舟山眼镜蛇毒心脏毒素-13的纯化、活性及尼群地平对其作用的影响

目的　从舟山眼镜蛇 (Najaatra)毒分离纯化心脏毒素并观察其心脏毒性作用和探讨作用机制。方法　用离子交换和凝胶过滤法从蛇毒中分离纯化心脏毒素 ,观察其对整体动物 ,离体器官和组织的作用及作用影响因素。结果　从舟山眼镜蛇毒中分离出 4个有心脏毒性组分 ,纯化其中 1个定名为心脏毒素 13(Cardiotoxin 13,CTX 13) ,它含有 6 0个氨基酸 ,分子质量 7 76 9ku。小鼠ivLD50 为 0 75 6mg·kg-1。对大鼠离体心脏CTX 13可使冠脉阻力增高 ,心脏收缩幅度减小 ,停于收缩期。尼群地平 (Nit)能取消CTX 13升高冠脉阻力作用 ,同时使CTX 13的负性肌力作用逆转为正性肌力作用。CTX 13可诱发猪离体冠脉环呈剂量依赖性收缩 ,其EC50 为 2 6 0mg·L-1,Nit 0 0 5 μmol·L-1使其量效曲线平行右移 ,EC50 提高到 36 0mg·L-1。但对于大鼠离体乳头肌Nit 0 83μmol·L-1对CTX 13所致心脏毒性无明显对抗作用。在整体实验中Ni0 3mg·kg-1可使大鼠ivCTX 13的最小致死量 (MLD)从 (44 4 7± 2 8 5 ) μg·kg-1提高到(5 41 2± 2 3 2 ) μg·kg-1。结论　CTX 13的心脏毒性作用除其直接心脏毒作用外 ,尚与其收缩冠脉作用有关     

T2毒素在灌流大鼠肠肝中的首过效应和代谢动力学

建立并用大鼠在体肠-肝灌流标本研究了T2毒素在大鼠肠肝中的首过效应和代谢转化动力学,T2毒素在大鼠肠肝中的主要代谢产物是HT2,3′-OHHT2和其葡萄糖醛酸结合物,T2毒素具有显著的肠肝首过效应,当毒素(42μg·ml~(-1))由上肠系膜动脉恒速单次灌流(8 ml·min~(-1))肠-肝标本时,穗态肝、肠抽提率分别为0.978和0.454,总有效清除率为7.91 ml·min~(-1),T2毒素在循环灌流大鼠肠-肝标本中的消除半衰期为6.5min,主要代谢产物HT2,3′-OHHT2的生成半衰期分别为8.5和38.5 min,结果表明,T2毒素经消化道中毒后,在肠和肝的首过代谢下能很快地转化为产物,因此,毒素在体内的毒效作用主要由其代谢产物表现出来。     

T-2毒素在大鼠小肠中吸收和代谢转化的研究

T-2毒素是一种极易污染农作物和储存粮食的单端孢霉烯族毒素,可引起人、畜的各种急慢性中毒,并与人类肿瘤和某些地方病的发生有一定的关系。本文应用大鼠在体肠灌流标本研究了T-2毒素在小肠中的吸收和代谢。将T-2毒素加在灌流液中对小肠进行血管灌流时,主要代谢产物为HT-2毒     

M_2受体抗体在肺源性心脏病发病中大鼠心脏结构影响的实验研究

目的 通过建立肺源性心脏病大鼠模型观察M2受体抗体对心脏结构的影响。方法 60只Wistar大鼠随机分为5组(每组12只):单纯缺氧组、环孢素A组、尼卡地平组、对照组、主动免疫组,测定各组大鼠血清中M2受体抗体的含量,光镜及电镜下观察各组大鼠心脏结构改变并计算相关指标。结果 M2受体抗体在单纯缺氧组为67%,主动免疫组为100%,与对照组(阳性率为8%)比较差异均有统计学意义(P<0.01)。环孢素A组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,单纯缺氧组及主动免疫组心脏结构有明显变化,环孢素A组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 M2受体抗体在引起心脏结构病理改变的过程中具有重要作用。     

中华眼镜蛇全毒对离体大鼠窦房结和乳头肌的电生理效应

用玻璃微电极和心脏活体灌流技术,观察到中华眼镜蛇全毒(1μg/ml)在5min内使离体大鼠窦房结起搏动作电位振幅(APA)降低48.1±SD5.8mV,最大舒张期电位(MDP)衰减-52.0±3.0mV,并最好发生“非可逆性去极化”。舒张期4相去极化速率(RP4D)减慢57.1±SD3.5 mV/s,并产生不规则的类“后电位振荡”现象,导致4相去极化和复极化的紊乱,窦性周长(P)亦延长150±SD70ms。离体大鼠乳头肌经蛇毒1μg/ml灌流,3min内即呈现剧烈的负变力效应,等长峰张力(PCF)衰减了12.5±SD 2.8mm。上述结果提示,中华眼镜蛇全毒中可能含有类“心脏毒素”组分。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠抗氧化能力的影响

目的研究银杏提取物对糖尿病大鼠的抗氧化能力。方法将36只2型糖尿病模型Wistar大鼠按血糖分层随机分为模型对照组、银杏叶提取物高和低剂量(6和3 mg/kg)组,每组各12只。另取12只健康Wistar大鼠作为正常对照。连续给药4周。测定大鼠体质量、心脏/体质量比,血清及心脏丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)、超氧歧化酶(SOD)和糖基化终产物(AGEs)含量,以及血清糖化血红蛋白(HbA1C)。结果与正常对照组相比,模型对照组体质量、血清和心脏GSH、SOD含量显著降低(P<0.01或0.05),而心脏/体质量比、血清HbA1C以及血清和心脏体MDA、AGEs含量显著升高(P<0.01或0.05);与模型对照组相比,银杏叶提取物高和低剂量组大鼠体质量、血清和心脏GSH和SOD含量显著升高(P<0.01或0.05),而心脏/体质量比、血清HbA1C含量以及血清和心脏体MDA、AGEs含量显著降低(P<0.01或0.05)。结论银杏叶提取物可降低糖尿病大鼠的心脏氧化应激反应,此作用可能与银杏叶提取物预防糖尿病心脏病有关。     

阿米洛利对大鼠压力超负荷性心肌肥厚的抑制作用

目的　观察钠氢交换体 (NHE)抑制剂阿米洛利 (Ami)对压力超负荷左室肥厚 (LVH)大鼠心功能、心肌细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)及心肌细胞膜Na+ 、K+ ATP酶活性的影响。方法　①同步记录离体工作心脏LVSP、LVEDP、±dp/dtmax及T值 ;②测定Fura 2 /A负载后的单个心室肌细胞的 [Ca2 + ]i;③光电比色法测定Na+ 、K+ ATP酶的活性。结果　①与对照组相比 ,LVH组LVEDP和T值明显增加 ,-dp/dtmax明显降低 (均P <0 0 1) ;与LVH组相比 ,Ami组和Ena组的LVEDP及T值明显下降 (均P <0 0 1)。②与对照组相比 ,LVH组的心肌细胞 [Ca2 + ]i明显增高 ,细胞膜Na+ 、K+ ATP酶活性明显降低 (均P <0 0 1) ;Ami及Ena可降低LVH大鼠的 [Ca2 + ]i,升高其Na+ 、K+ ATP酶活性 (均P <0 0 1)。结论　压力超负荷大鼠心脏舒张功能明显下降 ,心室肌细胞 [Ca2 + ]i增高 ,心肌细胞膜Na+ 、K+ ATP酶活性受损 ,Ami及Ena均可抑制此类异常     

镰刀菌毒素毒性损伤及硒保护效应的研究

T-2毒素是单端孢霉烯族镰刀菌毒素中毒性最强的毒素之一,它对人畜的危害十分严重,其毒性靶器官为增殖旺盛的组织,如骨髓、淋巴结、胸腺、脾脏、生殖腺等。本实验观察给大鼠连续给每五个月的毒性损伤,同时观察3种不同剂量硒(Se)的保护效应。结果表明,给硒能减轻中毒症状,使T-2毒素引起的白细胞缺乏得以恢复。T-2毒素     

T2毒素对机体内稳态的影响

通过对小鼠微循环观察和大鼠血液酸碱平衡分析试验,研究了T2毒素对机体内稳态的影响。T2毒素单次ip 3.67 mg/kg可引起小鼠严重的微循环障碍。单次sc 0.6 mg/kg可引起大鼠急性代谢性酸中毒,并出现呼吸代偿,表现为反射性过度换气,代偿程度为非完全性,不是复合性酸碱平衡紊乱。     

注射用苦参碱对阿霉素致大鼠心脏重构的影响

目的 研究注射用苦参碱对阿霉素引起大鼠心脏重构的影响。方法 将52只大鼠随机分为:对照组、模型组、苦参碱(100 mg/kg)组,尾iv阿霉素制备心肌损伤模型,采用超声心动图检测大鼠心脏左心室舒张末期内径(LVEDd)、左室射血分数(LVEF)和缩短分数(FS);生理记录仪检测大鼠左心室舒张末期压(LVEPD)、收缩压(LVPS)、室内压最大收缩/舒张速率(±dp/dt_max);称大鼠体质量,脊髓离断法处死大鼠,称大鼠心脏质量并计算心脏指数;试剂盒法检测大鼠心脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)水平;应用流式细胞术检测大鼠心肌细胞凋亡水平。结果 与模型组比较,苦参碱组大鼠LVEDd值显著降低、EF和FS值显著升高;LVEPD显著降低,LVPS、dp/dt_max及－dp/dt_max均显著升高;心脏指数、心肌细胞凋亡率显著降低;心肌细胞内GSH-Px、SOD活性明显升高,MDA水平显著降低。结论 注射用苦参碱减轻阿霉素引起的心肌细胞凋亡,改善心脏重构及心脏功能,可能与改善心肌细胞氧化应激水平有关。     

冠心康宁合剂抗心肌缺血的实验研究

目的:探讨冠心康宁合剂治疗冠心病心绞痛的药效学作用。方法:进行了脑垂体后叶素致大鼠心肌缺血和血浆血管内皮素(ET)、血清一氧化氮(NO)检测试验;盐酸异丙肾上腺素致大鼠心肌缺血试验;对离体豚鼠心脏冠脉流量试验。结果:冠心康宁合剂能显著降低垂体后叶素致心肌缺血大鼠心电图S-T段、T波的抬高;改善应激性心肌缺血大鼠血浆ET、血清NO的含量;降低盐酸异丙肾上腺素致心肌缺血大鼠心电图S-T段、T波的抬高;增加离体豚鼠心脏冠脉流量。结论:冠心康宁合剂具有抗心肌缺血作用,其作用可能与该剂扩张冠脉、增加冠脉流量以及纠正ET、NO的失衡有关。     

二甲基氨氯吡咪对心肌肥厚大鼠离体心功能的影响及机制探讨

目的研究二甲基氨氯吡咪(d im ethylam iloride,DMA)对心肌肥厚大鼠离体心功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法应用Langendorff心脏灌流方法观察DMA对心肌肥厚大鼠离体心脏功能的影响,并使用L-型钙通道阻滞剂和Na+/Ca+交换(sod ium calc ium exchanger,NCX)抑制剂探讨其可能机制。结果在Langendorff灌流的大鼠心脏,DMA(0.5~2)μmol.L-1能增强心肌肥厚大鼠离体心脏功能,即增强左室主动收缩压(LVSP-LVDP)、左室压最大上升速率(+dp/dtm ax)、和左室压最大下降速率(-dp/dtm ax),与用药前比较,差异均具有显著性(P<0.05或P<0.01)。DMA对心肌肥厚大鼠离体心功能的增强作用不能被L-型钙通道阻滞剂尼卡地平(n icard ip ine)阻断,但能被NCX抑制剂氯化镍(N iC l2)阻断。结论DMA(0.5~2μmol.L-1)能增强心肌肥厚大鼠心脏的收缩和舒张功能。DMA增强心肌肥厚大鼠心脏功能的作用可能是通过激动NCX实现的,与L-型钙通道无关。     

丹参酮Ⅱ A 磺酸钠对急性心肌梗死大鼠心肌组织间液钙离子与心功能的影响

目的 检测丹参酮ⅡA磺酸钠灌流对急性心肌梗死大鼠离体心脏心肌组织间液钙离子(Ca²⁺)及心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T, cTnT) 浓度的影响,分析其影响心脏做功的机制。方法 将40只SD大鼠随机分为模型组、普萘洛尔组、异丙肾组、丹参酮组,采用舌下静脉注射垂体后叶素的方法建立大鼠急性心肌梗死动物模型,于造模2 h后断头取心,固定于 Langendorff离体心脏灌流装置后灌流给药。分别检测用药前10 min及药后0.5、1 h心肌组织间液Ca²⁺及cTnT 浓度,心肌收缩力(isometric tension,IT)、心率(reart rate,HR)、左室最大上升/下降速率(±LVdp/dtmax)、左室射血分数(LVEF)、左室内压力峰值(LVSP)。结果 丹参酮组在灌流丹参酮ⅡA磺酸钠用药后0.5和1 h时,cTnT、IT、±LVdp/dtmax、LVEF、LVSP明显降低,组织间液中Ca²⁺明显升高,与用药前及异丙肾组比较, P＜0.05,但HR实验前后差异无显著性。结论 急性心肌梗死时存在钙超载,其机制是大量Ca²⁺内流与cTnT结合,cTnT浓度增高、心肌组织间液Ca²⁺降低,而丹参酮ⅡA磺酸钠可阻止Ca²⁺内流,减少心肌组织间液Ca²⁺过量内流造成钙超载,降低心脏做功,避免钙超载诱导和加重急性心肌梗死。     

二氟甲基鸟氨酸对2型糖尿病大鼠心肌肥厚及内质网应激的影响

目的研究二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine,DFMO)对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌肥厚的作用,以及对内质网应激蛋白GRP78和CHOP的影响。方法采用高糖高脂膳食负荷链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)单次腹腔注射,建立T2DM大鼠模型。实验大鼠分为正常对照组、T2DM模型组和DFMO治疗组,上述条件继续饲养12周。检测各组大鼠空腹血糖、心脏参数、心肌纤维化程度;测定MDA含量、SOD和T-AOC活性;检测GRP78和CHOP蛋白表达。结果 DFMO治疗后,降低T2DM大鼠空腹血糖和心脏参数(P<0.05),心肌间质纤维化程度下降(P<0.05),MDA含量降低,SOD和T-AOC活性增加。同时,DFMO治疗可以下调GRP78和CHOP蛋白表达水平(P<0.05)。结论 DFMO抑制T2DM大鼠心肌肥厚,机制与下调GRP78和CHOP蛋白表达,抑制内质网应激有关。     

T-2毒素简讯

<正> T-2毒素(T-2 Toxin)为单端孢霉烯族镰刀菌毒素。镰刀菌(fusarium)在自然界广泛分布,极易侵染危害麦子和玉米等谷物,引起人和家畜中毒。本品由镰刀菌培养生物合成,为白色、针状结晶。经元素分析、熔点、薄板层析、红外光谱、质谱等检测     

辛伐他汀对自由基引起的离体大鼠心肌损伤的保护作用

目的　探讨在大鼠离体灌流心脏预先给予辛伐他汀能否对抗自由基引起的心肌功能损伤。方法　在Langen dorff离体大鼠心脏上观察辛伐他汀能否拮抗DPPH自由基对离体心功能的损伤 ,记录左心室收缩功能指标 ,冠脉流量(CF) ,心率 (HR)及心肌组织脂质过氧化物丙二醛 (MDA)的生成。结果　在DPPH自由基损伤对照组LVDP ,+dp/dtmax,CF ,HR较正常对照组下降 (P <0 0 1) ,而MDA的生成较正常对照组升高 (P <0 0 1)。预先给予含辛伐他汀的灌流液灌流 15min ,再用含DPPH自由基的灌流液灌流心脏 ,结果显示心脏收缩功能指标LVDP ,+dp/dtmax较DPPH自由基损伤组改善 (P <0 0 1) ,而MDA的生成较DPPH自由基损伤对照组减少 (P <0 0 1)。CF及HR较DPPH损伤组也稍有改善。结论　辛伐他汀对DPPH自由基引起的心肌损伤具有明显的保护作用。     

葛根注射液抗心肌缺血作用药理研究

目的 考察葛根注射液的抗心肌缺血作用。方法 考察葛根注射液高中低剂量组对大鼠离体心脏左室峰压(LVSP)、冠脉流量(CF)及大鼠离体心脏缺血再灌注后的LVSP、左室舒张期末压(LVEDP)、心率(HR)、CF的影响。结果 葛根注射液可升高大鼠离体心脏心肌收缩力及冠脉流量;对离体心脏缺血再灌注导致的LVSP和LVEDP的升高、心率及冠脉流量的降低均有对抗作用。结论 葛根注射液具有抗心肌缺血的作用。     

依那普利和牛磺酸逆转肾性高血压大鼠左心室肥厚及抗心律失常的作用

肾性高血压大鼠形成左心室肥厚后,心肌线粒体Ca2+含量和用成串电脉冲刺激离体心脏引起的心律失常发生率显著增高。依那普利(6mg·kg^-1),牛磺酸(30mg·kg^-1)在左心室肥厚形成后(术后第9周)开始连续po给药9周,均能显著降低血压、左心室重与体重的比值、电刺激引起的心律失常发生率和心肌线粒体Ca²⁺含量,且两药合用后,降压作用增强。本实验表明,肾性高血压左心室肥厚大鼠的心脏对电刺激的敏感性增加,更容易产生心律失常;依那普利和牛磺酸对肾性高血压大鼠有降压、逆转左心室肥厚的作用,并能降低左心室肥厚大鼠的心脏对电刺激的敏感性。     

急性切口痛大鼠血浆及上消化道胃动素表达的变化

目的观察急性切口痛大鼠血浆、胃体及十二指肠胃动素(MTL)水平的变化。方法 SPF级健康雄性SD大鼠156只,6~8周龄,体质量180~220 g,采用随机数字表法将其分为2组(n=78):对照组(C组)和切口痛组(P组)。P组行右足跖肌切口。2组先随机各取6只大鼠,于术前24 h(T0)、术后1 h(T1)、6 h(T2)、24 h(T3)、48 h(T4)、72 h(T5)测定机械缩足阈值(PWMT)与热缩足反射潜伏期(PWTL)。并于上述每个时点,2组分别取12只大鼠,断头处死,提取血浆、胃体及十二指肠组织,采用ELISA法测定MTL水平。结果与C组比较,P组T1~T4时PWMT降低,PWTL缩短,血浆、胃体MTL水平降低,而十二指肠MTL水平升高(P<0.05),T0、T5时差异无统计学意义;P组血浆MTL水平与PWMT、PWTL呈正相关(r分别为0.952、0.879,P<0.01),P组胃体MTL水平与PWMT、PWTL呈正相关性(r分别为0.970、0.931,P<0.01);十二指肠MTL水平与PWMT、PWTL呈负相关性(r分别为-0.991、-0.975,P<0.01)。结论急性切口痛可使大鼠血浆、胃体MTL水平降低,而使十二指肠MTL水平升高。     

环维黄杨星D对大鼠心脏功能及血压的作用

目的观察环维黄杨星D(CVB-D)对正常大鼠在体心脏功能和血压的调节作用。方法雄性SD大鼠灌胃给予CVB-D 3.35 mg·kg~(-1)·d~(-1),分别于给药2,4和6周后,用血流动力学方法观察大鼠的收缩压、舒张压、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力最大变化速率(±dp/dt_(max))以及心率。结果与对照组相比,灌胃给予CVB-D 6周后,大鼠LVSP增高,收缩压降低。而各时间点给药组LVEDP、±dp/dt_(max)、舒张压及心率均未发生明显改变。结论CVB-D对在体大鼠有一定的增强心脏功能和降低主动脉压力效应,同时不会引起心动过速。