口腔鳞癌细胞增殖和细胞凋亡的相关性研究

目的:通过观察口腔鳞癌中细胞增殖和细胞凋亡之间的关系,探讨细胞凋亡在口腔鳞癌发生中的作用.方法:利用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色,对69例(维族36例、汉族33例)口腔鳞癌中的凋亡细胞和增殖细胞进行原位观察和比较.结果:口腔鳞癌不同组织学分级比较,高分化口腔鳞癌与中低分化口腔鳞癌之间增殖指数及凋亡指数均有显著性差异(P<0.05),不同部位的口腔鳞癌其增殖指数无显著差异,而舌癌组凋亡指数低于唇癌组和牙龈癌组(P<0.05),增殖指数与凋亡指数在口腔鳞癌中呈负相关关系(r=-0.663,P<0.05).结论:口腔鳞癌癌变过程不仅存在活跃的细胞增殖,而且存在细胞凋亡之异常,细胞增殖和细胞凋亡平衡失调在舌癌发病中可能起重要作用.     

FEZ1 Survivin在肺小细胞癌及低分化鳞状细胞癌蛋白表达及其在凋亡中的作用

目的：探讨抑癌基因FEZ1与抗凋亡因子Survivin在肺小细胞癌和低分化鳞状细胞癌中的表达及其作用．为临床在肺癌的诊断、治疗方面提供可靠的依据。方法：应用免疫组化及流式细胞定量分析技术检测肺小细胞癌和低分化鳞状细胞癌中FEZ1、Survivin蛋白的表达；并比较分析正常肺组织、小细胞癌和低分化鳞状细胞癌的凋亡率与增殖指数．结果：肺小细胞与低分化鳞状细胞癌相比，FEZ1、Survivin蛋白阳性表达存在显著性差异（P〈0．05）。正常肺组织、低分化鳞状细胞癌、及小细胞癌；其凋亡率及增殖指数依次升高，三者之间差别均有统计学意义（P〈0．05）。结论：本实验表明FEZ1、Survivin基因的蛋白表达水平在小细胞肺癌、低分化鳞状细胞癌间存在明显差异。因此．在肺癌的诊断、治疗方面为临床提供了可靠的依据。     

口腔鳞癌诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）在口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）发生、发展中的作用及其与OSCC的临床病理特征之间的关系。方法：运用原位杂交技术检测10例口腔正常黏膜、12例单纯增生上皮、28例不典型增生上皮及32例鳞癌组织中iNOS mRNA的表达情况。结果：正常口腔黏膜组织缺乏iNOS mRNA表达；不典型增生组和鳞癌组中iNOS mRNA的表达较单纯增生组均显著增加（P〈0．001）；随着上皮不典型增生程度的加重，iNOS mRNA表达显著增强（P〈0．05）；不典型增生组与鳞癌组之间iNOS mRNA的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。高、中、低分化的3种鳞癌组织中iNOS mRNA表达差异有统计学意义（P〈0．05）。口腔鳞癌患者Ⅲ、Ⅳ期组与有颈淋巴结转移组iNOS mRNA表达分别明显高于Ⅰ、Ⅱ期组与无颈淋巴结转移组（P〈0．05）。结论：iNOS mRNA可能在口腔鳞癌的发生、发展中起重要作用；口腔鳞癌的组织分化程度、TNM分期及颈淋巴结转移与iNOS mRNA表达关系密切。iNOS的检测可能对口腔鳞癌患者的预后判定和指导治疗具有参考意义。     

PTEN在食管鳞状细胞癌中的表达和临床意义

目的：研究抑癌基因PTEN蛋白表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系,探讨其在食管癌变中的可能作用。方法：应用免疫组织化学SP法检测60例食管鳞状细胞癌及20例癌旁正常组织中PTEN蛋白的表达,结合临床资料进行分析。结果：PTEN蛋白阳性反应主要定位于胞浆。食管鳞状细胞癌组织中PTEN蛋白表达阳性率56．7％明显低于正常组织阳性率90．0％（P〈0．05）。PTEN蛋白在低分化、中分化、高分化鳞癌组的阳性表达率分别是21．4％、55．0％、76．9％,三组之间相互比较有极显著统计学差异（P〈0．01）,肿瘤分化程度越低PTEN蛋白表达越低。有淋巴细胞转移的食管癌组织中VrEN表达的阳性率42．9％明显低于无淋巴细胞转移的食管癌组织阳性率76．0％（P〈0．05）。有外膜浸润的食管癌组织中PTEN表达的阳性率26．1％明显低于无外膜浸润的食管癌组织阳性率75．7％（P〈0．05）。PTEN蛋白在食管癌早期表达高于晚期（P〈0．01）。结论：PTEN蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的低表达可能与食管鳞癌的发生发展有重要关系。     

非霍奇金林巴瘤中细胞凋亡与细胞增殖的研究

目的 了解非霍奇金淋巴瘤（NHL）中细胞凋亡与细胞增殖间的关系，探讨两者在NHL发生与发展中的作用。方法 利用TdT介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法和PCNA免疫组化技术原位检测60例NHL中的细胞凋亡和增殖水平，计算凋亡指数（AI）和增殖指数（PI）。结果 B细胞性NHL中，随着恶性度增高，AI和PI均增高（P＜0．05），T细胞性NHL中高度恶性组PI明显高于低度恶性组（P＜0．05），而AI在两组之间无显著性差异（P＞0．05）。AI和PI呈显著正相关（r=0．704，P＜0．01）。结论 在NHL中细胞凋亡与增殖之间可能存在密切的联系，共同参与了NHL的发生和恶性进展。对细胞凋亡和增殖水平的检测可能有助于NHL恶性度及预后的判断。     

诱导型一氧化氮合酶在口腔鳞癌中的表达及其意义

[目的]探讨口腔鳞癌（OSCC）诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达与OSCC生物学行为之间的关系。[方法]采用免疫组化法检测10例正常口腔黏膜、17例口腔乳头状瘤、32例鳞状细胞癌组织中iNOS的表达。[结果]①正常121腔黏膜组织不表达iNOS，口腔乳头状瘤和鳞癌中iNOS表达阳性率分别为58．82％和78．12％，三组间比较差异有显著性（P〈0．001）。②高、中、低分化口腔鳞癌组织中iNOS表达阳性率分别是61．54％、88．89％、90．0％（P〉0．05）；iNOS表达与口腔鳞癌的病理分级呈正相关（r=0．3）。③iNOS表达阳性率在Ⅲ-Ⅳ期组、有颈淋巴结转移组中分别明显高于Ⅰ～Ⅱ期组、无颈淋巴结转移组（P〈0．05）。④iNOS阴性表达的口腔鳞癌患者3年生存率（83．33％）明显高于阳性者的27．27％（P=-0．022）。[结论]iNOS产生的一氧化氮（NO）可能在口腔鳞癌的发生、发展中起重要作用；口腔鳞癌组织中iNOS表达与其病理分级、TNM分期、颈淋巴结转移及预后关系密切。     

Caspase活化的细胞凋亡在非小细胞肺癌组织中的表达

目的：观察非小细胞肺癌（NSCLC）组织中Caspase活化的癌细胞凋亡与临床病理特征的关系。方法：对手术切的NSCLC组织标本50例（其中鳞癌24例，腺癌26例），采用Caspase特异的单克隆抗体－M30 CytoDEATH免疫组化染色方法 显示凋亡细胞，计算凋亡指数（AI），结果：28．0％（14／50）的肺癌组织标中中可见不同程度的M30表达，其中肺鳞癌组织的M30阳性表达率（41．7％）明显高于肺腺癌（15．3％），有显著性差异（P＜05），肺鳞癌组织的AI亦高于腺癌，有显著性差异（P＜0．05），低分化NSCLC 组织的AI高于中，高分化的NSCLC组织，有显著性差异（P＜0．05），低分化鳞癌组织的AI明显高于中高分化的鳞癌，有显著性差异（P＜0．05），M30的表达与其它临床病理学特征无相关性。结论：非小细胞肺癌组织中存在Caspase活化的自发性癌细胞凋亡控制，且Caspase的表达与组织类型及组织分化程度有关。     

凋亡相关基因蛋白bcl—xl和bak在肺鳞癌中的表达及意义

目的：探讨肺鳞状细胞癌中凋亡调控因子bcl—xl和bak蛋白的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学技术检测50例肺鳞状细胞癌及20例正常肺组织中bcl—xl和bak蛋白的表达水平。结果：bcl—xl蛋白在肺鳞状细胞癌中表达水平高于正常肺组织（P〈0．05）。bak表达水平低于正常肺组织（P〈0．05）。bcl—xl和bak蛋白的表达水平在不同分化程度的肺癌之间差异有显著意义（P〈0．05）。结论：肺鳞状细胞癌的发生、发展与bcl—xl和bak蛋白的异常表达有关,可能是细胞凋亡失衡的结果。     

食管癌MGMT、survivin 蛋白的表达及其临床意义

  目的 研究食管癌MGMT、survivin蛋白的表达及其临床意义。方法 应用免疫组化（EnVision二步法）检测56例食管鳞状细胞癌、20例腺样结构食管癌和9例小细胞癌组织中MGMT、survivin蛋白的表达，并分析其与临床病理诸因素之间的关系。结果 小细胞癌与鳞状细胞癌及腺样结构食管癌的MGMT蛋白表达比较均有显著性差异（P〈0．01）；低分化鳞癌MGMT蛋白阳性表达率为45．45％，低于高、中分化鳞癌的阳性率（84．44％，P〈0．05）。食管鳞状细胞癌survivin阳性表达率明显高于腺样结构食管癌（P〈0．05）。结论 MGMT、survivin蛋白表达与食管癌的组织学类型有密切关系，可作为食管癌预后判断的参考指标。     

甲状腺肿瘤增殖与凋亡的关系

 目的 研究甲状腺肿瘤细胞增殖指数PI和凋亡指数AI的关系；探讨甲状腺肿瘤的发病机制及PI和AI在鉴别甲状腺良、恶性肿瘤中的诊断价值。方法 用免疫组化Envision法和TUNEL法分别检测76例甲状腺肿瘤细胞中Ki67和AI表达。结果 ①39例腺瘤和37例腺癌PI和AI表达在腺瘤和腺癌组间比较差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；②15例滤泡性腺瘤（FTA）和15例滤泡性腺癌（F1C）的PI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；AI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；③15例乳头状腺瘤（PTA）和15例乳头状腺癌（PTC）AI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。PI表达组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。④9例嗜酸细胞腺瘤（OCTA）PI表达和7例嗜酸细胞腺癌（OCTC）PI组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。9例OCTA AI表达和7例OCTCAI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。⑤AI表达强度和PI表达强度呈正相关（rs=0．595，P〈0．01）。结论 甲状腺癌细胞的增殖与凋亡相关，甲状腺癌细胞的AI表达增高不表示有良好生物学行为。AI表达率和PI表达率可以作为鉴别诊断甲状腺良、恶性肿瘤的参考指标。     

乳腺癌组织中PCNA和Cath—D的表达及相关性研究

目的：探讨Cath—D、PCNA在乳腺癌中表达的意义及相关性。方法：应用免疫组化S—P法检测49例乳腺癌中Cath—D、PCNA的表达情况,并与35例乳腺良性病变进行对照分析。结果：乳腺良性病变Cath—D、PCNA的阳性率分别为17．1％（6／35）、28．6％（10／35）。乳腺癌Cath—D、PCNA的阳性率分别为53％（26／49）、73．5％（36／49）,差异具有统计学意义（P〈0．05）。乳腺癌Cath—D的表达与年龄无关（P〉0．05）,与组织学分级相关（P〈0．05）;PCNA的表达与年龄、组织学分级均无关（P〉0．05）。乳腺癌Cath—D、PCNA的表达呈正相关（P〈0．05）。结论：Cath—D、PCNA表达异常在乳腺癌的发生、发展中具有重要的作用,两者具有相互作用。Cath—D、PCNA可用于良、恶性乳腺疾病的鉴别,对乳腺良性病变的恶性转化有-定的预兆性。     

喉鳞癌患者凝血功能状态及其临床意义

目的：探讨喉鳞癌患者凝血状态的改变及其与肿瘤临床分期、转移的关系。方法：选取113例喉鳞癌患者（试验组）与65例喉良性疾病患者（对照组）为研究对象,分析血浆凝血酶原时间（胛）、活化部分凝血活酶时间（hgrr）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fib）在两组问的差异及其与喉鳞癌临床分期、转移的关系。结果：喉鳞癌患者血浆APTT比对照组显著缩短（P〈0．05）,其中转移组比未转移组显著缩短（P〈0．05）;喉鳞癌患者血浆Fib高于对照组（P〈0．05）,其中转移组明显高于未转移组（P〈0．05）,Ⅲ＋Ⅳ期组明显高于I＋Ⅱ期组（P〈0．05）;PT及TT在各组间无显著差异（P〉0．05）。结论：喉鳞癌患者血液呈高凝状态,检测血浆APTT及Fib有助于喉鳞癌患者的临床诊治和预后评估。     

喉鳞癌患者凝血功能与肿瘤复发的关系

目的：探讨喉鳞癌患者凝血功能状态与肿瘤术后复发的关系。方法：选取65例喉良性疾病患者（对照组）和155例喉鳞癌患者（试验组）为研究对象,分析血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fib）在两组间的差异及其与喉鳞癌术后复发的关系。结果：试验组血浆APTT比对照组显著缩短（P〈0.05）,其中复发组比未复发组显著缩短（P〈0.05）;试验组血浆Fib显著高于对照组（P〈0.05）,复发组较未复发组显著升高（P〈0.05）;PT及TT在各组间无显著差异（P〉0.05）。结论：喉鳞癌患者血液呈高凝状态,血浆APTT及Fib可能对喉鳞癌术后复发的监测有重要参考价值。     

脆性组氨酸三联体与肺癌的临床病理学研究

目的：探讨抑癌基因FHIT在肺癌组织中的表达缺失及其与临床病理因素的关系。方法-采用免疫组织化学S—P法检侧40例肺癌组织中FHIT蛋白表达情况,以癌旁组织作对照。结果：FHIT蛋白表达阴性率在肺癌为65．00％（26／40）,FHIT蛋白在肿瘤组织中的表达明显低于癌旁正常组织（P〈0．05）。其中鳞癌为38．46％（5／13）,腺癌为77．78％（21／27）,其差异有显著性（P=0．01）。FHIT与组织学类型、分化程度及性别有相关性（P〈0．05）。与年龄、肿瘤大小、临床分期、有无淋巴结转移无关（P〉0．05）。结论：FHIT在肺癌中失表达或表达下降可能与肺癌的发生有相关性。     

大肠癌PKC-α、CyclinD1和Cdk4的表达与临床病理学特征的关系

目的：探讨大肠癌PKC-α，CyclinD1和Cdk4的表达与临床病理学特征的关系。方法：应用免疫组织化学sP法对PKC-α，CyclinD1和Cdk4的表达进行检测。结果：PKC-α在大肠癌组织中阳性表达率31／47（66．0％）与大肠正常组织3／15（20．0％）及腺瘤10／21（47．6％）对比有显著性差异（P〈0．05），与大肠癌分化程度，Dukes分期，淋巴结转移及CEA水平明显相关（P〈0．05）。CyclinD1和Cdk4在大肠癌中阳性表达率分别为26／47（55．5％），28／47（59．6％），与正常组织中表达2／15（13．3％），1／15（6．70％）及腺瘤组织中表达8／21（38．1％），9／21（42．9％）相比呈递增趋势（P〈0．05）。大肠癌中CyclinD1阳性表达与肿瘤分化程度，Dukes分期，淋巴结转移呈正相关关系（P〈0．05），而与CEA水平关系不大（P〉0．05）；Cdk4阳性表达则与分化程度，Dukes分期有关（P〈0．05），与淋巴结转移及CEA水平关系不密切（P〉0．05）。结论：PKC-α，Cy-clinD1和Cdk4的高表达与大肠癌分化程度，Dukes分期呈明显相关，对判断大肠肿瘤恶性程度具有一定的临床意义。     

EEN-B1及其启动子甲基化在外阴鳞状细胞癌中的表达及意义

目的：检测EEN—B1在外阴鳞癌组织及外阴鳞癌细胞株中的启动子甲基化及蛋白表达情况,探讨其启动子异常甲基化在外阴鳞癌发病过程中的作用。方法：采用重亚硫酸盐测序PCR（bisulfite genomic se—quencing PCR,BSP）联合TA克隆测序法,以正常外阴组织作对照,检测外阴鳞癌组织中EEN—B1启动子区CpG岛的甲基化状态,以甲基化酶抑制剂5-aza-2-deoxycitydine（5-aza—dC）作用于外阴鳞癌细胞A-431,检测作用前后甲基化率变化情况;Westernblot方法检测外阴鳞癌及对照组织中EEN—B1蛋白表达情况,检测5-aza—dC处理前后A-431中该蛋白表达情况。结果：在癌组织中EEN—B1启动子的甲基化率为54．66％,与对照组织的12．16％相比,差异具有统计学意义;而在外阴鳞癌组织中EEN—B1蛋白明显下调;经1×10 -7mol／L5-aza—dC处理72小时后,A-431细胞系中EEN—B1启动子的甲基化率由67．05％下降至26．82％（P〈0．05）,而该蛋白表达明显上调。结论：外阴鳞癌细胞株A-431及癌组织中EEN—B1基因表达与启动子区甲基化状态有关,启动子区的高甲基化可能导致了外阴鳞癌组织及细胞系中EEN—B1基因的表达沉默。     

微血管密度和细胞凋亡在多西他赛增敏加3D-CRT治疗局部晚期非小细胞肺鳞癌中的表达

目的：观察单药多西他赛周疗联合3D-CRT同步对局部晚期非小细胞肺鳞癌AI、MVD的影响,MVD、AI与T0.5三者间的相关性,探讨多西他赛放疗增敏的分子生物学机制.方法：60例均经病理证实为鳞癌的初治病人入组,临床分期Ⅲa-Ⅲb.随机分为两组,观察组：（3D-CRT＋多西他赛增敏＋辅助化疗）30例,从放疗第1天开始,多西他赛静脉滴注（36mg/m2）,每周1次,共6周,放疗结束后TP方案化疗4周期;对照组（3D-CRT＋辅助化疗）30例,放疗结束后TP方案化疗4-6周期.放疗前及放疗（20Gy）后的24小时内,各行支气管镜活检1次,两次取材部位相同.采用免疫组化染色SP法对肿瘤标本进行微血管密度（MVD）检测,TUNEL法检测肺癌细胞凋亡标记指数（AI）,计算肿瘤缩小50％所需的时间（T0.5）.结果：观察组MVD表达降低较对照组有明显差异（P＜0.05）,观察组治疗前后诱导AI增加较对照组有明显差异（P＜0.05）,MVD表达降低与T0.5呈负相关（r=-0.624,P＜0.05）,AI表达增加与T0.5没有相关性.结论：多西他赛有可能通过降低MVD表达、诱导AI增加达到放疗增敏的目的,单药多西他赛周疗联合3D-CRT可有效改善局部晚期非小细胞肺鳞癌患者的预后,从而提高病人的生活质量.     

乳腺癌组织p27^kip1的表达及其与细胞增殖的关系

目的：研究乳腺癌组织中细胞周期抑制剂 p27^kip1的表达及其意义,并探讨其与细胞增殖的关系。方法：应用免疫组化SP法检测80例乳腺癌和20例癌旁正常组织中 p27^kip1和增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen,PCNA）的表达。结果：乳腺癌组织中 p27^kip1高表达率为53．75％（43／80）,明显低于癌旁正常组织（P〈0．01）。 p27^kip1表达与组织学分级、TNM分期及淋巴结转移均相关,P〈0．05。乳腺癌组织中 p27^kip1的表达与PCNALI呈负相关,r=0．372,P〈0．05。 p27^kip1高表达的乳腺癌术后5年无病生存率（DFS）明显高于 p27^kip1低表达者（P〈0．05）。结论： p27^kip1表达缺失可促进肿瘤细胞增殖,是判断乳腺癌发生、发展及预后的有效生物学指标。