克瘤丸对结肠癌细胞HT-29细胞凋亡及细胞周期的影响

目的 观察克瘤丸对人结肠癌细胞生长的影响及其作用机制.方法 将4mg/ml、2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml浓度克瘤丸作用于HT-29细胞24～48h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测克瘤丸对HT-29细胞增殖的影响,AnnexinV单染法检测克瘤丸对HT-29细胞凋亡的影响,流式细胞仪检测细胞周期的分布情况. 结果 与对照组比较,浓度为4、2、1、0.5mg/ml克瘤丸作用HT-29细胞48h,OD值、48h抑制率差异均有统计学意义(P＜0.01);4、2、1mg/ml浓度克瘤丸作用HT-29细胞48h,OD值、48h抑制率均明显优于0.25mg/ml及0.5mg/ml浓度克瘤丸(P＜0.01).与1mg/ml浓度比较,2mg/ml、4mg/ml组凋亡率差异有统计学意义(P＜0.05).4mg/ml时G0/G1期前出现明显的亚二倍体区,与1mg/ml、2mg/ml组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 克瘤丸对人结肠癌细胞HT-29的增殖具有抑制作用并能够引起该细胞的凋亡.     

姜黄素调控结肠癌SW480细胞skp2-p27kip通路的研究

目的：探讨姜黄素抑制结肠癌细胞增殖并促进其凋亡的分子机制。方法：通过MTT检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60μmol/L）处理结肠癌细胞SW480后凋亡情况;通过蛋白免疫印迹方法检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60μmol/L）处理结肠癌细胞后细胞中skp2、p27kip蛋白表达情况。结果：姜黄素能抑制结肠癌细胞SW480增殖并促进其凋亡,有浓度和时间依赖;姜黄素降低了结肠癌细胞SW480中skp2蛋白的表达（P〈0.05）,而促进了p27kip蛋白的表达,有时间和剂量依赖,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：姜黄素能抑制结肠癌细胞SW480的增殖并促进其凋亡,有时间和剂量依赖,这种抗癌效应可能与干扰skp2-p27kip通路有关。     

钩吻总碱对人结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的:探讨钩吻总生物碱提取物(钩吻总碱)促进人结肠癌HT-29细胞凋亡的机制。方法:钩吻总碱体外干预HT-29细胞24 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法评估其对细胞增殖的影响,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法及流式细胞术(Annexin V-FITC/PI)观察HT-29细胞的凋亡情况,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察HT-29细胞B型淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2 mRNA表达情况,利用紫外分光光度法检测含半胱氨酸的天冬氨酸水解酶-3(Caspase-3)表达量的变化。结果:钩吻总碱可抑制HT-29细胞增殖,200 mg·L~(-1)钩吻总碱干预24 h后,对HT-29细胞增殖的平均抑制率达54.17%。DAPI染色及流式细胞术(Annexin V-FITC/PI)观察到钩吻总碱可促进HT-29细胞凋亡。RT-PCR观察到钩吻总碱能降低HT-29细胞Bcl-2 mRNA表达(P0.05),对Bax mRNA表达无明显影响,提高了Bax/Bcl-2 mRNA表达(P0.05)。利用紫外分光光度法检测到随着钩吻总碱浓度的升高,HT-29细胞的Caspase-3表达呈上升趋势(P0.05)。结论:钩吻总碱能有效地抑制HT-29细胞的增殖,促进HT-29细胞的凋亡,其机制可能与通过Bax/Bcl-2途径诱导细胞凋亡相关。     

辽东楤木叶总皂苷对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响

目的探讨辽东楤木叶总皂苷(ETS)诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响。方法 MTT法检测不同浓度(6.25、12.5、25、50、100、200 mg/kg)ETS培养的结肠癌HT-29细胞增殖率,Hoechst33258染色和激光共聚焦成像检测细胞凋亡,并观察凋亡细胞的形态学改变,免疫组化检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果 ETS可诱导HT-29细胞发生凋亡,且凋亡作用在一定范围内呈剂量依赖性;ETS可使HT-29细胞Bcl-2表达降低、Bax表达升高(P0.05,P0.01),且呈明显的量效关系。结论 ETS可诱导HT-29细胞凋亡,其凋亡机制可能与降低Bcl-2、升高Bax的表达相关。     

蟾毒灵调控PI3K/Akt 通路对结肠癌HT-29 细胞凋亡及周期的影响

目的：研究蟾毒灵诱导人结肠癌HT-29 细胞凋亡及周期阻滞的能力并对其分子机制进行探讨。方法：将人结肠癌HT-29 细胞分为对照组（野生型细胞）,蟾毒灵（Bufalin） 处理组（0.25,0.5,1 μmol/L） 和顺铂（DDP） 组（1 μg/mL）。通过流式细胞术（FCM） 检测蟾毒灵诱导人结肠癌HT-29 细胞凋亡及周期阻滞的作用;使用蛋白质免疫印迹法检测经蟾毒灵处理HT-29细胞24 h 后磷脂酰肌醇-3 激酶（PI3K）、磷酸化磷脂酰肌醇-3 激酶（p-PI3K）、蛋白激酶B（Akt） 和磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）蛋白表达的变化。通过实时荧光定量PCR 法（RT-qPCR） 检测蟾毒灵对HT-29 细胞PI3K、Akt mRNA 表达的影响。结果：FCM结果显示,与对照组比较,蟾毒灵（0.25,0.5,1 μmol/L） 组能诱导结肠癌HT-29 细胞的凋亡（P＜0.05）,并呈剂量依赖性。与对照组比较,蟾毒灵（0.25,0.5,1 μmol/L） 组能够诱导结肠癌HT-29 细胞的周期阻滞于G2/M 期,并且蟾毒灵浓度越大,周期阻滞效果越显著（P＜0.05）。蛋白质印迹实验结果表明,与对照组比较,蟾毒灵能够下调PI3K、p-PI3K、Akt 和p-Akt 的表达水平,并呈一定的剂量依赖（P＜0.05）。RT-qPCR 结果显示,与对照组比较,蟾毒灵能够显著下调PI3K 和Akt mRNA 的表达。结论：蟾毒灵能够诱导结肠癌HT-29 细胞凋亡及周期阻滞,其机制可能与抑制PI3K/Akt 信号通路有关。     

蒲公英提取物调控DPC4对大肠癌细胞凋亡、迁移、 侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨蒲公英提取物通过调控胰腺癌缺失位点4 (DPC4)表达对大肠癌细胞凋亡、迁移和侵袭的影响和机制。方法:用不同终浓度(1.5、3.0、7.5、15.0 mg/mL)的蒲公英提取物处理HT-29细胞48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot检测DPC4蛋白的表达。将pcDNA3.1-DPC4转染HT-29细胞,观察过表达DPC4对HT-29细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。将si-DPC4转染HT-29细胞,给予蒲公英提取物处理后,观察抑制DPC4表达对HT-29细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。结果:蒲公英提取物在体外可诱导HT-29细胞凋亡,抑制HT-29细胞的迁移和侵袭,并呈明显的浓度依赖性。15.0 mg/mL的蒲公英提取物可促进DPC4蛋白的表达。过表达DPC4可显著促进HT-29细胞凋亡,抑制HT-29细胞的迁移和侵袭。抑制DPC4表达能逆转蒲公英提取物对HT-29细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。结论:蒲公英提取物通过上调DPC4表达进而促进大肠癌细胞凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭能力。     

藤梨根正丁醇提取物在人食管癌细胞生长中的作用

目的：观察藤梨根正丁醇提取物对培养人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用,探讨藤梨根对人食管癌细胞的作用机制。方法：MTT比色法检测藤梨根正丁醇提取物在不同浓度（1、10、100μg/ml等）及不同时间（24、48、72 h等）对Eca-109细胞的生长抑制作用,TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应,免疫组化SP法检测凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的表达。结果：藤梨根正丁醇提取物对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强,其生长抑制率可达87.2%;提取物对瘤细胞有明显的凋亡效应,而在对照组未见有明显凋亡现象;提取物对瘤细胞作用24、48、72 h后分别与对照组比较,用药组Bax蛋白表达明显增强（P〈0.01）,同时伴有Bcl-2表达的减弱,在72 h后最明显,差异有显著意义（P〈0.01）。结论：藤梨根正丁醇提取物能有效抑制人食管癌Eca-109细胞生长。     

苦参素诱导人食管癌Eca-109凋亡作用及机制的研究

目的：探讨苦参素诱导人食管癌Eca-109凋亡作用及其机制。方法：运用倒置显微镜和透射电子显微镜观察细胞形态变化;运用流式细胞术检测细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白Bcl-2和Bax的表达水平。结果：苦参素1 mg/mL、2 mg/mL作用24 h后,倒置显微镜和透射电子显微镜观察Eca-109细胞均出现典型的凋亡形态变化;流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率与阴性对照组相比,差异具有显著性（P〈0.05）;Bcl-2表达量明显减少,Bax表达量明显增加,差异具有显著性（P〈0.05）;但细胞凋亡峰不明显。结论：苦参素对人食管癌Eca-109有诱导凋亡作用,其机制与上调Bax和下调Bcl-2表达有关。     

吉祥草提取物对人结肠癌HT-29细胞体外抑制作用的研究

目的 研究吉祥草提取物对人结肠癌HT-29细胞的体外增殖抑制作用和诱导凋亡作用.方法 MTT法筛选吉祥草乙醇提取物及其不同溶剂萃取部分对HT-29细胞抑制作用的活性部位;通过凋亡染色观察细胞凋亡形态;应用流式细胞术Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率.结果 吉祥草正丁醇萃取物对HT-29细胞的抑制作用较强,且呈量效和时效关系,作用48 h时IC50值为66.59 mg·L-1,凋亡染色显示有典型的凋亡形态出现,流式细胞仪检测其能诱导HT-29细胞凋亡并呈剂量依赖关系.结论 吉祥草正丁醇萃取物能抑制人结肠癌HT-29细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

央芪汤对胃癌细胞凋亡影响的实验研究

目的：观察央芪汤对胃癌细胞凋亡的影响。方法：培养人胃癌细胞SGC-7901细胞株,用MTT法评价央芪汤对胃癌细胞增殖的抑制作用,确定央芪汤对胃癌细胞的IC50值,采用流式细胞术检测央芪汤对胃癌细胞凋亡的诱导作用,免疫细胞化学法检最4胃癌细胞中bel-2及caspase-3蛋白的表达情况。结果：央芪汤可以显著促进胃癌细胞SGC-7901的凋亡（P〈0．01）。明显增加胃癌细胞SGC-7901凋亡蛋白caspase-3的表达（P〈0．01）,并可明显抑制抗凋亡蛋白bel-2的表达（P〈0．01）。结论：央芪汤可以通过促进胃癌细胞的凋亡,达到抗肿瘤的目的。     

苦豆子生物碱抗结肠腺癌细胞株SW620的作用筛选

目的：对苦豆子提取物中的总生物碱（TBSA）、苦参碱（MT）、氧化苦参碱（OMT）、槐果碱（SC）、槐定碱（SRI）等进行初步抗结肠癌的体外筛选实验。方法：应用MTT法测定各生物碱对SW620细胞株增殖活性的影响，药物终浓度从0～2mg／ml作用于细胞，检测其抑制SW620的剂量效应关系；应用光学显微镜、荧光显微镜进行细胞形态学观察，流式细胞仪检测生物碱对SW620细胞凋亡的作用，检测细胞凋亡率。结果：5种生物碱对结肠癌SW620细胞株具有不同程度的增殖抑制作用，其作用TBSA〈OMT〈SC〈MT〈SRI；深入研究表明苦参碱、槐定碱对结肠腺癌细胞株SW620有显著的生长抑制及促进凋亡作用，其作用呈时间-剂量依赖性；其中以槐定碱促进凋亡作用最为明显。结论：苦参碱和槐定碱对结肠腺癌细胞株SW620的增殖显著抑制并诱导细胞凋亡，为进一步开展抗结肠癌苦豆子生物碱有效成分的开发和研发中药治疗结肠癌的靶向新药提供实验依据。     

冬虫夏草提取物对结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的:探讨冬虫夏草提取物对结肠癌细胞株HT-29细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:利用不同浓度冬虫夏草提取物(0.5~6.5 mg/m L)作用HT-29细胞24、48和72 h,采用MTT、平板实验、流式细胞检测和WB检测冬虫夏草提取物对HT-29细胞生长增殖作用、细胞集落数的形成、对细胞凋亡率的影响以及对细胞凋亡相关分子Caspase-3蛋白表达的影响。结果:MTT结果表明,提取物能够显著抑制HT-29的生长增殖,呈一定的量时效关系,半数抑制浓度为3.5 mg/m L;流式细胞仪分析表明,冬虫夏草提取物呈浓度依赖性诱导HT-29细胞凋亡,浓度为6.5 mg/m L时,HT-29凋亡率(12.57±0.16)%;Western blotting表明,HT-29细胞与对照组相比,经不同浓度提取物诱导后,Caspase-3表达逐渐增强。结论:冬虫夏草提取物具有抑制HT-29细胞增殖作用,这可能与增加Caspase-3蛋白表达、诱导细胞调亡有关。     

白藜芦醇对结肠癌HT-29细胞的增殖抑制作用研究

目的:观察白藜芦醇对体外培养的人结肠癌HT-29细胞的增殖抑制作用。方法:使用不同浓度白藜芦醇处理体外培养结肠癌细胞系HT-29后,运用细胞计数试剂盒检测法(CCK-8)检测白藜芦醇对HT-29细胞生长的影响,流式细胞术(FCM)检测白藜芦醇对HT-29细胞凋亡率的影响。结果:CCK-8法检测显示白藜芦醇对HT-29细胞的增殖有明显抑制作用,且在一定浓度范围内呈剂量依赖性(P0.01)。FCM法检测结果提示,与阴性对照组比较,不同浓度的白藜芦醇可以提高HT-29细胞凋亡率(P0.05)。结论:白藜芦醇对人结肠癌HT-29细胞的增殖有抑制作用,且能诱导HT-29细胞凋亡,是一种高效低毒的药物,其具体机制有待进一步探讨。     

三叶青提取物对人肺癌H1299细胞凋亡的影响及机制研究

目的探讨三叶青提取物对人肺癌H1299细胞增殖抑制、凋亡作用及其机制。方法采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）检测三叶青提取物对H1299细胞增殖的抑制作用;采用倒置显微镜观察三叶青提取物对H1299细胞形态的影响;荧光显微镜观察三叶青提取物作用细胞后经Hoechst 33258染色的凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白印迹法（Western blot）检测pro-caspase-3、9,cle-caspase-3、9,poly-ADP-ribose polymerase（PARP）蛋白表达变化。结果与对照组比较,浓度为0.5、1、5、10 mg/m L三叶青提取物作用H1299细胞后抑制率升高（P〈0.05,P〈0.01）;同时作用时间越长,抑制率越高（P〈0.01）。倒置显微镜下观察给药后细胞形态明显改变,细胞减少;荧光显微镜下观察荧光染色后细胞核浓染和凋亡小体形成。流式细胞仪检测结果显示细胞凋亡率呈明显的量-效关系。Western blot结果表明：与对照组比较,浓度为5、10 mg/m L三叶青提取物明显抑制H1299细胞中pro-caspase-3、9和PARP蛋白表达,增加cle-caspase-3、9,cle-PARP蛋白的表达,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论三叶青提取物对人肺癌H1299细胞具有明显抑制其增殖,促进细胞凋亡作用,且其机制可能与激活caspase蛋白表达有关。     

苦参碱对人结肠癌HT29细胞生长抑制作用的实验研究北大核心CSCD

目的研究苦参碱（matrine,MA）对人结肠癌HT29细胞系抑制和诱导凋亡的作用。方法分别采用MTT法检测细胞的生长抑制率,流式细胞仪、透射电镜观察MA处理HT29细胞后细胞周期阻滞和细胞凋亡的发生。结果2～32mg／mLMA均能抑制HT29细胞增殖（P〈0．05）,其抑制率与作用时间及浓度相关。4、8、16mg／mLMA处理HT29细胞后,G。／G,细胞明显高于阴性对照组（P〈0．05）,提示细胞周期停滞于G0／G1期。透射电镜可见,HT29细胞出现凋亡形态学改变。结论MA对HT29细胞有抑制作用,机制可能与阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡有关。     

半枝莲提取物对人结肠癌细胞HT-29Pim-1和Pim-2mRNA表达的影响

目的探讨半枝莲提取物对人结肠癌细胞HT-29 Pim-1和Pim-2 mRNA表达的影响。方法采用人结肠癌细胞HT-29常规体外培养,随机设定空白组和不同浓度(0.5、1.5、2.5、4 mg/mL)半枝莲提取物组,干预24h。倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定不同浓度药物对HT-29细胞增殖的影响,并用2.5 mg/mL浓度干预1、3、6、12、24、48 h观察对HT-29细胞增殖的影响;RT-PCR检测药物作用后HT-29细胞Pim-1和Pim-2mRNA的表达。结果半枝莲提取物干预后,HT-29的细胞密度明显减少、细胞变小,抑制HT-29细胞增殖,并呈现出量一效和时一效作用;Pim-1和Pim-2 mRNA表达随药物浓度的增加而减少。结论半枝莲提取物能显著地抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖,下调Pim-1和Pim-2的mRNA表达。     

苦参碱对人结肠癌HT29细胞生长抑制作用的实验研究

目的研究苦参碱（matrine,MA）对人结肠癌HT29细胞系抑制和诱导凋亡的作用。方法分别采用MTT法检测细胞的生长抑制率,流式细胞仪、透射电镜观察MA处理HT29细胞后细胞周期阻滞和细胞凋亡的发生。结果2～32mg／mLMA均能抑制HT29细胞增殖（P〈0．05）,其抑制率与作用时间及浓度相关。4、8、16mg／mLMA处理HT29细胞后,G。／G,细胞明显高于阴性对照组（P〈0．05）,提示细胞周期停滞于G0／G1期。透射电镜可见,HT29细胞出现凋亡形态学改变。结论MA对HT29细胞有抑制作用,机制可能与阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡有关。     

半枝莲醇提物含药血清对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡和周期的影响

目的:研究半枝莲醇提物(EESB,ethanol extract from Scutellaria barbata)含药血清对人结肠癌HT-29细胞株体外诱导其凋亡和周期的变化。方法:体外常规培养人结肠癌HT-29细胞株,制备含药血清,设置空白血清组、含有不同浓度EESB含药血清组、5-FU组,1应用MTT法评价EESB含药血清对HT-29细胞24 h、48 h、72 h的生长抑制率,2Annexin V-PE/7-AAD双染色分析在流式细胞仪上观察EESB含药血清处理HT-29细胞48 h后的细胞凋亡率,3PI法检测细胞周期变化。结果:1与空白组比较,MTT法显示EESB低、中、高剂量含药血清都能抑制HT-29细胞增殖(P0.05),抑制率与作用时间及血清含药浓度相关,72 h时其达到39%。2同空白组比较,低、中、高剂量含药血清处理HT-29细胞48 h后凋亡率显著高于对照组(P0.05),同时低、中、高剂量含药血清处理HT-29细胞48 h后,3与空白组比较,G0/G1期细胞明显较对照组增加(P0.05),提示半枝莲可促进细胞凋亡,并且将细胞生长周期阻滞于G0/G1期,并且S期减少。结论:半枝莲对人结肠癌HT-29细胞有抑制作用,作用机制可能不光与抑制细胞生长有关,还和阻滞细胞生长周期及诱导细胞凋亡有关。     

常绿钩吻碱对人结肠癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨常绿钩吻碱促进人结肠癌HT-29细胞凋亡的机制。方法:常绿钩吻碱体外培养HT-29细胞24 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法评估其对细胞增殖的影响,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法观察HT-29细胞的凋亡情况,蛋白印迹法(western-blot)观察HT-29细胞的B型淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白和B型淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)的表达情况。结果:常绿钩吻碱可抑制HT-29细胞增殖,8μg/mL常绿钩吻碱干预24 h后,对HT-29细胞增殖的平均抑制率达58.81%。DAPI染色法观察到常绿钩吻碱可促进HT-29细胞凋亡。western-blot法观察到常绿钩吻碱能降低HT-29细胞Bcl-2蛋白表达(P<0.05),对Bax蛋白表达无明显影响(P>0.05)。结论:常绿钩吻碱能有效地抑制HT-29细胞的增殖,促进HT-29细胞的凋亡,其机制可能与通过Bcl-2/Bax途径诱导细胞凋亡相关。     

消瘤汤干预大肠癌细胞凋亡相关基因bcl-2 bax表达的实验研究

目的：探讨消瘤汤促进大肠癌细胞株HT-29凋亡的作用机制。方法：采用MTT法测消瘤汤对大肠癌细胞株HT-29作用的有效剂量，运用流式细胞仪测定消瘤汤对人大肠癌细胞株HT-29凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。结果：消瘤汤可促进大肠癌细胞株HT-29凋亡；能抑制凋亡相关基因bcl-2、bax的表达，但对凋亡抑制基因bcl-2的抑制更明显。结论：消瘤汤能促进肿瘤细胞凋亡，其作用机制可能是通过抑制凋亡相关基因表达实现的。