control,CON)组、WMD组、WMD+UCBMC组与UCBMC对照组。通过单侧缺血联合缺氧的方法制成WMD模型(每个时间点每组各5只),造模24 h 后,CON组和WMD组经侧脑室注入2 μL PBS,UCBMC 对照组和WMD+UCBMC 组经侧脑室注入3×10⁶UCBMC。移植后24 h、3 d、7 d和14 d,采用2',3'-环核苷酸3'-磷酸二酯酶(CNPase)/活性半胖氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase-3)及髓鞘碱性蛋白(MBP)/4'6-二脒基-2 苯基吲哚(4'6-diamidino-2-phenylindole,DAPI) 免疫荧光双标观察UCBMC移植对纹状体处少突胶质细胞及MBP的变化,并行机制的探讨。结果 移植后24 h、3 d和7 d,WMD组CNPase⁺ Cleaved Caspase-3⁺细胞数均高于CON组、WMD+UCBMC 组与UCBMC 对照组(均P<0.01),且在24 h开始增加,3 d达高峰,7 d有所下降;WMD+UCBMC组CNPase⁺ Cleaved Caspase-3⁺细胞数显著少于WMD组(P<0.01)。移植14 d后,WMD组MBP⁺DAPI⁺细胞数显著少于CON组及UCBMC对照组(P<0.01);WMD+UCBMC组MBP⁺DAPI⁺细胞数显著高于WMD组,仍少于CON组(P<0.01)。结论 UCBMC侧脑室移植可减少脑白质损伤低龄大鼠的少突胶质细胞的凋亡,减少髓鞘的脱失,从而修复损伤的脑白质。     

孤独症谱系障碍儿童血清多不饱和脂肪酸水平的研究

目的 研究孤独症谱系障碍(ASD)儿童血清多不饱和脂肪酸(PUFAs)的表达水平,为ASD的诊治提供理论依据。方法 2020年12月—2021年6月在上海市儿童医院儿童保健科选取45例ASD儿童及30例对照组儿童为研究对象,通过液相-串联质谱法对其外周血血清进行PUFAs含量测定;通过简易孤独症饮食行为量表(BAMBI)及自制膳食调查问卷了解ASD儿童与对照组饮食行为习惯及饮食结构上的差异,进一步分析ASD儿童血清PUFAs表达水平的影响因素。结果 ASD组儿童血清中二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、花生四烯酸(AA)、亚油酸(LA)、总n-3 PUFAs及总n-6 PUFAs下降(t=2.81、2.04、2.94、2.33、2.11、2.63,P＜0.05),其中EPA及AA下降明显(P＜0.01)。ASD组儿童在拒食行为、与ASD特征相关喂养问题、食物谱狭窄及总分方面均高于对照组儿童(t=2.93、13.42、2.22、8.40,P＜0.05),ASD组儿童对饮食的总体兴趣低于对照组(t=2.70,P＜0.05),尤其对鱼类的兴趣偏低(t=5.03,P＜0.05)。结论 ASD儿童血清多数PUFAs含量比正常儿童低,可能与饮食行为及饮食偏好有关,补充PUFAs可能成为ASD儿童的辅助治疗手段之一。     

孤独症大鼠前额叶皮质中Notch相关蛋白的表达

目的 观察孤独症大鼠前额叶皮质中Notch信号通路相关蛋白发状分裂相关增强子(Hes1)和星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的变化,探讨Notch信号通路在孤独症发病机制中的作用。方法 健康繁殖期Wistar雌鼠20只,体重250~260 g,随机选取15只在妊娠12.5 d(E12.5)腹腔注射丙戊酸钠(VPA),其子代为孤独症模型组;其余5只则注射等量生理盐水,子代为对照组。通过比较三箱实验、自梳理实验验证模型建立是否成功;Western blot方法对比孤独症模型组与对照组大鼠出生后42 d(P42)前额叶皮质中Hes1以及GFAP表达水平的变化。结果 1)成功建立孤独症动物模型:与正常对照组比较,三箱实验显示模型组大鼠交互能力障碍、缺乏对新鲜事物的偏好性;自梳理实验显示模型组理毛时间显著增加(P<0.05);2)与正常组比较,模型组大鼠P42前额叶皮质Hes1表达显著升高(P<0.05),GFAP表达显著升高(P<0.05)。结论 孤独症大鼠P42前额叶皮质Notch信号通路活化增多,且伴星形胶质细胞增多,提示孤独症的发病机制可能与Notch信号通路的异常活化有关。     

生命早期母婴分离对大鼠成年后催产素水平及情绪、行为障碍的影响

目的探讨大鼠生命早期母婴分离对成年期异常行为、情绪问题及体内催产素及相关分子表达的影响。方法将新生SD大鼠随机分为对照组和新生期母婴分离组(NMS组),NMS组新生鼠生后第1~14天每天与母鼠分离2 h,6周龄进行行为学测试,包括旷场测试、三厢社交测试、高架十字迷宫和强迫游泳测试。Western blot方法检测大鼠下丘脑组织CD38蛋白表达水平,ELISA检测大鼠血清OXT水平。结果与对照组相比,NMS大鼠成年后自身梳理时间[(29.19±3.55)s,(55.90±4.03)s,P<0.001]和次数(6.67±0.74,9.53±0.73,P<0.05)均显著增加,提示刻板行为增加;与同伴互动时间减少[(350.40±41.25)s,(260.30±33.43)s,P<0.05],提示社交功能受损;对新环境的探索时长[高架开放臂:(78.15±20.95)s vs.(36.45±5.35)s,P<0.05;旷场中央区:(153.70±34.41)s vs.(13.84±4.80)s,P<0.01]减短、排便次数增多(1.72±0.24,3.25±0.26,P<0.001),提示焦虑样行为增加;强迫游泳试验中首次不动潜伏期缩短[(59.02±8.64)s,(33.97±5.87)s,P<0.05],提示抑郁样行为加重。此外,NMS大鼠下丘脑CD38蛋白表达水平(P<0.01)、血清OXT含量(P<0.05)明显降低。结论 1)生命早期母婴分离可能导致大鼠成年后出现孤独症样行为,焦虑、抑郁样行为。2)母婴分离可能通过降低大鼠下丘脑组织中CD38蛋白表达,进一步引起OXT释放减少,导致相关行为异常。     

孤独症谱系障碍儿童感觉异常现况调查及相关临床特征的关联分析

目的 分析孤独症谱系障碍(ASD)儿童感觉异常现状及其相关因素,为ASD的临床诊断和行为矫正提供理论依据。方法 收集2015年8月—2016年1月在中山大学附属第三医院确诊的121例ASD儿童的孤独症诊断会谈量表(ADI-R)分析感觉异常情况;孤独症教育心理评核(第三版)(PEP-3)评估各方面能力;中国韦氏幼儿智力测试(简称智测)或Gesell量表评估智力或发育商,孤独症儿童进食行为量表(BAMBI)评估喂养问题;并分析感觉异常的相关临床特征的关联分析。结果 无感觉异常组23例(19.0%),轻度感觉异常组(简称轻度组)64例(52.9%),重度感觉异常组(简称重度组)34例(28.1%)。轻度组和重度组感觉异常种类显著多于无感觉异常组(χ²=88.042,P＜0.01),重度组感觉异常种类显著多于轻度组(P＜0.01)。在ADI-R中,无语言能力儿童重度感觉异常组A部分(社会互动异常)(19.59±4.67)和B部分(沟通异常)(12.36±1.76)均高于无感觉异常组(15.79±1.94、9.86±3.34,F=3.032、5.190,P＜0.05),且重度组B部分(沟通异常)高于轻度组(10.79±2.32,P＜0.05)。在PEP-3中,轻度组和重度组个人自理百分比得分均低于无感觉异常组(χ²=8.641,P＜0.01)。三组间智力测试和Gesell量表评估结果比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。BAMBI评估显示,轻度组和重度组食物谱狭窄得分均高于无感觉异常组(χ²=6.806,P＜0.05)。无语言ASD儿童的感觉异常与ADI-R的A部分及B部分得分呈正相关(r_s=0.260、0.359,P＜0.01),ASD儿童的感觉异常与个人自理百分比呈负相关(r_s=-0.252,P=0.005),与食物谱狭窄得分呈正相关(r_s=0.224,P=0.013)。结论 81.0%的ASD儿童有感觉异常,重度组感觉异常的种类较多。感觉异常程度严重的ASD儿童,社交能力较弱,饮食问题更多。ASD儿童的感觉异常与智力测试和Gesell量表评估结果不相关。感觉异常可能是ASD儿童社交能力的预测因子。