黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠血浆及脑组织环磷腺苷酸、环磷酸鸟苷和一氧化氮的影响

目的：观察中药黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠血浆及脑组织环磷腺苷酸、环磷酸鸟苷和一氧化氮变化的影响。方法：实验于2004-05在安徽中医学院第一附属医院实验中心进行。选用雄性Wistar大鼠100只，分为空白组15只；假手术组15只；余下70只全部造模，随机选取造模成功大鼠45只，分成模型组、黄蒲通窍组、阿米三嗪3组各15只。空白组不干预，假手术组不阻断大脑中动脉，其他3组线栓法制作大脑中动脉栓塞所致的血管性痴呆大鼠模型。黄蒲通窍组和阿米三嗪组按照大鼠体质量以0．01mL／g的剂量灌胃给药，其他3组予以蒸馏水(0.01mL／g)灌胃，于造模结束第2天开始给药，1次／d，连续处理28d。观察各组大鼠血浆及脑组织环磷腺苷酸、环磷酸鸟苷和一氧化氮的变化。结果：58只大鼠进入结果分析。①环磷腺苷酸：模型组大鼠血浆和脑组织中的环磷腺苷酸浓度降低[(0．34&;#177;0．11)，(17．07&;#177;2．81)nmol／L]，黄蒲通窍组、阿米三嗪组较模型组明显升高[(0．96&;#177;0．11)，(28．61&;#177;6．98)，(1．08&;#177;0．13)，(32．10&;#177;6．41)nmol／L]。②环磷酸鸟苷：模型组大鼠血浆和脑组织中的环磷酸鸟苷浓度升高[(0．26&;#177;0．05)，(5．92&;#177;1．15)nmol／L]，黄蒲通窍组、阿米三嗪组较模型组明显降低[(0.14&;#177;0．05)，(4．08&;#177;0．30)，(0．14&;#177;0．05)，[3．74&;#177;0．25)nmol／L]。③模型组一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性显著高于假手术组(P&;lt;0．01)，黄蒲通窍组与模型组相比一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性显著降低(P&;lt;0．01)，与阿米三嗪组比较无差异。结论：黄蒲通窍胶囊具有下调脑组织和血浆中环磷腺苷酸水平、升高环磷酸鸟苷水平，降低脑组织一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性的作用，并可能通过跨膜信号路径抑制神经细胞凋亡而起到改善痴呆模型大鼠记忆和认知功能的作用。     

灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注后凋亡相关蛋白的干预

目的:探讨灯盏花素干预脑缺血再灌注损伤后对Bcl-2蛋白、c-Fos蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白的表达影响及其对大脑损伤的保护作用。方法:实验于2004-06/09在华中科技大学同济医学院生理学实验室进行,取SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组和灯盏花组3组,每组10只。假手术组不造模,模型组和灯盏花组建立脑缺血再灌注模型后分别腹腔注射生理盐水1mL/kg和灯盏花素注射液1mL/kg。采用免疫组化法测定灯盏花素干预大鼠脑缺血24h后对Bcl-2蛋白、c-Fos蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达的变化。结果:30只大鼠均进入结果分析。①Bcl-2蛋白:模型组大鼠脑组织中阳性细胞数与假手术组相比有显著差异犤(40.83±2.69),(2.02±0.18)个/视野,t=7.12,P<0.01犦,而灯盏花组又明显高于模型组犤(64.88±3.13)个/视野,t=9.34,P<0.01犦。②c-Fos蛋白:模型组大鼠脑组织中c-Fos蛋白表达水平显著高于假手术组犤(72.47±4.23),(2.30±0.34)个/视野,t=10.22,P<0.01犦;灯盏花组较模型组明显减少犤(48.23±5.12)个/视野,t=7.55,P<0.01犦。③半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白:模型组大鼠脑组织中阳性细胞数明显高于假手术组犤(126.31±7.12),(2.30±0.64)个/视野,t=15.74,P<0.01犦,灯盏花组大鼠脑组织中阳性细胞数明显低于模型组     

电针对癫痫大鼠脑组织及肝脏的一氧化氮和一氧化氮合酶含量的影响

目的:探讨电针对癫痫大鼠脑组织和肝组织中一氧化氮,一氧化氮合酶(nitricoxidesyntheses,NOS)的影响,以及电针治疗癫痫的可能机制。方法∶实验于2004-03/10在南京中医药大学第二临床医学院实验室完成。选择SD大鼠40只,随机分成为正常组、模型组、电针组、假针刺组,每组10只。采用比色法测定对癫痫造模大鼠的一氧化氮,NOS和一氧化氮/NOS比值进行随机对照分析性研究。结果∶模型组脑一氧化氮犤(19.76±2.66)μmol/L犦,NOS犤(498.8±94.7)nkat/g犦和一氧化氮/NOS比值(1.38±0.46)明显高于正常组(P<0.05),电针组脑一氧化氮犤(6.04±3.52)μmol/L犦,NOS犤(203.9±102.2)nkat/g犦和一氧化氮/NOS比值(1.00±0.57)明显低于模型组(P<0.05),假针刺组一氧化氮,NOS和一氧化氮/NOS含量不明显变化。肝组织中各项因子变化与脑组织中变化一致。结论∶电针对癫痫大鼠的一氧化氮,NOS和一氧化氮/NOS有显著的抑制调节作用。这可能是电针治疗癫痫临床取得疗效的重要机制之一。     

骨髓间质干细胞对血管性痴呆大鼠BDNF和NGF的影响

目的:观察静脉注射骨髓间质干细胞(marrowstromalcell,MSC)对血管性痴呆(vasculardementia,VD)大鼠脑组织脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达的影响。方法:体外分离培养、扩增成年大鼠MSC。利用结扎双侧颈总动脉方法制备慢性前脑缺血动物模型,利用穿梭箱、水迷宫试验、ELISA方法检测注射MSC后30,60dVD大鼠认知功能以及脑组织BDNF和NGF含量变化。结果:与正常对照组相比,VD大鼠主动回避反应、游泳时间、错误次数和盲端时间,在造模后30和60d差异有显著性意义(P<0.01)。静脉注射MSC后30和60d,VD大鼠认知功能显著改善。造模后30,60d大鼠脑BDNF含量犤(96±27),(108±26)ng/g犦,NGF含量犤(73±22),(89±24)ng/g犦较对照组显著增高犤(51±13)ng/g,(36±11)ng/g犦,P<0.01;注射MSC后30,60d大鼠脑BDNF含量犤(180±46),(185±5)ng/g犦,NGF含量犤(115±29),(108±34)ng/g犦较模型组显著升高。结论:静脉注射MSC可显著改善VD大鼠认知功能,增加VD大鼠脑组织BDNF和NGF含量。     

参麻益智胶囊对痴呆大鼠一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的:证实参麻益胶囊治疗血管性痴呆的药效以及探讨其作用机制。方法:采用颈内动脉注射同种大鼠微血栓悬液制作大鼠血管痴呆(多发性脑梗死)动物模型,设立参麻益智胶囊高、中、低剂量组和阳性药、模型及正常对照组,连续给药6周后,测定血浆、脑组织的一氧化氮含量及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:①模型对照组大鼠血浆中的一氧化氮含量(71.6±24.3)μmol/L和NOS活性(135.9±35.8)nmol/(L·s)明显高于正常对照组(45.5±17.0)μmol/L和(59.3±32.2)nmol/(L·s),P<0.01。②模型对照组大鼠脑组织中的一氧化氮含量(261.0±30.0)μmol/g和NOS活性(66.8±7.2)nmol/(g·s)明显高于正常对照组(191±39)μmol/g和(52.2±2.8)nmol/(g·s),P<0.05。③参麻益智胶囊高、中、低剂量组大鼠血浆中的一氧化氮含量分别为(52.6±15.3),(56.0±17.9),(56.3±12.3)μmol/L和NOS活性(71.9±31.2),(99.7±26.5),(93.0±35.7)nmol/(L·s)明显低于模型对照组(P<0.01)。④参麻益智胶囊高、中、低剂量组大鼠脑组织中的一氧化氮含量和NOS活性明显低于模型对照组(P<0.01)。结论:参麻益智胶囊可降低血管性痴呆大鼠血浆、脑组织中一氧化氮含量及NOS活性。     

十一酸睾酮对雄性骨质疏松大鼠骨代谢的影响

目的:研究十一酸睾酮替代治疗对雄性去势骨质疏松大鼠骨代谢的影响,以期为男性骨质疏松症的预防提供思路。方法:实验选用15周龄雄性SD大鼠32只去睾后作为动物模型,随机分为对照组11只、模型组11只、治疗组10只,28周后行血尿生化、骨密度检查。结果:模型组大鼠全身骨密度、股骨中点骨密度、睾酮水平犤(0.351±0.012),(0.357±0.007)g/cm2,(0.01±0.02)nmol/L犦明显低于对照组犤(0.366±0.021),(0.366±0.012)g/cm2,(1.82±0.02)nmol/L犦(P<0.05～0.01)。治疗组大鼠全身骨密度、股骨中点骨密度、睾酮水平、雌二醇水平明显高于模型组(P<0.05～0.01)。模型组大鼠尿钙/肌酐、尿磷/肌酐、尿羟脯氨酸/肌酐水平明显高于对照组(P<0.05～0.01)。治疗组大鼠血碱性磷酸酶水平明显高于模型组(P<0.05)。结论:早期应用十一酸睾酮替代治疗可逆转雄性大鼠去睾28周后骨质疏松的发生。     

亚力克对小鼠脑损伤后脂质过氧化及能量代谢能力的影响

目的:ALEC(亚力克)是由α-亚麻酸(A)、L-赖氨酸(L)、维生素E(E)及维生素C(C)组成的复方,通过正交试验设计,以脑组织中乳酸含量为指标,确定4者比例(A:L:E:C为432:187:18:8),并研究ALEC对小鼠脑损伤后丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及三磷酸腺苷酶(ATPase)和唾液酸(SA)的影响。方法:70只昆明种小鼠,单纯随机分为6组:对照组(n=11),生理盐水(NS)组(n=11),氟苯桂嗪(Nimodipine)组(n=12),ALEC高、中、低(HALEC,MALEC,LALEC)组(每组12只)。除对照组外,其余各组给予腹腔注射NS,Nimodipine和不同剂量ALEC后进行持续缺氧处理,造成急性持续性缺氧脑损伤模型,检测各组小鼠脑组织中MDA,SA及NO含量和ATPpase活性。结果:小鼠经持续低氧处理后,脑组织中MDA犤(4.06±0.37)nmol/L犦和NO犤(0.69±0.09)μmol/L犦含量与对照组比犤(2.27±0.27)nmol/g,(1.39±0.23)μmol/L犦明显升高(t=1.20,0.95,P<0.05～0.01),而Ca2+-ATPase(42±64)nmol/s,Na+/K+-ATPase(256±69)nmol/s,Mg2+-ATPase(192±103)nmol/s,SA(0.094±0.010)nmol/mg含量与对照组犤(539±136),(619±111),(511±117)nmol/s,(0.156±0.017)nmol/mg犦比明显降低(t=8.9,9.7,4.1,5.4,P<0.01)。HALEC组可使MDA(2.65±0.48)nmol/g和NO(1.36±0.19)μmol/L含量降低,使Na+/K+-A     

姜黄素对脑出血大鼠血肿周围脑组织肿瘤坏死因子水平的影响

目的:探讨姜黄素对脑出血大鼠脑组织肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor-alpha,TNF-α)水平的影响。方法:将120只健康雄性SD大鼠随机分为姜黄素治疗组、脑出血对照组和假手术组。每组分为手术前、术后6,12,24,48,72,96,120h8个时点,每个时点5只大鼠。采用立体定向自体血注入大鼠尾状核建立脑出血模型,观察各组术前及术后各时点血肿周围脑组织肿瘤坏死因子(TNF-α)水平及含水量变化。结果:脑出血对照组术后12～96h各时点血肿周围脑组织TNF-α水平犤分别为(1.48±0.13),(1.53±0.20),(1.56±0.39),(1.49±0.28),(1.47±0.21)μg/L犦较假手术组犤分别为(1.06±0.33),(1.05±0.28),(1.14±0.15),(1.04±0.14),(1.08±0.11)μg/L犦明显升高(P<0.05)。姜黄素治疗组术后12～96h各时点TNF-α水平犤分别为(1.12±0.21),(1.11±0.18),(1.21±0.11),(1.15±0.15),(1.14±0.21)μg/L犦均明显低于脑出血对照组(P<0.05)。脑出血对照组和姜黄素治疗组术后各时点血肿周围脑组织含水量分别与相应脑组织TNF-α水平呈正相关(r=0.541,P<0.05;r=0.548,P<0.05)。结论:姜黄素可抑制大鼠脑出血后TNF-α含量增加,其对抗脑出血后脑水肿作用可能与此有关。     

白藜芦醇苷对全脑缺血再灌注大鼠脑保护的剂量依赖性作用

目的:观察白藜芦醇苷注射液对大鼠全脑缺血再灌注损伤脑保护作用的剂量依赖性关系,并以己酮可可碱作阳性对照。方法:实验于2004-06在南方医科大学基础部药理教研室完成。选择SD大鼠132只,随机分6组:假手术组、模型组、白藜芦醇苷注射液7.5,15,30mg/kg组,己酮可可碱16.5mg/kg组,每组22只。各药物组均舌下静脉给药,1次/d,连续2d,假手术组和模型组给予生理盐水注射液5mL/kg。给药第3天,将各组大鼠腹腔注射麻醉,动脉夹结扎双侧颈总动脉,缺血1h后经舌下静脉再注射各剂量药物或生理盐水,继续缺血1h后解除动脉夹实施再灌注,缝合切口。假手术组除不结扎外,其余步骤同上。于再灌注24h时各组取12只测定脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量评估脂质过氧化和氧自由基水平,各组取10只大鼠测量脑组织含水量评估脑水肿情况。结果:132只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量:模型组脑组织超氧化物歧化酶活性明显低于假手术组犤(1390.3±76.2),(1853.7±64.0)μkat/g犦,丙二醛含量高于假手术组犤(92.33±13.05),(65.76±8.56)μmol/g,(P<0.01)犦,白藜芦醇苷注射液各剂量组均能明显升高脑组织中超氧化物歧化酶活性犤(1620.3±68.2),(1793.7±99.4),(2023.8±89.2)μkat/g犦,降低丙二醛含量犤(87.4±4.33),(70.1±2.35),(66.3±2.81)μmol/g,(P<0.01)犦,且呈剂量依赖趋势。②各组大鼠脑组织含水量:模型组大鼠大脑右半球含水量明显高于假手术组及己酮可可碱16.5mg/kg组、白藜芦醇苷注射液7.5,15,30mg/kg组犤(79.32±0.65)%,(77.36±1.33)%,(78.69±0.64)%,(78.54±1.32)%,(78.12±1.29)%,(77.63±0.99)%,(P<0.01)犦。各给药组大鼠大脑右半球含水量亦较假手术组低,同时有呈剂量依赖性的趋势(P<0.05～0.01)。结论:白藜芦醇苷注射液能显著减轻脑缺血再灌注损伤引起的氧自由基损害,减少过氧化脂质的形成,并且可以减轻脑水肿,从而改善脑组织微循环及缺血、缺氧,作用强度有剂量依赖关系,以白藜芦醇苷注射液30mg/kg组治疗效果最好。     

脑脉通注射液对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用(英文)

背景:脑脉通注射液是治疗缺血性脑血管病的中药复方制剂,具有拮抗钙超载,调节前列素与血栓素系统的失衡状态,阻断自由基介导的脂质过氧化反应而保护大脑。目的:观察脑脉通注射液对大鼠脑组织含水量和Ca2+含量、超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物、6-酮-前列素1α、血栓素水平的影响,并与复方丹参注射液做比较。设计:随机对照实验。单位:成都中医药大学实验中心。材料:实验于1997-10/1998-02成都中医药大学实验中心完成。选择健康雄性Wistar大鼠72只,随机分为6组,每组12只。①正常对照组:不进行模型制备,自由饮水,常规饲养。②模型组:腹腔注射生理盐水1.67mL/kg,2次/d。③复方丹参注射液1.67mL/kg组:腹腔注射复方丹参注射液1.67mL/kg,2次/d。④脑脉通注射液3.33,1.67,0.84mL/kg组:腹腔注射脑脉通注射液3.33,1.67,0.84mL/kg,2次/d。方法:各组大鼠用药48h后,于麻醉状态下快速断头处死,立即取出脑组织,从两半球中间切开分成两份,一份在低温下制备脑组织匀浆采用放射免疫分析法待测6-酮-前列素1α和血栓素B2水平评估前列素与血栓素系统的平衡状态、采用改进的邻苯三酚自氧化法和硫代巴比妥酸比色法检测超氧化物岐化酶活性和脂质过氧化物水平评估自由基介导的脂质过氧化情况。另一份立即在电子天平上称取干、湿重,计算脑组织含水量评估脑水肿情况。采用原子吸收分光光度法检测脑组织Ca2+含量评估钙超载情况。主要观察指标:①各组大鼠脑组织含水量和Ca2+含量。②各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物含量。③各组大鼠脑组织6-酮-前列素1α和血栓素B2含量。结果:72只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠脑组织含水量和Ca2+含量:模型组明显高于正常组犤(82.27±1.32)%,(77.24±1.36)%;(267.47±15.69),(37.55±13.23)μg/g,P<0.01犦,4个治疗组的脑组织含水量均有不同程度的减轻,脑脉通注射液3.33mL/kg组效应最强犤(78.74±1.41)%犦,复方丹参注射液1.67mL/kg组最弱犤(81.45±1.52)%犦。复方丹参注射液各组Ca2+含量均有不同程度降低,存在剂量效应依赖性,而复方丹参注射液1.67mL/kg组Ca2+含量与模型组接近犤(253.66±12.85)μg/g,P>0.05犦。②各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物含量:模型组超氧化物歧化酶活性明显低于正常组犤(86.18±3.17),(131.86±4.67)μkat/g,P<0.01犦,经过治疗后脑脉通3个剂量组的超氧化物歧化酶活性均有提高,存在剂量效应依赖性(P<0.01),脑脉通注射液3.33mL/kg组效应最强犤(119.02±4.00)μkat/g犦,复方丹参注射液1.67mL/kg组超氧化物歧化酶活性与模型组接近(P>0.05)。模型组脂质过氧化物含量高于正常组犤(52.46±3.25),(32.29±2.23)μmol/L,P<0.01犦,各治疗组的脂质过氧化物含量均显著低于模型组,而脑脉通注射液3.33,1.67,0.84mL/kg组的疗效优于复方丹参注射液1.67mL/kg组犤(35.68±2.86),(41.54±2.47),(45.71±3.14),(47.84±2.71)μmol/L,P<0.01犦。③各组大鼠脑组织6-酮-前列素1α和血栓素B2含量:模型组脑组织6-酮-前列素1α含量明显低于正常组(P<0.01),4个治疗组均能提高6-酮-前列素1α含量,脑脉通注射液3.33,1.67,0.84mL/kg组的疗效优于复方丹参注射液1.67mL/kg组犤(43.84±2.98),(35.01±4.32),(29.97±3.81),(22.89±3.64)ng/g,P<0.01犦。模型组脑组织血栓素B2含量明显高于正常组(P<0.01),经治疗后4个治疗组与模型组比较均能显著降低脑组织血栓素B2含量,且存在剂量差异,而复方丹参注射液1.67mL/kg组的效果低于脑脉通注射液3.33,1.67,0.84mL/kg组犤(40.58±1.34),(32.85±1.43),(34.31±1.39),(37.27±1.52)ng/g,P<0.01犦。结论:脑脉通注射液可减轻脑水肿、拮抗钙离子、调节血栓素和前列腺素系统失衡、提高抗氧化酶活性和抗自由基损伤作用,从而起到保护脑组织结构和功能的治疗效应,且有一定的效量关系,脑脉通注射液的效果优于复方丹参注射液。     

复方丹参滴丸干预短暂性脑缺血发作时对血浆环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的影响

背景：在缺血性脑卒中急性期和恢复期皆可见血小板处于活化状态，环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷与血小板功能密切相关。目的：观察复方丹参滴丸预防治疗短暂性脑缺血发作的临床疗效及对血浆环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷的影响。设计：随机对照实验。单位：滨州医学院附属医院神经科。对象：选择2000-09／2001—04滨州医学院附属医院神经科门诊180例自愿参加本实验的短暂性脑缺血发作患者。采用随机数字表将患者按给予复方丹参滴丸剂量大小分为3组。给药10粒／d组60例，男35例，女25例；年龄50～70岁，平均（54．3&;#177;7．2）岁；给药20粒／d组60例，男32例，女28例；年龄49～62岁，平均（55．7&;#177;5．1）岁。给药30粒／d组60例，男33例，女27例；年龄52&;#177;69岁，平均（54．9&;#177;5．5）岁。方法：给药10粒／d组，1次／d，10粒／次；给药20粒／d组，2次／d，10粒／次；给药30粒／d组，3次／d，10粒／次。患者均在服药4周后，晨抽血3mL，采用放射免疫分析法，测定三组血浆中的环磷酸腺苷、环磷酸尿苷含量。每例患者均3个月随访一次，共随访18个月：①观察短暂性脑缺血发作的发作次数及发作形式。②发生缺血性脑卒中例数（包括心、脑卒中）。（④副作用：消化道反应，牙龈出血、鼻出血、皮下出血、口麻、头痛、头晕等。主要观察指标：①各组患者短暂性脑缺血发作的发作形式。②各组患者发生缺血性脑卒中例数。③各组患者副作用发生情况。④各组患者血浆中环磷酸腺苷，环磷酸鸟苷水平。结果：180例患者均进入结果分析。①发生短暂性脑缺血发作的发作例数：给药10粒／d组，发生颈内动脉系统短暂性脑缺血发作的1例；发生椎动脉系统短暂性脑缺血发作的2例；发生脑梗死的1例；发生心肌梗死的2例；给药20粒／d组，分别为2，2，1例；给药30粒／d组．分别为1，2，1例。②发生缺血性脑卒中例数：3组分别发生脑卒中的例数为6．5，4例。⑨各组患者副作用发生情况：三组不良事件及副反应分别为1．2，4例，其中给药10粒／d组出现口周麻木1例，给药20粒／d组出现口周麻木和头痛各1例，给药30粒／d组出现胃肠道反应1例，口周麻木2例，头晕1例；末出现牙龈出血、鼻出血及皮下出血病例，同时患者亦未因上述副作用退出治疗。各组比较，无显著性差异（P〉0．05）。（少各组患者血浆中环磷酸腺苷，环磷酸鸟背水平：3组环磷酸腺苷分别为（21．22&;#177;3．94），（22．5&;#177;3．67），（23．1&;#177;7．7）ng/L；环磷酸鸟苷分别为（3．67&;#177;1．18）．（4．74&;#177;2．12）．（4．6&;#177;0．7）ng／L，（P〉0．05）．结论：复方丹参滴丸在短暂性脑缺血发作的二级预防中，有肯定的疗效，各剂量比较疗效基本一致，同时无明显副作用。     

Effects of atrial natriuretic factor on cyclic guanosine monophosphate and cyclic adenosine monophosphate accumulation in microdissected nephron segments from rats.

Atrial natriuretic factor (ANF) (1 microM) markedly increased cyclic guanosine monophosphate (cGMP) content in microdissected glomeruli (35-fold) and in microdissected inner medullary collecting ducts (IMCD) (20-fold). ANF caused little or no increase in cGMP content in other nephron segments. The threshold concentration for increased cGMP accumulation by ANF was 0.1-1 nM in IMCD, which is in the range reported for rat plasma. Sodium nitroprusside (1 mM), which selectively stimulates soluble guanylate cyclase, increased cGMP content in glomeruli but not in IMCD. ANF did not alter cAMP accumulation in the absence or presence of vasopressin (AVP) or parathyroid hormone (PTH) in outer and inner medullary tubule suspensions, or in microdissected proximal convoluted tubules (PCT), medullary thick ascending limbs (MAL) or IMCD. These data are compatible with the hypothesis that cGMP is a second messenger for a physiologic action of ANF in the inner medullary collecting duct. ANF apparently activates membrane-bound guanylate cyclase in this segment.     

复方丹参滴丸干预短暂性脑缺血发作时对血浆环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的影响

背景在缺血性脑卒中急性期和恢复期皆可见血小板处于活化状态,环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷与血小板功能密切相关.目的观察复方丹参滴丸预防治疗短暂性脑缺血发作的临床疗效及对血浆环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷的影响.设计随机对照实验.单位滨州医学院附属医院神经科.对象选择2000-09/2001-04滨州医学院附属医院神经科门诊180例自愿参加本实验的短暂性脑缺血发作患者.采用随机数字表将患者按给予复方丹参滴丸剂量大小分为3组.给药10粒/d组60例,男35例,女25例;年龄50～70岁,平均(54.3±7.2)岁;给药20粒/d组60例,男32例,女28例;年龄49～62岁,平均(55.7±5.1)岁.给药30粒/d组60例,男33例,女27例;年龄52～69岁,平均(54.9±5.5)岁.方法给药10粒/d组,1次/d,10粒/次;给药20粒/d组,2次/d,10粒/次;给药30粒/d组,3次/d,10粒/次.患者均在服药4周后,晨抽血3mL,采用放射免疫分析法,测定三组血浆中的环磷酸腺苷、环磷酸尿苷含量.每例患者均3个月随访一次,共随访18个月①观察短暂性脑缺血发作的发作次数及发作形式.②发生缺血性脑卒中例数(包括心、脑卒中).③副作用消化道反应,牙龈出血、鼻出血、皮下出血、口麻、头痛、头晕等.主要观察指标①各组患者短暂性脑缺血发作的发作形式.②各组患者发生缺血性脑卒中例数.③各组患者副作用发生情况.④各组患者血浆中环磷酸腺苷,环磷酸鸟苷水平.结果180例患者均进入结果分析.①发生短暂性脑缺血发作的发作例数给药10粒/d组,发生颈内动脉系统短暂性脑缺血发作的1例;发生椎动脉系统短暂性脑缺血发作的2例;发生脑梗死的1例;发生心肌梗死的2例;给药20粒/d组,分别为2,2,1例;给药30粒/d组,分别为1,2,1例.②发生缺血性脑卒中例数3组分别发生脑卒中的例数为6,5,4例.③各组患者副作用发生情况三组不良事件及副反应分别为1,2,4例,其中给药10粒/d组出现口周麻木1例,给药20粒/d组出现口周麻木和头痛各1例,给药30粒/d组出现胃肠道反应1例,口周麻木2例,头晕1例;未出现牙龈出血、鼻出血及皮下出血病例,同时患者亦未因上述副作用退出治疗.各组比较,无显著性差异(P＞0.05).④各组患者血浆中环磷酸腺苷,环磷酸鸟苷水平3组环磷酸腺苷分别为(2122±3.94),(22.5±3.67),(23.1±7.7)ng/L;环磷酸鸟苷分别为(3.67±1.18),(4.74±2.12),(4.6±0.7)ng/L,(P＞0.05).结论复方丹参滴丸在短暂性脑缺血发作的二级预防中,有肯定的疗效,各剂量比较疗效基本一致,同时无明显副作用.     

衰老对大鼠阴茎组织中一氧化氮,cGMP,cAMP的影响及与勃起功能障碍的关系

目的:观察衰老对一氧化氮NO,cAMP,cGMP含量变化,探讨其与阴()茎勃起功能障碍的关系。方法:应用亚硝酸还原酶法及放免法对不同月龄,8,16,24个月)大(2鼠阴茎组织中NO及cGMP,cAMP含量分别进行检测。结果:随月龄增加,NO含量先增高,再降低,其中月龄最高,24月龄8最低,各月龄组间差异有非常显著性意义(P<0.001);cGMP,cAMP含量均随月龄增加而逐渐下降,各月龄组间差异也有非常显著性意义(P<0.001)。结论:衰老对NO及cGMP,cAMP有显著影响,提示临床应用增加NO,cGMP,cAMP的药物对勃起功能障碍的康复有重要价值。     

应用脑微透析技术观察大鼠纹状体基础环鸟苷酸来源及一氧化氮在纹状体细胞内对环鸟苷酸的转导过程

目的应用清醒大鼠脑微透析技术以选择性可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂1 H-[1,2,4]恶二唑[4,3-A]喹喔啉-1-酮为工具药观察大鼠纹状体一氧化氮-环鸟苷酸信号转导.方法实验于2004-02/08在锦州医学院药理教研室完成,选择雄性健康SD大鼠35只,平衡麻醉液麻醉后,将大鼠固定在立体定位仪上,横跨纹状体植入一透析探头,待大鼠清醒后24 h进行透析灌流实验,灌流速度为5 mL/min,每20 min收集1次透析液,用放射免疫方法测定环鸟苷酸含量.结果35只大鼠均进入结果分析.①纹状体内局部灌流1 H-[1,2,4]恶二唑[4,3-A]喹喔啉-1-酮10,50,100 μmol/L可剂量依赖性降低细胞外基础环鸟苷酸水平,1 H-[1,2,4]恶二唑[4,3-A]喹喔啉-1-酮100μmol/L作用最强,最大,可使细胞外基础环鸟苷酸水平降低约50%.②1 H-[1,2,4]恶二唑[4,3-A]喹喔啉-1-酮100μmol/L可完全对抗N-甲基-D-天冬氨酸(250μmol/L)引起的细胞外环鸟苷酸水平增加.③1 H-[1,2,4]恶二唑[4,3-A]喹喔啉-1-酮也可阻断一氧化氮供体S-亚硝基-N-乙酰青霉胺(1 mmol/L)引起的细胞外环鸟苷酸水平增加.纹状体内局部灌流a-氨基羟甲基异恶唑丙酸(100μmol/L)不能使环鸟苷酸水平增加.结论①在基础状态下纹状体的环鸟苷酸约50%来源于可溶性鸟苷酸环化酶的激活.②纹状体的一氧化氮-环鸟苷酸神经通路的激活是通过N-甲基-D-天冬氨酸受体完成的.③在大鼠纹状体一氧化氮也是通过激活可溶性鸟苷酸环化酶而使环鸟苷酸增加的.     

Immunohistochemical studies of cyclic guanosine monophosphate and nuclear function.

In previous immunohistochemical studies, it has been found that all nuclei contain cyclic (c)GMP, which occurs in discrete aggregates and in the nucleolus. We have studied the nature of the cGMP aggregates in isolated mouse fetal nuclei using a specific immunofluorescent technique. These aggregates correspond to the areas of condensation of DNA, demonstrable by either Felugen's or acridine orange stain. Treatment with DNAase eliminated DNA and cGMP staining. Staining for RNA, with a human anti-RNA antibody, demonstrated RNA to be distributed diffusely throughout the nucleus and not preferentially in the areas of discrete cGMP aggregates. The diffuse stain for nuclear RNA was eliminated by pretreatment with RNAase but not DNAase, but aggregates of cGMP were not affected by pretreatment with RNAase. Sites of active RNA synthesis were determined by autoradiography using [3H]uridine, and did not correspond to the aggregates of cGMP. The relationship of cGMP to nucleolar function was examined in the endothelial cells of the isthmus and ampulla of the rat fallopian tube. Previous studies have shown that in proestrous, a period of increased RNA synthesis, nucleoli detectable by staining for RNA appear in the endothelial cells lining the fallopian tube. After immunofluorescent staining, we found prominent accumulation of cGMP in the nucleoli. During other phases of the cycle, there is an absence of nucleoli detectable by staining for RNA, and an absence of nucleolar cGMP. After we treated hypophysectomized or oophorectomized rats with estrogen, which is known to increase nucleolar RMA synthesis in the fallopian tube and endometrium, nucleoli in the endothelial cells of the rat fallopian tube and uterus stained strongly for cGMP. In conclusion, our studies suggest that the discrete aggregates of nuclear cGMP are associated with a fraction of DNA uninvolved in RNA synthesis. In contrast, cGMP appears in the nucleolus during a period of increased RNA synthesis, suggesting a role for cGMP in regulating nucleolar synthesis and processing of RNA.     

应用脑微透析技术观察大鼠纹状体基础环鸟苷酸来源及一氧化氮在纹状体细胞内对环鸟苷酸的转导过程

目的：应用清醒大鼠脑微透析技术以选择性可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂1H-[1，2，4]恶二唑[4，3-A]喹喔啉-1-酮为工具药观察大鼠纹状体一氧化氮-环鸟背酸信号转导。方法：实验于2004—02／08在锦州医学院药理教研室完成，选择雄性健康SD大鼠35只，平衡麻醉液麻醉后，将大鼠固定在立体定位仪上，横跨纹状体植入一透析探头，待大鼠清醒后24h进行透析灌流实验，灌流速度为5mL／min，每20min收集1次透析液，用放射免疫方法测定环鸟苷酸含量。结果：35只大鼠均进入结果分析。①纹状体内局部灌流1H-[1，2，4]恶二唑[4，3-A]喹喔啉-1-酮10，50，100μmol／L可剂量依赖性降低细胞外基础环鸟苷酸水平，1H-[1，2，4]恶二唑[4，3-A]喹喔啉-1-酮100μmol／L作用最强，最大，可使细胞外基础环鸟苷酸水平降低约50％。②1H-[1，2．4]恶二唑[4，3-A]喹喔啉-1-酮100μmol／L可完全对抗N-甲基-D-天冬氨酸（250μmol／L）引起的细胞外环鸟苷酸水平增加。③1H-[1，2，4]恶二唑[4，3-A]喹喔啉-1-酮也可阻断一氧化氮供体S-亚硝基-N-乙酰青霉胺（1mmol／L）引起的细胞外环鸟苷酸水平增加。纹状体内局部灌流α-氨基羟甲基异恶唑丙酸（100μmol／L）不能使环鸟苷酸水平增加。结论：①在基础状态下纹状体的环鸟苷酸约50％来源于可溶性鸟苷酸环化酶的激活。②纹状体的一氧化氮-环鸟苷酸神经通路的激活是通过N-甲基-D-天冬氨酸受体完成的。③在大鼠纹状体一氧化氮也是通过激活可溶性鸟苷酸环化酶而使环鸟苷酸增加的．