供体凋亡淋巴细胞预输注对猪肝移植受体CD4+T、CD8+T、CD4+CD25+调节性T细胞的影响

背景：凋亡细胞能够主动调节机体的免疫功能,并能通过调节机体细胞免疫和体液免疫的途径诱导免疫耐受,但这些结果只在大鼠肝脏移植模型中证实。 目的：探讨通过⁶⁰Co γ射线体外处理后的供体淋巴细胞预输注诱导猪肝移植特异性免疫耐受的作用中,对淋巴细胞亚群的影响。 方法：建立非转流小型猪原位肝移植模型。将受体猪随机摸球法均分为2组：空白对照组,受体猪无特殊处理,行肝移植;淋巴细胞组：受体猪在肝移植前7 d经耳静脉注射⁶⁰Co γ射线处理过的5×10⁸个供体淋巴细胞。观察两组受体猪移植后的存活时间,移植后T淋巴细胞亚型CD4⁺T、CD8⁺T、CD4⁺CD25⁺Tr变化及病理。 结果与结论：移植后3 d,两组病理活检均呈急性中、重度排斥反应;移植后6 d,两组均呈急性重度排斥反应。移植后1,3,6 d CD4⁺T、CD8⁺T、CD4⁺CD25⁺Tr升降趋势,两组间差异无显著意义(P > 0.05)。提示,⁶⁰Co γ射线体外处理过的淋巴细胞预输注未能够诱导猪同种异体肝移植特异性免疫耐受,未能引起T淋巴细胞亚群变化有关。     

腰椎间盘退变性疾病与外周血淋巴细胞亚群的关系

文题释义：淋巴细胞亚群：淋巴细胞是白细胞的一种,是机体免疫应答功能的重要细胞成分,是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者,占外周血白细胞总数的20%-40%,按其发生迁移、表面分子和功能的不同,主要分成T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞三大类。 自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)：是机体重要的免疫细胞,不仅与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。 背景：既往研究认为椎间盘退变的主要原因为遗传、衰老、营养不良和负荷史,免疫系统在椎间盘退变过程中的作用尚不清楚。 目的：观察腰椎间盘退变患者外周血淋巴细胞亚群的变化,并研究腰椎间盘退变程度与外周血各淋巴细胞亚群的关系。 方法：收集76例腰椎间盘退变性疾病患者和56例健康志愿者(对照组)的血样,用流式细胞仪检测外周血各淋巴细胞亚群,包括CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD19⁺B细胞、CD3^-CD16⁺CD56⁺自然杀伤细胞等淋巴细胞亚群的百分率,计算CD4⁺/CD8⁺比值。采用Pfirrmann分级标准评估2组腰椎间盘退变程度和分级,进一步评估外周血各淋巴细胞亚群与腰椎间盘退变程度的相关性。研究经郑州大学第一附属医院伦理审查委员会批准(伦理批号：2019-KY-285),所有受试者都签署了知情同意书。 结果与结论：①腰椎间盘退变性疾病组的腰椎间盘退变程度明显高于对照组(P < 0.05);②腰椎间盘退变性疾病组CD4⁺T细胞百分率、自然杀伤细胞百分率和CD4⁺/CD8⁺比值明显高于对照组(P < 0.05);腰椎间盘退变性疾病组CD8⁺T细胞百分率较对照组显著降低(P < 0.05);③对照组腰椎间盘退变程度与外周血各淋巴细胞亚群无相关性;腰椎间盘退变性疾病组腰椎间盘退变程度与CD4⁺ T细胞百分率、CD4⁺/CD8⁺比值、自然杀伤细胞百分率成线性正相关(r =0.412,P=0.000;r=0.715,P=0.000;r=0.494,P=0.000),与CD8⁺ T细胞百分率成线性负相关(r=-0.737,P=0.000);④结果表明,腰椎间盘发生退行性改变可能与外周血各淋巴细胞亚群改变有关,且CD4⁺T细胞增多、自然杀伤细胞增多以及CD4⁺/CD8⁺比值增高可能加速腰椎间盘退变。提示,免疫系统改变预示腰椎间盘退变发生的可能,其有望成为腰椎间盘退变性疾病的防治靶点。 ORCID: 0000-0002-8087-2356(冯阳) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

外周血淋巴细胞亚群在儿童EB病毒感染中的变化及临床意义

目的：探讨外周血淋巴细胞亚群在儿童EB病毒(EBV)感染诊断中的临床意义。方法：选取EBV感染患儿48例作为观察组，另选取急性支气管肺炎患儿23例和肺炎支原体(MP)感染患儿48例作为对照组。流式细胞术检测患儿外周血淋巴细胞亚群，并收集患儿临床资料。比较观察组与对照组、观察组传染性单核细胞增多症(IM)与非IM、肝功能异常与肝功能正常患儿淋巴细胞亚群变化。线性相关分析法分析观察组淋巴细胞亚群与血清EBV-DNA载量的相关性。受试者工作特征(ROC)曲线评估淋巴细胞亚群的诊断效能。结果：EBV感染患儿外周血淋巴细胞数量、T细胞数量和比例、CD8⁺T细胞数量和比例升高(均P<0.05),CD4⁺T细胞比例、B细胞比例及CD4⁺/CD8⁺降低(均P<0.05)。EBV感染患儿外周血淋巴细胞改变与EBV-DNA载量相关。与非IM和肝功能正常患儿相比，IM和肝功能异常患儿淋巴细胞数量(均P<0.001)、T细胞数量(均P<0.001)和比例(P<0.001;P=0.002)、CD...     

静脉输注过氧化氢溶液上调小鼠脾脏和外周血CD4+Foxo3+调节性T细胞

背景：现已证实,天然生成的调节性T细胞在维护机体免疫稳态、抑制炎性反应、抗移植排斥、抑制抗肿瘤免疫应答以及防治自身免疫病中都有重要的功能和作用。 目的：探讨静脉输注过氧化氢对BALB/c小鼠CD4⁺CD25⁺Foxo3⁺ 调节性T细胞的影响。 方法：取BALB/c小鼠12只,随机分为两组。H₂O₂处理组小鼠尾静脉注射含有H₂O₂的PBS;PBS组小鼠静脉注射无菌PBS。分别在注射2周后处死小鼠,采集小鼠外周血、脾脏和胸腺,采用流式细胞仪检测其中CD4⁺CD25⁺ Foxp3⁺T细胞比例。 结果与结论：H₂O₂处理组小鼠外周血和脾脏CD4⁺Foxp3⁺ T细胞比例、CD4⁺Foxp3⁺/CD4⁺细胞比例均高于对照组小鼠(P < 0.05)。提示静脉注射H₂O₂能上调小鼠外周血和脾脏内CD4⁺Foxp3⁺调节性T细胞的比例。     

重度烧伤患者血糖与炎性因子及免疫功能的相关性研究

目的研究重度烧伤患者血糖与炎性因子及免疫功能的相关性。 方法选取2012年1月至2017年12月在成都医学院第一附属医院烧伤整形外科治疗的重度烧伤患者96例作为试验组,另选取成都医学院第一附属医院经体检证明健康的志愿者60名作为对照组,检测两组空腹血糖(FPG)、炎性因子及T淋巴细胞水平,比较两组间FPG、炎性因子以及T淋巴细胞水平之间的差异;再将试验组患者根据FPG浓度分为血糖正常组(17例,FPG <7.0 mmol/L)和血糖升高组(79例,FPG≥7.0 mmol/L),比较两组炎性因子以及T淋巴细胞水平之间的差异,并对重度烧伤患者的FPG与炎性因子及T淋巴细胞水平进行Pearson相关性分析。指标比较采用t检验。 结果试验组患者FPG(11.39±2.28) mmol/L、C反应蛋白(CRP)(39.67±4.15) mg/L、肿瘤坏死因子-α (TNF-α) (108.12±6.49) ng/L、白细胞介素(IL)-6 (139.77±7.43)ng/L、IL-8(91.56±4.91)ng/L,均高于对照组[FPG(5.07±1.15) mmol/L、CRP(5.91±0.76) mg/L、TNF-α(12.94±1.69) ng/L、IL-6(14.11±3.93) ng/L、IL-8(17.22±2.89) ng/L],差异均有统计学意义(t＝5.365、4.365、11.912、9.834、6.139,P值均小于0.01);试验组患者免疫指标CD4^＋ T淋巴细胞水平为(29.77±4.12)%、CD4^＋/CD8^＋为0.91±0.24,分别低于对照组(41.89±5.36)%、1.59±0.37,而试验组的CD8^＋ T淋巴细胞水平为(32.69±4.73)%,高于对照组(25.83±3.52)%,差异均有统计学意义(t＝3.931、2.433、2.696,P值均小于0.05)。试验组患者中,血糖升高组的血浆CRP(45.19±5.45) mg/L、TNF-α(121.81±5.43) ng/L、IL-6(153.31±5.57) ng/L、IL-8(106.56±5.65) ng/L、CD8^＋T淋巴细胞水平(35.46±4.11)%,均高于血糖正常组[CPR(36.67±3.45) mg/L、TNF-α(91.58±4.93) ng/L、IL-6(114.65±6.33) ng/L、IL-8(79.62±3.74) ng/L、CD8^＋ T淋巴细胞水平(28.62±4.03)%],差异均有统计学意义(t＝2.341、2.894、4.167、3.018、2.763,P值均小于0.05);CD4^＋ T淋巴细胞水平(28.89±3.79)%、CD4^＋/CD8^＋(0.82±0.37)均低于血糖正常组[(33.47±4.98)%、(1.17±0.52)],差异均有统计学意义(t＝2.158、2.247,P值均小于0.05);FPG与CRP、TNF-α、IL-6、IL-8以及CD8^＋T淋巴细胞呈正相关(r＝0.651、0.571、0.781、0.425、0.543,P值均小于0.05),与CD4^＋T淋巴细胞、CD4^＋/CD8^＋呈负相关(r＝－0.636、－0.519,P值均小于0.05)。 结论重度烧伤患者机体会发生应激反应,出现应激性高血糖且机体内炎性因子及免疫功能会发生明显的改变,血糖与炎性因子及免疫水平有显著的相关性,血糖越高者,机体炎症反应越明显,免疫功能越低下。     

激酶mTORC2在EAE模型中对致病性CD4+T细胞的调控作用

目的 研究mTORC2信号缺陷减轻EAE临床症状和其对致病性CD4⁺T细胞的调控机制。方法 通过MOG_35-55肽免疫分别诱导Rictor^fl/flCD4^cre(Rictor^-/-)和Rictor^fl/fl(WT)小鼠，记录其临床症状分数和体质量变化情况，应用流式细胞术检测致病性CD4⁺T细胞亚群的数目、过氧化脂质水平和线粒体来源的ROS水平。结果 Rictor^-/-小鼠中EAE临床症状比WT小鼠更轻，致病性CD4⁺T细胞更少，且这群细胞更易发生铁死亡。结论 mTORC2信号缺陷通过促使致病性CD4⁺T细胞发生铁死亡来减轻EAE的临床症状。     

同种异体肢体移植中他克莫司的应用剂量

背景：他克莫司应用于同种异体肝移植的免疫耐受已多见报道。 目的：探索他克莫司在异体肢体移植时的最佳应用剂量。 方法：建立同种异体肢体移植大鼠模型,移植造模后设立给予不同他克莫司剂量的0.5,1,2 mg/(kg•d)组及对照组,对大鼠进行大体观察、组织学、淋巴细胞亚群测定。 结果与结论：移植后出现排斥反应的时间分别是对照组(3.43±0.79) d、0.5 mg/(kg•d)组(5.68±0.97) d、1 mg/(kg•d)组(9.13±1.17) d、2 mg/(kg•d) 组(9.61±2.38) d,排斥反应的病理分级4组分别为(2.61±0.38),(1.57±0.43),(0.85±0.24),(0.71±0.19)级。移植后各给药组CD4⁺、CD8⁺检测值均明显下降,CD4/CD8比值轻度增加或在正常值范围内;对照组CD4⁺、CD8⁺无明显变化,CD4/CD8比值明显增加。提示,他克莫司的应用剂量在1 mg/(kg•d)时就能达到理想的抑制免疫排斥反应,提高用量后意义不大。     

使用活化诱导标记法评价HIV-1感染者特异性CD4+T细胞免疫应答的研究

目的:建立一种检测HIV-1特异性CD4⁺T细胞亚群功能的活化诱导标记法(activation-induced markers,AIM),从而更有效地评价HIV-1抗原特异性CD4⁺T细胞免疫应答水平。方法:选取12例未经抗病毒治疗的HIV-1慢性感染者及6例未感染HIV-1的健康人,分别以基于多色流式细胞术的AIM法和细胞内因子染色法(intracellular cytokine staining,ICS)检测抗原特异性T淋巴细胞功能,并探讨两种方法用于评价HIV-1感染者抗原特异性T细胞免疫应答的能力。结果:AIM法检测HIV-1慢性感染者中HIV-1抗原特异性PD-1⁺CD25⁺CD4⁺T、CD69⁺CD200⁺CD4⁺T、CD69⁺ICOS⁺CD4⁺T细胞阳性的比例为11/12、8/12和7/12,检测CD69⁺ICOS⁺CD8⁺T、CD137⁺CD69⁺CD8⁺T、PD-1⁺CD25⁺CD8⁺、OX40⁺PD-1⁺CD8⁺T细胞阳性的比例为8/12、8/12、7/12、7/12。ICS法检测HIV-1抗原特异性IL-2⁺CD4⁺T、IFN-γ⁺CD4⁺T、TNF-α⁺CD4⁺T细胞阳性的占比为2/12、2/12、0;IFN-γ⁺CD8⁺T、TNF-α⁺CD8⁺T、IL-2⁺CD8⁺T细胞阳性的占比为12/12、10/12、5/12。结论:AIM法在评价CD4⁺T细胞功能方面更为敏感,可作为ICS法的补充,两种方法联合使用可更全面地评估抗原特异性T淋巴细胞反应。     

表达PD-1受体的Tfh细胞促进复发-缓解型多发性硬化急性期发作

目的：探讨多发性硬化(MS)患者外周血滤泡辅助性T淋巴细胞表面PD-1受体表达及其与临床特征的关系。方法：研究人群包括43例复发-缓解型MS急性期发作患者和43例健康志愿者,流式细胞仪检测CD4⁺CXCR5⁺CCR7^loPD-1^hiT细胞,ELISA检测血清IL-21水平。对MS患者治疗前、治疗后4周进行扩展残疾状况评分量表(EDSS)评分并统计头颅MRI增强病灶数目。结果：MS患者治疗后较治疗前EDSS评分降低(P<0.05),但头颅MRI增强病灶数目无明显变化(P>0.05)。MS患者CD4⁺CXCR5⁺T细胞中CCR7^loPD-1^hi亚群细胞比例及血清IL-21水平明显高于健康对照组(均P<0.05),且治疗后两者均降低(均P<0.05)。MS患者MOG-Ig G和MBP-Ab表达阳性者CD4⁺CXCR5⁺T细胞中CCR7^lo     

类风湿性关节炎中树突状细胞亚群分析

目的分析类风湿性关节炎患者外周血和关节液中的DC(dendritic cell,DC)亚群以及DC亚群与炎症产生的关系。方法收集来自西南医院体检中心26例健康人外周血作为对照组,来自西南医院风湿免疫科28例RA患者的外周血及滑膜液作为实验组,其中RA患者的外周血和滑膜液来自同一RA患者。采用人外周血淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离提取对照组和实验组外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)和滑膜液单个核细胞(synovial fluid mononuclear cells,SFMCs),流式细胞术检测如下DC亚群:浆细胞样DC(CD123⁺DC)、髓系DC(CD11c⁺DC),进一步分析CD11c⁺DC亚群,CD1c⁺DC和CD141⁺DC。结果首先我们分析比较健康人外周血、RA患者外周血和RA患者滑膜液中各DC亚群,结果发现:健康人外周血CD123⁺DC亚群的比例明显高于RA患者外周血(P<0.0001),而RA患者外周血和滑膜液CD123⁺DC亚群的比例无显著性差异;而RA患者滑膜液中CD11c⁺DC亚群占比例明显高于RA患者外周血(P<0.01);进一步对CD11c⁺的亚群进行分析,结果发现RA患者滑膜液中CD1c⁺DC所占比例明显高于RA患者外周血(P<0.05);而RA患者滑膜液中CD141⁺DC亚群所占比例也显著高于RA患者外周血(P<0.001);最后我们分析了RA患者滑膜液中CD11c⁺、CD1c⁺以及CD141⁺DC亚群与RA患者滑膜液中活化CD4⁺CD45RO⁺T细胞相关性,结果发现:CD1c⁺DC的比例与CD4⁺CD45RO⁺T细胞比例有显著正相关(P<0.05)。结论RA患者滑膜液中CD11⁺DC、CD1c⁺DC和CD141⁺DC亚群的比例明显高于患者外周血,提示mDC可能在RA的局部炎症中起着比较重要的作用。     

老年冠状动脉粥样硬化性心脏病患者冠状动脉病变影响因素的探讨

目的探讨循环人血管紧张素1～7(Ang1～7)、内皮细胞微颗粒CD31^＋、单核细胞CD14^＋CD16^＋和超敏C－反应蛋白(hs－CRP)对老年冠状动脉粥样硬化性心脏病患者冠状动脉病变的影响。 方法选择2010年1月至2014年3月老年冠状动脉粥样硬化性心脏病患者140例,健康对照组50例。根据冠状动脉狭窄程度将患者分为3组：75%～84%组,85%～94%组和95%～100%组;根据冠状动脉病变支数将患者分为4组：单支、双支、三支和四支病变组;再根据美国纽约心脏病学会(NYHA)分级将患者分为4组：NYHAⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组;又根据左心室射血分数(LVEF)进一步将患者分为3组：48%～58%组、36%～47%组和25%～35%组;根据6 min步行试验的步行距离又将患者分为3组：>450 m组、150～450 m组和<150 m组。采用流式细胞术检测血清CD31^＋和CD14^＋CD16^＋水平的变化,使用双夹心抗体酶联免疫吸附法定量检测Ang1～7水平,应用免疫散射比浊法测定hs－CRP的水平。多组间差异采用单因素方差分析,组间两两比较采用t检验。 结果冠状动脉狭窄75%～84%组Ang1～7(34.8±6.9)pg/mL、CD31^＋(471±29)个/μL、CD14^＋CD16^＋(1.4±0.3)%、hs－CRP(1.7±0.8)mg/L分别与冠状动脉狭窄95%～100%组Ang1～7(9.1±0.4) pg/mL、CD31^＋ (1554±40)个/μL、CD14^＋CD16^＋(5.9±0.8)%、hs－CRP(17.1±1.5) mg/L比较,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);冠状动脉单支病变组Ang1～7(38.7±7.9)pg/mL、CD31^＋(496±30)个/μL、CD14^＋CD16^＋(2.1±0.7)%、hs－CRP(1.9±0.9)mg/L与分别冠状动脉四支病变组Ang1～7(11.2±2.0)pg/mL、CD31^＋(1583±52)个/μL、CD14^＋CD16^＋(10.6±1.4)%、hs－CRP(14.9±1.9)mg/L比较,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);NYHAⅠ级组Ang1～7(38.5±2.7)pg/mL、CD31^＋(511±32)个/μL、CD14^＋CD16^＋(1.7±0.5)%、hs－CRP(1.9±0.2)mg/L与分别NYHA Ⅳ级组Ang1～7(10.0±1.2)pg/mL、CD31^＋(1598±49)个/μL、CD14^＋CD16^＋(12.1±1.4)%、hs－CRP(15.0±1.9)mg/L比较,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);LVEF 48%～58%组Ang1～7(32.9±6.8)pg/mL、CD31^＋(385±28)个/μL、CD14^＋CD16^＋(2.9±0.8)%、hs－CRP(2.1±0.8)mg/L与分别LVEF 25%～35%组Ang1～7(9.5±2.0)pg/mL、CD31^＋(1644±54)个/μL、CD14^＋CD16^＋(13.0±1.6)%、hs－CRP(14.1±2.0)mg/L比较,差异均有统计学意义(P值均小于0.05);6 min步行试验>450 m组Ang1～7(36.4±7.1)pg/mL、CD31^＋(561±30)个/μL、CD14^＋CD16^＋(1.9±0.5)%、hs－CRP(2.1±0.9)mg/L与分别6 min步行试验<150 m组Ang1～7(10.1±0.9)pg/mL、CD31^＋(1338±41)个/μL、CD14^＋CD16^＋(7.2±0.9)%、hs－CRP(18.7±1.5)mg/L比较,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。 结论Ang1～7水平下降,CD31^＋、CD14^＋CD16^＋和hs－CRP表达水平的增高可能影响老年冠状动脉病变的严重程度。     

PD-L1 在胃癌患者手术前后外周血T 细胞和单核细胞上的表达及意义

目的:检测胃癌患者术前术后外周血细胞表面PD-L1的表达,探讨其表达改变及临床意义。方法:收集44例胃癌患者术前术后和18名健康志愿者外周血标本,流式细胞术检测CD3⁺ CD4⁺ T、CD3⁺ CD8⁺ T 细胞表面PD-1 和PD-L1 以及CD14⁺单核细胞表面PD-L1 的表达。结果:与健康志愿者相比,胃癌患者外周血CD4⁺ T 和CD8⁺ T 细胞表面PD-L1 表达无显著差异[(11.1±6.4)% vs (9.8±5.6)%,P =0.453 2;(13.9±12.0)% vs (12.0±7.1)%,P =0.558 9],而CD14⁺ 单核细胞表面PD-L1 表达水平显著增加[(29.2±16.7)% vs (17.5±9.7)%,P=0.007 3]。但胃癌患者术后CD4+ T 细胞和CD8⁺ T 细胞表面PD-L1 的表达均显著高于术前水平[(15.8±8.2)% vs (11.1±6.4)%,P= 0.001 5;(22.5±13.3)% vs (13.9±12.0)%,P =0.000 2],而术后外周血CD14+单核细胞PD-L1 表达水平并无显著变化[(33.8±17.3)% vs (29.2±16.7)%,P=0.082 8]。同时,胃癌患者手术前后外周血CD4⁺T 和CD8⁺T 细胞表面PD-1的表达无统计学差异[(25.6±9.9)% vs (26.9±8.9)%,P=0.505 5;(26.5±14.6)% vs (29.9±10.4)%,P=0.118 7]。结论:PD-L1 可作为监测原发性胃癌患者的免疫功能和预后评估的有效指标。     

肝移植后他克莫司血药浓度对外周血单个核细胞内HBV DNA的影响

背景：肝移植后他克莫司等免疫抑制剂的长期应用导致机体细胞免疫功能降低,并有可能影响机体对乙肝病毒的清除。 目的：分析乙肝相关肝移植患者后不同浓度他克莫司对外周血单个核细胞中的HBV DNA含量的影响。 方法：纳入乙肝相关终末期肝病肝移植受者23例,根据移植后12周清晨空腹他克莫司血药浓度,分为高浓度组(≥ 10 μg/L) 9例和低浓度组(< 10 μg/L)14例,同时用荧光标记单克隆抗体结合流式细胞技术检测外周血T细胞亚群的百分比,用实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞内的HBV DNA。 结果与结论：用多元线性回归分析外周血单个核细胞内的HBV DNA含量与CD8⁺CD152⁺呈正相关,与CD8⁺CD28⁺呈负相关。高血药浓度他克莫司的患者外周血单个核细胞内的HBV DNA高于低浓度组,其改变与反映细胞免疫功能的指标CD8⁺CD152⁺和CD8⁺CD28⁺的变化有关。     

Toll样受体1对间充质干细胞免疫调节Th17细胞的作用

背景：课题组前期研究表明间充质干细胞具有免疫调节Th17细胞的作用,但内在的调节机制尚待阐明,为此,针对Toll样受体1在其中的作用进行探讨,为今后潜在的细胞治疗策略提供可能的实验依据。目的：探讨Toll样受体1对间充质干细胞免疫调节Th17细胞的作用。方法：贴壁法分离人胚胎骨髓来源间充质干细胞,免疫磁珠法分离正常人CD4⁺ T细胞。CD4⁺ T细胞单独培养或与间充质干细胞共培养4 d。实时定量聚合酶链反应测定白细胞介素17、Toll样受体1相关基因的表达水平;流式细胞仪检测Th17细胞的数量。结果与结论：CD4⁺ T细胞及间充质干细胞均表达Toll样受体1。相对于CD4⁺单独培养组,间充质干细胞共培养组(间充质干细胞+CD4)白细胞介素17明显升高(3.59±0.11,1.14±0.08,P < 0.01);进一步发现Toll样受体1 mRNA表达水平亦相应升高(6.07±1.79,1.53±0.63,P < 0.01)。流式细胞仪检测发现,共培养组(间充质干细胞+CD4)Th17细胞数量明显高于CD4⁺ T细胞组[(4.53±1.27)%,(2.39±0.80)%,P < 0.01)。研究结果表明Toll样受体1可能参与间充质干细胞免疫调节人Th17细胞的作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

自体造血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤后大剂量白细胞介素2过继免疫对长期生存的影响

背景：过继免疫治疗是目前肿瘤免疫治疗的热点,白细胞介素2是一种具有多种生物学活性的细胞因子,在机体的抗肿瘤免疫中起到重要作用。 目的：评价比较淋巴瘤自体造血干细胞移植治疗后应用与不应用大剂量白介素2行免疫治疗的临床疗效。 方法：回顾分析30例恶性淋巴瘤患者(治疗组)自体造血干细胞移植后行大剂量白细胞介素2 治疗,与随机挑选30例患者(对照组)自体造血干细胞移植后未行白细胞介素2治疗进行对比,检测两组患者外周血T淋巴细胞亚群,观察两组免疫功能的变化,并对所有患者进行随访观察。 结果与结论：自体造血干细胞移植后白细胞介素2治疗组外周血T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺水平明显提升。随访结束时统计复发率：治疗组13.3%,对照组26.7%;中位生存期：治疗组14~98 (42±2)个月,对照组8~78 (28±2)个月。提示恶性淋巴瘤自体造血干细胞移植后行大剂量白细胞介素2治疗能提高患者的免疫功能,减少移植后复发率,并有望延长生存期。     

内皮微粒在肾移植急性排斥反应中的诊断作用

背景：血管内皮细胞的变化与移植排斥反应的关系极为密切,内皮微粒脱落于激活或凋亡的内皮细胞,能直接而特异地反映血管内皮细胞的变化,检测血浆中内皮微粒对肾移植排斥反应的诊断监测具有一定的理论和实际意义。 目的：探讨肾移植急性排斥反应时循环内皮微粒的数量和表型的变化及与急性排斥反应之间的关系。 方法：建立同基因和同种异基因大鼠腹腔原位肾移植模型;移植后5 d苏木精-伊红染色观察肾组织的病理学改变,并进行Banff评分;采用免疫组化法检测肾组织中细胞间黏附分子1表达;采用流式细胞术检测血浆中CD144⁺内皮微粒数量及细胞间黏附分子1⁺/CD144⁺内皮微粒的数量;分析内皮微粒的数量和表型与肾组织病理变化的关系。 结果与结论：与同基因移植组比较,异基因移植组Bnaff评分明显增加(P < 0.01),肾组织中细胞间黏附分子1表达明显增强(P < 0.01);与同基因移植组比较,异基因移植组CD144⁺内皮微粒的数量和携带细胞间黏附分子1的内皮微粒的水平明显增加(P < 0.01)。内皮微粒的数量与移植肾急性排斥反应的程度呈正相关(P < 0.01),携带细胞间黏附分子1内皮微粒的水平与移植肾脏中细胞间黏附分子1的表达呈正相关(P < 0.01)。提示肾移植后对内皮微粒数量和表型进行检测对诊断急性排斥反应的发生有一定意义。     

人脐血单个核细胞中CD133+细胞移植治疗心力衰竭的评价

BACKGROUND:Cell purification can eliminate the biological variability of cells, providing new insight into cell regeneration therapy. OBJECTIVE:To study the Influence of CD133⁺ cells on human umbilical cord blood mononuclear cell transplantation for treatment of heart failure. METHODS:Human cord blood mononuclear cells were isolated using lymphocyte separation medium method, and CD133⁺ and CD133^- cells were sorted using immunomagnetic beads at a cell density of 1×10⁸/L. Forty Sprague-Dawley rats were randomized into five groups: sham group, model group, CD133⁺ cell group, CD133^- cell group and mononuclear cell group. Animal models of heart failure were made using intraperitoneal injection of isoproterenol in all the groups except for the sham group. Rats in the CD133⁺ cell group and CD133^- cell group were given 1 mL CD133⁺ cells plus 1 mL PBS and 1 mL CD133^- cells plus 1 mL PBS via the tail vein, respectively. Rats in the mononuclear cell group were given 1 mL CD133⁺ cells plus 1 mL CD133^- cells via the tail vein, and those in the sham and model groups given 2 mL PBS via the tail vein. After 4 weeks, cardiac pathology, degree of myocardial fibrosis and colonization of CD133⁺ cells in myocardial tissues were observed. RESULTS AND CONCLUSION:Hematoxylin-eosin staining showed that myocardial tissues arranged disorderly in the model group, but regularly in the sham group; myocardial disorders were mildest in the CD133⁺ cell group, successively followed by the mononuclear cell group, and severest in the CD133^- cell group and model group. Masson staining showed that in the model group, collagen fibers were proliferated, arranged irregularly and even broken, while in the sham group, the collagen fibers were less in number and arranged in order. Additionally, there was less reduction in collagen fibers and milder myocardial disorders in the CD133⁺ cell group compared with the other groups. Area of collagen fibers was increased significantly in all the groups except for the sham group (P < 0.05), but this increment was the minimal in the CD133⁺ cell group. Findings from immunohistochemistry and immunofluorescence staining showed that there were no CD133⁺ cells in the myocardial tissues of rats. Therefore, our data indicate that compared with the mononuclear cell transplantation, CD133⁺ cell transplantation exerts superiorities in relieving myocardial damage and reducing myocardial fibrosis. However, CD133⁺ cells are not colonized in the myocardial tissue after transplantation.