豨莶草对胶原诱导性大鼠关节炎的治疗作用

目的 基于白细胞介素（IL）-23/辅助性T细胞17（Th17）炎症轴探讨豨莶草对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型的治疗作用。方法 建立CIA大鼠模型,将建模成功大鼠随机分为模型组、豨莶草组、豨莶草+IL-23组,每组10只;另外10只作为阴性对照组。观察大鼠形态并称量体质量,运用水容积法测定大鼠足趾肿胀度、5级评分法测关节炎指数;苏木精-伊红染色（HE）检测滑膜组织形态学情况;酶联免疫吸附（ELISA）、实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测大鼠腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平;流式细胞术检测腹主动脉血和滑膜组织中Th17细胞百分比。结果 与阴性对照组相比,模型组大鼠体质量降低,足趾肿胀度、关节炎指数、腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平、Th17细胞百分比均升高（P＜0.05）;与模型组相比,豨莶草组大鼠体质量升高,足趾肿胀度、关节炎指数、腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平、Th17细胞百分比均降低（P＜0.05）;与豨莶草组相比,豨莶草+IL-23组大鼠体质量降低,足趾肿胀度、关节炎指数、腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平、Th17细胞百分比均升高（P＜0.05）。结论 豨莶草可通过抑制IL-23/Th17炎症轴从而降低炎症水平,实现对CIA大鼠的治疗。     

骨痨愈康丸通过JAK3/STAT3信号通路对佐剂性关节炎大鼠炎症反应的影响

目的 基于JAK3/STAT3信号通路探讨骨痨愈康丸对类风湿关节炎模型大鼠的影响机制。方法 将60只Wistar大鼠,随机分为正常对照(Control)组、模型(CIA)组、骨痨愈康丸(GL)组、骨痨愈康丸+JAK受体酪氨酸激酶抑制剂AG490(GL+AG490)组、JAK受体酪氨酸激酶抑制剂AG490(AG490)组,除正常对照组外,其余四组均建立胶原诱导性类风湿关节炎(CIA)大鼠模型。通过ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6、IL-17水平,运用免疫组化法与实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测踝关节软骨和滑膜组织中JAK3、STAT3蛋白及mRNA的表达情况。结果 与Control组比较,CIA、GL、GL+AG490、AG490组大鼠踝关节肿胀明显,伴关节畸形、大鼠活动明显减少、跛行、毛色暗淡无光泽、体重减轻;模型大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-17水平显著升高;JAK3、STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05)。与CIA组相比,各治疗组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-17水平降低;JAK3、STAT3蛋白及mRNA表达下调(P...     

抗TNFα单克隆抗体在II型胶原诱导的关节炎模型中的应用

目的制备胶原诱导的关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型,对AT132进行药效评价。方法制备Ⅱ型胶原诱导的CIA模型,且对新药AT132进行药效评价。HE染色观察膝关节和踝关节的病理变化。ELISA法检测血清中CⅡ、TNFα的表达。流式细胞仪检测小鼠关节滑膜中TNFα、IL-1、IL-6、IL-10的表达。结果 (1)模型组小鼠关节表现为小指关节、足爪、足趾肿胀以及变形,AT132组小鼠关节则表现为轻微的红肿。(2)模型组小鼠膝关节和踝关节病理结果表现为炎性细胞的浸润、滑膜增生、血管翳和破骨细胞的出现,软骨和骨的破坏。AT132组病理结果表现为轻微炎性细胞的浸润和滑膜增生。(3)ELISA法检测结果发现:模型组中CⅡ的表达明显上升,AT132给药组中CⅡ的表达明显下降(P0.01)。(4)流式细胞仪检测结果发现:模型组小鼠关节滑膜中TNFα、IL-1、IL-6、IL-10的表达明显增加,AT132组小鼠关节滑膜中TNFα、IL-1、IL-6、IL-10的表达明显降低(P0.01)。结论 CIA模型造模成功率为100%,AT132能够有效地治疗关节炎小鼠。     

基于脾虚湿阻研究佐剂性关节炎大鼠模型炎性因子、钠钾ATP酶及病理组织学变化

目的：建立基于脾虚湿阻环境下的佐剂性关节炎(AA)大鼠模型,观测其炎性关节的炎性因子、脾脏钠钾ATP酶(Na⁺,K⁺-ATPase)表达及关节的病理组织学变化。方法：将30只Wistar大鼠按照随机数字表法分为模型组、AA对照组、空白对照组,每组10只。模型组在脾虚湿阻环境下复制AA大鼠模型,AA对照组在常温常湿下复制AA模型,空白对照组给予常温常湿环境喂养。28 d后,观察大鼠的进食量、精神状态、毛发、关节肿胀度、活动情况,以及关节的病理组织学;检测血常规,炎性关节的白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及脾脏的Na⁺,K⁺-ATPase活性。结果：与对照组比较,模型组大鼠精神萎靡,进食量减少,部分大鼠腹泻,毛发失去光泽,关节肿胀,部分足底部溃烂,活动迟缓或跛行;模型组大鼠关节的病理组织学表现为滑膜组织中大量淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞等炎性细胞浸润,滑膜增生呈多层化,纤维血管翳形成。血小板计数、中性粒细胞比率和单核细胞比率明显升高(P <...     

祛风止痛胶囊对关节炎模型大鼠抗炎作用及机制的实验研究

目的：研究中药祛风止痛胶囊对关节炎模型大鼠的关节炎症、肿胀、结构破坏的影响,探讨其抗炎作用机制。方法：50只雄性SD大鼠随机分为5组：正常对照组,模型组,祛风止痛胶囊低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其他4组应用Ⅱ型胶原-弗氏完全佐剂诱导大鼠关节炎,用祛风止痛胶囊连续灌胃给药2周进行治疗,测量大鼠后肢足爪体积,观察大鼠踝关节组织病理学变化,并用ELISA方法检测大鼠血清中白细胞介素（IL）10、肿瘤坏死因子（TNF）α的含量。结果：与模型组比较,祛风止痛胶囊降低了大鼠后足爪肿胀程度。大鼠踝关节组织病理学变化显示,祛风止痛胶囊减轻滑膜组织的异常增生,炎性细胞浸润呈剂量依赖性的降低;大鼠血清中促炎细胞因子TNFα的水平变化不明显,而抑制炎症的细胞因子IL10水平明显升高。结论：中药祛风止痛胶囊通过上调抑制炎症的细胞因子IL10的水平而抑制了大鼠关节炎的滑膜增生和软骨的破坏,提示祛风止痛胶囊可作为类风湿关节炎的治疗药物。     

髋关节骨性关节炎组织学计量与炎性因子表达

目的 探讨骨性关节炎各组织成分中细胞冈子、金属基质蛋白酶等炎性物质表达水平与疾病的关系.方法 获取行OA组关节置换及创伤性股骨颈骨折组患者手术时的软骨、滑膜组织和软骨下骨,苏木素-伊红(HE)染色行软骨下骨组织形态计量分析,应用放射免疫测定肿瘤坏死因子(TNF)-α与门细胞介素(IL)-1β,以酶联免疫吸附试验(ELISA)测金属基质蛋白酶(MMP)-9蛋白表达水平,并将两组结果进行t检验,软骨下骨组织计量值与细胞因子水平进行相关分析.结果 OA组较非OA对照组软骨下骨骨形成增加,骨质硬化骨小梁数目增加并错乱;滑膜组织中MMP-9表达是调;软骨组织中MMP-9及IL-1 β较对照组提高;而在软骨下骨,MMP-9、TNF-α及IL-β均有增高,并且与软骨下骨组织学改变相关联.结论 证实了OA促炎症条件的病理学基础,并且炎性改变与软骨硬化及关节软骨退变相关.     

IL-17在类风湿性关节炎中的作用

类风湿性关节炎的发病与多种细胞因子如TNF-α、IL-1、IL-17等有关.IL-17是一种前炎症细胞因子,在活动性类风湿性关节炎患者血清及关节液中表达均增高.IL-17主要由活化的T细胞产生,并能诱导活化T细胞,促进滑膜细胞分泌多种细胞因子,抑制软骨细胞合成基质,增强破骨细胞活性,最终导致骨侵蚀.IL-17能与其他细胞因子相互作用,导致类风湿性关节炎进一步发展.IL-17在类风湿性关节炎进程中起重要的调节作用,因此抗IL-17抗体生物治疗有望成为治疗类风湿性关节炎的新方法.     

Th1/Th2细胞因子mRNA的表达与心脏移植免疫耐受的关系

目的探讨Th1/Th2细胞因子信使核糖核酸(mRNA)表达改变与心脏移植免疫耐受的关系. 方法采用大鼠腹部心脏移植模型,将30只大鼠随机分成对照组、排斥反应组、免疫耐受组,每组10只.观察移植心脏存活时间,供心病理学改变,受者脾和心脏中Th1/Th2细胞因子白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10) mRNA表达水平. 结果免疫耐受组供心存活时间为85.28±7.48天,较排斥反应组的7.33±1.03天显著延长(P＜0.01);排斥反应组供心见大量炎性细胞浸润,免疫耐受组供心仅见少量炎性细胞浸润;排斥反应组Th1细胞因子IL-2、IFN-γ mRNA表达较对照组增强,免疫耐受组减弱;排斥反应组Th2细胞因子IL-4、IL-10 mRNA表达较对照组减弱,免疫耐受组增强. 结论 Th1/Th2细胞因子的动态平衡在移植耐受中起重要作用,Th1向Th2偏离是移植耐受的机制之一.     

大鼠肝移植免疫耐受过程Th细胞和Treg细胞因子及信号通路蛋白的变化研究

目的探讨大鼠肝移植免疫耐受过程中,辅助性T细胞(Th)和调节性T细胞(Treg)细胞因子及相关信号通路蛋白的变化与免疫耐受的关系。方法双袖套法建立原位肝移植模型,将大鼠分为3组:手术对照组(6只),假手术不进行肝移植;短期组(10只),术后存活10 d;耐受组(10只),术后存活100 d,移植肝功能恢复正常。检测各组大鼠肝功能指标如丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),Th1细胞因子[干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α],Th2细胞因子(IL-4、IL-5、IL-6、IL-13),Th17细胞因子[粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-17A],Treg细胞因子[IL-10、转化生长因子(TGF)-β、IL-12p]表达水平。对各组大鼠血清进行蛋白芯片检测。结果与手术对照组比较,短期组AST明显降低,ALT明显升高(P0.05)。而耐受组与手术对照组的AST、ALT水平比较,差异均无统计学意义(均为P0.05)。各组大鼠的肝组织中,与手术对照组比较,短期组Th1细胞因子IFN-γ、IL-2表达水平明显升高(均为P0.05);耐受组Th2细胞因子IL-4的表达水平明显低于手术对照组(P0.05);短期组Th2细胞因子IL-5、IL-6、IL-13的表达水平明显低于手术对照组(P0.05);耐受组IL-17A的表达水平明显高于手术对照组(P0.05)。耐受组IL-10、IL-12p的表达水平明显高于手术对照组(均为P0.05),短期组TGF-β的表达水平明显高于手术对照组(P0.05)。与手术对照组比较,短期组细胞间黏附分子(ICAM)-1、前血小板碱性蛋白(Ppbp)、神经纤毛蛋白(Neuropilin)-2、Notch-2蛋白的表达水平明显升高(均为P0.05);耐受组趋化因子配基17(CXCL17)、ICAM-1、Neuropilin-2蛋白的表达水平明显升高(均为P0.05),而B7-1蛋白的表达水平显著减低(P0.05)。结论在大鼠肝移植自然免疫耐受过程中,Treg类细胞因子(IL-10、TGF-β、IL-12p), IL-6, IL-17以及细胞表面的跨膜信号通路分子(ICAM-1、Neuropilin-2、B7-1蛋白)在其中起到了重要的作用。     

基于JNK信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响

目的基于JNK信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响。方法将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、SP600125组(JNK抑制剂)和豨莶草高(4 g/kg)、中(2 g/kg)、低(1 g/kg)组,对照组和模型组灌胃给予生理盐水,其他各组给予相应的药物,连续7天,第5天给药1 h后向大鼠膝关节腔注射尿酸钠建立痛风性关节炎模型,对照组不做处理,采用HE染色观察滑膜组织病理情况,ELISA检测大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量,western bloting测定JNK和p-JNK蛋白含量和RTPCR测定c-jun、AP-1和NF-κB mRNA表达。结果与对照组比较,模型组炎性细胞浸润,滑膜细胞增生,成纤维细胞,SP600125组和不同浓度豨莶草组对滑膜组织炎性细胞浸润明显减少,滑膜细胞增生和成纤维细胞增生明显减轻;模型组大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显增高,SP600125组和不同浓度豨莶草组血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显降低;western bloting和RT-PCR结果显示模型组滑膜组织中JNK和p-JNK蛋白含量明显增加,AP-1、c-jun和NF-κB mRNA表达明显增加,不同浓度豨莶草组和SP600125组能够明显降低痛风性关节炎大鼠JNK和p-JNK蛋白含量及c-jun、AP-1和NF-κB mRNA表达。结论豨莶草能够改善急性痛风性关节炎症状,其可能机制是调控JNK信号通路异常激活。     

Th1/Th17细胞在肺部感染中的作用

目的：观察Th1、Th17型细胞因子在肺部感染性疾病中的动态变化,深入探讨机体抵抗肺部感染的免疫机制,为肺部感染性疾病的特异性诊治提供实验依据。方法：收集临床肺部感染患者血清、外周血淋巴细胞样本,分别用ELISA方法检测血清中Th1型细胞因子（IFN-γ）及Th17型细胞因子白细胞介素-17（IL-17）的表达水平,用FACS检测外周血中CD4＋IFN-γ＋Th1及CD4＋IL-17＋Th17细胞的比例变化,同时用Realtime-PCR方法检测外周血中Th17型细胞因子IL-17在基因水平的表达变化。以上指标的检测均以临床公认的CRP水平的变化作为参考。结果：ELISA结果显示,肺部感染患者血清IFN-γ的水平较健康对照组显著升高,动态检测结果显示IFN-γ变化水平与反映临床疾病状态的CRP出现显著的相关性。而IL-17的表达在不同的疾病过程未出现显著的变化。FACS及Real-time-PCR结果均显示CD4＋IFN-γ＋Th1的活性变化与疾病状态相关,而CD4＋IL-17＋Th17细胞在肺部感染不同阶段未出现显著的变化。结论：相对于Th17细胞而言,Th1细胞在机体防御肺部感染的过程中发挥更为关键的作用。Th17细胞在该类感染性疾病中的作用尚需进一步探讨。     

瘤体内直接注射白细胞介素-7基因抗小鼠乳腺肿瘤免疫效应的研究

目的 观察瘤体内直接注射白细胞介素(IL)-7基因抗小鼠乳腺肿瘤免疫效应.方法 构建IL-7真核表达质粒(pcDNA3-IL-7);建立乳腺癌TM40D细胞BALB/C小鼠移植模型;瘤体内直接注射pcDNA3-IL-7,观察小鼠肿瘤体积变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血干扰素(IFN)-γ含量;流式细胞仪检测胞内IFN-γ的分泌量;局部肿瘤经治疗后行常规病理分析.结果 成功构建pcDNA3-IL-7;与对照磷酸盐缓冲液(PBS)组(115.2±11.8) ng/L、pcDNA3组(133.6±9.4) ng/L比较,pcDNA3 -IL-7注射组(242.3±10.1)ng/L外周血IFN-γ明显增高;pcDNA3-IL-7明显抑制肿瘤生长(P＜0.05);流式细胞仪检测显示pcDNA3-IL-7显著促进CD4+T细胞、CD8+T细胞内IFN-γ的分泌量;常规病理显示pcDNA3 -IL-7注射组肿瘤组织大量坏死,炎性细胞和大量淋巴细胞浸润.结论 瘤体内直接注射pcDNA3-IL-7明显抑制小鼠乳腺肿瘤生长,显著促进IFN-γ分泌,增强了小鼠机体抗乳腺肿瘤的免疫效应.     

IFN-γ和TNF-α诱导的骨髓间充质干细胞的免疫抑制作用及环孢素A对其的影响

目的 观察γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的骨髓问充质干细胞(MSC)的免疫抑制作用及环孢素A(CsA)对其的影响.方法 取Balb/c小鼠骨髓,分离、培养、纯化及扩增MSC,分别以IFN-γ、TNF-α和IFN-γ+TNF-α(终浓度均为20 ng/ml)预处理MSC 12 h,然后与Balb/c小鼠脾细胞共培养,脾细胞以刀豆蛋白A激活72 h.混合细胞培养实验分8组进行:(1)脾细胞组;(2)MSC组,MSC+脾细胞;(3)IFN-γ处理组,IFN-γ预处理的MSC+脾细胞;(4)TNF-α处理组,TNF-α预处理的MSC+脾细胞;(5)联合处理组,IFN-γ与TNF-α联合预处理的MSC+脾细胞;(6)CsA组,CsA+脾细胞;(7)CsA联合预处理组:IFN-γ与TNF-α联合预处理的MSC+CsA+脾细胞;(8)1400W组,IFN-γ与TNF-α联合预处理的MSC+脾细胞+1400W[诱导型-氧化氮合酶(iNOS)抑制剂].各组脾细胞数量均为5000个,MSC与脾细胞按1:10混合,CsA浓度为10μg/ml.培养72 h后,以四甲基偶氮唑盐法检测脾细胞增殖情况,同时以碘化丙啶和Annexin-V凋亡双染试剂盒检测脾细胞的凋亡情况;以实时聚合酶链反应法检测经炎症因子处理的MSC的iNOS mRNA表达情况,观察CsA对MSC的iNOS mRNA表达的影响.结果 MSC组、IFN-γ处理组和TNF-α处理组的MSC对脾细胞的增殖无明显抑制作用(P>0.05),而联合处理组的脾细胞增殖明显受到抑制,CsA组的脾细胞增殖同样受到抑制,但IFN-γ与TNF-α联合预处理MSC产生的这种免疫抑制作用却可以被CsA所抑制(CsA联合预处理组,P<0.05).联合处理组、CsA组和CsA联合预处理组的脾细胞凋亡率明显高于脾细胞组、MSC组、IFN-γ处理组和TNF-α处理组(P<0.05),而联合处理组和CsA组的脾细胞凋亡率又明显高于csA联合预处理组(P<0.05).野生型MSC、分别以IFN-γ或TNF-α单独刺激的MSC均不表达iNOS mRNA,而以IFN-γ和TNF-a联合处理的MSC则高表达iNOS mRNA,但这种高表达可被CsA所抑制(P<0.05).1400W组的脾细胞增殖受到明显抑制(P<0.05).结论 IFN-γ和TNF-α联合预处理的MSC在体外可抑制脾细胞的增殖,促进脾细胞凋亡,CsA可抑制该种MSC的这一作用,其机制可能与CsA下调lFN-7和TNF-α联合预处理的MSC的iNOS表达有关.     

白细胞介素4在诱导新生期大鼠免疫耐受中的作用

目的　探讨白细胞介素４（ＩＬ４） 在诱导新生期大鼠免疫耐受中的作用。方法　将２ ．５ ×１０７ 个Ｗｉｓｔａｒ 大鼠脾淋巴细胞注入新生ＳＤ 大鼠胸腺内，４～６ 周龄时取其脾淋巴细胞与Ｗｉｓｔａｒ 大鼠脾淋巴细胞（２０ Ｇｙ Ｘ 射线照射） 进行混合培养， 于７２ ｈ 测定ＩＬ４ 和γ干扰素（ＩＦＮγ） 的含量。结果　实验组ＩＬ４ 和ＩＦＮγ的含量分别为（４５５±８５） ｎｇ／Ｌ和（１４５±４６） ｎｇ／Ｌ； 对照组则分别为（１３９ ．２ ±４６ ．３） ｎｇ／Ｌ和（４７０±１０２） ｎｇ／Ｌ， 两组比较，ＩＬ４ 和ＩＦＮγ含量的差异均有显著性（ Ｐ＜ ０．００１） 。结论　ＩＬ４ 在新生期大鼠免疫耐受的诱导中起重要作用。     

脾动脉缩窄对门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达及Th1/Th2平衡的影响

目的 观察脾动脉缩窄对肝硬化门静脉高压大鼠脾脏iNOS、Th1/Th2型细胞因子表达的影响,并探讨机制.方法 肝硬化门静脉高压大鼠随机分3组(n=10):假手术组(SOG)、脾动脉缩窄术组(SAC)和脾动脉结扎术组(SAL);正常大鼠10只行假手术作为对照组(NCG).免疫组化法测脾脏iNOS表达,RT-PCR法测脾脏IFN-γ、IL-4mRNA表达,对iNOS与IFN-γ、IL-4表达量作相关分析.结果 SOG脾脏iNOS明显高于NCG(P＜0.01),SAC和SAL明显低于SOG(P＜0.01).SOG脾脏IFN-γmRNA和IFN-γ/IL-4明显低于NCG(P＜0.01),IL-4mRNA明显高于NCG(P＜0.01);SAC脾脏IFN-γmRNA高于SOG(P＜0.05),SAC和SAL脾脏IL-4mRNA低于SOG(P＜0.05),而IFN-γ/IL-4高于SOG(P＜0.05).iNOS与IFN-γ负相关(r=-0.672,P＜0.01),与IL-4正相关(r=0.634,P＜0.01).结论 脾动脉缩窄术后门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达降低,IFN-γ/IL-4升高,脾脏Th1/Th2失衡改善可能与术后iNOS表达降低有关.     

同种异基因组织工程骨修复骨缺损IFN -γ和IL -10的表达

[目的]通过检测同种异基因组织工程骨(tissue engineering bone,TEB)修复骨缺损血清IFN -γ、IL - 10水平和脾内IFN-γmRNA、IL-10mRNA的表达,探讨同种异基因TEB的免疫原性.[方法]Ficoll - Hypaque梯度密度离心法分离出成年兔骨髓间充质干细胞(MSCs),培养扩增.取第3代细胞,化学法诱导成成骨细胞(ODC).将ODC按1×109/L密度接种至羟基磷灰石/磷酸三钙(HA/TCP),共同培养,构建TEB.动物随机分三组(TEB,HA/TCP组,自体骨组),每组24只,人为造成兔左桡骨处1.0 cm左右长创伤性骨缺损,植入TEB、HA/TCP、自体骨.观察伤口愈合情况;于术后第4、10 d、6周,麻醉下取下腔静脉血ELISA法测血清IFN -γ、IL - 10水平;取脾行HE染色观察;RT- PCR测IFN -γ、IL - 10 mRNA表达.[结果]各组动物IL - 10、IL - 10 mRNA比IFN -γ和IFN-γ mRNA高,其中TEB组IFN -γ和IFN -γ mRNA较其他两组稍高,IL - 10和IL - 10 mRNA较其他两组稍低,IFN -γ、IL - 10水平和IFN - γmRNA、IL - 10 mRNA表达同组前后比较有统计学差异(P＜0.05),组间比较没有差异(P＞0.05).[结论]由同种异基因MSCs诱导而成的ODC与HA/TCP构建的TEB免疫原性极低,可以用于修复骨缺损.     

Th17 alloimmunity prevents neonatal establishment of lymphoid chimerism in IL-4-deprived mice

Immune responses in newborn mice are known to be biased toward the helper type 2 phenotype. This may account for their propensity to develop tolerance. Herein, we evaluated the effects of IL-4 deprivation on CD4(+) T-cell activities elicited by neonatal exposure to allogeneic spleen cells. We showed that chimerism, Th2-type polarization and pathology, as well as skin allograft acceptance were inhibited in BALB/c mice immunized at birth with (A/J x BALB/c) F(1) spleen cells upon in vivo IL-4 neutralization. While IL-4 neutralization inhibited the development of Th2 cells in this model, it led to the accumulation of IL-17A, IL-17F, IL-22, IL-6 and RORγt mRNA in the spleen or graft tissues. Moreover, IL-4 deprivation led to the differentiation of donor-specific Th17 cells with a concomitant Th1 response characterized by IFN-γ production. The Th17-type response emerging in IL-4-deprived mice was found to mediate both intragraft neutrophil infiltration and the abrogation of B-cell chimerism. Neutralization of this Th17 response failed however to restore functional skin graft acceptance. Collectively, our observations indicate that the neonatal Th2 response opposes the development of Th17 cells, and that Th17 cells are responsible for controlling lymphoid chimerism in mice neonatally injected with semiallogeneic cells.     

自体血液回输对脊柱手术患者术后IL-6、IFN-γ和TNF-α的影响

目的观察同种异体输血和自体血液回输对脊柱手术患者术后免疫反应的影响。方法择期行脊柱手术的患者44例,按手术日奇偶数分为2组,自体组术中仅输注自体洗涤红细胞（22例）,异体组术中仅输注异体悬浮红细胞（22例）,分别测定2组术前、术后1天和术后7天血清中白细胞介素6（IL-6）、干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF—α）的水平。结果与术前相比,自体组术后1天、7天血清IFN-γ和IL-6均增高,IL-6升高尤为显著,明显高于异体组,2组间差异有显著性（P〈0.01）。2组术后的TNF—α水平在各个时间点都没有明显变化。结论与同种异体输血相比,在脊柱手术中采用自体血液回输对术后患者血清中TNF-α的影响不明显,但可以明显提高IFN-γ和IL-6的水平。自体血液回输对术后免疫细胞因子的抑制作用远小于异体输血,能够保护甚至增强脊柱手术患者术后的细胞免疫功能。     

人脐带间充质干细胞移植对大鼠流产模型妊娠结局的影响

目的探讨人脐带间充质干细胞(WJ-MSCs)移植对大鼠流产模型妊娠结局的影响及机制。方法将48只孕鼠随机分为6组,每组8只。生理盐水对照组(a):孕6~8d皮下注射生理盐水0.4mg·kg~(-1)·d~(-1),孕9d尾静脉注射生理盐水1ml/kg;乙醇对照组(b):孕6~8d皮下注射75%乙醇0.4mg·kg~(-1)·d~(-1),孕9d尾静脉注射生理盐水1ml/kg;流产模型组(c):孕6~8d皮下注射溴隐亭0.4mg·kg~(-1)·d~(-1),孕9d尾静脉注射生理盐水1ml/kg;实验组d1、d2、d3分别于孕6~8d皮下注射溴隐亭0.4mg·kg~(-1)·d~(-1),孕9d尾静脉注射WJ-MSCs 1×105个、1×106个、1×107个(生理盐水使用量为1ml/kg,将细胞制成混悬液后注射)。各组大鼠均于孕14d处死并取材,观察各组大鼠胚胎吸收率,RT-PCR检测蜕膜组织白介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和IL-17mRNA的相对表达量。ELISA检测各组外周血IL-10、IFN-γ和IL-17的含量。结果 c组和d1组的平均胚胎吸收数和平均胚胎吸收率均显著高于a、b、d2、d3组(P0.05)。c组、d1组与a、b、d2、d3组比较,IL-10mRNA表达显著降低(P0.05),IFN-γ和IL-17mRNA表达显著升高(P0.05)。c组、d1组与a、b、d2、d3组比较外周血IL-10含量显著降低(P0.05),IFN-γ和IL-17含量显著升高(P0.05)。c组与d1组间,a、b组与d2、d3组间的观察指标比较均无显著性差异(P0.05)。结论一定浓度的WJ-MSCs移植入大鼠流产模型体内,可以降低胚胎吸收率,改善大鼠流产模型的妊娠结局;其机制可能与WJ-MSCs上调IL-10、下调IFN-γ和IL-17的含量有关。     

小鼠端粒酶蛋白亚单位转染树突状细胞体外诱导特异性抗肝癌细胞免疫应答

目的 观察携带小鼠端粒酶蛋白亚单位(mTERT)基因蕈组腺病毒载体(AdmTERT)转染树突状细胞(DC)后诱发免疫效应细胞产生特异性抗肝癌细胞免疫应答的研究.方法 用流式细胞仪分析及电镜观察培养6 d DC的细胞表型及形态,Ad-mTERT重组腺病毒转染体外培养的小鼠DC,Western blot检测mTERT融合蛋白表达;用负载mTERT的DC刺激同型淋巴细胞,免疫磁珠分选CD8~+T细胞做为效应细胞,小鼠肝癌细胞株(H22)及小鼠结肠癌细胞(CT26)作为靶细胞,用酶联免疫吸附试验(ELISA)及酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测干扰索(IFN)-γ分泌量和释放抗原特异性IFN-γ的T细胞数,~(51)Cr释放法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞的杀伤活性.结果 细胞表型及形态观察证实小鼠骨髓来源的DC为成熟的树突状细胞;AdmTERT转染DC后能正确表达mTERT融合蛋白,用AdmTERT转染DC致敏的淋巴细胞IFN-γ分泌量(208.6μg/L)和分泌IFN-γ的特异性T细胞的数量(341/10~6脾细胞)都高于Ad-GFP转染的DC组(14.2μg/L,33/10~6脾细胞)和单纯DC组(12.1μg/L,19/10~6脾细胞,P＜0.05).AdmTERT修饰DC刺激产生的效应T细胞在效靶比为90:1时,对H22细胞的杀伤率(54.2%)明显高于AdGFP致敏组(8.2%)和未致敏DC组(4.5%,P＜0.05),而对CT26细胞无明显杀伤作用.结论 AdmTERT修饰的DC体外能够诱导出针对mTERT抗原特异性的CTL效应,可特异性杀伤mTERT阳性的肝癌细胞.