烟雾暴露对卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型肺组织激活素A mRNA和蛋白表达的影响

目的分析烟雾暴露对卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型肺组织激活素A mRNA和蛋白表达的影响。方法取28只健康成年雄性SD大鼠,按照随机分配原则,分为空白对照组(正常大鼠,不采取任何处理)、阴性对照组(正常大鼠+烟雾暴露)、模型组(制备卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型)、实验组(急性支气管哮喘大鼠+烟雾暴露),每组各7只。行苏木精-伊红染色,观察各组大鼠肺组织病理学改变;采用免疫印迹法检测大鼠肺组织中激活素A蛋白表达水平;根据实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠肺组织中激活素A mRNA相对表达量。结果经病理学染色结果可知,空白对照组肺组织病理学未见异常,而阴性对照组、模型组及实验组肺组织出现不同程度的病理学改变,且实验组更加明显。经免疫印迹法检测可知,阴性对照组、模型组及实验组肺组织中激活素A蛋白表达水平较空白对照组均明显升高(P <0. 05);模型组肺组织中激活素A蛋白表达水平较阴性对照组明显升高(P <0. 05);实验组肺组织中激活素A蛋白表达水平较阴性对照组和模型组明显升高(P <0. 05)。经实时荧光定量聚合酶链反应检测可知,相比空白对照组,阴性对照组、模型组及实验组肺组织中激活素A mRNA相对表达量均明显上调(P <0. 05);相比阴性对照组,模型组肺组织中激活素A mRNA相对表达量明显上调(P <0. 05);相比阴性对照组和模型组,实验组肺组织中激活素A mRNA相对表达量明显上调(P <0. 05)。结论在卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型中,经烟雾暴露可促进大鼠肺组织激活素A蛋白表达,提高激活素A mRNA表达量,并进一步导致气道炎症加重。     

黄芪总皂苷对大鼠缺血心肌血管内皮生长因子蛋白表达的影响

目的探讨黄芪总皂苷对急性心肌梗死（ AMI）大鼠缺血心肌组织血管内皮生长因子（ VEGF）蛋白表达水平的影响。方法雄性Wistar大鼠24只,建立AMI模型,术后24 h存活大鼠随机分为药物组（n＝8）、对照组（n＝8）,另设假手术组（n＝8）。药物组给予黄芪总皂苷水溶液2．5 mg/（kg· d）腹腔注射,对照组及假手术组给予等体积生理盐水,4周处死大鼠。心肌组织取材,Ⅷ因子染色计数微血管数（ MVC）及微血管密度（ MVD）,免疫组化法观察缺血心肌VEGF蛋白表达水平。结果药物组及对照组大鼠缺血心肌MVC、MVD均高于假手术组,且药物组MVC、MVD高于对照组（P＜0．05）;药物组及对照组大鼠缺血心肌VEGF蛋白表达均高于假手术组（P＜0．01）,且药物组高于对照组（P＜0．01）。结论黄芪总皂苷促进大鼠缺血心肌血管新生,同时可上调缺血心肌组织VEGF蛋白表达水平。     

大鼠急性心肌梗死后ACE、ACE2基因异常表达的意义及福辛普利干预的影响

目的研究急性心肌梗死（AMI）后左室梗死区及非梗死区ACE、ACE2 mRNA的表达以及福辛普利对ACE、ACE2 mRNA表达的影响。方法结扎冠状动脉前降支诱导大鼠急性心肌梗死，AMI后24h存活的24只大鼠随机分为AMI组、福辛普利组，每组8只。另设8只假手术组；术后24h开始直接灌胃给药，AMI及假手术组大鼠灌等量生理盐水；用药28d后，用RT-PCR法检测左心室梗死区及非梗死区心肌ACE和ACE2 mRNA表达的情况。结果大鼠AMI 28d后左心室梗死区及非梗死区心肌ACE、ACE2 mRNA表达均较假手术组明显升高（P〈0．01），福辛普利组梗死区及非梗死区ACE mRNA表达较心梗组均显著降低（P〈0．05），但仍高于假手术组（P〈0．05）；福辛普利对ACE2 mRNA的表达几乎无影响，心梗组及福辛普利组梗死区及非梗死区ACE2 mRNA表达无明显差异（P〉0．05）。结论AMI后ACE2 mRNA表达增多在心肌损伤后肾素血管紧张素系统有关的血管紧张素肽的产生与降解的负性调节中起着重要的作用。     

肝细胞生长因子在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的研究肝细胞生长因子（简称HGF／SF）表达与肺癌微血管密度及肺癌预后的相关性。方法应用免疫组化方法和图像分析仪分析对49例手术切除非小细胞肺癌（NScLc）标本进行检测分析。结果HGF阳性表达率63．3％，HGF阳性表达主要出现肺癌组织中癌细胞胞浆内，HGF表达与肺癌的微血管生成及肺癌的进展有关，其中Ⅲ期肺癌组HGF阳性率为85．7％高于Ⅰ、Ⅱ期组（P＜0．005）；有淋巴结转移N1N2组HGF阳性率分别为91．7％和90．9％，高于无淋巴结转移N0组（46．2％）（P＜0．005）；2年生存率HGF表达阳性组（51．6％）明显低于HGF表达阴性组（83．3％）（P＜0．05）；HGF表达阳性肺癌组织中微血管密度明显高于HGF表达阴性组（P＜0．05）。结论HGF是促进肺癌组织血管生成的重要因素，可作为判断肺癌患者预后的重要指标。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心功能及bcl-2和caspase-3mRNA表达水平的影响

目的观察急性心肌梗死大鼠应用骨髓间充质干细胞（MSCs）移植前后心功能及凋亡相关蛋白bcl-2和caspase-3 mRNA的变化,以期了解骨髓间充质干细胞移植治疗心梗的机制。方法40只SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组、假手术组、心梗组、移植组,每组各10只。心梗组和移植组大鼠分别结扎前降支造成心梗模型。取大鼠骨髓,体外分离扩增培养MSCs。术前4组大鼠进行超声心动图检测心功能,结扎后移植组立即予MSCs多点注射到大鼠心肌梗死区周边,而梗死组和假手术组注射同剂量培养液,对照组不注射。饲养8周后,分别予超声心动图心功能检测。取梗死周边区心肌行RT-PCR检测bck2和caspase-3mRNA的表达。结果术前4组大鼠心功能指数无显著差异（P〉0．05）;而MSCs移植后,梗死组大鼠心肌LVESD、LVEDD较其它3组明显增高,差异具有显著性（P〈0．05）;而移植组又较对照组和假手术组明显增高（P〈0．05）;而对照组和假手术组在上述指标中无显著差异（P〉0．05）;梗死组大鼠EF较其它3组明显降低（P〈0．05）;而移植组又较对照组、假手术组明显降低（P〈0．05）;而对照组与假手术组之间无显著差异（P〉0．05）。bd-2mRNA在对照组和假手术组表达较少,而在梗死组表达增加,差异有显著性（P〈0．05）;在移植组表达更多,与梗死组相比有显著性（P〈0．05）;caspase-3在对照组和假手术组表达较少,在梗死组表达增加,有显著差异（P〈0,05）;在移植组表达又较梗死组表达减少,有显著差异（P〈0．05）;但与对照组和假手术组相比,表达增加（P〈0．05）。结论急性心肌梗死移植MSCs后,心功能得到改善,心肌凋亡得到抑制。     

心肺复苏后大鼠血浆中微小核糖核酸在心肌损伤中的变化及其意义

目的本研究探讨心肺复苏后大鼠血浆中心肌损伤相关微小核糖核酸(miRNA)的变化及其意义。方法将64只Sprague-Dawley大鼠分为对照组和实验组,每组各32只。采用窒息法建立大鼠心肺复苏模型,两组分别于气管切开后(对照组)或心肺复苏后(实验组)3、6、12、24 h取静脉血,检测各时间点血浆miRNA-1、miRNA-21、miRNA-126、miRNA-133a、miRNA-210、miRNA-320及miRNA-499的表达水平,并采用受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积评价两组大鼠血浆各miRNA对心搏骤停-心肺复苏后心肌损伤的预测价值。结果实验组与对照组间不同时间点miRNA-1、miRNA-21、miRNA-126、miRNA-133a、miRNA-210、miRNA-320和miRNA-499相对表达量比较,差异均有统计学意义(F=223.037、635.809、51.557、167.260、93.157、296.361、622.023,P均0.001);进一步两两比较发现,miRNA-1、miRNA-133a和miRNA-499在各时间点的相对表达量较对照组均明显上升(P均0.05);而miRNA-21在各时间点相对表达量较对照组均显著下降(P均0.001);此外,miRNA-126在3、6、12 h的相对表达量较对照组均明显下调(P均0.001),而在24 h的相对表达量与对照组比较则显著上调(P0.001)。miRNA-210在6 h、12 h的相对表达量和miRNA-320在3、6、12 h的相对表达量较对照组均呈上调趋势(P均0.05)。实验组中,miRNA-1,miRNA-133a,miRNA-210在3 h的相对表达量与24 h的相对表达量比较,差异均无统计学意义(P均0.05),其余各时点比较差异均具有统计学意义(P均0.05);miRNA-21和miRNA-126在3 h与6 h的相对表达量比较、6 h与12 h的相对表达量比较,差异均无统计学意义(P均0.05),其余各时间点间的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P均0.05);而miRNA-320和miRNA-499各个时间点的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P均0.05)。ROC曲线分析结果显示miRNA-1、miRNA-21、miRNA-126、miRNA-133a、miRNA-320及miRNA-499的ROC曲线下面积分别为:0.938、0.912、0.859、0.914、0.805和0.969,敏感度分别为:0.750、1.000、0.875、0.750、1.000和0.875,特异度分别为:1.000、0.750、0.750、1.000、0.750和1.000(P均0.05),提示miRNA-1、miRNA-21、miRNA-126、miRNA-133a、miRNA-320及miRNA-499对心肺复苏后心肌损伤具有预测价值。结论大鼠心肺复苏后血浆中各miRNA的相对表达量在心肌损伤中有不同的变化,其中miRNA-1、miRNA-21、miRNA-126、miRNA-133a、miRNA-320及miRNA-499对心肺复苏后心肌损伤均具有预测价值。     

上调miRNA-22表达对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭的影响及与VEGF和P53蛋白表达的关系研究

目的研究上调miRNA-22表达对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭的影响及与血管内皮生长因子(VEGF)和P53蛋白表达的关系。方法前瞻性收集新疆维吾尔自治区人民医院的卵巢癌组织标本112例(A组)、卵巢癌旁组织标本85例(B组)及正常卵巢组织标本75例(C组)。采用实时荧光定量PCR法对三组标本中的miRNA-22表达量进行检测。将卵巢癌SKOV-3细胞株分为转染miRNA-22-mimic(转染组)、miRNA-22-NC(空白载体组)及正常对照组。采用实时荧光定量PCR法对各组细胞中的miRNA-22表达量进行测定,通过Transwell小室法对各组细胞的侵袭能力进行检测,并用Western blot法对各组细胞中的P53及VEGF蛋白表达情况进行检测。结果 A组miRNA-22表达量较B、C组均明显下降(P 0. 05),而B、C组miRNA-22表达量的比较,并无显著差异(P 0. 05)。相比正常对照组与空白载体组,转染组细胞中的miRNA-22表达量明显升高(P 0. 05),而正常对照组与空白载体组细胞中miRNA-22表达量的比较,无显著差异(P 0. 05)。Transwell小室法检测结果发现,转染组卵巢癌SKOV-3细胞株侵袭能力较正常对照组与空白载体组明显减弱(P 0. 05),而正常对照组与空白载体组侵袭细胞数的比较,无显著差异(P 0. 05)。Western blot法检测结果发现,转染组细胞中P53和VEGF蛋白表达水平较正常对照组与空白载体组明显下降(P 0. 05),而正常对照组与空白载体组细胞中P53和VEGF蛋白表达水平的比较,无显著差异(P 0. 05)。结论上调miRNA-22表达可起到阻滞卵巢癌SKOV-3细胞株侵袭的作用,其机制可能与P53和VEGF蛋白表达水平下降密切相关。     

利拉鲁肽对NAFLD大鼠的保护作用及其与ERp46蛋白表达的相关性研究

目的研究利拉鲁肽对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的保护作用及其与ERp46蛋白表达的相关性。方法取24只雄性SD大鼠随机分为对照组(8只,正常饲养)和实验组(16只,高脂饮食);喂养3个月后,将实验组随机分为A组(给予生理盐水)和B组(给予利拉鲁肽100 g/kg)各8只。各组均行苏木精-伊红(HE)染色处理,并进行正常葡萄糖-高胰岛素钳夹试验,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡情况;采用Western印迹法对各组大鼠肝脏组织中ERp46蛋白的表达情况进行检测。结果 A组葡萄糖输注率较对照组明显下降(P 0. 05); B组大鼠葡萄糖输注率较A组显著升高,但较对照组明显下降(P 0. 05)。A组肝细胞凋亡率较对照组明显升高(P 0. 05); B组大鼠肝细胞凋亡率较A组明显降低,但较对照组仍明显升高(P 0. 05)。A组大鼠肝脏组织中ERp46蛋白表达水平较对照组显著下降(P 0. 05); B组大鼠肝脏组织中ERp46蛋白表达水平较A组明显上调(P 0. 05),而与对照组表达水平的比较,无显著差异(P 0. 05)。结论利拉鲁肽对NAFLD大鼠肝脏组织具有一定的保护作用,其可能通过提高ERp46的表达水平而发挥减轻NAFLD大鼠胰岛素抵抗和肝脏脂肪变性、减少肝细胞凋亡的作用。     

鹿角方对压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及其mRNA表达的影响

目的：观察压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及其mRNA表达的改变及鹿角方对其的影响。方法：36只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、鹿角方组，各组12只。建立腹主动脉狭窄所致充血性心力衰竭心肌肥厚大鼠模型，观察左室质量指数(left venwicular mass index，LVMI)，采用免疫组织化学染色方法观察心肌Ⅰ，Ⅲ型胶原的改变，采用RT-PCR方法观察心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA的表达，并采用放射免疫分析方法检测血浆和心肌血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)水平。结果：模型组LVMI[(3．15&;#177;0．47)／1000]明显高于假手术组[(2．24&;#177;0．12)／1000]，鹿角方组LVMI[(2．60&;#177;0．44)／1000]与模型组比较有明显下降，差异均有显著性意义(P&;lt;0．001～0．01)；模型组Ⅰ和Ⅲ型胶原均较假手术组显著升高，鹿角方组较模型组明显下降，差异均有显著性意义(P&;lt;均0．01)。模型组Ⅰ和Ⅲ型胶原mRNA的表达均较假手术组显著升高，鹿角方组较模型组明显下降差异均有显著性意义(P&;lt;均0．05)。模型组血浆和左室心肌AngⅡ水平较假手术组显著升高。鹿角方组血浆AngⅡ和左室心肌AngⅡ水平明显降低，差异均有显著性意义(P&;lt;0．001～0．01)。结论：压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及其mRNA的表达增加；鹿角方降低压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及其mRNA的表达；鹿角方逆转心肌纤维化的作用可能与降低循环血浆和局部心肌AngⅡ平，影响Ⅰ和Ⅲ型胶原mRNA表达有关。     

子宫内膜异位症大鼠窦前卵泡、窦状卵泡和凋亡卵泡数目及血清性激素水平变化

目的探讨子宫内膜异位症大鼠血清性激素水平和卵泡发育及凋亡情况。方法取36只雌性SD大鼠,随机分为对照组(未进行处理)、假手术组(开腹后用丝线缝扎)和实验组(建立子宫内膜异位症模型),三组各12只。造模3周后,取实验组大鼠病灶组织,行苏木精-伊红染色,评价病理学改变,判断模型是否成功。取三组大鼠腹主动脉血,采用放射免疫法检测大鼠血清性激素的水平;取大鼠双侧卵巢组织,行TUNEL染色,并比较三组窦前卵泡、窦状卵泡和凋亡卵泡数目。结果实验组成功建立子宫内膜异位症模型,成模率为100. 00%。实验组血清雌二醇水平较对照组和假手术组明显下降(P 0. 05);而三组血清孕酮、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)比较,均无显著性差异(P 0. 05)。实验组窦前卵泡和窦状卵泡数较对照组和假手术组明显减少,凋亡卵泡数较对照组和假手术组明显增多(P 0. 05);而对照组与假手术组窦前卵泡、窦状卵泡和凋亡卵泡数比较,均无显著性差异(P 0. 05)。结论通过建立子宫内膜异位症大鼠模型可知,子宫内膜异位症可导致雌二醇水平降低,对孕酮、LH和FSH水平无显著影响,可促使大鼠窦前卵泡和窦状卵泡数减少,诱导大鼠卵泡凋亡,对其卵泡发育造成极大的影响。     

曲美他嗪对心肌梗死后心力衰竭大鼠左心功能和心肌细胞自噬水平的影响

目的探讨曲美他嗪对心肌梗死后心力衰竭大鼠左心功能和心肌细胞自噬水平的影响。方法取24只雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(不结扎左冠状动脉前降支近段)、模型组(结扎左冠状动脉前降支近段制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型)、给药组(心肌梗死后心力衰竭+曲美他嗪每日15 mg/kg),用药4周,三组各8只。通过小动物超声仪测定三组小鼠左心室功能指标,分别采用苏木精-伊红染色和Masson染色观察小鼠心肌组织病理学改变和纤维化情况,根据原位缺口末端标记法(TUNEL法)荧光染色测定小鼠心肌细胞凋亡情况,分别采用免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应测定小鼠心肌组织中自噬相关蛋白和基因的表达情况。结果模型组和给药组左心室收缩末期内径(LVESD)和左心室舒张末期末径(LVEDD)较假手术组均明显增厚,左心室射血分数(LVEF)较假手术组均明显降低(P 0. 05);给药组LVESD和LVEDD较模型组下降,LVEF较模型组明显升高(P 0. 05)。相比假手术组,模型组梗死区心肌细胞水肿和坏死明显,可见诸多炎性细胞浸润,心肌细胞损伤明显,出现明显蓝色胶原沉积,可见大量凋亡小体;相比模型组,给药组心肌组织病理学改变的情况得以明显改善,少见蓝色胶原沉积和凋亡小体。模型组和给药组P62蛋白的表达水平较假手术组均显著上调,LC3B蛋白的表达水平较假手术组均显著下调(P 0. 05);给药组P62蛋白的表达水平较模型组显著下调,LC3B蛋白的表达水平较模型组显著上调(P 0. 05)。模型组和给药组Atg7 mRNA和Beclin-1 mRNA相对表达量均明显低于假手术组,给药组Atg7 mRNA和Beclin-1 mRNA相对表达量均明显高于模型组(P 0. 05)。结论自噬具有保护心肌细胞的功能,应用曲美他嗪给药可提高心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞自噬水平,从而减轻心功能障碍,抑制心肌细胞凋亡。     

米力农对糖尿病性心肌损伤大鼠心肌收缩力和氧供平衡的影响及其机制

目的探究米力农对糖尿病性心肌损伤大鼠心肌收缩力和氧供平衡的影响及其机制。方法将健康雄性Sprague-Dawley大鼠分为对照组(腹膜注射等量生理盐水)、心肌损伤模型组(注射STZ诱导大鼠糖尿病模型造成心肌损伤)和米力农给药组(模型组基础上腹膜注射0. 5μg/kg米力农治疗,共10周)。生理记录仪监测大鼠左室收缩压(LVSP),左室舒张末压(LVEDP)、最大左室升/降率(±dp/dtmax)及氧动力指标;RT-q PCR检测促炎因子Caspase-3、细胞色素C(Cyt C)、白细胞介素1β(1L-1β)的mRNA表达情况;蛋白印迹分析心肌损伤指标脑钠肽(BNP)、心钠肽(ANP)的蛋白表达;酶联免疫吸附(ELISA)实验检测三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)。结果心肌损伤组较对照组LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax降低、LVEDP升高(P <0. 05),米力农给药组较心肌损伤组LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax升高、LVEDP降低(P <0. 05);心肌损伤组较对照组氧供给、氧消耗降低,氧摄取率升高(P <0. 05),米力农给药组较心肌损伤组氧供给、氧消耗升高,氧摄取率降低(P <0. 05);心肌损伤组较对照组Caspase-3、Cyt C、1L-1β的mRNA以及BNP、ANP蛋白表达均显著升高(P <0. 05),米力农给药组较心肌损伤组以上指标均显著降低(P <0. 05);心肌损伤组较对照组ATP/ADP和ATP/AMP降低,米力农给药组较心肌损伤组以上指标军显著升高(P <0. 05)。结论米力农可以改善大鼠糖尿病引起的心肌线粒体能量代谢异常及心肌收缩能力,增加组织氧供给,对缓解心肌损伤具有重要价值。     

TWEAK在心肌梗死后大鼠心肌组织中表达特点的研究

目的探讨心肌梗死后大鼠心肌组织中肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)的表达。方法 72只雄性SD大鼠随机分成两组:心肌梗死组和假手术组。心肌梗死组采用结扎冠状动脉左前降支(LAD)方法构建大鼠心肌梗死模型。假手术组仅开胸,不结扎冠状动脉。两组大鼠再随机分成24 h、2周、4周、8周共4个亚组。记录两组大鼠术前及术后2周心率、体重变化。应用超声心动图仪测定术前及术后2周大鼠左室舒张末内径(LVEDD)、左室收缩末内径(LVESD),计算左室短缩分数(LVFS)、左室射血分数(LVEF)。Western Blot(WB)检测心肌组织TWEAK蛋白表达情况。结果与假手术组相比,心肌梗死2周后大鼠心率加快(P0.01),大鼠心室前壁运动减弱,LVEDD、LVESD扩大,LVEF、LVFS显著降低(P0.01)。心肌梗死后24 h、2周、4周及8周大鼠心肌组织TWEAK蛋白表达均明显增加(P0.01),至8周时已出现下降趋势。2周时大鼠心肌组织中TWEAK表达量与LVEDD、LVESD呈正相关,与LVEF、LVFS呈负相关(P0.01)。结论心肌梗死大鼠心肌组织的TWEAK表达增高,并随着梗死后时间推移而逐渐升高,至8周时出现下降趋势。心肌梗死2周后大鼠心室腔扩大,心脏收缩功能降低,与心肌组织中TWEAK的表达存在相关性,提示TWEAK可能参与心肌梗死后心室重构过程。     

七氟烷后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与NCX1的相关性研究

目的研究七氟烷后处理(Sevo Po C)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及与钠钙交换体1(NCX1)的相关性。方法取36只SD大鼠,构建离体心脏灌注模型,待血流动力学稳定0. 5 h后,缺血0. 5 h复灌1 h构建大鼠MIRI模型,随机分为对照组(离体心脏灌注KH液2 h)、模型组(离体心脏灌注KH液0. 5 h,停止灌注0. 5 h,接着恢复灌注1 h)和实验组(复灌即刻用3%的七氟烷持续灌注15 min,其他同模型组),三组各12只。比较三组大鼠平衡灌注期(T0)、再灌注0. 5 h(T1)和再灌注1 h(T2)各项心功能指标的变化情况,采用免疫印迹法检测三组大鼠NCX1、兰尼碱受体2(RyR2)及L型钙通道(LTCCs)蛋白的表达水平,并用实时荧光定量PCR法检测大鼠NCX1、RyR2及LTCCs mRNA的相对表达量。结果相比T0,模型组再灌注0. 5 h(T1)和再灌注1 h(T2)左心室舒张末期压力(LVEDP)显著增高(P 0. 05),而最大左心室发展压下降速率(-dp/dt)、最大左心室发展压上升速率(+p/dt)、心率与左心室发展压的乘积(RPP)显著下降(P 0. 05);相比对照组,模型组T1和T2时LVEDP显著增高(P 0. 05),而-dp/dt、+dp/dt和RPP显著下降(P 0. 05);相比T0,实验组T1和T2时LVEDP显著增高(P 0. 05),T1和T2时LVEDP较对照组明显增高,而较模型组显著下降(P 0. 05);实验组T1时-dp/dt较模型组显著增高(P 0. 05),T2时-dp/dt较T0显著下降,亦较对照组显著下降(P 0. 05);实验组T1和T2时+dp/dt和RPP较模型组显著增高(P 0. 05)。三组大鼠RyR2和LTCCs蛋白表达水平的比较,无显著差异(P 0. 05);模型组大鼠NCX1蛋白表达水平较对照组明显升高(P 0. 05),而实验组大鼠NCX1蛋白表达水平较模型组明显下降(P 0. 05)。三组大鼠NCX1、RyR2及LTCCs mRNA相对表达量的比较,无显著差异(P 0. 05)。结论 Sevo Po C可促进MIRI大鼠心功能恢复,其具有保护MIRI的作用,而这一保护作用可能与其具有抑制NCX1表达的作用密切相关。     

大鼠脑动静脉瘘模型硬脑膜中血管内皮生长因子表达与超微结构变化

目的：探讨大鼠脑动静脉瘘模型硬脑膜中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表达及其与血管超微结构改变的关系。方法：选Wistar雄性大鼠24只(实验组：n=12；对照组：n=12)，右侧颈总动脉和颈外静脉端一端吻合，同时结扎上矢状窦，建立大鼠脑动静脉瘘模型的动物模型；90d后采用免疫组化方法检测硬脑膜血管内皮细胞中VEGF的表达和血管生成情况，透射电镜观察血管壁超微结构变化。结果：对照组的硬脑膜血管中VEGF仅呈微弱表达，其吸光度值(A)为2．12&;#177;0．59，实验组硬脑膜中血管内皮细胞VEGF表达A值为8．66&;#177;1.75，两者相比实验组微血管生成数量显著增高(P＜0．05)；微血管密度(&;#215;200倍计数)对照组为(3．04&;#177;0．31)／mm^2，实验组为(11．70&;#177;2．36)／mm^2，两者相比实验组微血管生成密度显著增高(P＜0．05)。而且实验组血管内皮细胞的间隙增宽，平滑肌数量减少，胶原组织增多。结论：大鼠脑动静脉瘘模型硬脑膜血管中VEGF表达升高，可能与血管生成及血管的超微结构改变有重要关系。     

氯沙坦对百草枯中毒致大鼠肺损伤的改善作用及与ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴表达的关系

目的分析氯沙坦对百草枯中毒致大鼠肺损伤的改善作用及与ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴表达的关系。方法将36只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和实验组,三组各12只。对照组给予生理盐水;模型组给予百草枯溶液18 mg/kg,于一次性腹腔注射;实验组给予百草枯溶液18 mg/kg,于一次性腹腔注射,待0. 5 h后应用氯沙坦溶液进行灌胃,每日10 mg/kg。1周、2周、3周取各组大鼠肺组织,对其肺系数进行计算以评估其肺水肿的状况;采用HE染色对各组大鼠肺泡炎的程度进行观察,并用Masson染色评估大鼠肺纤维化的严重程度;采用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠肺组织匀浆中Ang-(1-7)和转化生长因子β1(TGF-β1)的水平,并通过免疫组织化学法对各组大鼠肺组织中Mas受体和血管紧张素转换酶II(ACE2)蛋白的表达水平进行检测。结果在染毒后1周、2周、3周时,模型组和实验组肺系数较对照组均显著升高(P 0. 01),而实验组各时间点时的肺系数较模型组均显著下降(P 0. 01)。在染毒后1周、2周、3周,模型组出现明显肺泡炎症,且随着染毒时间的增加,可出现肺纤维化,实验组肺泡炎症程度轻于模型组,实验组肺纤维化程度较模型组明显减轻。随着染毒时间的增加,Ang-(1-7)和TGF-β1在模型组与实验组肺组织匀浆中的水平均逐渐升高,且模型组与实验组各时间点Ang-(1-7)和TGF-β1的含量较对照组均显著升高(P 0. 01);染毒后1、2、3周,Ang-(1-7)在实验组肺组织匀浆中的水平较模型组明显升高,而TGF-β1的含量较模型组显著下降(P 0. 01)。随着染毒时间的增加,模型组与实验组大鼠肺组织中Mas受体和ACE2蛋白的表达水平均显著升高(P 0. 05),且实验组染毒后2周、3周Mas受体和ACE2蛋白的表达水平较模型组均显著升高(P0. 05)。结论在百草枯中毒后,肺组织匀浆中Ang-(1-7)和TGF-β1的表达水平明显上调,而氯沙坦可能通过升高ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴的表达水平而起到下调纤维化因子TGF-β1表达的作用,因此可改善百草枯中毒所引起的肺损伤和肺纤维化的形成。     

脂肪干细胞移植对脑缺血大鼠脑组织MAG和OMgp表达的影响

目的观察脂肪干细胞(ADSC)移植对脑缺血模型大鼠缺血侧脑组织中髓鞘相关糖蛋白(MAG)和少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)表达的影响。方法 SD大鼠分为假手术组、模型组和ADSC组。体外分离培养ADSC。模型组和ADSC组线栓法制作大鼠脑缺血模型,假手术组接受相似手术处理,但是不插入线栓。ADSC组于造模成功后经侧脑室注射ADSC悬液,模型组注射等量磷酸盐缓冲液。各组大鼠分别于4 d、7 d和14 d处死取材,采用免疫组织化学法和Western blot法检测大鼠缺血侧脑组织中MAG和OMgp表达情况。结果模型组和ADSC组各个时间点缺血侧脑组织中MAG和OMgp表达水平较假手术组明显升高(P 0. 05); ADSC组各个时间点缺血侧脑组织中MAG和OMgp表达水平较模型组明显降低(P 0. 05)。结论 ADSC移植促进大鼠脑缺血后神经功能的恢复,其机制可能与抑制MAG和OMgp表达有关。     

PA-MSHA预处理对严重脓毒症大鼠肠组织和腹腔灌洗液细胞因子和肠道ICAM-1、VCAM-1表达的影响

目的分析铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝素(PA-MSHA)预处理对严重脓毒症大鼠肠组织和腹腔灌洗液中细胞因子和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法取雄性SD大鼠30只,随机分为对照组(未建立脓毒症模型)、模型组(建立严重脓毒症模型)和实验组(建立严重脓毒症模型+给予PA-MSHA预处理),三组各10只,分别进行相应处理。通过苏木精-伊红染色观察三组大鼠病理学改变,采用酶联免疫吸附试验法对三组大鼠肠道内VCAM-1和ICAM-1水平进行检测,采用相同方法检测大鼠腹腔灌洗液和肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)及白介素-10(IL-10)的水平,并进行比较。结果对照组肠上皮细胞未见异常,肠腺体未见异常,未出现炎症细胞浸润;模型组和实验组均出现不同程度的肠上皮细胞破坏、毛细血管扩张、固有层水肿及炎症细胞浸润,但实验组肠道损伤程度较模型组明显减轻。模型组和实验组肠组织中VCAM-1和ICAM-1水平较对照组显著升高(P 0. 05)。模型组和实验组腹腔灌洗液中TNF-α、IL-6及IL-10的水平较对照组显著升高(P 0. 05);实验组腹腔灌洗液中TNF-α、IL-6及IL-10的水平较模型组显著下降(P 0. 05)。模型组和实验组肠组织中TNF-α、IL-6及IL-10的水平较对照组显著升高(P 0. 05);实验组肠组织中TNF-α和IL-6较模型组显著下降,IL-10的水平较模型组显著升高(P 0. 05)。结论 PA-MSHA预处理可促使局部细胞因子和VCAM-1及ICAM-1水平下降,从而可有效减轻脓毒症大鼠肠道炎症损害,缓解肠道炎症反应,减轻脓毒症病情进展,因此对脓毒症导致的肠道损伤具有良好的预防效果。     

金乌骨通胶囊对去势大鼠骨质疏松作用的研究

目的研究金乌骨通胶囊对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用。方法雌性Wistar大鼠40只被随机分为正常对照组、假手术组、卵巢切除组、实验组,每组10只。骨质疏松模型成功后,实验组大鼠灌服金乌骨通胶囊,正常对照组、假手术组和卵巢切除组按照实验组的方法给大鼠灌服等容积的蒸馏水,治疗3个月,测定大鼠腰椎和胫骨上端骨密度及外周血清中雌激素(E2)、降钙素(CT)的含量。结果假手术组腰椎、胫骨上端骨密度明显高于卵巢切除组及实验组(P0.05),但与正常对照组比较差异未见统计学意义(P0.05);实验组腰椎、胫骨上端骨密度明显高于卵巢切除组(P0.01)。假手术组血清E2明显高于卵巢切除组及实验组(P0.01),但与正常对照组比较差异未见统计学意义(P0.05);实验组血清E2虽较卵巢切除组有所升高,但差异未见统计学意义(P0.05)。卵巢切除组血清CT较假手术组明显降低(P0.01),正常对照组、实验组与假手术组比较差异未见统计学意义(P0.05);实验组血清CT较卵巢切除组明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论金乌骨通胶囊减轻骨吸收、促进骨形成、延缓骨质疏松的发生和发展可能与卵巢切除大鼠血清CT升高有关,而且不依赖于雌激素的表达。     

游泳对心肌梗死大鼠心脏微血管的保护作用及机制研究

目的:研究游泳对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠康复阶段心脏微血管的保护作用及机制。方法:选用Wistar大鼠(160—180g)80只,采用随机区组设计法分成4组:假手术组、模型组、游泳组、地奥心血康组,每组20只。通过结扎左冠状动脉主干制备MI模型,假手术组除不结扎冠状动脉外,其余操作与模型组动物完全相同。MI模型制备结束后14天,游泳组大鼠进行游泳训练,共计8周。地奥心血康组按照150 mg/kg·d灌胃给药,连续给药8周,模型组和假手术组同样方法灌胃相同体积生理盐水。采用超声心动图系统和BL—420F生物机能实验系统检测心功能及心电图;凝胶墨汁实验检测心脏微血管密度;Western Blot检测Caspase-3、PECAM-1、PI3K、pPI3K、AKT、p-AKT、eNOS、p-eNOS的蛋白表达;NO试剂盒测心脏组织中NO的含量。结果:游泳组及地奥心血康组较模型组ST段显著降低(P=0.002,P=0.000);超声结果显示游泳组及地奥心血康组较模型组左室射血分数(LVEF)显著升高(P=0.038,P=0.003),游泳组及地奥心血康组左室短轴缩短率(LVFS)较模型组显著升高(P=0.028,P=0.000);HE结果表明游泳及地奥心血康显著减小了模型大鼠的心脏梗死面积;Western blot结果显示游泳组及地奥心血康组较模型组Caspase-3蛋白表达量显著下调(P=0.035,P=0.000);此外,游泳组及地奥心血康组心脏微血管密度较模型组显著增大(P=0.015,P=0.000);同时,Western Blot结果显示游泳组较模型组PECAM-1的蛋白表达量显著上调(P=0.025),游泳组较模型组p-PI3K的蛋白表达量显著上调(P=0.013),游泳组较模型组p-AKT的蛋白表达量显著上调(P=0.02),游泳组较模型组p-eNOS的蛋白表达量显著上调(P=0.02);此外,游泳组较模型组NO含量显著升高(P=0.011)。结论:游泳增加MI大鼠心脏微血管剪切力,激活PECAM-1/PI3K/AKT/eNOS信号通路,促进NO释放,增加梗死区域心脏微血管血流灌注量,抑制心肌细胞凋亡,从而改善MI大鼠的预后。