毛细管电泳-质谱联用法测定灵芝药材中核苷类成分

建立一种用于测定赤芝和紫芝中的核苷类成分的毛细管电泳-质谱联用法(CE-MS)。CE条件为：熔融石英毛细管柱(120 cm×50 μm),缓冲液体系100 mmol/L甲酸-10%甲醇水溶液。运行电压25 kV;毛细管温度25 ℃。MS条件为：0.3%甲酸-75%甲醇水溶液为鞘液,流速3 μL/min;干燥气体流速6 L/min,干燥温度350 ℃;采用电喷雾离子化源(ESI),正离子模式检测,全扫描范围m/z 50～350。以5-氯胞嘧啶阿拉伯糖苷为内标物。结果表明,胞嘧啶、鸟嘌呤、胞苷、腺苷、次黄嘌呤、鸟苷、肌苷和尿嘧啶在线性范围内具有较好的线性关系(除鸟苷外,其他成分R²>0.990)。加样回收率在95.3%～104.6%之间。各待测化合物的最低检测限(LOD)和最低定量限(LOQ)分别分布在0.13～9.85 μg/mL和0.42～20.83 μg/mL之间。测定结果显示赤芝的核苷类成分的含量上高于紫芝。CE-MS适合用于中药中核苷类成分的分析检测。     

HPLC-MS法同时测定钩藤药材中四种生物碱含量

目的:建立钩藤药材中四种生物碱的高效液相色谱-质谱联用含量测定方法。方法:色谱条件:HaloC_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),1%乙酸-水(氨水调pH=5.5)-甲醇-乙腈为流动相,梯度洗脱,流量0.3 mL·min~(-1),柱温35℃。质谱条件:电喷雾离子源,正离子检测方式,多反应监测模式,干燥气温度350℃,干燥气流量9 L·min~(-1),雾化器压力35 psi,毛细管电压4 000 V。结果:钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱和异去氢钩藤碱含量分别为355.5μg·g~(-1)、143.9μg·g~(-1)、93.3μg·g~(-1)、202.7μg·g~(-1)。结论:该方法结果准确,重现性好,可用于测定钩藤药材中的生物碱含量。     

大体积进样-气相色谱-质谱法测定白芍中15种农药残留

目的:建立同时测定白芍中有机氯、有机磷和拟除虫菊酯类等15种农药残留的大体积进样-气相色谱-质谱联用(LVI-GC-MS)分析方法。方法:采用大体积进样-气相色谱-质谱法,色谱柱为DB-5MS毛细管柱(30 m×250μm,0.25μm),程序升温:初始温度40℃保持1 min,然后以20℃/min升至210℃保持2 min,以5℃/min升至280℃保持22 min。进样量15μl,流速1.0 ml/min。结果:各农药在一定质量浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9937～0.9995。在10μg/kg和100μg/kg两个质量浓度水平下,各农药的回收率为60.4%～106.8%(除二甲戊乐灵和4,4’-DDE为53.1%、45.2%外),相对标准偏差(RSD)为3.6%～18.6%,检测限(S/N=3)为0.16～3.59μg/kg。样品中检测到4,4’-DDE,其含量远低于药典规定的残留限量。结论:本研究建立的LVI-GC-MS方法操作简单、准确、灵敏度高、成本低,可以实现白芍药材中多农药残留的快速检测。     

射干异黄酮类化学成分的HPLC-DAD/ESI-MS分析

目的:通过高效液相色谱-二极管阵列光谱检测/电喷雾离子化质谱(HPLC-DAD/ESI-MS)联用技术定性分析射干中的主要化学成分。方法:以70%乙醇超声辅助提取中药射干原药材。高效液相色谱条件:选择YMC ODS-C18 (250 mm×4.6 mm I.D.,5 μm)色谱柱,以20%甲醇水溶液A-70%乙腈水溶液B(0→30→45→65 min,20%→30%→90%→100% B)梯度洗脱,流速为0.45 ml/min,检测波长为265 nm。ESI质谱条件:正离子扫描模式,喷针电压5 000 V,毛细管电压 20 V,干燥气(N2)压力20 psi(1 psi=6 894.8 Pa),质量扫描范围m/z 250～550,雾化温度 300℃。结果:通过 HPLC-DAD/ESI-MS联用技术,分离检测并鉴定出射干中9个主要异黄酮类化学成分。结论:通过 HPLC-DAD/ESI-MS联用技术,为鉴定射干中的化学成分建立起了一种快速、高效的分析方法,也为中药射干的质量控制提供更多的科学依据。     

电喷雾串联质谱法检测大鼠粪样中的樟柳碱及其代谢物

目的 应用液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-MSn)法检测樟柳碱及其大鼠粪样中的代谢物.方法 收集灌胃20 mg樟柳碱的大鼠粪样,用水浸泡后,以乙酸乙酯萃取,采用甲醇-0.01%三乙胺水溶液(以甲酸调节pH 3.5)(60∶40)为流动相,0.2mL·min-1流速,40℃柱温,以及离子源喷射电压5.0 kV,毛细管电压45 V,毛细管温度200 ℃,鞘气(N2)流速40个单位等进行LC-MS及LC-MSn检测原药及其代谢物.和空白粪样及樟柳碱相比较,根据代谢物相对分子质量的变化(△Mr)及其多级质谱数据,鉴定并阐述其结构.结果 在服药后的大鼠粪样中发现5种代谢物,分别为莨菪品、去甲基莨菪品、去甲基樟柳碱、羟基樟柳碱以及樟柳酸等.结论 该方法灵敏、快速、简便、可靠,适合于生物样品中的药物及其代谢物的快速鉴定.     

基于UPLC-MS/MS白芍指纹图谱研究

目的:建立白芍UPLC-MS/MS指纹图谱分析方法,为其质量控制、研究开发和应用提供科学依据。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(1.7μm,100 mm×2.1 mm),以水(A,含0.05%甲酸)—乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;柱温:40℃,流速:0.4 mL·min-1,进样量2μL。结果:建立了白芍UPLC-MS/MS指纹图谱的共有模式,确定了7个共有峰,并根据对照品和参考文献指认了4个峰,对11批不同产地白芍药材相似度进行了考察,其相似度在0.90以上。结论:白芍药材UPLC-MS/MS指纹图谱分析方法快速、灵敏、简便,为白芍各品种的质量控制提供实验依据。     

HPLC-DAD-TOF/MS法测定小柴胡汤中柴胡皂苷a、黄芩苷和甘草酸的含量

目的:建立小柴胡汤药材中柴胡皂苷a 、黄芩苷和甘草酸含量测定的方法.方法:采用HPLC-DAD-TOF/MS,Agilent Zorbax XDB-C18柱(2.1 mm×50 mm, 1.8 μm),水(0.025%甲酸)-甲醇(0.025%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.15 ml·min-1,柱温为25℃ ,进样量0.25 μl;质谱条件为电喷雾电离源(ESI),正离子监测,毛细管电压为4 000 V,干燥气流速为10.0 L·min-1,干燥气温度为350℃ ,雾化器压力为40 psi(275 792 Pa),裂解器电压为200 V,用于定量分析的柴胡皂苷a离子为m/z 803.420 0～803.490 0.黄芩苷和甘草酸检测波长分别是275 nm和250 nm.结果:柴胡皂苷a线性范围为0.211 6～127.3 μg·ml-1, 线性方程为Y=461 182 X 2 000 000(r=0.999 0).黄芩苷线性范围为0.758～455 μg·ml-1,线性方程Y=5.978 9X-27.418(r=0.999 5).甘草酸单铵盐线性范围为2.268-136.8 μg·ml-1,线性方程Y=0.949 9X-1.046 4(r=0.999 5).高、中、低浓度的柴胡皂苷a平均回收率分别为(95.54±1.60)%、(99.39±3.97)%、(103.8±1.97)%和黄芩苷平均回收率分别为(102.3±0.47)%、(100.9±1.32)%、(97.15±2.10)%及甘草酸单铵盐平均回收率分别为(102.6±1.96)%、(100.3±3.12)%、(97.75±1.25)%.日内、日间RSD均＜5%,21 d内稳定性试验结果表明RSD均＜5%.小柴胡汤中柴胡皂苷a、黄芩苷和甘草酸的含量分别为0.750 0、10.65和2.572 mg/g.结论:该方法简便、灵敏、快速、准确,适用于小柴胡汤的质量控制.     

高效液相色谱法测定当归中阿魏酸含量方法的探讨

目的 :探讨阿魏酸稳定性及高效液相色谱法测定当归中阿魏酸含量的方法。方法 :以甲酸∶水 (5∶95 )为阿魏酸对照品的溶剂 ,甲酸∶甲醇 (5∶95 )为样品的溶剂 ,固定相为shim packCLC ODS ,流动相为 0 2 %甲醇乙腈∶0 1%磷酸 0 1%三乙胺水溶液(2 0∶80 ) ,检测波长为 3 2 4nm ,流速为 1ml·min-1。结果 :阿魏酸在 0 70 4～ 17 6mg·L-1范围内线性良好 (r =0 9998,n =5 ) ,平均加样回收率为 99 3 3 % ,RSD为 0 60 % (n =6)。结论 :高效液相色谱法简便快速 ,可用于当归药材的含量测定     

沙枣果实HPLC指纹图谱的研究

目的建立沙枣果实的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为沙枣药材的质量控制提供依据。方法采用高效液相色谱法测定11批次不同产地沙枣的色谱图,确立指纹图谱。色谱条件:选用Hypersil ODS-2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为0.04%磷酸水溶液和0.04%硫酸水溶液1∶1(A)与乙腈和甲醇1∶1(V/V)的混合溶剂,梯度洗脱,流速0.75 ml.min-1,柱温35℃,检测波长220 nm。结果以槲皮素为参照峰,标示出沙枣的20个共有峰,建立了沙枣果实的HPLC指纹图谱。结论该图谱从整体上显示沙枣的征性,为沙枣药材的质量控制提供参考。     

高效液相色谱-质谱联用测定全血中环孢霉素A含量

目的:建立高效液相色谱-质谱联用测定全血中环孢霉素A含量的方法.方法:色谱柱为Hypersil C8 (4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈-醋酸溶液(Ph 4.5)7030,流速为1.0 ml·min-1,柱后分流比82,柱温为65℃,进样量10 μl;质谱条件为电喷雾电离源(ESI),正离子选择离子监测,毛细管电压为4 000 V,干燥气流速为8.0 L·min-1,干燥气温度为350℃,雾化器压力为30 psi,裂解器电压为140 V.结果:环孢霉素A在26.68 ～1 067 μg·L-1范围内线性方程为y=0.001 1x-0.004 6(r=0.999 3),最低检测浓度为4.35 μg·L-1,低、中、高3种浓度的相对回收率分别为(89.81±4.91)%、(104.5±3.73)%、(95.17±2.33)%,绝对回收率分别为(77.64±4.38)%、(78.01±3.79)%、(83.02±1.59)%,日内、日间RSD均＜6%,150 d内稳定性试验结果,RSD均＜5%.结论:该法操作快速、简便、灵敏度高、专属性强,适用于环孢霉素A临床血药浓度监测.     

桂枝、白芍药对不同比例配伍提取物指纹图谱研究

目的:建立桂枝、白芍药对不同比例配伍提取物的高效液相指纹图谱。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长为254 nm,柱温25℃。结果:以1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖为参照峰,标定18个共有峰,指认了其中8个色谱峰。通过桂枝、白芍7个比例指纹图谱的研究,初步确定了两药材主要成分的归属,以芍药苷与肉桂酸峰面积比值为指标确定其配伍比例。结论:建立了桂枝、白芍药对不同比例配伍提取物的高效液相指纹图谱,为桂枝、白芍药对提取物的质量控制和成分鉴别及配伍提供依据。     

白芍与柴胡不同比例配伍白芍总苷及苯甲酸水煎出量的比较

[目的]考察白芍与柴胡不同比例配伍共煎芍药总苷及苯甲酸的煎出量,以探讨传统药对白芍配伍柴胡对有效成分及有害成分煎出的影响。[方法]单味白芍、白芍与柴胡配伍(1:2,1:1,2:1),水煎提取,分别直接分离和水解后再分离测定游离苯甲酸及芍药总苷,采用高效液相色谱法(HPLC)测定。[结果]白芍配伍柴胡,游离苯甲酸煎出量均比白芍单煎明显降低,芍药总苷煎出量与白芍单煎比变化不大。[结论]白芍配伍柴胡合煎与白芍单煎相比,可显著降低有害成分苯甲酸的煎出量。     

芍药苷在白芍单煎剂和桂枝汤中含量变化的研究

目的:比较芍药苷含量在白芍单煎剂和桂枝汤中的变化,探讨桂枝汤配伍的合理性。方法:采用薄层扫描法测定白芍药材及桂枝汤中芍药苷的含量,展开剂为三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶氨试液(8∶1∶4∶1),检测波长575 nm,参比波长700 nm。结果:芍药苷在1.93μg~19.3μg范围内线性良好(r=0.999 8),白芍单煎液和复方煎液的方法回收率分别为95.7%和96.3%,单煎液中芍药苷的含量明显低于复方煎液(P<0.01)。结论:白芍在桂枝汤中配伍可以增加有效成分芍药苷的煎出量。     

柴胡和白芍醋炙前后组方四逆散对抑郁大鼠粪便代谢组学的比较

目的   应用1H-NMR代谢组学技术探究慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁大鼠粪便代谢组学的变化,评价柴胡和白芍醋炙前后组方四逆散的抗抑郁作用,并探讨四逆散中君药柴胡和臣药白芍醋炙的增效机制及炮制内涵。方法   利用CUMS程序建立大鼠抑郁模型,以1H-NMR为技术手段研究不同给药情况下抑郁大鼠粪便代谢组学的变化。结果   CUMS抑郁大鼠模型复制成功。代谢组学结果表明,与空白组比较,模型组大鼠中共有17种代谢物水平发生变化。与模型组比较,四逆散组及柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散组干预后的抑郁大鼠代谢发生显著变化。与四逆散组比较,柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散组干预的抑郁大鼠粪便中乳酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖、甲酸、乙酸、苏氨酸6种代谢物的水平发生变化,同时对丙酮酸代谢、糖酵解与糖质新生代谢、甲烷代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、甘氨酸-丝氨酸-苏氨酸代谢、氨酰合成代谢共6条代谢通路产生影响。结论   柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散抗抑郁作用更佳,这可能与能量代谢、氨基酸代谢、免疫调控及肠道菌群有关。      

妇得乐颗粒的质量标准研究

目的:建立妇得乐颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱法对妇得乐颗粒中的丹参、赤芍进行鉴别;采用高效液相色谱法测定其中丹参酮IIA的含量。结果:在薄层色谱中检出丹参、赤芍;丹参酮IIA在0.039μg～0.401μg范围内线性关系良好,r=0.9993,平均回收率97.33%,RSD为1.67%。结论:所建立的方法可准确地进行定性、定量检测,可用于该制剂的质量控制。     

不同生长年限的亳白芍质量研究

目的研究不同生长年限亳白芍中芍药苷的含量，为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法利用薄层色谱封亳白芍药材进行了专属性的鉴别；采用HPLC法封亳白芍申芍药苷的含量进行比较研究。结果不同生长期亳白芍中芍药苷的含量不同，以2年生者含量最高。结论随着生长年限的延长，亳白芍中芍药苷的含量呈下降趋势。     

模式识别在白芍质量控制中的应用

目的旨在通过通用性强的中药色谱数据特征的抽取和神经网络识别,建立白芍的质量评价模式。方法首先通过实验获取同一品种不同质量29个白芍样本的高效液相色谱数据,然后依照非线性的核主成分分析(KP-CA)进行数学特征提取,将取得的压缩数据,输入BP神经网络进行学习,运用训练后的网络识别白芍的质量分类。并探讨了模式识别中人工神经网络的数据预处理、网络隐含层数、隐节点数、激励函数和过拟合现象等。结果通过改良后网络训练,已成功地识别白芍药材质量类别(识别率100%)。结论非线性特征提取KPCA法与人工神经网络结合适用于白芍整体质量分析。     

白芍饮片厚度对其损耗及标准汤剂转移率和出膏率的影响

目的 考察不同厚度白芍饮片的损耗及其标准汤剂的转移率和出膏率,评价饮片厚度对白芍质量的影响。方法 切制不同厚度的白芍饮片,计算其碎屑率、下料率和翘片率;制备不同厚度白芍饮片标准汤剂,测定其出膏率,并利用高效液相色谱法测定白芍饮片和汤剂中的主要成分,计算其转移率。结果 其碎屑率、下料率及翘片率随饮片厚度增加而降低;白芍饮片的标准汤剂出膏率和各成分转移率与白芍饮片厚度成反比。结论 在本研究的基础上,结合产业化生产实际,建议亳白芍饮片厚度以2 mm左右为宜。     

养血润燥丸质量标准的研究

目的建立养血润燥丸的质量标准,以评价和控制其质量。方法对处方中的何首乌、白芍和白鲜皮3味药材进行薄层色谱鉴别,并采用高效液相色谱法对何首乌中主要成分二苯乙烯苷进行含量测定。结果何首乌、白芍和白鲜皮3味药材的薄层鉴别色谱斑点清晰,专属性强;何首乌中二苯乙烯苷在0.028-0.28μg/mL（r=0.992 9）的范围内线性关系良好,平均回收率为100.8%,RSD值为3.90%（n=5）。结论本方法准确可靠、重复性好,为养血润燥丸质量控制提供了依据。