重组人骨形态发生蛋白-2对鼠雪旺细胞增殖及生长相关蛋白GAP-43表达的影响

目的 观察重组入骨形态发生蛋白-2( rhBMP-2)对体外培养的乳鼠雪旺细胞增殖及生长相关蛋白( GAP-43)表达的影响。方法 将纯化的雪旺细胞分两组,一组设为对照,另一种加含终质量浓度为5 μg/L rhBMP-2的DMEM/F12培养液培养,在培养后0、12、24、36、48、72 h分别用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同时间点的A值并绘制生长曲线;用BrdU法测定雪旺细胞增殖率;用Western blot法检测GAP-43蛋白的表达水平。结果 经含5μg/L rhBMP-2培养液培养的雪旺细胞,在24、36、48 h细胞增殖率明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组中GAP-43在24、36、48 h的表达也显著高于对照组(P＜0.05)。结论 rhBMP-2有促进雪旺细胞分裂增殖和GAP-43蛋白表达的作用,可能是其促进周围神经再生的重要机制之一。     

硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后轴突髓鞘化和胶质瘢痕的影响

目的探讨硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)对大鼠脊髓损伤后轴突再生、髓鞘化和胶质瘢痕形成的影响。方法将72只雄性SD大鼠随机分为ChABC治疗组(A组)、生理盐水治疗组(B组)和假手术组(C组),每组24只。A、B组采用改良Allen撞击法制作大鼠T9中度脊髓损伤模型,分别在伤后1 h和之后连续7 d每天1次经蛛网膜下腔注射6μL浓度为1 U/mL ChABC和生理盐水;C组仅打开椎管,不损伤脊髓。术后1、7、14、28 d,采用BBB评分评定大鼠后肢运动功能恢复情况;取出损伤段脊髓组织,行HE染色和Nissl染色,并采用免疫组织化学染色检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、生长相关蛋白43(growth associated protein 43,GAP-43)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的变化情况。结果术后各时间点C组BBB评分均明显高于A、B组(P<0.05);术后随时间延长A、B组BBB评分逐渐增加,14、28 d时A组BBB评分明显优于B组(P<0.05)。HE和Nissl染色显示术后各时间点A组脊髓组织形态和神经元数量均优于B组。术后各时间点A、B组MBP和GAP-43的积分吸光度(IA)值及GFAP染色阳性面积均高于C组(P<0.05),术后7、14、28 d时A组MBP和GAP-43的IA值明显高于B组(P<0.05),GFAP染色阳性面积明显小于B组(P<0.05)。结论 ChABC能有效改善大鼠脊髓损伤区域微环境,提高MBP和GAP-43表达并抑制GFAP表达,促进轴突再生与髓鞘化,抑制胶质瘢痕形成,促进神经功能恢复。     

硫酸肝素复合胶原蛋白支架材料桥接大鼠坐骨神经的形态学研究

目的以形态学方法观测硫酸肝素复合胶原蛋白支架材料桥接大鼠坐骨神经10mm缺损的疗效。方法以硫酸肝素复合胶原蛋白经冷冻干燥技术制备新型神经组织支架材料,并用此材料桥接修复SD大鼠坐骨神经缺损10mm,术后36周分别以辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,HE、甲苯氨蓝和镀银染色法,S100、生长相关蛋白43(GAP-43)、神经丝蛋白(NF)免疫组化染色法、MBP免疫荧光染色法及透射电镜等形态学方法观测其引导神经再生的疗效。结果硫酸肝素复合胶原蛋白支架材料在移植术后36周已神经化。除再生有髓神经纤维的密度低于自体移植,有髓神经纤维的面积和髓鞘厚度与自体移植组无明显差异。结论以硫酸肝素复合胶原蛋白制备的神经组织工程支架材料,可以引导神经再生。     

激活的Notch信号系统对许旺细胞调控作用的影响

目的 研究体外激活的Notch信号系统对许旺细胞的调控作用.方法 培养成年SD大鼠坐骨神经许旺细胞,分别加入Notch信号激活剂Recombinant rat jagged1/FC chimera和抑制剂DAPT,空白对照加PBS缓冲液.通过免疫荧光检测细胞Notch信号蛋白激活状态,MTT检测细胞增殖情况,酶联免疫吸附试验检测细胞分泌NGF情况.结果 倒置显微镜下观察Notch激活组细胞生长优于其他各组;MTT检测该组促细胞增殖作用明显(P＜0.05),且增殖效果在72 h内逐渐增强;ELISA显示Notch激活组细胞培养上清液中NGF蛋白浓度[(60.11±2.61)pg/ml]较对照组[(51.29±3.59)pg/ml]及抑制组[(43.43±2.82 pg/ml]明显升高(P＜0.05).结论 一定剂量的Notch信号激活剂不仅促进体外培养的许旺细胞增殖,而且促进许旺细胞分泌NGF增多.     

局部应用甲状腺素促进周围神经再生的实验研究

在周围神经系统 ,外源性甲状腺素可以增加受损神经元合成蛋白质的数量 ,促进轴突的再生 [1 ]。近年来研究发现 ,在周围神经系统 ,甲状腺素对于相应细胞的作用需要三碘甲状腺原氨核心受体 (NT3 R) [2 ] 。而在坐骨神经损伤时或许旺细胞的体外培养中 ,许旺细胞会表达 NT3 R[3 ] 。因此 ,局部应用的甲状腺素会与损伤局部许旺细胞上的 NT3 R特异性结合 ,从而发挥甲状腺素促进许旺细胞增殖分化的作用。因此 ,本实验设计用硅胶管桥接大鼠周围神经缺损 ,在其中注入一定剂量的甲状腺素 ,观察其能否促进周围神经的再生 ,从而探索一种新的治疗措施…     

术中短期低频电刺激对陈旧性周围神经缺损再生能力的影响

目的探讨术中短期低频电刺激(short-term low-frequency electrical stimulation,SLES)对陈旧性周围神经缺损再生能力的影响。方法成年雌性SD大鼠30只,体质量160~180 g,制备大鼠坐骨神经13 mm长陈旧性缺损模型,随机分为实验组和对照组,每组15只。实验组切取对侧正常坐骨神经桥接缺损并施以SLES,对照组同法修复神经缺损但不予以电刺激。修复术后1、2、7 d取大鼠脊髓腰膨大段(L_(4、5))以及相应背根神经节,行抗生长相关蛋白43(growth-associated proteins 43,GAP-43)及抗脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)双重免疫荧光染色观察。修复术后3个月行荧光金逆行示踪实验。取再生神经组织中段作横、纵冰冻切片,分别行Meyer神经三色染色和抗鼠神经丝蛋白(neurofilament,NF)及可溶性蛋白100(soluble protein100,S-100)双重免疫荧光染色观察,并取术侧远端神经行透射电镜观察,测量有髓神经纤维、轴突直径及髓鞘厚度,计算有髓神经纤维密度及G比值。取术侧腓肠肌计算相对湿重比,并行Karnovsky-Root运动终板胆碱酯酶组织学染色观察。结果实验组修复术后1、2 d,术侧对应运动神经元和感觉神经元GAP-43和BDNF表达上调快于对照组。荧光金逆行示踪实验示,实验组术侧脊髓前角及相应背根神经节中标记的神经元多于对照组。实验组再生神经Meyer神经三色染色和双重免疫荧光染色均显示再生神经组织发育优于对照组。透射电镜观察示再生神经纤维成簇分布,实验组轴突直径、髓鞘厚度、有髓神经纤维密度及G比值均高于对照组,但差异无统计学意义(P0.05)。实验组术侧腓肠肌相对湿重比高于对照组,差异有统计学意义(t=4.633,P=0.000)。腓肠肌Karnovsky-Root运动终板胆碱酯酶组织学染色示,实验组运动终板的形态和数量略优于对照组。结论术中SLES能在一定程度上提高大鼠短期(1个月)长距离陈旧性周围神经缺损的再生能力。     

Foxo3a和p27kip1在大鼠坐骨神经损伤后背根神经节中的表达

目的 探讨坐骨神经夹伤后Foxo3a和p27kip1在腰段背根神经节(DRG)中表达变化及其意义.方法 将成年SD大鼠随机分为正常对照组和实验组.对实验组实行坐骨神经夹伤术.运用蛋白质印迹、免疫荧光双标,研究大鼠坐骨神经夹伤后,腰段DRG中Foxo3a和p27kip1的表达、分布以及细胞增殖和轴突再生情况.结果 Foxo3a在坐骨神经夹伤后1 d表达值(7.0±3.5)开始明显下降,2 d表达值(6.0±3.8)达到最低值,随之逐渐升高,p27kip1在坐骨神经夹伤后2 d表达值(29.0±3.5)表达开始明显下降,7 d表达值(21.0±3.0)达到最低值,随之逐渐升高;Foxo3a和p27kip1分布于神经元和神经胶质细胞内且在坐骨神经夹伤后2d DRG中,Foxo3a和p27kip1在神经元细胞[(37.8±5.7)%、(43.3±4.3)%]和神经胶质细胞[(22.4±3.9)%、(13.8±3.2)%]中表达较在正常组神经元细胞[(73.6±2.5)%、(84.1±3.7)%]和神经胶质细胞[(61.3±4.4)%、(68.7±5.6)%]减少;细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和神经元生长相关蛋白(GAP-43)在坐骨神经夹伤后2 d DRG中表达值[12±2.6,15±1.9]均开始上调,PCNA在7 d表达值(25.0±3.2)达到最高点,GAP-43则保持较高水平;此外,PCNA与神经胶质细胞共定位明显,与神经元细胞几乎无共定位.结论 大鼠坐骨神经损伤后,Foxo3a和p27kip1在腰段DRG中的表达减少与神经胶质细胞增殖和轴突再生密切相关.     

过表达核转录因子Kr(u)ppel样因子4下调胃癌AGS细胞血管内皮生长因子的表达

目的 观察过表达核转录因子Kr(u)ppel样因子4(KLF4)是否下调胃癌AGS细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法 体外培养人胃癌AGS细胞,分为4组:转染空质粒24 h对照组、转染空质粒48 h对照组、转染KLF4表达质粒24 h组、转染KLF4表达质粒48 h组.构建KLF4表达质粒,脂质体LipofectamineTM2000分别转染空质粒、KLF4表达质粒到AGS细胞,24、48 h后提取总RNA和蛋白,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、Western blot法分别检测KLF4和VEGF mRNA和蛋白水平的表达.结果 AGS细胞在24 h转染率为65%-75%,48 h转染率为40%～45%.实验组与对照组转染24、48 h后,KLF4 mRNA的表达量分别为:563.584±250.744比4.997±5.729(P＜0.05);351.852±212.439比2.4420±1.3770(P＜0.05).VEGF mRNA表达量分别为:0.008 929±0.003 810比0.002 294±0.000720(P＜0.05);0.018 375±0.008 263比0.002 193±0.001 698(P＜0.05);胃癌AGS细胞KLF4蛋白表达量显著性增加,相对应地VEGF蛋白表达水平显著性降低(P＜0.05).结论 体外胃癌AGS细胞过表达KLF4导致VEGF mRNA和蛋白表达下调,KLF4可能参与抑制调节胃癌AGS细胞VEGF的表达.     

葡萄糖原合成酶-3β抑制剂促进大鼠脊髓损伤后轴突再生与下肢功能恢复的研究

目的 探讨葡萄糖原合成酶-3β(GSK-3β)的抑制剂噻二唑-8(TDZD-8)对大鼠脊髓损伤后轴突再生与下肢功能恢复的影响. 方法 健康成年雌性SD大鼠108只,均制作T9平面完全性截瘫的脊髓损伤动物模型,并在L4平面蛛网膜下腔插入注药导管后随机分为3组(n=36):TDZD-8治疗组(A组)经注药导管注入1 mg/(kg·d)的TDZD-8,PBS治疗组(B组)经注药导管注入60 μL/d的磷酸盐缓冲液,C组为空白对照组.各组均在瘫痪后lh开始注射,连续注射3周.注射后2 h、4h、8h、24 h、7 d,TUNEL法观察神经元细胞凋亡的表达;注射后7、14、28 d,兔抗生长相关蛋白-43(GAP-43)的表达;注射后1、2、3、6、8、12周,Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估下肢运动功能恢复情况;注射后8周,采用免疫荧光法观察损伤节段轴突再生情况. 结果 脊髓损伤后2h观察到凋亡细胞,注射后2h、4h、8h、24 h、7 dA组的神经元细胞凋亡数明显低于B、C组,各组细胞凋亡表达在注射后8h达到高峰,此后逐渐减少,差异均有统计学意义(P＜0.05);注射后7、14、28 d,A组的GAP-43表达面积明显高于B、C组,各组GAP-43表达在损伤后14 d达到高峰,此后逐渐减少,差异均有统计学意义(P ＜0.05);从注射后3周开始,A组的BBB评分明显高于B、C组,差异有统计学意义(P＜0.05).A组有较多再生神经纤维穿过损伤部位,而B、C组只有少许再生神经纤维穿过损伤部位,注射后8周A组阳性标记的皮质脊髓束纤维面积明显高于B组、C组,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 TDZD-8能够抑制细胞凋亡,减少继发性脊髓损伤,上调GAP-43的表达,促进轴突再生、延长,促进大鼠后肢功能恢复.     

CXCL12/CXCR4介导少突胶质前体细胞髓鞘化的作用及调控机制

[目的]体外条件下研究CXCL12/CXCR4介导大鼠少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)髓鞘化的作用及影响。[方法]振荡分离、差速贴壁和免疫细胞化学技术分离、培养、鉴定OPCs;Western blotting检测在不同浓度CXCL12(0、5、10、20 ng/ml)作用下,OPCs髓磷脂碱性蛋白(MBP)和髓鞘脂蛋白(PLP)的表达;CXCR4si RNA干扰CXCR4蛋白表达、LY294002抑制AKT通路活性、U0126抑制ERK通路活性,利用Western blotting检测在20ng/ml CXCL12作用下OPCs髓鞘形成相关蛋白MBP和PLP的表达,并用免疫荧光标记MBP和PLP。[结果]随着细胞外CXCL12的浓度升高,CXCL12能够明显促进OPCs髓鞘形成相关蛋白MBP和PLP的表达。与0 ng/ml相比,CXCL12在20 ng/ml作用后,OPCs髓鞘形成相关蛋白MBP和PLP蛋白表达增加最明显(P<0.05);干扰CXCR4蛋白表达,抑制AKT、ERK通路活性,OPCs髓鞘形成相关蛋白MBP和PLP蛋白表达受到抑制(P<0.05)。[结论]体外条件CXCL12/CXCR4对大鼠少突胶质前体细胞参与轴突髓鞘化有促进作用,并且能够通过ERK和PI3K/AKT信号通路对髓鞘形成相关蛋白MBP和PLP蛋白表达进行调控。     

钛合金颗粒对小鼠成骨细胞增殖及核因子-κB受体活化因子配体的影响

目的 观察钛合金颗粒对体外培养小鼠成骨细胞增殖以及核因子(NF) -κB受体活化因子配体(RANKL)的影响,探讨假体周围骨溶解机制.方法 体外培养小鼠成骨细胞,随机分为空白对照组和钛合金颗粒处理A(0.01％)、B(0.10％)、C(1.00％)组.采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测培养24、48、96、168 h成骨细胞增殖活性.分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养24、48 h后成骨细胞的RANKL mRNA表达及培养上清液的RANKL含量.结果 培养48 h,A组、B组与对照组比较细胞增殖活性差异无统计学意义(P＞0.05),C组与其他各组比较细胞增殖活性明显降低(P＜0.01).培养168 h,B组细胞增殖活性下降,和对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).培养24、48 h,和对照组比较,各实验组RANKL mRNA表达及分泌量均明显升高(P＜0.01),各实验组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 钛合金颗粒可降低成骨细胞增殖活性,促进成骨细胞RANKL表达与分泌,是假体周围骨溶解机制之一.     

磷酸盐缓冲液纯化许旺细胞的实验研究

目的 探索应用磷酸盐缓冲液(PBS)纯化新生小鼠许旺细胞的可行性. 方法 取新生(出生5～7 d)C57BL/6小鼠的坐骨神经,采用0.2%的复合胶原酶NB4消化获取许旺细胞,然后采用含10%FBS的低糖DMEM培养基培养24 h.在16℃～20℃PBS中振荡差速分离纯化许旺细胞,48 h后再重复1次,共进行两次纯化.每次纯化后应用S-100免疫荧光组化法鉴定许旺细胞的纯度. 结果 应用16℃～20℃PBS纯化新生鼠坐骨神经来源的许旺细胞2次后,经免疫荧光组化法鉴定许旺细胞纯度可达98%以上. 结论 该法可以纯化新生小鼠坐骨神经来源的许旺细胞,是一种经济和高效的纯化新方法.     

大鼠坐骨神经损伤后Spastin表达变化的实验研究

目的观察内源性Spastin蛋白在大鼠坐骨神经损伤后再生过程中的表达变化,探讨其在周围神经再生过程中的作用和意义。方法取成年雄性SD大鼠36只,随机分为实验组(n=30)和假手术对照组(n=6),实验组建立坐骨神经挤压损伤模型,对照组仅暴露坐骨神经。实验组分别于术后1、3、7、14、28 d(n=6),假手术组于术后7 d取大鼠坐骨神经相应节段的L4~6脊髓组织,采用实时荧光定量PCR检测Spastin m RNA相对表达量,Western blot检测Spastin蛋白表达;并取损伤远端5 mm处神经组织,通过透射电镜观察坐骨神经远端轴突的超微结构变化。结果两组大鼠L4~6节段脊髓组织中Spastin蛋白表达和基因表达变化趋势基本一致。实验组Spastin蛋白和基因表达量呈先下降后逐渐上升的趋势,于术后7 d降至最低,28 d时达初始水平。其中实验组术后3、7、14 d Spastin蛋白和基因表达量显著低于假手术对照组(P0.05);术后1、28 d与假手术对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。实验组术后3、7、14 d Spastin蛋白和基因表达量显著低于术后1 d和28 d(P0.05),术后1 d和28 d比较差异无统计学意义(P0.05)。透射电镜观察发现实验组术后1、3、7 d,坐骨神经损伤远端髓鞘严重破坏;术后14 d雪旺细胞增生;术后28 d可见大量有髓神经纤维,接近正常形态。结论内源性Spastin蛋白在坐骨神经损伤后再生过程中出现了表达变化,提示Spastin可能在周围神经损伤后的再生过程中起着一定作用。     

马钱子对人肝癌细胞生长的影响及其作用机制

目的 探讨马钱子对人肝癌细胞生长影响及作用机制.方法 体外培养人肝癌细胞SMMC-7721,分别加入5％、10％、20％的马钱子药物血清,噻唑蓝(MTT)比色法测定对人肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用.20％马钱子药物血清作用肝癌细胞SMMC-77210、24、48 h后,分别收集细胞,提取蛋白和总RNA,应用Westem blot和荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测Fas、Cyclin D1、PCNA蛋白和mRNA表达.结果 20％马钱子药物血清对人肝癌细胞72 h的生长抑制率为(54.94±8.19)％,与5％、10％浓度抑制率(19.928±7.653)％、(29.020 ±6.100)％比较差异有统计学意义(F=18.23,P＜0.01).药物血清作用24、48 h后,肝癌细胞SMMC-7721 Fas蛋白表达分别为(0.302±0.009)、(0.399±0.021),与对照组(0.226±0.022)比较,差异有统计学意义(F=68.25,P＜0.05);药物血清作用48 h后,肝癌细胞SMMC-7721 PCNA蛋白表达为(0.7457±0.0386),与对照组、24 h(0.8529±0.0099、0.9016±0.0139)比较,差异有统计学意义(P＜0.05);药物血清作用24、48 h后,肝癌细胞SMMC-7721 Cyclin D1 mRNA表达分别为0.045 680 ±0.038 130、0.026 714±0.019934,与对照组(0.145246±0.048543)比较,差异有统计学意义(F=8.671,P＜0.05);药物血清作用24、48 h后,肝癌细胞SMMC-7721 Cyclin D1蛋白表达,PCNA、Fas mRNA表达变化差异无统计学意义(F =68.25,P＞0.05).结论 马钱子具有抑制人肝癌细胞增殖作用,其抑制效应与药物血清浓度成正相关;通过上调肝癌细胞Fas蛋白和下调PCNA蛋白及Cyclin D1 mRNA表达,是马钱子抑制肝癌细胞增殖的机制之一.     

腺病毒介导的LacZ基因在培养许旺细胞中的表达

目的 观察腺病毒介导的LacZ基因在培养许旺细胞中的表达。方法 用报告基因LacZ重组腺病毒感染原代培养的许旺细胞，X-gal组织化学染色检测LacZ基因的表达。结果 用LacZ重组腺病毒感染培养的许旺细胞时，有较好的量效关系和时效关系。当感染增殖率分别为200、100时，24、48h后接近100％的许旺细胞被感染。而且感染后许旺细胞的形态无明显异常，增殖能力也没有受到影响。结论 腺病毒介导的LacZ基因可转入体外培养的许旺细胞并高效表达，同时许旺细胞的生长特性并不受影响，为腺病毒介导神经营养因子等基因治疗促进外周周围神经损伤再生奠定了基础。     

链脲佐菌素诱导的糖尿病模型小鼠热痛反应潜伏时间与坐骨神经髓鞘相关蛋白表达的相关性

目的观察链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病模型小鼠热痛反应潜伏时间与坐骨神经髓鞘相关蛋白表达的相关性。方法 16只6周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分成两组,每组8只。STZ处理组小鼠采用一次性腹腔注射STZ 200 mg/kg,建立小鼠糖尿病模型;对照组注射同等体积缓冲液。采用YLS-6A智能热板仪进行热痛反应潜伏期测量,记录各组小鼠热痛反应潜伏期。采用实时定量PCR检测两组小鼠坐骨神经髓鞘相关蛋白MAG、P0 mRNA的表达;采用western blot检测髓鞘相关蛋白MAG、P0的蛋白表达水平。并分析小鼠热痛反应潜伏时间与髓鞘相关蛋白表达水平的相关性。结果与对照组比较,STZ处理组小鼠FBG升高(P0.0001),成功建立糖尿病模型。与对照组相比,STZ处理组小鼠热痛反应潜伏期延长(P0.05),STZ组小鼠热痛不敏感。与对照组比较,STZ处理组小鼠坐骨神经髓鞘相关蛋白MAG、P0 m RNA(P0.0001)以及蛋白水平的表达下降。结论 STZ诱导的糖尿病模型小鼠热痛反应时间延长,与坐骨神经髓鞘相关蛋白表达水平下降相关。但具体机制仍待进一步探讨。     

siRNA沉默高迁移率蛋白A2基因对人膀胱移行细胞癌细胞T24增殖凋亡的影响

目的 观察siRNA靶向沉默HMGA2基因在人膀胱移行细胞癌T24细胞中表达的变化,探讨抑制HMGA2基因对T24细胞增殖、周期和凋亡的影响.方法 针对人HMGA2基因构建siRNA干扰片段,瞬时转染T24细胞后,采用Western-blot方法检测转染siRNA干扰片段48h后T24细胞蛋白表达量的变化,CCK-8法检测T24细胞增殖和流式细胞仪（FCM）检测T24细胞周期和凋亡情况.结果 转染后48h的T24细胞HMGA2蛋白表达水平较空白对照组（CON）和阴性对照组（NC）显著下降,差异有统计学意义（P＜0.05）,转染HMGA2-siRNA的实验组抑制T24细胞增殖,T24细胞S期细胞比例（35.47±0.23）％高于CON组和NC组（P＜0.05）,实验组T24细胞凋亡率为（17.25±0.24）％,明显高于CON组和NC组（P＜0.05）.结论 HMGA2基因的特异性siRNA可以抑制T24细胞增殖,细胞周期阻滞在S期,并促进其凋亡.     

许旺细胞与PLGA共同移植于大鼠全横断脊髓损伤的实验研究

目的观察许旺细胞与PLGA组织工程材料共同移植于大鼠全横断脊髓损伤处对脊髓修复的影响。方法许旺细胞与PLGA体外共同培养后行扫描电镜观察,将其共移植于大鼠横断性脊髓损伤处,不同时间行BrdU／MBP免疫组化、天青-美蓝染色、透射电镜、运动功能评分（BBB）、运动诱发电位（MEP）、股四头肌复合肌肉动作电位（CMAP）、体感诱发电位（SEP）检测。结果扫描电镜下许旺细胞在PLGA内生长良好。6个月后移植物内可见BrdU／MBP免疫组化双染阳性细胞,天青-美蓝染色和透射电镜观察可见新生的髓鞘及形成髓鞘的许旺细胞。BBB评分各组间无显著性差异,MEP和SEP检测移植后6个月所有大鼠波形仍未恢复,但T（11-12）椎间隙可记录到SEP波。结论许旺细胞与PLGA具有良好的组织相容性,共同移植于损伤脊髓可促进轴突生长及髓鞘再生,但没有与损伤远端联系。     

高糖对大鼠肾系膜细胞泛素及泛素化蛋白表达的影响

目的 探讨高糖对大鼠肾系膜细胞泛素及泛素化蛋白表达的影响。 方法 将大鼠HBZY-1肾系膜细胞进行体外培养,高糖作为刺激因子,分别设正常对照组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖组（10、20、30 mmol/L葡萄糖）、甘露醇组。刺激12、24、48 h后,分别用实时定量PCR法和Western印迹法检测各组系膜细胞泛素mRNA和泛素化蛋白的表达。 结果 泛素化蛋白多以大分子蛋白为主。与正常对照组比较,30 mmol/L葡萄糖刺激24 h和48 h后泛素化蛋白的表达分别增加36％和52％（均P ＜ 0.01）;20 mmol/L和30 mmol/L葡萄糖作用48 h泛素化蛋白的表达分别增加31％和52％（均P ＜ 0.01）;高糖作用24、48 h,泛素mRNA的表达显著增加（均P ＜ 0.05）。 结论 高糖呈时间浓度依赖性地促进大鼠肾系膜细胞泛素mRNA及泛素化蛋白的表达,增加泛素蛋白酶体途径活性。     

丙戊酸钠充填导管促进大鼠外周神经再生的实验研究

目的 观察丙戊酸钠(VPA)充填导管对缺损外周神经再生的促进作用.方法 通过建立大鼠坐骨神经缺损模型.用硅胶管(1 cm)进行缺损神经段(0.8 cm)的桥接,局部应用8%VPA注射液10ul,观察VPA对神经再生和运动神经功能恢复的影响.30只大鼠随机分成2组,实验组在硅胶管局部注射VPA注射液;对照组在硅胶管局部注入生理盐水. 结果 术后每只大鼠每2周进行坐骨神经功能指数(SFI)检测,每4周做电生理检查,最后术后12周处死所有大鼠,对坐骨神经进行组织形态学分析.用数字图像分析软件检测有髓神经纤维髓鞘厚度.并对再生神经纤维轴突计数.通过统计软件分析发现SFI,电生理检查,神经组织性形态上两组差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 局部使用VPA于神经缺损的大鼠,可以促进损伤神经的轴突再生和运动功能恢复.因此VPA有望在临床上应用于外周神经损伤病例的治疗.