胎盘滋养细胞自噬的研究进展

自噬是一种从酵母菌到哺乳动物细胞中均广泛存在的保守性细胞物质清除机制。在细胞和组织重塑、抵御细胞外刺激和病原体的过程中,细胞内组分可以转移到溶酶体中完成物质的新陈代谢,这对于维护细胞内稳态和物质、能量平衡都至关重要。本文主要探讨滋养细胞自噬在胎盘形成、孕早期滋养细胞缺氧、胚胎着床等过程中的重要作用,并阐述自噬及自噬相关基因与子痫前期及胎儿生长受限发生的相关性。     

细胞自噬与妊娠

细胞自噬是一种重要的生命现象,具有广泛的生理功能。细胞自噬的基本功能是对饥饿的适应,可使细胞在饥饿条件下生存,因此是一种促细胞生存机制。细胞自噬还有助于细胞稳态的维持。最近研究证明细胞自噬与妊娠密切相关。正常妊娠早期存在细胞自噬,其可保护滋养细胞生存,并可参与滋养细胞的分化、发育、侵入和母体螺旋动脉重铸的过程。妊娠中晚期也存在细胞自噬,其可促进胎盘发育,维持妊娠。细胞自噬也与病理妊娠有关:细胞自噬异常与子痫前期密切相关;细胞自噬增强参与胎儿生长受限的发病过程;细胞自噬降低与早产密切相关。     

细胞自噬与妊娠

细胞自噬是一种重要的生命现象，具有广泛的生理功能。细胞自噬的基本功能是对饥饿的适应，可使细胞在饥饿条件下生存，因此是一种促细胞生存机制。细胞自噬还有助于细胞稳态的维持。最近研究证明细胞自噬与妊娠密切相关。正常妊娠早期存在细胞自噬，其可保护滋养细胞生存，并可参与滋养细胞的分化、发育、侵入和母体螺旋动脉重铸的过程。妊娠中晚期也存在细胞自噬，其可促进胎盘发育，维持妊娠。细胞自噬也与病理妊娠有关：细胞自噬异常与子痫前期密切相关；细胞自噬增强参与胎儿生长受限的发病过程；细胞自噬降低与早产密切相关。     

胎盘自噬与子痫前期

子痫前期(PE)是一种妊娠特异性、多脏器疾病,由于病理机制复杂,目前治疗仍以减轻临床症状和适时分娩为主要原则.PE被视为一种胎盘源性疾病,胎盘内部稳态受到细胞自噬的调节.然而关于胎盘自噬在PE发病机制中的作用目前仍存在一定分歧,需要进一步阐明.本文结合新的研究成果,概述胎盘自噬相关因素在PE病理中的作用,以期为寻求预防...     

早发型和晚发型子痫前期自噬与凋亡水平差异及相互关系研究

目的探讨早发型子痫前期(early-onset preeclampsia, EOPE)和晚发型子痫前期(late-onset preeclampsia, LOPE)胎盘组织中自噬和凋亡水平的差异,利用人绒毛膜滋养层细胞株HTR 8/SVneo缺氧模型探讨自噬与凋亡的关系,为解释子痫前期(preeclampsia, PE)的发病机制提供新的思路。方法选取2018年1～6月上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院产科剖宫产分娩孕妇26例的临床资料。按照PE发生程度分为EOPE组10例,LOPE组6例,正常孕妇组10例。通过透射电镜观察EOPE组、LOPE组和正常孕妇组胎盘组织滋养层细胞中的自噬溶酶体;采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应和免疫印迹方法检测EOPE组、LOPE组和正常孕妇组胎盘组织中自噬相关基因(LC 3和Beclin-1)、抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax mRNA和蛋白水平的表达;利用HTR 8/SVneo缺氧模型,检测LC 3、Beclin-1、Bcl-2和Bax mRNA水平的表达。结果与正常孕妇组胎盘组织相比,EOPE组自噬溶酶体含量降低,LC 3、Beclin-1和Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低,Bax表达升高,差异均有统计学意义(P0.05)。LOPE组自噬溶酶体含量增加并且出现凋亡细胞,LC 3、Beclin-1和Bax表达均升高,Bcl-2表达降低,差异均有统计学意义(P0.05)。缺氧模型中,与正常HTR 8/SVneo细胞相比,缺氧12 h组LC 3和Beclin-1 mRNA表达水平均升高,Bcl-2和Bax mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P0.05),抑制自噬活性后,Bax mRNA表达水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05);24 h和48 h组LC 3、Beclin-1、Bcl-2和Bax的mRNA表达均降低,差异有统计学意义(P0.05);72 h组LC 3、Beclin-1和Bax表达均升高,Bcl-2表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 EOPE组胎盘滋养层细胞中自噬活性受损,凋亡水平增加;而LOPE组中自噬和凋亡水平均增加;短期缺氧激活滋养层细胞自噬,凋亡降低,抑制自噬凋亡增加;长期缺氧引发过度自噬和凋亡。     

可溶性血管内皮生长因子受体1与子痫前期的相关研究

子痫前期(preeclampsia)是妊娠期特有的疾病,以妊娠20周后出现高血压和蛋白尿为特征,并伴有全身多脏器损害。目前研究认为,子痫前期-子痫的发病起源于滋养细胞侵袭不足引起的胎盘病理生理改变,进一步导致全身血管内皮细胞损伤,从而引起子痫前期的一系列临床症状。可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)在子痫前期的发生发展过程中起重要作用,干扰滋养细胞侵袭和母体血管重铸过程,参与子痫前期炎症反应和引发母体血管内皮功能障碍。针对sFlt-1在子痫前期的相关作用及研究进展作综述。     

可溶性血管内皮生长因子受体1与子痫前期的相关研究

子痫前期(preeclampsia)是妊娠期特有的疾病,以妊娠20周后出现高血压和蛋白尿为特征,并伴有全身多脏器损害.目前研究认为,子痫前期-子痫的发病起源于滋养细胞侵袭不足引起的胎盘病理生理改变,进一步导致全身血管内皮细胞损伤,从而引起子痫前期的一系列临床症状.可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)在子痫前期的发生发展过程中起重要作用,干扰滋养细胞侵袭和母体血管重铸过程,参与子痫前期炎症反应和引发母体血管内皮功能障碍.针对sFlt-1在子痫前期的相关作用及研究进展作综述.     

子痫前期滋养细胞信号转导异常的研究

近年来的研究发现滋养细胞浅浸润是子痫前期发生、发展的关键环节,细胞信号转导调节细胞的生物学活性,在子痫前期患者滋养细胞中发现多种信号转导通路发生异常,并影响滋养细胞的侵袭性,推测其可能在子痫前期发生、发展中发挥重要作用。对滋养细胞信号转导的深入研究,有助于整体上揭示子痫前期的发病机制,随着蛋白激酶用于药物开发的研究,也为子痫前期的治疗提供了新的治疗方向。     

Fas表达异常与重度子痫前期的关系研究

目的:探讨重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞Fas(又称APO-1,CD95)的表达及意义。方法:采用免疫组化法观察24例Fas在重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的表达,并与24例正常晚期妊娠胎盘比较。结果:Fas主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞浆及胞膜内。与正常对照组比较,Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达水平显著增加(P<0.05),差异有显著性。Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达与新生儿出生体重和胎盘重量均有明显相关性。结论:Fas在重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞中表达失衡,通过免疫途径诱导滋养细胞发生级联凋亡反应及滋养细胞对螺旋小动脉的浸润过浅,影响“血管重铸”过程,导致胎盘缺血、缺氧,可能与重度子痫前期的病因及病理过程有关。     

子痫前期滋养细胞信号转导异常的研究

近年来的研究发现滋养细胞浅浸润是子痫前期发生、发展的关键环节，细胞信号转导调节细胞的生物学活性，在子痫前期患者滋养细胞中发现多种信号转导通路发生异常，并影响滋养细胞的侵袭性，推测其可能在子痈前期发生、发展中发挥重要作用。对滋养细胞信号转导的深入研究，有助于整体上揭示子痫前期的发病机制，随着蛋白激酶用于药物开发的研究，也为子痫前期的治疗提供了新的治疗方向。     

Beclin1介导的自噬在辐射诱导细胞早衰中的作用

自噬是机体及细胞必不可少的调节过程,在维持细胞的正常生理状态过程中发挥重要的作用。Beclin1是自噬的核心功能基因之一,其影响自噬体形成,并通过自噬影响肿瘤的发生和发展。研究发现Beclin1在p62蛋白介导的早衰调控中发挥一定作用,电离辐射可引起细胞发生自噬及早衰等细胞反应,导致细胞死亡。研究Beclin1介导的自噬在辐射诱导细胞早衰中的作用对肿瘤的放射治疗有重要意义,可为如何提高肿瘤细胞的放射治疗敏感性这一问题提供参考。综述Beclin1介导的自噬在辐射诱导细胞早衰中作用的相关研究进展,为Beclin1相关的肿瘤放射治疗的理论基础研究提供参考。     

肿瘤坏死因子-α和半胱氨酸蛋白酶-3在子痫前期胎盘的表达

目的 探TNF-α和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在子痫前期胎盘的表达.方法 采用免疫组织化学技术检测TNF-α和Caspase-3在子痫前期胎盘的表达,并采用Morphology/BX51系统进行图像分析.结果 TNF-α与Caspase-3在正常孕妇、轻度子痫前期及重度子痫前期患者胎盘组织中的定位和分布基本一致,但表达强度逐渐增高(P＜0.01).阳性细胞为细胞滋养细胞与合体滋养细胞以及蜕膜细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞和绒毛间质细胞等.结论 子痫前期患者TNF-α在胎盘组织的表达升高可能是子痫前期发病机制的重要环节,与外周循环TNF-α的增高和胎盘细胞凋亡的发生有关.     

子痫前期患者离体胎盘细胞的凋亡及其临床意义

目的:探讨子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡情况及其临床意义。方法:选择重度子痫前期、轻度子痫前期患者及正常以社会因素剖宫产孕妇各12例,分别取胎盘组织进行培养,以流式细胞仪测胎盘细胞的凋亡率并进行比较。结果:子痫前期患者胎盘细胞的凋亡率明显高于正常孕妇(P<0.05);重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率高于轻度者,差异有显著性(P<0.05)。结论:子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率增加,并与病情的严重程度呈正相关。凋亡率的增加与子痫前期的病因及病理过程密切相关。     

子痫前期患者胎盘滋养细胞中TGF-β1与PLGF的表达及相关性

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)与胎盘生长因子(PLGF)在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的表达及两者在发病机制中的作用。方法:采用免疫组化法检测30例正常妊娠及68例子痫前期患者TGF-β1与PLGF的表达强度。结果:重度子痫前期组TGF-β1的表达强度明显高于正常妊娠组、轻度子痫前期组(P<0.05),PLGF的表达强度明显低于正常妊娠组、轻度子痫前期组(P<0.05),TGF-β1与PLGF的表达在各组中呈负相关。结论:TGF-β1与PLGF不仅与子痫前期患者胎盘浅着床有关,并且还参与调节了子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞和血管内皮细胞的生长发育分化过程,并在疾病的发生、发展过程中发挥了重要作用。     

子痫前期滋养细胞ABCG2表达的研究

目的探讨正常及子痫前期胎盘滋养细胞分化前、后胎盘表达的主动转运因子ATP结合匣式转运子G2 (ABCG2)mRNA及蛋白的表达变化。方法酶消化法原代培养正常及子痫前期胎盘绒毛滋养层细胞,经传代与纯化后免疫鉴定滋养细胞及其纯度。收集培养后72 h (未分化状态)及培养后6 d (分化状态)的细胞,裂解后应用实时荧光定量PCR及Western Blot检测各组细胞ABCG2 mRNA及蛋白的表达水平。结果成功自正常及子痫前期胎盘中原代培养人绒毛滋养层细胞,未分化状态下子痫前期滋养细胞ABCG2mRNA及蛋白的表达平均值为正常的2. 54及2. 06倍,分化状态下子痫前期滋养细胞ABCG2mRNA及蛋白的表达为正常的1. 65及1. 53倍;正常胎盘滋养细胞分化后ABCG2 mRNA及蛋白表达增高3. 55及4. 06倍,子痫前期组仅增加2. 31及3. 03倍。结论自子痫前期及正常胎盘原代培养滋养细胞区分不同分化状态,实时荧光定量PCR及Western Blot检测子痫前期滋养细胞不同分化时期ABCG2 mRNA及蛋白的表达均高于正常,但滋养细胞分化后子痫前期ABCG2 mRNA及蛋白表达增长的程度低于正常。     

子痫前期患者外周血T-bet mRNA和GATA3 mRNA的表达水平

目的:从Th细胞特异性转录因子T-bet和GATA3的角度探讨其在子痫前期(pre-eclampsia)发病过程中可能的病理生理机制,为子痫前期的病因研究及免疫治疗提供思路。方法:采集正常产妇和子痫前期患者外周血单个核细胞(PB-MCs),提取总RNA,逆转录成cDNA,利用SYBRGreenI荧光定量PCR方法,以β-actin为内对照基因检测每组PBMCs中T-bet mRNA和GATA3 mRNA的表达水平。结果:①GATA3 mRNA在正常妊娠组、子痫前期轻度组和子痫前期重度组的表达随病情的加重表达减弱,子痫前期重度组与正常妊娠组相比差异有统计学意义(P<0.05),子痫前期轻度组与正常妊娠组、子痫前期重度组比较差异无统计学意义(P>0.05);②T-bet mRNA的表达随病情的加重表达增强,子痫前期重度组与正常妊娠组、子痫前期轻度组相比差异有统计学意义(P<0.05),子痫前期轻度组的表达也高于正常妊娠组,但差异无统计学意义(P>0.05);③T-bet mRNA/GATA3 mRNA比值结果显示,随病情的加重比值增大,且子痫前期重度组与正常妊娠组比较差异有统计学意义(P<0.05),子痫前期轻度组与正常妊娠组、子痫前期重度组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:子痫前期患者外周血中表现为免疫杀伤的Thl型细胞转录因子T-bet mRNA表达增强,表现为免疫保护或免疫营养的Th2型细胞转录因子GATA3 mRNA表达减弱,提示子痫前期患者外周血中T-bet mRNA的高表达与其发病有关,GATA3 mRNA在子痫前期的发生、发展中的作用不如T-bet mRNA明显;T-bet mRNA/GATA3 mRNA比值随病情的加重而增大,提示外周血中Th1/Th2转录因子的平衡偏离可能是导致子痫前期发病的病因之一。     

细胞自噬与脓毒症

自噬可分为3种类型：微自噬(microautophagy)、分子伴侣介导的自噬(chaperone mediated autophagy,CMA)和巨自噬(macroautophagy)。巨自噬(简称自噬autophagy)是一种基因调控的、高度保守的细胞降解过程,也是一种重要的自我平衡的过程,发生于所有真核细胞中［1-3］。在针对应激的过程中,自噬常常扮演着细胞应答的角色［4］。而且,自噬无论在先天免疫还是适应性免疫机制中均有着不可忽视的重要作用［2］。自噬与各种疾病的病理及生理过程广泛相关（例如感染、肿瘤、神经退行性疾病、心血管及肺部疾病等）,近期的研究［5-6］也表明,自噬在脓毒症中发挥一定的保护作用。本文从细胞病理学和分子生物学角度就细胞自噬在脓毒症发生发展中的作用作一综述,为寻找脓毒症治疗的新手段提供依据与线索。     

硒在子痫前期防治研究中的新进展

硒是人类和动物必需的微量元素,硒对妊娠期妇女子痫前期的防治有潜在益处。胎盘滋养细胞的生物学功能(增殖/凋亡、侵袭能力等)异常及氧化应激是导致子痫前期的发生、发展的关键环节。硒通过硒蛋白发挥其生物学功能,了解硒蛋白的生物合成过程对硒的体外研究至关重要。早期文献已证明硒蛋白具有一定的抗氧化应激作用,近期研究发现硒蛋白同时具有促进滋养细胞增殖、抗凋亡、促进激素分泌等多种生物学调节功能,这为硒在子痫前期防治中的作用提供了新思路。本文针对子痫前期胎盘滋养细胞生物学功能改变、硒蛋白生物学合成及其对胎盘滋养细胞生物学的影响做一综述。     

重度子痫前期胎盘细胞凋亡及其基因的表达

目的 探讨重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡情况及凋亡相关基因的表达.方法 选择重度子痫前期患者及正常以社会因素剖宫产者各12例,以TUNEL法检测胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率,免疫组化法检测Bcl-2、Bax和Fas的表达.结果 子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率明显高于对照组(F=22.65,P＜0.05);与正常对照组比较,Bax和Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达水平显著增加,差异有显著性(x2分别为4.1958、6.1714,均P＜0.05);Bcl-2在两组胎盘绒毛滋养细胞的表达无明显差异性.结论 子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率增加及促凋亡基因Bax和Fas的高表达导致胎盘缺血和缺氧,可能与重度子痫前期的病因及病理过程有关.     

β-catenin和DKK-1在子痫前期胎盘组织中的表达及意义

目的:探讨β-catenin和DKK-1蛋白表达在子痫前期胎盘组织中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法、Western blot分别检测20例正常、18例轻度子痫前期和27例重度子痫前期胎盘组织中的β-catenin和DKK-1蛋白表达。结果:β-catenin和DKK-1主要表达于胎盘滋养层细胞、蜕膜细胞中,在重度子痫前期胎盘组织中β-catenin、DKK-1表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。重度子痫前期胎盘组织中β-catenin与DKK-1的表达呈正相关,而在正常和轻度子痫前期胎盘组织中两者表达无明确相关性。结论:β-catenin和DKK-1的表达增加可能参与了重度子痫前期胎盘组织病变过程。