医院风险预警系统及预警方法在普通病房的应用研究

目的研究医院风险预警系统用于普通病房病人病情定量评估的可行性,为临床护理中患者病情的评估提供科学参考。方法选取2014年10月至2017年9月在普通病房住院的7289例患者。其中男4201例,女3084例,年龄22-74岁,平均(42.65±5.14)岁;对所有患者使用医院风险预警系统,记录监控异常情况,根据MEWS评分高低进行早期预警病情的变化与严重程度并采取及时的干预措施。结果有效病例数为7285,有效比例99%,无效病例数4例。评分超过4分病例560例,557例为高危病例,Spearman相关性分析表明MEWS评分与病人病情转归存在显著相关性(r=-0.333,P0.05),MEWS评分越高表明病人病情越重,患者治愈比例越低,预后越差。结论医院风险预警系统用于普通病房病人,能够自动预警提示且实时监控病人情况,提高了医疗监护的可靠性和安全性,可有效解决青年医护人员由于缺乏临床工作经验,不能及时客观准确的评估判断普通病房患者早期病情变化的问题。     

β-Catenin信号转导通路在肺癌A549细胞顺铂耐药中的作用

目的建立肺癌A549顺铂多药耐药细胞株,研究肺癌耐药的机制。方法使用顺铂逐步增加剂量和间歇大剂量冲击相结合的方法诱导肺癌A549细胞,以建立其多药耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验比较A549与A549/DDP细胞对顺铂的敏感性;绘制A549和A549/DDP细胞生长曲线,观察二者的增殖速度变化;Western blotting实验显示A549和A549/DDP细胞之间Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β和β-Catenin蛋白的表达改变。结果经过30周的诱导我们建立了肺癌A549细胞的顺铂耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验结果显示顺铂对A549和A549/DDP细胞的IC50值分别为(1.37±0.09)和(11.63±0.74)μmol/L,与A549细胞比较,A549/DDP细胞对顺铂耐药8.47倍,生长曲线结果显示A549/DDP细胞的增殖速度与A549细胞没有显著性差异;Western blotting的结果显示A549/DDP细胞的Akt磷酸化水平升高,抑制了下游GSK-3β的活性,导致了细胞内β-Catenin蛋白的上调。结论建立了肺癌A549顺铂多药耐药细胞系A549/DDP,A549/DDP细胞中β-Catenin通路的激活与其耐药性的形成有一定的相关性。     

基于本体的多Agent语义挖掘系统

在分析语义W eb与本体需求的基础上,提出了基于本体的多A gent语义挖掘系统模型。该系统由用户A gent、匹配A gent、语义中间件、推理A gent、查询A gent、本体库以及语义信息源等组成。并且开发了基于本体的多A gent语义挖掘系统的实验原型,为下一步研究开发比较成熟的软件产品奠定了良好的基础。     

洛阳汉族人群A2亚型遗传背景初探

目的 探讨ABO血型系统A2亚型在洛阳汉族人群的基因遗传背景.方法 采用血清学方法对A2亚型进行初步鉴定;采用PCR-SSP法进行ABO常规基因定型;对A2型的ABO基因第6、7外显子进行DNA测序.结果 ①通过对150个随机献血员进行PCR-SSP法基因定型,我们发现了A201A202、A202A202、A20101、A202B等10种基因型,但未发现A101A101、A101O2、A102O2等基因型;②通过对17例血清学鉴定为A2亚型的样本进行PCR-SSP法基因定型,发现其中12例为A201O或A201B,5例为A202O或A202B.通过对上述样本进行基因测序,发现A201等位基因主要含有467C>T突变,A202等位基因中主要含有nt1054 C>T突变.结论 洛阳汉族人群A2等位基因构成与其他人种存在显著差异.     

Semaphorin 7A及其受体在A549细胞转移中的作用

目的 观察SEMA7A及其受体在A549细胞转移中的作用机制。方法 利用小干扰RNA技术检测SEMA7A及其受体Plexin C1相互作用对A549细胞转移及其相关信号通路的影响。结果 SEMA7A及其受体Plexin C1在A549细胞中表达明显高于正常肺泡上皮细胞;SEMA7A增加了肿瘤细胞转移关键因子CCR-7、MMP-2及MMP-9的表达,但当SEMA7A及其受体Plexin C1沉默表达后,CCR-7、MMP-2及MMP-9的表达出现下降,同时A549细胞转移受到明显抑制。结论 SEMA7A及其受体Plexin C1相互作用促进了A549细胞的转移。     

S100A16转基因小鼠的构建与鉴定

目的:构建系统表达S100A16基因型小鼠,为研究S100A16基因的生物学功能提供模型动物?方法:将S100A16 cDNA插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射方法建立转基因小鼠?PCR鉴定转基因小鼠的基因型,采用定量PCR(QPCR)方法筛选高表达品系?结果:成功构建S100A16转基因载体,建立了S100A16转基因小鼠,通过PCR及QPCR方法筛选出两个高表达品系(line A,line B)?结论:建立了系统表达S100A16的转基因小鼠,转入的S100A16基因在脂肪?肝脏?肌肉?肺等组织高表达,为研究S100A16的生物学功能特别是在肥胖中的作用及机制提供了动物模型?     

环孢素A滴眼液的研制

目的:建立了环孢素A滴眼液的制备方法.方法:采用蓖麻油制备环孢素A滴眼液,用HLPC测定制剂中环孢素A的含量,并对制剂的稳定性进行了考察.结果:本研究研制的环孢素A滴眼液制备工艺简单,质量稳定,含量测定快速、准确.结论:该制剂工艺可用于常规制备环孢素A滴眼液.     

DNA甲基转移酶3A siRNA真核表达载体的构建和鉴定

目的：构建DNA甲基转移酶3A（DNA methyltransferases 3A,DNMT3A）siRNA重组质粒稳定表达载体,为进一步探讨DNMT3A在多种生物学过程及肿瘤发生发展中的机制提供工具。方法：依据DNMT3A基因的cDNA序列,利用siDESIGN软件获得RNAi靶位点后设计出对应的siRNA寡核苷酸模板,体外合成寡核苷酸片段经退火形成短双链,克隆到真核表达载体pSUPER-EGFP1中,构建DNMT3A siRNA重组质粒载体,经酶切鉴定后转染人肝癌细胞系SMMC-7721,荧光实时定量PCR初步分析DNMT3A经RNA干涉后的沉默效应。结果：成功构建了靶向DNMT3A基因的siRNA重组稳定表达载体,此载体有效地降低了肝癌细胞系中DNMT3A基因的表达水平。结论：通过该方法初步确定了沉默DNMT3A基因的较佳靶点。     

人耐药肺腺癌A549/DDP细胞株的差异蛋白质组学

目的：建立A549与A549/DDP两组细胞株的双向凝胶电泳图谱,识别并鉴定其差异表达的蛋白质,筛选肺腺癌耐药相关蛋白质。方法：收集A549与A549/DDP两组细胞株的总蛋白质,应用二维凝胶电泳（two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）进行分离应用,图像分析识别差异表达的蛋白质点,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定差异蛋白质点。使用Western免疫印迹对其中4个蛋白质进行验证。结果：建立了A549与A549/DDP细胞蛋白质的2-DE图谱,识别了40个差异表达的蛋白质点,鉴定了23个差异表达蛋白质。Western免疫印迹证实了差异蛋白质热休克蛋白β1,膜联蛋白A4,丝切蛋白l和波形蛋白在A549与A549/DDP细胞中的差异表达水平。结论：23个差异表达蛋白质为研究肺腺癌耐药机制提供了实验依据。     

DNA甲基转移酶3A siRNA 真核表达载体的构建和鉴定

目的:构建DNA甲基转移酶3A(DNA methyltransferases 3A,DNMT3A)siRNA重组质粒稳定表达载体,为进一步探讨DNMT3A在多种生物学过程及肿瘤发生发展中的机制提供工具.方法:依据DNMT3A基因的cDNA序列,利用siDESIGN软件获得RNAi靶位点后设计出对应的siRNA寡核苷酸模板,体外合成寡核苷酸片段经退火形成短双链,克隆到真核表达载体pSUPER-EGFP1中,构建DNMT3A siRNA重组质粒载体,经酶切鉴定后转染人肝癌细胞系SMMC-7721,荧光实时定量PCR初步分析DNMT3A经RNA干涉后的沉默效应.结果:成功构建了靶向DNMT3A基因的siRNA重组稳定表达载体,此载体有效地降低了肝癌细胞系中DNMT3A基因的表达水平.结论:通过该方法初步确定了沉默DNMT3A基因的较佳靶点.