护场理论指导下的箍围法对皮肤脓肿大鼠血浆IL-10、IL-1β的影响

[目的]观察箍围药红肿消外用对皮肤脓肿大鼠血浆内白介素-10(IL-10)、白介素-1β(IL-1β)表达的影响。[方法]40只大鼠,分为空白组、模型组、对照组、预治疗组、治疗组。除空白组外,其余4组皮下注射金黄色葡萄球菌造成皮下脓肿模型。模型组生理盐水换药,对照组莫匹罗星软膏外涂换药,预治疗组在注射细菌后4 h红肿消2 m L换药,治疗组红肿消2 m L换药,药物范围超过肿胀范围1 cm,换药每日1次。分别于治疗3、7、14、18 d心脏取血2 m L,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆内IL-10、IL-1β的表达。[结果]治疗组在治疗后第3天的IL-10含量与空白组比较都呈增加趋势,与空白组相比,对照组、治疗组IL-10的含量差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。各组IL-1β含量与空白组相比呈升高趋势,与空白组IL-1β含量相比,模型组、对照组、预治疗组、治疗组含量差异有统计学意义(P0.01)。治疗7 d时,各组的IL-10含量呈下降趋势,对照组、预治疗组数值下降明显,预治疗组、治疗组IL-10含量与空白组、模型组、对照组相比差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。模型组IL-1β含量持续升高,对照组、预治疗组、治疗组IL-1β含量呈下降趋势接近正常水平,与空白组相比,模型组IL-1β含量有统计学意义(P0.01)。与模型组相比,对照组、预治疗组、治疗组IL-1β含量有统计学意义(P0.01)。治疗14、18 d时,预治疗组、治疗组IL-10含量呈下降趋势,模型组呈上升趋势,各组IL-10含量相比差异无统计学意义(P0.05)。治疗14 d,与空白组相比,模型组、预治疗组IL-1β含量有统计学意义(P0.01),提示药物干预能抑制IL-1β的表达。与模型组相比,对照组、预治疗组、治疗组IL-1β含量有统计学意义(P0.01)。与对照组相比,预治疗组IL-1β含量有统计学意义(P0.05)。与预治疗组相比,治疗组IL-1β含量有统计学意义(P0.05)。治疗18 d,与空白组相比,模型组IL-1β含量有统计学意义(P0.01)。与模型组相比,对照组、预治疗组、治疗组IL-1β含量有统计学意义(P0.01),提示药物干预能抑制IL-1β的表达。[结论]在肿疡期(第3天)应用箍围法指导下的红肿消和百多邦处理大鼠皮肤脓肿未起到"消散毒邪"的作用。在脓疡期(第7天)与百多邦相比箍围法(红肿消)可促进大鼠血浆内IL-10的表达,红肿消早期应用及形成硬结后干预(2 d)两者无明显差异,百多邦和红肿消均抑制血浆内IL-1β的表达,抑制炎症反应,促进护场形成。在溃疡期(14、18 d)均起到抑制IL-1β的表达,促进创面愈合的作用。     

益气活血解毒法对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血浆ET-1含量影响

目的:探讨萎胃消颗粒对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠血浆内皮素-1(ET-1)的影响。方法:将48只SPF级SD大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型对照组、萎胃消治疗组和胃复春对照组,每组各12只。以饮用氨水法制备大鼠慢性萎缩性胃炎模型,空白对照组、模型对照组以蒸馏水灌胃,萎胃消组和胃复春组按生药804mg/d灌胃给药,连续用药8周,采用放射免疫法测定大鼠血浆ET-1水平。结果:与空白对照比较,模型组血浆ET-1含量升高(P0.01);与模型组比较,萎胃消治疗组和胃复春对照组血浆ET-1含量均降低(P0.01或P0.05);与胃复春对照组比较,萎胃消颗粒组ET-1含量低,两组比较有统计学意义(P0.01)。结论:萎胃消颗粒能够降低CAG大鼠血浆ET-1含量。     

温阳消饮法对CHF模型大鼠肾脏水通道蛋白2表达的影响

目的探讨温阳消饮法消除水饮的部分作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为空白组和A组,A组动物采用阿霉素(Adr)腹腔注射制备慢性心力衰竭(CHF)模型。造模结束后将A组大鼠再随机分为:模型组、温阳消饮组、去桂消饮组。1温阳消饮组:按12 g/(kg·d)等效剂量灌胃给予温阳消饮方药液,每日1次,连续4周;2去桂消饮组:按10 g/(kg·d)等效剂量灌胃给予去桂消饮方药液,每日1次,连续4周;3模型组、空白组:同等条件饲养,不实施任何给药方案。结果与空白组相比,模型组血清脑钠素(BNP)含量明显升高,肾脏组织中水通道蛋白2(AQP2)蛋白表达降低,差异有显著性(P0.05或P0.01);与模型组相比,温阳消饮组、去桂消饮组血清BNP含量明显降低,肾脏中AQP2蛋白表达增加,差异有显著性(P0.05或P0.01)。结论温阳消饮法可显著降低CHF模型大鼠血清BNP含量,上调CHF模型大鼠肾组织AQP2的表达。     

绞股蓝皂苷联合银杏叶提取物对2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织和血浆H_2S的影响

目的:观察绞股蓝皂苷联合银杏叶提取物对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)并非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织和血浆硫化氢(H_2S)含量的影响。方法:40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组,T2DM并NAFLD模型组。模型组造模周期8周。将模型大鼠随机分为模型组(予同等体积的纯净水灌胃),对照组[予绞股蓝0.5 g·(kg·d)-1灌胃干预],治疗组[予绞股蓝0.5 g·(kg·d)-1联合银杏叶提取物0.1 g·(kg·d)-1]灌胃干预。继续予高糖高脂饲料造模;整个实验周期共14周。检测肝组织H_2S和三酰甘油(triacylglycerol,TG)水平,检测血H_2S、血糖、TG水平。结果:1血浆H_2S浓度比较:与空白组比较,治疗组、对照组、模型组血浆H_2S下降;但治疗组、对照组高于模型组,差异有统计学意义(P0.01),治疗组高于对照组,差异有高度统计学意义(P0.01)。2肝组织H_2S含量比较:治疗组、对照组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01),治疗组高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。3空腹血糖水平比较:空白组为(5.56±0.42)mmol·L~(-1)、治疗组为(10.24±1.18)mmol·L~(-1)、对照组为(12.28±1.86)mmol·L~(-1)、模型组为(18.12±2.26)mmol·L~(-1),治疗组、对照组低于模型组,差异有统计学意义(P0.01),治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。4血TG水平比较:空白组(1.02±0.10)mmol·L~(-1)、治疗组(1.92±0.44)mmol·L~(-1)、对照组(2.45±0.51)mmol·L~(-1)、模型组(3.82±0.58)mmol·L~(-1),治疗组、对照组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01),治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。5肝组织TG水平:空白组(30.26±2.48)mg·g~(- 1)、模型组(228.46±8.48)mg·g~(- 1)、治疗组(153.12±9.98)mg·g~(- 1)、对照组(196.24±9.78)mg·g~(- 1),治疗组、对照组低于模型组(P0.05或P0.01),治疗组低于对照组(P0.05)。结论:绞股蓝联合银杏叶提取物能调整T2DM并NAFLD模型血糖、血脂代谢,抑制血浆和肝组织H_2S的表达。     

艾灸对实验性RA大鼠血浆Thl/Th2细胞因子平衡影响的实验研究

目的:观察艾灸对实验性类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)大鼠血浆IL-1β、IL-4含量的影响,探讨灸法对类风湿关节炎的细胞因子平衡的影响。方法:以佐剂性关节炎(AA)作为RA疾病模型,艾灸实验性RA大鼠"肾俞"、"足三里"两穴,运用ELISA双抗体夹心法测定治疗前后大鼠血浆中IL-1β、IL-4含量。结果:大鼠血浆中IL-1β的含量,模型组显著高于空白组(P<0.01),艾灸组显著高于空白组但也显著低于模型组(P<0.01)。大鼠血浆中IL-4含量,空白组低于模型组,但两组之间无显著性差异,艾灸组高于模型组与空白组,与这两组之间存在显著性差异(P<0.05)。大鼠血浆IL-1β/IL-4比值,模型组显著高于空白组(P<0.05),艾灸组显著低于模型组(P<0.05),与空白组无显著性差异。结论:艾灸能够抑制RA血浆中的IL-1β分泌并同时促进RA血浆中IL-4的分泌,调整Th1/Th2细胞因子失衡,对恢复RA病程中出现的Thl/Th2细胞因子失衡,治疗RA慢性炎症以及RA预后有积极意义。     

逍遥解郁方抗大鼠卒中后抑郁的相关作用机制研究

目的:基于单胺能神经信号通路探讨逍遥解郁方抗大鼠卒中后抑郁(PSD)的作用机制。方法:选取SD大鼠50只,随机分为空白组、模型组、氟西汀组及中药低、高剂量组,每组10只。首先采用大脑中动脉线栓阻塞法(MCAO)建立卒中大鼠模型,在此基础上采用慢性不可预见性温和刺激法(CUMS)结合孤养法建立抑郁模型。造模成功后,各药物组大鼠分别给予相应药物连续灌胃28 d。采用强迫游泳实验和糖水偏好实验对大鼠进行行为学评定;采用ELISA法检测血浆5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)浓度; RT-PCR法检测大鼠海马组织5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R mRNA表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠在强迫游泳实验中不动时间明显延长、挣扎时间明显缩短,糖水偏好度明显降低(P0.01);与模型组比较,氟西汀组大鼠不动时间无明显变化(P0.05),中药干预各组大鼠不动时间明显缩短(P0.01),各组大鼠挣扎时间均明显延长(P0.01),且糖水偏好度明显增加(P0.05)。与空白组比较,模型组大鼠血浆5-HT及NE含量均明显降低(P0.01);与模型组比较,各药物组大鼠血浆5-HT及NE含量明显升高(P0.05)。与空白组比较,模型组大鼠海马组织5-HT_(1A)R mRNA表达明显降低,5-HT_(2A)R mRNA表达明显增加(P0.01);与模型组比较,各药物干预组大鼠海马组织5-HT_(1A)R mRNA表达明显增加(P0.05,P0.01),氟西汀组和中药高剂量组大鼠海马组织5-HT_(2A)R mRNA表达均明显降低(P0.05,P0.01)。结论:逍遥解郁方可显著提高PSD大鼠血浆5-HT及NE含量;其升高5-HT含量的机制可能与其上调大鼠海马组织5-HT_(1A)R mRNA表达、下调5-HT_(2A)R mRNA表达有关。     

艾灸对实验性RA大鼠血浆Th1/Th2细胞因子平衡影响的实验研究

目的:观察艾灸对实验性类风湿关节炎(Rheumatoid arthrids,RA)大鼠血浆IL-1β、IL-4含量的影响,探讨灸法对类风湿关节炎的细胞因子平衡的影响.方法:以佐剂性关节炎(从)作为RA疾病模型.艾灸实验性RA大鼠"肾俞"、"足三里"两穴,运用ELISA双抗体夹心法测定治疗前后大鼠血浆中IL-1β、IL-4含量.结果:大鼠血浆中IL-1β的含量,模型组显著高于空白组(P<0.01),艾灸组显著高于空白组但也显著低于模型组(P<0.01).大鼠血浆中IL-4含量,空白组低于模型组,但两组之间无显著性差异,艾灸组高于模型组与空白组,与这两组之问存在显著性差异(P<0.05).大鼠血浆IL-1β/IL-4比值,模型组显著高于空白组(P<0.05),艾灸组显著低于模型组(P<0.05),与空白组无显著性差异.结论:艾灸能够抑制RA血浆中的IL-1β分泌并同时促进RA血浆中IL-4的分泌,调整Th1/Tn2细胞因子失衡,对恢复RA病程中出现的Th1/Tn2细胞因子失衡,治疗RA慢性炎症以及RA预后有积极意义.     

针刺对心衰模型大鼠血浆中精氨酸加压素浓度及水通道蛋白2表达的影响

目的观察针刺对心衰模型大鼠血浆中精氨酸加压素(AVP)浓度及水通道蛋白2(AQP2)表达的影响,并探讨其可能的调节机制。方法将大鼠随机分为空白组、模型组及针刺组。除外空白组,其余各组大鼠采用腹腔注射阿霉素(3 mg/kg,每周1次,连续6周)及睡眠剥夺复制心衰模型。空白组与模型组采取与针刺组相同的固定,针刺组予针刺双侧心俞穴、双侧肾俞穴、双侧内关穴治疗。均1次/d,连续治疗15 d。干预结束后,观察大鼠血浆中精氨酸加压素(AVP)浓度变化;采用免疫组化、蛋白印迹方法检测水通道蛋白2(AQP2)蛋白表达;实时定量PCR检测水通道蛋白2(AQP2)在大鼠肾组织的表达量的变化情况。结果针刺治疗组与未治疗的模型组相比,AVP浓度明显降低,并具有统计学意义(P 0.01),针刺治疗组血浆中AVP浓度低于对照组,但无统计学意义(P 0.05);蛋白印迹结果显示,各组灰度值进行对比,针刺组与模型组相比,差异有统计学意义(P 0.01),模型组与空白组相比,差异有统计学意义(P 0.05);模型组心衰大鼠AQP2-m RNA表达明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P 0.01)。针刺治疗组AQP2-m RNA明显下降与模型组比较,差异有统计学意义(P 0.01)。结论针刺可减轻大鼠心力衰竭症状,其作用机制可能与下调AVP浓度及AQP2表达而改善心力衰竭水潴留状态有关。     

三味檀香汤散对心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽含量影响的研究

目的研究三味檀香汤散调节心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中降钙素基因相关肽(CGRP)的含量,为三味檀香汤散改善和保护心肌顿抑的作用和作用机制提供新的理论依据。方法雄性SD大鼠随机分成三味檀香汤散大、中、小剂量组(简称大、中、小剂量组)、硝苯地平对照组(简称硝苯地平组)、心肌顿抑模型组(简称模型组)和空白组6组。各给药组按照一定药量,连续灌胃给药40天,1次/日,模型组和空白组以等容量的生理盐水灌胃,对各给药组及模型组制作大鼠心肌顿抑模型(结扎冠状动脉左前降支15min,空白组只穿线不结扎),再灌注1小时后分别取血浆和心脏,采用ELISA法测量心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中CGRP的含量,所有数据采用单因素方差分析,P0.05表示差异有统计学意义。结果 (1)再灌1h后,模型组与空白组比较,血浆中CGRP的含量增高,且具有明显统计学差异(P0.01);三味檀香汤散各剂量组及硝苯地平组与模型组比较,血浆中CGRP的含量明显增高,且具有统计学差异(P0.05)。(2)再灌1h后,模型组与空白组相比较,心肌组织中CGRP的含量降低,且具有明显统计学差异(P0.01);三味檀香汤散各剂量组及硝苯地平组与模型组比较,心肌组织中CGRP的含量明显增高,且具有统计学差异(P0.01)。结论 (1)三味檀香汤散可以明显升高心肌顿抑大鼠再灌1小时血浆及心肌组织中CGRP的含量,且具有明显的量效关系;(2)三味檀香汤散升高心肌顿抑大鼠血浆及心肌组织中CGRP的含量可能是其发挥保护和改善心肌顿抑作用的机制之一。     

电针不同腧穴对急慢性结肠炎大鼠髓过氧化物酶(MPO)含量的影响

目的:观察电针不同腧穴对急、慢性结肠炎模型大鼠结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)含量的影响。方法:急性实验取60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、大肠俞组、天枢组、足三里组、上巨虚组,每组10只,雌雄各半,用6%冰醋酸灌肠造模,造模后治疗3 d,麻醉取病变结肠组织,用ELISA法测定MPO含量。慢性实验SD大鼠分组同急性实验,用免疫学加局部刺激法造模,治疗3 d后各组处死一半检测MPO含量,其余继续治疗7 d后取材测定MPO含量。结果:急性实验中,与空白组比较,模型组MPO含量升高(P0.01);与模型组比较,腧穴组MPO含量均下降(P0.01);天枢组较其他腧穴组MPO含量下降(P0.05)。慢性实验治疗3 d后,天枢和上巨虚两组较大肠俞和足三里两组MPO含量下降(P0.05);治疗10 d后,天枢组较其他腧穴组MPO含量下降(P0.01)。结论:电针大肠俞、天枢、足三里、上巨虚均可降低急慢性结肠炎大鼠结肠组织中MPO含量,其中天枢组效果较佳。     

脂氧素A4通过p38 MAPK及Nrf2通路调控气道炎症反应

目的：研究脂氧素A4（LXA4）对脂多糖（LPS）诱导的人正常支气管上皮细胞炎症反应的抑制作用及其机制。方法：将对数生长期的BEAS-2B细胞分为3组。对照组：不做任何处理;LPS组：100 ng/mL LPS刺激24 h;LPS+LXA4组：100 nmol/L LXA4预处理30 min,加入100 ng/mL LPS刺激24 h。qPCR法检测IL-6、IL-1β、血红素加氧酶-1（HO-1）、醌氧化还原酶（NQO-1）mRNA表达水平;流式细胞术测定胞内活性氧（ROS）水平;谷胱甘肽（GSH）试剂盒检测GSH水平。为进一步了解LXA4的作用机制,Western blot法检测各处理组p38的磷酸化水平以及Nrf2的核转位及磷酸化水平。结果：与对照组相比,LPS组IL-6、IL-1β mRNA以及胞内ROS表达水平升高（P＜0.05）,HO-1 mRNA水平下降（P＜0.01）,p38磷酸化水平上升（P＜0.01）,胞核中Nrf2相对表达量下降（P＜0.01）,总Nrf2磷酸化水平下降（P＜0.05）。经LXA4干预后,与LPS组相比,除上述改变逆转外（P＜0.05）,NQO-1和GSH水平显著上升（P＜0.05）。结论：LXA4可减轻LPS引起的BEAS-2B细胞炎症反应并促进炎症消退,其机制可能一方面与抑制p38 MAPK通路,减少促炎因子的分泌有关;另一方面与增强Nrf2的核转位以及磷酸化,减轻氧化应激损伤有关。     

抑制高迁移率组蛋白1对大鼠急性脊髓损伤后炎性反应的影响

目的探讨抑制高迁移率组蛋白1(HMGB1)对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)炎性反应的影响。方法选择健康雄性Wister大鼠32只,随机分为正常组、假手术组、模型组、甘草酸(Gly)组,每组8只。正常组大鼠不予任何刺激,假手术组大鼠只咬除T10椎板,不损伤脊髓,模型组和甘草酸组大鼠采用改良Allen’s法制备T10不完全性急性脊髓损伤模型,甘草酸组给予200mg/kg甘草酸灌胃处理,每天1次,连用3天。术后3天取各组大鼠T10段脊髓,应用ELISA法检测脊髓组织HMGB1、核转录因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)水平,qRT-PCR法检测脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达量。结果ELISA结果显示,脊髓损伤后,模型组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β水平较正常组明显升高[(3139.33±68.89)pg/mL比(1977.42±19.08)pg/mL、(2420.16±30.45)pg/mL比(1390.88±15.32)pg/mL;(244.61±5.49)pg/mL比(103.35±2.20)pg/mL、(271.91±3.24)pg/mL比(138.90±3.34)pg/mL、(109.89±3.33)pg/mL比(47.44±1.94)pg/mL,P均<0.01];甘草酸组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β水平较模型组明显降低[(2566.91±23.75)pg/mL比(3139.33±68.89)pg/mL、(1728.55±24.27)pg/mL比(2420.16±30.45)pg/mL、(177.50±4.86)pg/mL比(244.61±5.49)pg/mL、(190.77±1.95)pg/mL比(271.91±3.24)pg/mL、(66.38±3.62)pg/mL比(109.89±3.33)pg/mL,P均<0.01]。RT-qPCR结果表明,模型组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平较正常组明显升高[(1.25±0.08)比(0.57±0.02)、(1.66±0.04)比(0.76±0.02)、(1.26±0.06)比(0.53±0.03)、(1.73±0.08)比(0.94±0.07)、(1.82±0.07)比(1.01±0.06),P均<0.01];甘草酸组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平较模型组明显降低[(0.79±0.03)比(1.25±0.08)、(1.14±0.04)比(1.66±0.04)、(0.75±0.03)比(1.26±0.06)、(1.37±0.04)比(1.73±0.08)、(1.31±0.04)比(1.82±0.07),P均<0.01]。结论 HMGB1至少部分参与介导ASCI炎性反应,并与HMGB1依赖的NF-κB信号通路密切相关,甘草酸可能通过抑制HMGB1/NF-κB通路减轻大鼠急性脊髓损伤后的炎性反应。     

LXA4对ANP诱发SIRS过程中NF-κB、ICAM-1表达的影响

目的探讨脂氧素A4抑制急性坏死性胰腺炎诱发SIRS的机制。方法健康雄性SD大鼠72只随机分为假手术组、ANP组和脂氧素A4(LXA4)干预组,分别采用等量生理盐水、LXA4(0.1mg/kg)间隔8h经阴茎背静脉注射,并分别于4、12、24h每组活杀8只大鼠,测定胰腺组织Schmidt病理评分、NF-ΚB、ICAM-1的表达水平。结果 (1)与假手术组比较,胰腺炎组、LXA4干预组的Schmidt胰腺病理评分有显著升高(P<0.01);LXA4干预组Schmidt胰腺病理评分在12、24h较胰腺炎组低(P<0.05)。(2)假手术组ICAM-1表达阴性,胰腺炎组、LXA4干预组随着病变进展,其反映ICAM-1表达相对强度的累积光密度值(IOD)逐渐上升(P<0.01);在4、12、24h等3个时点,LXA4干预组的IOD值较比SAP组均有显著下降(P<0.01)。(3)假手术组NF-κB P65蛋白阴性;ANP组NF-κB胞核阳性表达率为59.1%(13/22),显著高于LXA4干预组的4.3%(1/23),差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 (1)LXA4在ANP诱发SIRS过程中确能抑制ICAM-1的表达。(2)LXA4抑制ANP诱发SIRS可能是通过抑制NF-κB的细胞信号传导途径来实现的。     

黄芪建中汤对脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠胃粘膜病理形态影响的研究

目的：观察黄芪建中汤对大鼠脾虚型慢性萎缩性胃炎的治疗作用，为临床应用提供实验依据、方法：将24只Wistar大鼠随机分为4组：正常组、造模组、维酶素治疗组和黄芪建中汤治疗组，采用复合法复制大鼠脾虚型慢性萎缩性胃是模型，用黄芪建中汤治疗21d，运用组织芯片技术比较各组大鼠胃粘膜的微观结构结果：CAG组大鼠胃粘膜验证积分显著升高，而胃粘膜厚度和腺管总长度显著降低（P〈0．01），经黄芪建中汤治疗2ld后，大鼠上述指标的改变与CAG组和V组比较已取得显著的改善（P〈0．05～P〈0．01）。结论：黄芪建中汤对CAG大鼠胃粘膜病理形态学改变具有明显的复健作用，其疗效明显优于维酶素组。     

吸入低浓度氢气对小鼠哮喘和睡眠功能的影响

  目的  探讨吸入低浓度氢气对小鼠哮喘和睡眠功能的影响及其潜在机制。  方法  在哮喘实验中,BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组和氢气治疗组,卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导建立哮喘模型后,氢气治疗组每天吸入24~26 mL/L氢气,连续7 d,正常对照组和哮喘模型组在相同条件下吸入空气;ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中白细胞介素（interleukin,IL）-4、IL-13和干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）质量浓度;比色法检测肺组织中丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性;HE染色观察肺组织病理学改变。在睡眠实验中,ICR小鼠随机分为空白对照组,氢气治疗1 d、3 d、5 d组和地西泮组,观察吸入24～26 mL/L氢气对各组小鼠腹腔注射阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间以及阈下剂量所致小鼠睡眠发生率的影响。  结果  哮喘实验发现,与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中IL-4、IL-13质量浓度均增加（P<0.05）,IFN-γ质量浓度降低（P<0.001）;肺组织中MDA含量增加（P<0.01）,GSH含量降低（P<0.05）,SOD活性轻度降低（P>0.05）。与哮喘模型组相比,氢气治疗组小鼠BALF中IL-4和IL-13质量浓度均降低、INF-γ质量浓度增加（P<0.05）,而肺组织中MDA含量略降低（P>0.05）,GSH含量和SOD活性增加（P<0.05）。HE染色结果显示氢气治疗可以减轻哮喘小鼠肺组织病理损伤。在睡眠实验中,腹腔注射阈上剂量戊巴比妥钠后,与空白对照组比较,各氢气治疗组小鼠睡眠潜伏期均缩短（P<0.05）、睡眠时间延长（P<0.001）;同时各氢气治疗组小鼠睡眠潜伏期均长于地西泮组（P<0.001）,睡眠时间短于地西泮组（P<0.001）。腹腔注射阈下剂量戊巴比妥钠后,与空白对照组比较,氢气吸入1 d和5 d睡眠发生率增加（P<0.01）,与地西泮组比较差异均无统计学意义;氢气吸入3 d睡眠发生率轻度增加（P>0.05）,其睡眠发生率低于地西泮组（P<0.05）。  结论  吸入低浓度氢气可以缓解OVA诱导的小鼠哮喘,其机制可能与氢气的抗氧化与抗炎作用有关。此外,吸入低浓度氢气对小鼠睡眠功能有一定改善作用。     

P53和高迁移率族蛋白-1在不同程度慢性乙型肝炎后肝纤维化组织中的含量及其意义

目的：探讨P53和高迁移率族蛋白-1(high mobility group protein 1,HMGB1)表达在慢性乙型肝炎肝纤维化中的作用。方法：将103例经病理活检证实为肝纤维化的慢性乙型肝炎患者按照非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)量表进行肝纤维化评分,分为3组：无纤维化组(n=18)、低纤维化组(n=49)和高纤维化组(n=36)。检测患者血清HMGB1水平,根据HMGB1水平和肝纤维化的程度绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线。采用CCl4法诱导肝纤维化大鼠模型后于第6周和第12周处死部分大鼠,Masson染色法观察各组大鼠肝纤维化程度,Western印迹测定大鼠肝组织中HMGB1和P53蛋白水平,酶联免疫吸附法检测组蛋白去乙酰化酶活性以及外周血炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6含量。结果：低纤维化组及高纤维化组患者血清HMGB1水平均明显高于无纤维化组(P<0.01);ROC曲线示血清HMGB1诊断肝纤维化程度的cut off值为74 pg/mL,特异性为65%,敏感性为87%。与正常组比较,低、高度肝纤维化组大鼠肝组织蛋白中,核内HMGB1减少,胞质HMGB1增多,而P53蛋白表达量明显增加(P<0.01),组蛋白去乙酰化酶活性降低,外周血炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6水平升高。结论：慢性乙型肝炎后肝纤维化组织中P53和HMGB1表达均明显增加;HMGB1水平与肝纤维化水平呈正相关,可作为辅助诊断肝纤维化的指标。     

补阳还五汤防治特发性肺纤维化的作用及机制探讨

目的探讨补阳还五汤治疗博莱霉素致大鼠特发性肺纤维化药效学作用机制。方法将SD雄性大鼠144只随机分为空白组、博莱霉素组、强的松组(0.004 2 g/kg)和补阳还五汤大、中、小剂量(27.32、13.66、6.83 g/kg)组,每组24只。除空白组外其余各组均采用一次性气管注射博莱霉素法诱导肺纤维化模型。造模后24 h给予相应药物,分别于第7、14、28天随机抽取各组8只大鼠进行股动脉放血处死,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,采用HE染色法观察肺组织肺泡炎程度,酶联免疫法(ELISA法)检测BALF中早期炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和晚期炎性因子高迁移率族蛋白1(HMGB1)的水平。结果与空白组比较,博莱霉素组肺泡隔纤维增生灶增多,肺实质结构破坏,各时间点博莱霉素组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、HMGB1含量升高(P0.05);与博莱霉素组比较,补阳还五汤大、中、小剂量组肺泡炎均有不同程度的改善,补阳还五汤各剂量组均能降低大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、HMGB1含量。结论补阳还五汤能够有效降低博莱霉素所致的肺纤维化大鼠BALF炎性指标IL-1β、TNF-α、HMGB1的浓度,改善肺泡炎症,进而抑制肺纤维化。     

miRNA-381靶向HMGB1对IHH-4细胞生长侵袭及迁移的影响

目的探究微小RNA-381 (miR-381)调控高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)对甲状腺乳头状瘤IHH-4细胞生长、侵袭及迁移的影响。方法购置甲状腺乳头状瘤IHH-4细胞及正常甲状腺细胞Nthy-ori-3各1株,取第3代细胞培养48 h后,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-381和HMGB1在甲状腺乳头状瘤IHH-4细胞和正常甲状腺Nthy-ori-3细胞中的表达水平。利用Lipofectamine 2000转染miR-381 mimic后,检测IHH-4细胞中miR-381和HMGB1的表达水平。生物信息学预测miR-381和HMGB1的靶向关系,并用荧光素酶报告实验验证两者的靶向关系。每孔按2×105/m L细胞密度接种IHH-4细胞,分为IHH-4组(甲状腺乳头状瘤细胞IHH-4组)、miR-381 mimic组(miR-381 mimic转染组)、pc-HMGB1组(HMGB1过表达转染组)、mimic+pc-HMGB1组(miR-381 mimic和pc-HMGB1共同转染组),每组设3个复孔,采用CCK8法检测各组IHH-4细胞活性,Transwell及划痕实验分别检测IHH-4细胞侵袭及迁移能力,免疫印迹法检测IHH-4细胞中Ki67、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9和晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达水平。结果与Nthy-ori-3细胞比较,IHH-4细胞中miR-381mRNA水平降低,HMGB1 mRNA水平升高,差异有统计学意义(P <0. 01)。与IHH-4组相比,miR-381 mimic组miR-381表达增加(P <0. 01)。miR-381和HMGB1存在靶向关系。与IHH-4组相比,miR-381 mimic组细胞增殖倍数、Ki67表达、侵袭细胞数、划痕闭合率、MMP-2、MMP-9和RAGE表达均降低(P均<0. 01),pc-HMGB1组上述指标均升高(P均<0. 01);与miR-381mimic组相比,mimic+pc-HMGB1组细胞增殖倍数、Ki67表达、侵袭细胞数、划痕闭合率、MMP-2、MMP-9和RAGE水平也明显上升(P均<0. 01)。结论 miR-381通过靶向下调HMGB1表达,抑制IHH-4细胞增殖、侵袭和迁移。     

LXA4通过p38MAPK/Nrf2信号通路诱导H9c2心肌细胞HO-1高表达

目的:探讨脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)诱导心肌细胞H9c2中血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)-1表达可能涉及的信号转导通路?方法:分别用核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2 related factor 2,Nrf2)的抑制剂ATRA?p38MAPK的抑制剂SB203580?LXA4联合ATRA?LXA4联合SB03580预处理H9c2细胞后进行缺氧/复氧处理,RT-PCR?Western blot?免疫荧光等检测HO-1?Nrf2以及p38MAPK mRNA和蛋白表达的变化?结果:与只行缺氧/复氧处理的细胞相比,LXA4预处理的H9c2细胞HO-1 mRNA和蛋白的表达明显升高(P < 0.05),而ATRA?SB203580分别抑制了Nrf2的聚集和p38MAPK的磷酸化(P < 0.05),从而抑制了LXA4对HO-1的诱导(P < 0.05)?结论:LXA4预处理诱导心肌细胞H9c2的HO-1高表达,具有抗缺氧/复氧损伤的作用,其机制与p38MAPK/Nrf2信号通路有关?     

附子正丁醇、水提取物对虚寒证模型大鼠ATP酶活性及能荷的影响

目的研究附子正丁醇、水提取物对虚寒证模型大鼠三磷酸腺苷(ATP)酶活性及能荷的影响。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、附子正丁醇组、附子水提物组,模型组与治疗组大鼠均予灌含生药量3.2g/mL的造模药5mL,每天1次,连续14d,空白对照组每天灌服等量的生理盐水,造模成功后,附子正丁醇和水提物组分别灌服对应的治疗药,每日1次,连续7d,治疗结束后,分光光度数法检测大鼠肝匀浆液中的ATP酶活性,高效液相法测试ATP含量及能荷的比例。结果与空白对照组相比,模型组Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性明显降低(P<0.01);与模型组相比,附子正丁醇组Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高(P<0.05),附子正丁醇组Ca2+-Mg2+-ATP酶活性高于附子水提物组(P<0.05);与空白组相比,模型组ATP含量及能荷比例均降低(P<0.05);与模型组相比,附子正丁醇组能荷比例升高(P<0.05)。结论附子正丁醇和水提物能提高虚寒证大鼠的ATP酶活性及能荷的比例,有利于虚寒证大鼠物质代谢的恢复,ATP酶活性降低可能是造成虚寒模型的原因之一,但仍需后续的研究进一步确认。