补肾益智方对老年性痴呆大鼠学习记忆能力保护作用的观察

为寻求防治老年性痴呆的有效措施 ,运用Morris水迷宫评价了中药补肾益智方 (由蛇床子、枸杞子、女贞子、人参等组成 )对由D_半乳糖致亚急性衰老加上Meynert核损毁所致阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力的保护作用。结果表明 :补肾益智方能够改善模型大鼠的学习记忆成绩 ,包括缩短模型大鼠在Morris水迷宫中寻找到平台的逃避潜伏期 (P <0 .0 1) ,延长其在原平台象限游泳的距离 (P <0 .0 5)。提示补肾益智方对阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力有一定的保护作用     

补肾益智方阻抑老年性痴呆大鼠海马突触病理性重构的研究

应用体视学定量分析方法 ,观察补肾益智方 (由蛇床子、枸杞子、女贞子、人参、首乌等组成 )对D -半乳糖致亚急性衰老合并Meynert核损毁的老年性痴呆 (又称阿尔茨海默病 ,Alzheimer’sdisease ,AD)模型大鼠海马齿状回分子层突触病理性重构的影响。结果显示 ,补肾益智方灌胃组大鼠突触数密度较AD模型组明显增加 (P <0 .0 1)、面密度和平均面积显著减少 (P <0 .0 1) ,而与正常对照组比较无明显差异 (P >0 .0 5) ,表明该方具有阻止AD模型大鼠海马突触病理性重构的作用 ,提示对突触可塑性的影响可能是该方改善学习记忆的神经生物学机制之一     

补肾益智方对老年性痴呆模型动物空间探索学习记忆功能的改善作用

目的观察补肾益智方对老年性痴呆(AD)模型大鼠空间探索学习记忆功能的改善作用.方法用15月龄老年Wistar大鼠80只,以D-半乳糖ip4周加上鹅膏蕈酸(ibotenic acid,IBO)脑内Meynert核注射制造AD模型,随机分成AD模型组,双益平治疗对照组,补肾益智方高、低剂量(12,6 g/kg@d)治疗组.另加上正常老年组和正常青年组总共设立6个组别.动物经治疗处理4周后,应用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆的改善情况.结果空间探索试验发现,模型组及双益平组在空间探索试验中的指标与正常青年组和正常老年组有显著差异性(P＜0.01或P＜0.05);补肾益智方高、低剂量组也与模型组和双益平组有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05).与模型组比较,正常青年组、正常老年组和补肾益智方高剂量组第7天撤离平台后大鼠在原平台象限内游泳的时间占整个游泳时间的百分比明显要高(P＜0.05),而补肾益智方低剂量和双益平组虽然要高些,但差异无显著性(P＞0.05).结论补肾益智方能明显改善AD大鼠空间探索学习记忆功能.     

醒脑益智方拆方对AD模型大鼠学习记忆及胆碱能系统的影响

目的 通过观察醒脑益智方拆方对AD模型大鼠学习记忆及胆碱能系统的影响,以探讨醒脑益智方对AD作用的有效成分.方法 15月龄Wistar大鼠100只,随机分成10组:正常组,假手术组,模型组,哈伯因组,醒脑益智方原方组、补肾组、化痰组、活血组、补肾化痰组和补肾活血组.大鼠双侧基底前脑注射IBO和Aβ25-35混合物造成AD模型.动物经中药干预28 d后,各组大鼠进行Morris水迷宫行为学试验并检测大鼠海马胆碱能系统的影响.结果 本实验结果表明,IBO和Aβ25-35注射所致AD痴呆动物模型组学习记忆能力明显低于正常组和假手术组,表明此AD模型制作成功.在定位航行中,潜伏期醒脑益智方原方[(72.8±9.5)s]和补肾化痰方组[(78.7±8.2)s]比模型组[(105.1±14.3)s]明显缩短(P ＜0.05),在空间搜索中,跨过平台次数醒脑益智方原方[(3.46±0.62)次]和补肾化痰方组[(3.67±0.54)次]比模型组[(0.92±0.15)次]明显增加(P ＜0.05).醒脑益智方原方和补肾化痰方之间无显著差异(P ＞0.05).Ach和ChAT活性醒脑益智方原方和补肾化痰方组比模型组明显升高(P ＜0.05),2组之间比较无差异(P ＞0.05).结论 醒脑益智方各拆方均能在一定程度上改善AD模型大鼠行为学习水平,改善胆碱能系统损伤.但以醒脑益智方原方和补肾化痰方效果最佳,补肾化痰药是其最佳成分.     

补肾益智方对老年性痴呆模型大鼠海马结构生长抑素神经元的影响

目的 研究自拟的补肾益智方对大鼠老年性痴呆（阿尔茨海默病,Alzheimer disease,AD）模型海马内生长抑素（somatostatin,SS）神经元的影响。方法 用15月龄老年Wistar大鼠以D－半乳糖腹腔注射4周加上鹅膏草氨酸（ibotenic acid,IBO)脑内Meynert核注射制作AD模型,然后随机分成AD模型组、双益平治疗对照组、补肾益方高剂量治疗组、补肾益智方低剂量治疗组,另设正常老年对照组和正常青年对照组。动物经治疗处理后,运用免疫组织化学和寡核苷酸探针原位杂交方法检测大鼠海马CA、CA3和齿状回生状回生长抑素免疫阳性和mRNA表达阳性神经元数目。结果 补肾益智方高、低剂量组大鼠海马CA1、CA3和齿状顺生长抑素免疫阳性和mRNA表达阳性神经元数目。结果 补肾益智高、低剂量组大鼠海马CA1、CA3和齿状回生长抑素阳性神经元数目及其积分光密度较AD模型组有增加趋,有些组间比较有显著性差异。结论 补肾益智方对D－半乳糖腹腔注射4周加上鹅膏草氨酸（IBO）脑内M synwiyt核注射制作的大鼠AD第马内生长抑素（SS）神经元有一定的作用。     

补肾益智方对老年性痴呆模型动物定位航行学习记忆功能的改善作用

目的：观察补肾益智方改善老年性痴呆（AD）模型大鼠定位航行学习记忆功能的作用强度。方法：用15月龄老年Wistar大鼠80只,ip D-半乳糖4周加上鹅膏蕈氨酸（ibotenic acid,IBO）脑内Meynert核注射制造AD模型,随机分成AD模型组,双益平治疗对照组,补肾益智方高、低剂量治疗组,正常老年组和正常青年组。动物经治疗处理4周后,应用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆的改善情况。结果：模型组5d的平均定位航行试验逃避潜伏期比正常（青年、老年）组明显延长（P＜0．05）,与模型组比较,正常青年组、正常老年组、补肾益智方高剂量组明显缩短（P＜0．05）,而补肾益智方低剂量组、双益平对照组缩短差异不显著（P＞0．05）;随着行为训练的进行,各组逃避潜伏期都有一定程度的下降,但模型组的逃避潜伏期下降速率要慢于其它组,表明模型组学习记忆能力较差,而正常青年组、正常老年组、补肾益智方高剂量组逃避潜伏期下降的速率较快,其次是补肾益智方低剂量组和双益平组。经每日两两比较发现：正常青年组、正常老年组、补肾益智方高剂量组与模型组在第2、3、4天有显著性差异（P＜0．05或P＜0．01）;而补肾益智方低剂量组和双益平组虽然有差异,但无统计学意义（P＞0．05）。结论：补肾益智方能明显改善AD大鼠定位航行学习记忆功能。     

补元聪脑汤对AD大鼠胆碱能系统的影响

目的:以补肾祛痰化瘀立法组方(补元聪脑汤)治疗阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型大鼠,并观察其海马区胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性变化。方法:在大鼠海马区内注入鹅膏蕈氨酸(IBO)和β样淀粉蛋白1-42肽段(Aβ1-42)混合液造成AD模型,以补元聪脑汤和西药脑复康混悬液分别灌胃治疗。通过比色法测定大鼠海马内ChAT和AchE活性。结果:补元聪脑汤能增加AD大鼠海马内的ChAT和AChE活性。结论:补元聪脑汤对AD模型大鼠海马区ChAT和AChE活性变化有明显改善。     

补肾方对去卵巢大鼠学习记忆的调整作用

目的　探讨补肾方对去卵巢大鼠学习记忆的调整作用 ,为中医“肾”与“智”的关系及补肾治疗阿尔茨海默病 ( Alzheimer's disease,AD)提供实验基础。方法　将雌性 SD大鼠 4 0只 ,随机分成卵巢切除组、假手术组、卵巢切除 +补肾方治疗高、低剂量组。治疗 12周 ,测定各组动物血清雌二醇 ( E2 )、血清钙含量 ;Y -电迷宫检测学习记忆能力 ;测定海马组织乙酰胆碱 ( Ach)含量、乙酰胆碱酯酶 ( Ach E)活性 ;HE染色观察海马组织形态学变化。结果去卵巢 18周 ,大鼠学习记忆力明显下降 ;海马组织 Ach含量下降 ;海马锥体细胞层、分子层、多形细胞层细胞浓缩 ,出现大小不同空泡 ,锥体细胞顶树突消失 ,细胞排列紊乱 ,嗜银染色可见神经纤维增粗 ,大脑皮质颞叶出现老年斑。补肾方能提高血清 E2 、血清钙水平 ( P<0 .0 5 ) ,明显提高学习记忆成绩 ,并能提高海马组织 Ach含量及 Ach E活性 ( P<0 .0 5 ) ,对海马神经元的变性具有明显的改善作用。结论　补肾方对雌激素缺乏所致的学习记忆能力下降具有明显的改善作用 ,其机制可能是通过提高血清 E2 水平 ,调节 Ca,P代谢 ,从而提高中枢胆碱能神经系统功能实现的     

远志总皂苷对AD模型大鼠学习记忆及海马AchE、ChAT活性的影响

目的建立阿尔茨海默病（AD）的大鼠模型,并观察远志总皂苷对AD模型大鼠学习记忆及胆碱能系统的影响。方法将70只大鼠随机分为模型组,远志总皂苷高、中、低荆量组,盐酸多奈哌齐组,正常组和假手术组共7组,每组10只。采用双侧海马内一次性注射13一淀粉样多肽25—35片断（A1325—35）制作大鼠AD模型;连续给药5周后采用水迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力;采用生化法检测各组大鼠脑组织匀浆中乙酰胆碱酯酶（AchE）、胆碱乙酰转移酶（CHAT）活性变化。结果与模型组相比,远志总皂苷干预治疗组大鼠进入盲端的次数明显减少、游泳时间明显缩短,同时脑内ChAT活性增强,AchE活性降低,差异均具有统计学意义（P〈0．01、P〈0．05）。结论远志总皂苷对AD模型大鼠的学习记忆能力减退具有改善作用,其作用机制可能与保护中枢胆碱能系统有关。     

补肾益智方对AD模型大鼠海马区谷氨酸能系统的保护作用

通过观察补肾益智方对痴呆模型大鼠脑组织海马区谷氨酸系统的影响 ,旨在探讨该方治疗 AD作用的神经生物学机制。结果表明 :补肾益智方治疗老年痴呆可能是通过上调海马区谷氨酸受体数目 ,提高谷氨酸与突触后膜受体的结合能力 ,从而对海马区脑神经元起到保护作用。另外 ,中药补肾益智方治疗老年痴呆的疗效与给药剂量有关 ,高剂量中药治疗效果较优     

补肾益智方对老年性痴呆大鼠突触传递长时程增强的影响

观察补肾益智方（蛇床子、枸杞子、女贞子、人参等组成）对老年性痴呆（又称阿尔茨海默病,Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ,ＡＤ）模型大鼠突触传递长时程增强现象（ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ,ＬＴＰ）的影响,旨在探讨该方治疗ＡＤ作用的神经生物学机制。应用Ｄ－半乳糖致亚急性衰老合并Ｍｅｙｎｅｒｔ基底核损毁建立ＡＤ模型大鼠,用补肾智方对ＡＤ大鼠灌胃治疗４周,采用电生理学方法,检测大鼠海     

补中益气汤对脾虚大鼠胃泌素受体结合作用的影响及其对胃粘膜损伤的保护机制

目的 探讨补中益气汤对脾虚大鼠胃泌素受体结合作用的影响及其对胃粘膜损伤的保护机制。方法 采用大黄灌胃建立脾虚大鼠模型，并采用补中益气汤灌胃治疗。用五肽胃泌素腹腔注射刺激胃酸分泌，用酸碱滴定法测定胃液总酸度，用本室改进的Pronase-EDTA消化翻转胃袋及Percoll线性密度梯度法分离纯化胃壁细胞，放射配基受体结合分析法观察胃壁细胞胃泌素受体的结合位点数及其亲和力；用Griess试剂法或紫外分光光度法检测胃粘膜组织的一氧化氮代谢产物（NO2^-和NO3^-），过氧化亚硝酸（ONOO^-)及一氧化氮合酶（包括结构型cNOS，诱导型iNOS)的活性。结果 经胃泌素刺激后，脾虚大鼠胃液总酸度显著高于正常组；脾虚大鼠离体胃壁细胞胃泌素受体亲和力高于正常大鼠，但受体结合容量降低。经补中益气汤治疗后，脾虚大鼠胃泌素刺激后的胃液总酸度与正常组无显著性差异；离体胃壁细胞胃泌素受体亲和力降低，受体结合容量升高；补中益气汤含药血清能同^125I-胃泌素竞争与大鼠胃壁细胞胃泌素受体特异性结合；脾虚大鼠胃粘膜组织中NO3^-,iNOS和ONOO^-水平均低于正常大鼠，经补中益气汤治疗能恢复到接近正常水平。结论 胃泌素受体亲和力升高是脾虚大鼠对刺激物的胃酸反应性升高的机理之一。此外，胃泌素保护粘膜作用相关的一氧化氮（NO）含量下降，可能表明胃泌素正常的粘膜保护功能降低。补中益气汤可能通过与胃泌素受体竞争性结合，降低受体过高的亲和力，从而降低对刺激物的胃酸反应性；同时一定程度升高NO含量，恢复了胃泌素的正常保护功能。     

甲亢类阴虚及甲低类阳虚模型动物中枢胆碱能M一受体变化的实验研究

本文报告了利用放射性配基受体结合法分析测定了甲亢类阴虚和甲低类阳虚模型动物大脑中枢胆碱能M一受体的变化,以及养阴益气中药复方和温补肾阳中药复方对其影响,尝试从细胞生物学水平上对虚证的发病机理和中药复方治疗虚证的机制作些探讨。结果表明,甲亢类阴虚模型大鼠脑中枢胆碱能M一受体数量减少(P<0.05),素和力提高(P<0.05),养阴益气中药复方能提高其数量(P<0.05),降低其亲和力(P<0.05);相反,甲低类阳虚模型免大脑中枢胆碱能M一受体的数量增多(P<0.05),亲和力无明显改变,温补肾阳中药复方能降低其数量。提示中枢胆碱能M一受体的变化,可能是中医阴虚(甲亢)阳虚(甲低)病理生理功能改变的原因之一,中药对此具有纠正调整作用。     

通络救脑注射液对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆及氧化应激反应的影响

目的:探讨通络救脑注射液(Tong Luo Jiu Nao injection,TLJN)对阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)模型大鼠的防治作用及其抗氧化机制.方法:采用脑内定位注射β淀粉样蛋白(βamyloidl-42)建立AD大鼠模型,在模型建立成功的同时给予TLJN治疗.采用Morris水迷宫进行AD大鼠的行为学检测,用化学比色法检测大脑皮质丙二醛(MDA)的含量.结果:与正常组比较,AD模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长(P＜0.01),目标象限停留时间明显缩短(P＜0.01);TLJN治疗组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05),目标象限停留时间明显增加(P＜0.05).AD模型组大鼠脑皮质中MDA含量增加(P＜0.01);TLJN治疗组,脑皮质MDA含量显著减少(P＜0.01).结论:TLJN具有改善学习记忆能力,对抗大鼠神经系统的退行性病变有一定的作用,可能通过抑制AD模型大鼠脑皮质MDA产生发挥其保护作用.     

NGF、BDNF和NT3在AD大鼠海马中的分布及表达变化

目的 观察NGF、BDNF和NT3在Alzheimer disease（AD）大鼠海马中的分布及其表达变化。方法 采用海马注射Aβ淀粉蛋白的方法建立AD模型。10d后对大鼠进行灌注,取脑,冰冻切片,用NGF、BNDF和NT3抗体行免疫组织化学染色。对海马恒定视野内NGF、BDNF和NT3的阳性细胞进行记数并进行统计学分析。结果 AD组海马中的NGF阳性细胞较正常组显著增多（P〈0．01）．且染色增强。BDNF阳性细胞较正常组明显减少（P〈0．01）．染色强度减弱。而NT3的阳性细胞数及染色强度与正常组比较差异均没有统计学意义（P〉0．05）。结论 NGF、BDNF和NT3在AD的海马中发生了不同的变化,提示NGF、BDNF和NT3在AD中发挥了不同的作用．尤其是BDNF阳性细胞的减少可能与AD的神经功能减退有关。     

老年性痴呆的危险因素和保护因素以及中医保健养生方法的可能作用

综述了近１５年来对老年性痴呆（阿尔茨海默病，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）的危险因素和保护因素的研究概况，认为ＡＤ公认的危险因素包括有年龄、性别、低教育程度、职业、痴呆家族史、头部外伤等，而早年接受教育或智力因素、抗衰老、预防头部外伤、雌激素替代治疗可能具有防止或延迟ＡＤ发生的保护作用。通过对中医保健养生方法可能作用的分析，提出中医保健养生方法可能对ＡＤ有保护作用的假说并就假说提供     

敲除Sirt3后激活自噬对阿尔茨海默病有保护作用

目的: 探究Sirt3在阿尔茨海默病（AD）发生发展中的作用及可能机制。方法: 体内实验以C57BL/6野生型小鼠和Sirt3基因敲除小鼠为对象,采用腹腔注射D-半乳糖联合脑定位注射β-淀粉样蛋白（Aβ）_1-40建立AD小鼠模型。莫里斯（Morris）水迷宫实验、自发活动开场实验和悬尾实验观察造模前后小鼠学习记忆和焦虑抑郁状态的改变,免疫荧光染色观察脑内海马区域Aβ沉积情况,蛋白质印迹法检测小鼠脑组织中自噬和凋亡相关蛋白表达。体外实验选小鼠皮层原代细胞作为对象,给予Aβ_1-40建立AD体外模型,MTT法检测细胞活性。结果: 体内实验结果显示,野生型小鼠诱发AD后平台潜伏期延长（P < 0.05）,穿越平台次数减少、目标象限停留时间缩短（均P < 0.05）,提示造模后小鼠的学习记忆能力下降;而Sirt3敲除能够缓解AD所致的学习记忆障碍（均P < 0.05）。相较于野生型小鼠,Sirt3基因敲除小鼠脑内海马区域的Aβ沉积减少（P < 0.05）,凋亡蛋白cleaved caspase 3表达减少（P < 0.05）。另外,野生型小鼠诱发AD后LC3-Ⅱ和P62蛋白表达增加（均P < 0.05）,提示自噬流受阻;而Sirt3基因敲除小鼠诱发AD后LC3-Ⅱ蛋白表达增加,P62蛋白表达减少（均P < 0.05）,提示自噬被激活。小鼠皮层原代细胞AD模型中,Sirt3基因敲除的细胞较野生型细胞死亡减少（P < 0.05）;加用自噬抑制剂氯喹后,Sirt3基因敲除的保护作用消失（P < 0.05）。结论: Sirt3敲除对于D-半乳糖联合Aβ_1-40诱发的AD有保护作用,这种保护作用可能与自噬流活化有关。