血小板相关抗体的检测及其应用研究

目的探讨血小板相关抗体(PAIgG)检测的应用价值。方法采用流式细胞术分别对42例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者、39例再生障碍性贫血患者及21例其他自身免疫性疾病患者的PAIgG进行检测,并分析其与血小板输注无效率的关系。结果ITP患者组、再生障碍性贫血患者组及其他自身免疫性疾病患者组PAIgG阳性血小板百分率均明显高于正常对照组(P<0.01);PAIgG阳性的ITP患者及再生障碍性贫血患者中的血小板输注无效率均明显高于PAIgG阴性的患者(P<0.01;P<0.05)。结论PAIgG用于ITP诊断敏感性高,特异性差,PAIgG的存在与血小板输注无效存在密切关系,是引起血小板输注无效的重要原因之一。     

血小板相关抗体与血小板输注无效关系探讨

目的探讨血小板相关抗体(PAIgG)与血小板输注无效的关系。方法采用流式细胞术分别对42名特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者及39名再生障碍性贫血患者的PAIgG进行检测,并分析其与血小板输注无效率的关系。结果ITP患者组、再生障碍性贫血组PAIgG阳性血小板百分率均明显高于正常对照组(P<0.01);PAIgG阳性的ITP患者及再生障碍性贫血患者中的血小板输注无效率均明显高于PAIgG阴性的患者(P<0.01;P<0.05)。结论PAIgG与血小板输注无效存在密切关系,是引起血小板输注无效的重要原因之一。     

急性特发性血小板减少性紫癜患儿外周血血小板抗体、调节性T淋巴细胞水平的检测及临床意义

目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿治疗前后外周血血小板相关抗体(PAIgG)、CD4+、CD25+、Foxp3+调节性T淋巴细胞(Tr细胞)的变化,探讨Tr细胞与PAIgG之间的相关性,分析Tr细胞及PAIgG在急性ITP患儿发病机制中的相互作用。方法用流式细胞仪检测外周血PAIgG和Tr细胞的数量,血细胞分析仪计数血小板(PLT)含量。结果急性ITP患儿治疗前外周血PLT数量、Tr细胞均低于健康对照组(均为P0.05),而PAIgG含量高于健康对照组(P0.05);随着病情痊愈或好转,血小板数量、Tr细胞含量达到正常值或接近正常值,而PAIgG含量仍然较高(均为P0.05),PAIgG在治疗前与血小板含量呈负相关(痊愈组及好转组:r值分别为-0.81,-0.78,均为P0.05),Tr细胞含量在治疗前与血小板含量呈正相关(r值分别为0.76、0.81,均为P0.05),Tr细胞含量与PAIgG含量在治疗前呈负相关(r值分别为-0.64、-0.73,均为P0.05)。结论急性ITP患儿外周血中Tr细胞数量和PAIgG含量、PLT数量均有较好的相关性,检测指标Tr细胞数量能够反映急性ITP患儿外周血中PAIgG和PLT数量的变化,Tr细胞水平的降低反映了机体的免疫功能状态降低,PAIgG及Tr细胞在急性ITP发病机制中发挥了重要作用。     

网织血小板和血小板相关抗体在特发性血小板减少性紫癜鉴别诊断中的作用比较

本研究旨在探讨网织血小板和血小板相关抗体在特发性血小板减少性紫癜(ITP)鉴别诊断中的作用。用Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪对34例ITP患者、36例非ITP患者及411例正常人静脉血进行检测,获得未成熟血小板比例(immature platelets fraction,IPF)数据,同时利用酶联免疫法测定血小板相关抗体含量,并对二者结果进行统计学分析。结果表明,ITP患者的IPF值明显高于疾病对照组和正常对照组,差异显著(p均<0.05)。对于ITP诊断的意义,IPF的阳性率明显高于疾病对照组,差异显著(p<0.05);PAIgG的阳性率与疾病对照组比较,无显著性差异(p>0.05)。IPF的灵敏度、特异度、阴性预测值均高于PAIgG,仅阳性预测值略低于PAIgG。IPF的ROC曲线下面积大于PAIgG的ROC曲线下面积。结论IPF和PAIgG对于ITP的鉴别诊断均有一定的临床意义,IPF的诊断价值优于PAIgG。     

血小板相关免疫球蛋白在流式细胞仪检测上的特征

血小板相关IgG(PAIgG)常用于ITP与其它免疫性血小板减少的诊断.本研究用流式细胞仪(FCM)检测了47例ITP(包括Evans综合症)、13例非免疫性血小板减少、10例无血小板减少的自身免疫性溶血性贫血(AIHA)和31例正常人的PAIgG,并与ELISA测定的结果进行比较.FCM检测的ITP患者PAIgG的荧光强度(MFI)(2.26±2.29)明显高于非免疫性血小板减少(0.33±0.39),AIHA(0.17±0.07)和正常对照组(0.25±0.15)(P值均小于0.01).同时,ITP患者PAIgG阳性血小板百分率[(44.1±29.0)%]也明显高于非免疫性血小板减少[(17.5±9.4)%],AIHA[(10.7±7.5)%]和正常对照[(16.6±8.4)%](P值均小于0.01).有13例ITP患者(23.4%)的血小板荧光峰形有异常(双峰或峰拖尾),其中有7例只出现峰形异常而无MFI或阳性血小板百分率的改变.这种情况在正常人的血小板未观察到,这可能反映出不同的血小板群体有诊断价值.用FCM测定ITP患者PAIgG总的阳性率为87.2%,稍高于用ELISA检测的83.0%阳性率,但两者之间无显著性差异.两种检测结果的符合率为85.1%.本研究表明,FCM是一个快速与敏感的测定PAIgG的方法,可成为检测免疫性血小板减少的常规的新方法.     

血小板相关抗体IgG初筛不能提高单克隆抗体特异性俘获血小板抗原对免疫性血小板减少性紫癜诊断的敏感性

目的评价血小板相关抗体IgG（PAIgG）初筛能否提高单克隆抗体特异性俘获血小板抗原（MAIPA）技术对免疫性血小板减少性紫癜（ITP）诊断的敏感性。方法用酶联免疫吸附竞争法检测PAIgG，改良MAIPA技术检测抗血小板GPⅡb／Ⅲa、GPⅠb／Ⅸ特异性抗体；190例血小板减少症患者同时行PAIgG及MAIPA检测，其中132例为ITP患者；采用Kappa检验进行两种诊断试验的一致性分析。结果单做PAIgG及PAIgG与MAIPA并联诊断ITP的敏感度分别为85．6％和90．2％，较单做MAIPA（53．0％）分别提高32．6％与37．2％；特异度分别为29．3％和24．1％，较单做MAIPA（81．0％）则分别下降51．7％与56．9％；PAIgG与MAIPA串联诊断ITP的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为48．5％、86．2％、88．9％和42．4％，均与单做MAIPA相当。ITP与非免疫性血小板减少症患者PAIgG与MAIPA测定结果之间的Kappa值分别为0．129与0．012，即两种试验对ITP及非免疫性血小板减少症诊断的一致性均较差。结论PAIgG检测不能作为MAIPA的过筛试验。     

211例各种疾病的血小板表面相关IgG的临床意义

用竞争性酶联免疫吸附试验检测血小板表面相关IgG的方法,对211例各和疾病的病人进行了研究,从结果中可以看出,血小板表面相关IgG(PAIgG)除了在慢性血小板减少性紫癫病人增高外,其他与免疫机制有关的疾病及各种血液系统疾病尤其是急性白血病、淋巴瘤也明显增高,因此在免疫介导的血小板减少的发生上,PAIgG仅从是几种因素之一。     

肝脏疾病的严重性与血小板计数、血小板IgG、血清IgG 和免疫复合物间的内部联系

慢性肝脏疾病病人常发生血小板减少和免疫学异常。为调查慢性肝脏病人免疫学异常和血小板减少间的内部作用。作者对慢性肝脏病人的血小板计数、血清IgG、血小板相关IgG(PAIgG)和IgG 免疫复合物进行了前瞻性的对照研究。慢活肝(CAH)27例。原发性胆汁性肝硬化(PBC)38例,酒精性肝脏疾病(ALD)27例,自身免疫性血小板减少症11例。13例健康者作对照。所有对象均取血检测血小板计数、血清IgG、PAIgG 和IgG 免疫复合物。结果:肝脏疾病组病人血清IgG 平均浓度增加,ITP 和对照组间无明显差异。各类肝脏病人的PAIgG 升高,ITP 组PAIgG 值最高。13例对照组中1例的IgG 免疫复合物>500mg/L,ITP 组11例中3     

特发性血小板减少性紫癜血小板相关抗体分析

目的 :探讨血小板相关抗体 (PAIg)与特发性血小板减少性紫癜 (ITP)的关系。方法 :采用ELISA法检测 10 8例ITP患者及 10 8例继发性血小板减少症患者PAIg (PAIgG、PAIgA、PAIgM) ,并计算三种指标灵敏度及特异度。结果 :①灵敏度 :PAIgG >PAIgM >PAIgA :PAIgG特异度 77 8%。②PAIgG在ITP组高于继发性血小板减少症组 (P <0 0 5 )。③对 36例急性ITP患者不同血小板数量组间PAIgG分析 ,结果示血小板数量越低 ,PAIgG均值越高 ,0～ 10× 10 9/L组 ,10～ 30× 10 9/L组 ,30～ 80× 10 9/L组间PAIgG结果有统计学差异 ,P <0 0 0 1)。④ 8例急性ITP患者治疗前后PAIgG明显高于普通ITP组 ,且伴有PAIgM升高。⑥低巨核细胞型ITP患者PAIgM均升高 ,治疗前后PAIgM有统计学差异 (P <0 0 5 )。结论 :血小板相关抗体PAIg是ITP患者诊断、治疗反应的有用指标。难治性或低巨核细胞型ITP患者除有PAIgG升高外 ,均伴有PAIgM升高     

血小板相关抗体在维吾尔族免疫性血小板减少性紫癜诊断中的应用价值分析

目的探究血小板相关抗体在维吾尔族免疫性血小板减少性紫癜(ITP)诊断中的应用价值。方法选取该院40例确诊为ITP患者作为免疫组,同期选取30例非免疫性血小板减少性紫癜患者为非免疫组,20例体检健康者作为对照组,入组人群均为维吾尔族。观察比较各组人群血清中血小板相关抗体(PAIgA、PAIgM、PAIgG)水平及血小板特异性抗体(GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ)水平,并分析ITP患者各类血小板抗体水平与血小板水平的关系。结果非免疫组患者血小板相关抗体(PAIgA、PAIgM、PAIgG)及血小板特异性抗体(GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ)水平高于对照组;免疫组患者血小板相关抗体(PAIgA、PAIgM、PAIgG)及血小板特异性抗体(GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ)水平高于非免疫组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同血小板水平ITP患者血小板相关抗体(PAIgA、PAIgM、PAIgG)水平差异无统计学意义(P>0.05),血小板特异性抗体(GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ)水平随血小板水平的降低而升高,且血小板计数与GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ水平呈负相关关系(r=-0.282、-0.331,均P<0.05)。结论血小板抗体在ITP诊断和鉴别诊断中具有重要意义,其中,GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ水平还可作为评估疗效及预后的重要指标。     

Detection of various platelet-associated immunoglobulins by flow cytometry in idiopathic thrombocytopenic purpura

BACKGROUND: In 1975, Dixson reported that anti-platelet IgG on platelets from patients with idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) is greater than in normal people, by determining anti-platelet antibodies directly on the platelet surface with a quantitative complement lysis-inhibition-assay. Since then, platelet-associated IgG (PAIgG) has been thought of as evidence of ITP. Although platelets from ITP patients show significantly higher PAIgG values than from normal control individuals, PAIgG is not specific for autoantibody because it increases in other than immune ITP patients. METHODS: We analyzed positive platelet percentage with various platelet-associated immunoglobulins: IgG, IgM, IgA, and total immunoglobulins, in the blood from 17 normal donors and 23 ITP patients. RESULTS: The specificity for ITP disease was better in flow cytometry than in ELISA, because, other than ITP, only aplastic anemia was positive in flow cytometry; however, various disorders (aplastic anemia, chronic lymphocytic leukemia, acute myeloid leukemia, and myelodysplastic syndrome) showed positive in ELISA. Flow cytometry methods had the same sensitivity for ITP disease as ELISA. However, it is supposed that there was no nonimmune ITP in this study because the PAIgG negative patients (n = 1) showed positive results in flow cytometry. CONCLUSION: Flow cytometry method was effective for ITP screening, especially for specificity.     

Assessment of the optimal anticoagulant solution for storage of whole blood samples prior to measurement of platelet-associated IgG

The complexity of assays used to measure platelet-associated IgG (PAIgG) often requires blood samples to be sent to a central laboratory, In order to determine the optimal storage conditions, we measured PAIgG, platelet recovery, and platelet size serially over several days in whole blood samples obtained from healthy individuals. Blood was collected into EDTA, acid-citrate-dextrose (ACD) and citrate- phosphate-dextrose-adenine (CPD-A) with and without the fixative paraformaldehyde (P). The level of PAIgG remained with normal limits in all samples stored for up to six days in the ACD, the CPD-A and the CPD- A-P samples. The least drop in platelet count and change in platelet size occurred in the ACD and CPD-A samples. Blood collected into EDTA plus paraformaldehyde was less satisfactory, with PAIgG rising by day three in some samples, and a decline in the platelet count occurring by day two. Specimens collected into EDTA alone were least satisfactory, with a rise in PAIgG by 24 hours after collection. Collection of whole blood into either ACD or CPD-A and storage at 22 degrees C allows a good recovery of platelets whose level of PAIgG is unchanged for up to six days.     

血小板相关参数在血小板减少性疾病诊断中的临床意义

目的 探讨血小板参数在血小板减少症诊治中的作用.方法 应用sysmex XE-5000自动化分析仪测定137例血小板减少患者[特发性血小板减少性紫癜（ITP）34例,再生障碍性贫血（AA）18例,骨髓增生异常综合征（MDS）11例,慢性乙型肝炎36例,肝硬化33例,肝移植术后5例]和60例正常对照组的血小板计数（PLT）、血小板平均体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、大血小板比率（P-LCR）及网织血小板百分比（IPF%）,并对临床资料进行分析.结果 6组患者外周血PLT绝对值均显著低于正常对照（P〈0.01）.ITP、MDS、肝硬化和肝移植患者外周血中IPF%明显高于正常对照（P〈0.05）,其中ITP组和肝移植组显著高于对照（P〈0.01）.ITP、肝硬化和肝移植患者MPV明显高于正常对照（P〈0.05）.ITP、慢性乙型肝炎、肝硬化和肝移植患者P-LCR明显高于正常对照（P〈0.05）,其中肝移植患者显著高于对照（P〈0.01）.ITP、慢性乙型肝炎、肝硬化和肝移植患者PDW明显高于正常对照（P〈0.05）,其中ITP和肝硬化患者显著高于对照（P〈0.01）.AA患者IPF%明显低于对照组（P〈0.05）,而MPV、P-LCR和PDW虽低于正常对照,但无统计学意义（P〉0.05）.结论 IPF%、MPV、PDW、P-LCR 检测的结果对血小板减少性疾病的病因诊断和治疗观察上有一定的参考价值.     

Elevation of platelet-associated IgG in aplastic anemia.

We determined platelet-associated IgG (PAIgG) levels in patients with aplastic anemia, idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP), iron deficiency anemia, and systemic lupus erythematosus (SLE), as well as in normal healthy adults as a control group. To determine PAIgG levels, we used a competitive micro enzyme-linked immunosorbent assay, which had excellent reproducibility, recovery, and dilution. We confirmed its reliability by comparing it to the immunoradiometric assay. Both the aplastic anemia group (n = 27, mean +/- SD = 218.6 +/- 244.6 ng/10(7) platelets) and the ITP group (n = 82, mean +/- SD = 212.5 +/- 327.8 ng/10(7) platelets) had higher PAIgG levels than the SLE group (n = 4, mean +/- SD = 38.4 +/- 22.4 ng/10(7) platelets), iron deficiency anemia group (n = 10, mean +/- SD = 16.1 +/- 3.6 ng/10(7) platelets), and normal control group (n = 69, mean +/- SD = 16.1 +/- 3.6 ng/10(7) platelets. The higher platelet-associated IgG levels in aplastic anemia suggest that autoimmune mechanisms are involved.     

儿童不典型再生障碍性贫血与免疫性血小板减少性紫癜的特点及早期鉴别诊断

目的分析并比较不典型再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)和特发性血小板减少性紫癜(idiopathic chrombocytopenic purpura,ITP)的外周血及骨髓特点,为临床诊断提供一定依据,减少误诊的发生。方法选取2008年1月～2014年12月西安交通大学医学院第二附属医院收治的不典型再生障碍性贫血15例为不典型AA组;同期初诊的急性ITP 30例为ITP组。入院后均行血常规、骨髓涂片,自身抗体系列,抗血小板抗体等检查。所有病例入组前排除白血病,MDS,典型AA等血液疾病。结果不典型AA组患儿中性粒细胞计数为2.17±1.07(ANC),血红蛋白为93.23±32.11 g/L(HB)显著低于ITP患儿(ANC为2.73±0.39 g/L及HB为111.11±42.23 g/L),两组间进行t检验,差异具有统计学意义(P<0.05);而ITP患儿血小板计数为(30.38±2.22)×109/L,显著低于不典型再障患儿(47.14±2.17)×109/L,两组间进行t检验,差异具有统计学意义(P<0.05);不典型AA患儿巨核细胞数为17.83±7.83明显低于ITP患儿225.3±64.23,两组间进行t检验,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论不典型AA和ITP存在许多相似性,容易发生误诊,当患儿出现血小板降低时,应仔细分析其他血细胞的特点,并参照骨髓穿刺结果,必要时进行骨髓活检以明确诊断。     

补肾生血方对慢性再生障碍性贫血患者甲状腺等指标影响的观察

目的观察慢性再生障碍性贫血(CAA)患者血浆促甲状腺激素(TSH)、总三碘甲腺原氨酸(T3)、总甲状腺素(T4)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(COR)水平及补肾生血方对其影响。方法选择CAA患者56例以补肾生血方为主治疗2个疗程,血细胞分析仪检测治疗前后外周血象,放射免疫法检测治疗前后CAA患者血浆TSH、T3、T4,ACTH、COR水平。结果治疗后外周血象血红蛋白、白细胞计数、血小板计数较治疗前明显升高;CAA患者血浆T3、T4水平明显低于正常对照组,TSH、ACTH、COR水平与正常对照组比较无显著性差异。CAA缓解后T3、T4水平明显升高,治疗前后CAA患者血浆TSH、ACTH、COR水平无显著变化。结论 CAA患者体内存在内分泌失调;补肾生血方对CAA具有良好的治疗作用。     

血小板参数在血小板减少症鉴别诊断中的价值探讨

目的 探讨血小板参数在鉴别骨髓性和非骨髓性血小板减少症中的作用.方法 使用Cell-Dyn3700血细胞分析仪检测血小板减少症(TP)76例、特发性(免疫性、原发性)血小板减少性紫癜(ITP)66例、继发性血小板减少性紫癜(STP)8例、获得性纯巨核细胞再生障碍性血小板减少性紫癜(AATP)8例、造血干细胞疾病(HSCD)(急性白血病、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征)140例、健康体检者100例(对照组)的血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板分布宽度(PDW).结果 ①与对照组相比,HSCD患者的MPV显著减少,PDW明显增加;STP患者MPV、PDW显著增大.②AATP患者MPV正常,PDW增大.③ITP组和TP组与对照组的MPV、PCT、PDW差异有统计学意义(均P＜0.01).④HSCD组与对照组、ITP组和TP组比较,MPV、PCT和PDW差异有统计学意义(均P＜0.01).⑤骨髓性TP组与非骨髓性TP组比较,其MPV和PDW均有统计学意义(均P＜0.01).⑥当ITP患者治疗有效时,PLT升高,其MPV和PDW下降.结论 通过观察MPV和PDW数值的升降,特别是MPV的变化可初步判断血小板减少是由骨髓病变(MPV＜参考值)还是由骨髓外病症(MPV＞参考值)所引起.另外,当ITP患者治疗有效时,可用PDW和MPV较早地(比PLT提前5 d)观察到疗效.血小板参数的动态观察有助于ITP的鉴别诊断、病情判断及疗效观察.     

影响骨髓穿刺取材质量的各因素分析

目的：回顾分析两年来的骨髓穿刺检查，了解影响骨髓穿刺取材质量的各种因素。方法：骨髓穿刺分为技术性取材欠佳和非技术性取材欠佳，对比同种疾病出现非技术性取材欠佳和取材正常病人血常规差异。结果：非技术性取材欠佳前三位的疾病是多发性骨髓瘤、特发性血小板减少性紫癜、再生障碍性贫血；多发性骨髓瘤非技术性取材欠佳者多数经过治疗；非技术性取材欠佳骨髓增生异常综合征一难治性贫血病人RBC计数和血红蛋白明显增高，血小板明显降低。结论：血小板数量不是影响骨髓取材的主要因素；结合外周血RBC和Hb的变化和骨髓多部位穿刺可估计骨髓病变及纤维化的进展；自细胞在正常和接近正常范围时不影响骨髓的取材。     

免疫性血小板减少症时检测血小板相关抗体及血小板膜糖蛋白的意义

为探讨血小板表面血小板相关抗体(血小板相关免疫球蛋白)及血小板膜糖蛋白在免疫性血小板减少症中的诊断及预后评价方面的应用价值,采用流式细胞术(FCM)测定了76例血小板减少症患者及30名正常人血小板表面血小板相关免疫球蛋白(PAIg)及血小板膜糖蛋白(CD41,CD61,GPⅡb/Ⅲa).结果发现,初治38例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者中血小板相关抗体(PAlgG、PAIgM、PAIA)在血小板表面阳性百分率均高于正常对照组(P＜0.001),血小板膜糖蛋白均低于正常对照组(P＜0.01);9例经激素治疗的ITP患者PAIgG,PAIgM,PAIgA与正常对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),血小板膜糖蛋白与正常对照组相比差异无统计学意义(P＞0.02);继发性血小板减少症患者(慢性再生障碍性贫血、白血病、SLE、Evans综合征、甲亢、乙肝后肝硬化脾功能亢进)血小板相关抗体在血小板表面阳性百分率均高于正常对照组(P＜0.001),血小板膜糖蛋白均低于正常对照组(P＜0.05);12例治疗有效患者治疗后血小板相关抗体较治疗前下降(P＜0.05),血小板膜糖蛋白上升,其差异有统计学意义(P＜0.01).结论FCM用于免疫性血小板减少症患者的血小板相关抗体及血小板膜糖蛋白检测,具有灵敏、快速、简便的特点,是适用于临床诊断的新方法,对免疫性血小板减少症的诊断及疗效观察有较好的实用价值.