Toll样受体7激动剂对荷瘤小鼠肾癌的抑制作用及免疫机制

目的　研究Toll样受体7激动剂Imiquimod对荷瘤小鼠肾癌的抑制作用及免疫机制。方法　用Renca肾癌细胞构建BABL/c小鼠肾癌模型,实验分为control组、imiquimod组和sorafenib组。观察3组小鼠肿瘤体积及重量、抑瘤率,qPCR法检测肿瘤组织中炎性相关因子肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素1β（Interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素6（Interleukin-6,IL-6）、干扰素α（Interferon-α,IFN-α）、干扰素β（Interferon-β,IFN-β）、干扰素γ（Interferon-γ,IFN-γ）及Toll样受体通路相关因子Toll样受体7（Toll-like receptor 7,TLR7）、髓样分化因子88（Myeloid differentiation primary response gene 88,MyD88）、核因子κB （Nuclear factor κB,NF-κB）mRNA表达,Western blot法检测瘤组织中TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达。流式细胞术检测脾脏中CD4+T、CD8+T、CD4+IFN-γ和CD8+IFN-γ细胞比例。结果　与control组比较,imiquimod组和sorafenib组小鼠的肿瘤体积及瘤体重量降低（P＜0.05）;与control组相比,imiquimod组TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-α、IFN-β、IFN-γ及TLR7、MyD88、NF-κB mRNA水平升高（P＜0.05）,而sorafenib组各因子略有上升（P＞0.05）;与control组和sorafenib组比较,imiquimod组CD4+T、CD8+T细胞比例有不同程度的升高（P＞0.05）,CD4+IFN-γ和CD8+IFN-γ细胞比例增加（P＜0.05）。结论　Toll样受体7激动剂通过活化TLR7-MyD88-NF-κB信号刺激多种炎性细胞因子分泌,并上调CD4+T、CD8+T比例及功能,对荷瘤小鼠肾癌发挥抑制作用。     

TLR4/MyD88/NF-κB通路在真菌性角膜炎中的表达和作用

目的 探究Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)通路在真菌性角膜炎中的表达和作用。方法 选择2016年1月-2021年1月滕州市中心人民医院收治的82例(82眼)真菌性角膜炎角膜上皮组织为真菌组,另选择40例(40眼)健康角膜组织为正常组,采用免疫组化、实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹法检测角膜上皮中TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达阳性率、 mRNA及蛋白水平,酶联免疫吸附实验检测炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、α-干扰素(IFN-α)水平。结果 真菌性角膜炎角膜上皮中TLR4、MyD88和NF-κB蛋白阳性表达率、mRNA及蛋白表达水平高于正常角膜上皮(P<0.05);真菌性角膜炎角膜上皮中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ、IFN-α水平高于正常角膜上皮(P<0.05);真菌性角膜炎角膜上皮中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达水平与炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ、IFN-α均呈正相关(P<0.05)。结论 TLR4、MyD88和NF-κB在真菌性角膜炎中上调表达,并与炎性细胞因子呈正相关,TLR4/MyD88/NF-κB通路的激活可能在真菌性角膜炎发病机制中发挥着重要作用。     

鱼腥草提取物对肺炎支原体感染大鼠的抗炎作用及其作用机制

目的 对肺炎支原体感染大鼠进行鱼腥草提取物治疗,对其所产生抗炎功效及作用机制进行分析。方法 SPF级Wistar雄性大鼠分为空白组、肺炎支原体感染模型组、鱼腥草提取物低剂量组和高剂量组各9只。空白组、模型组只进行生理盐水灌胃,低剂量组和高剂量组给予鱼腥草提取物125 mg/kg、500 mg/kg灌胃,持续7 d后检测外周血转化生长因子-β(TGF-β)、涎液化糖链抗原-6(KL-6)、表面活性蛋白D(SP-D)、炎症因子及Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB)mRNA相对表达量,免疫印迹法检测肺组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组、鱼腥草提取物低剂量组、高剂量组TGF-β、KL-6、SP-D、IL-13、TNF-α水平、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达量、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达量均升高,IL-12水平降低(P<0.05);与模型组、低剂量组比较,高剂量组TGF-β、KL-6、SP-D、IL-13、TNF-α水平、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达量、...     

肠梗阻并发腹腔感染患者TLR4/NF-κB信号通路及其与病情转归的关系

目的 探究肠梗阻并发腹腔感染(IAI)患者外周血Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路及其与病情转归的关系。方法 分别选取2018年1月-2021年6月大连大学附属中山医院肠梗阻并发IAI患者117例(感染组)和肠梗阻未合并感染患者109例(未感染组),检测外周血单个核细胞(PBMC)中TLR4 mRNA、髓样分化因子88(MyD88)mRNA和NF-κB mRNA水平及白细胞介素-4(IL-4)、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),同时采集基本资料并完善其他检查,根据感染程度和抗感染疗效对患者进行分组,并比较不同程度和疗效患者各项指标差异。结果 感染组PBMC中TLR4 mRNA、MyD88 mRNA和NF-κB mRNA及IL-4、IL-10与TNF-α高于未感染组(P<0.05);重度组PBMC中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA和IL-4、IL-10及TNF-α水平高于轻中度组(P<0.05);好转组治疗3 d时PBMC中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及IL-4、IL-10和TNF-α均降低(P<0.05),...     

生长抑素对内毒素诱导感染性休克大鼠肺损伤的保护作用

目的基于Toll-样受体4/核因子кB(TLR4/NF-κB p65)信号通路探讨生长抑素(SST)对内毒素诱导感染性休克大鼠肺损伤的保护作用。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组[10 mg/kg脂多糖(LPS)]、BAY11-7082组(LPS+10 mg/kg BAY11-7082)、SST组(LPS+22μg/kg SST)和SST+BAY11-7082(LPS+SST)组各12只。注射LPS后12 h,检测各组大鼠肺组织病理变化和细胞凋亡、肺组织湿/干质量(W/D)比值、LPS、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、TLR4、髓样分化蛋白抗原(MyD88)、p65、磷酸化的NF-кB抑制蛋白(p-IκB)和裂解天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved Caspase)-3表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肺组织W/D比值和细胞凋亡率升高,LPS、IL-6、IL-10和TNF-α水平升高,TLR4、MyD88、p65、p-IκB和cleaved Caspase-3表达升高(P0.05);与模型组比较,BAY11-7082组和SST组肺组织病理学评分、W/D比值和细胞凋亡率降低,LPS、IL-6和TNF-α水平下降,IL-10水平升高(P0.05),TLR4、MyD88、p65、p-IκB和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(P0.05);与SST组比较,SST+BAY11-7082组肺组织病理学评分、W/D比值和细胞凋亡率降低,LPS、IL-6和TNF-α水平下降,IL-10水平升高,TLR4、MyD88、p65、p-IκB和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(P0.05)。结论 SST可以抑制TLR4/NF-κB信号通路,降低肺组织炎症反应,减轻内毒素诱导感染性休克大鼠肺损伤。     

参苓白术散治疗溃疡性结肠炎的实验研究

目的参苓白术散对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型大鼠的治疗作用。方法用三硝基苯磺酸(trinitrobenzene-sulfonic acid,TNBS)制备UC模型大鼠,随机分为模型组、阳性对照组、参苓白术散组和正常对照组。观察大鼠一般情况、肠黏膜形态学特点、测定血清IL-1、IL-6,免疫组化法测黏膜NF-κB表达。计量资料组间比较采用方差分析,计数资料比较采用χ2检验,P0.05为差异有统计学意义。结果与模型组相比,参苓白术散组与柳氮磺胺吡啶组可明显减轻UC模型大鼠炎症程度,DAI评分、大体形态评分、组织学评分明显改善,血清IL-1、IL-6水平下降,差异均有统计学意义(均P0.05);结肠黏膜NF-κB表达明显降低。与柳氮磺胺吡啶组比较,参苓白术散组的NF-κB光密度值降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论参苓白术散可抑制局部和全身的炎症反应程度,对改善症状具有明显效果。     

儿童难治性支原体肺炎外周血TLR2信号通路表达及其对疗效的诊断价值

目的 探究难治性支原体肺炎(RMPP)患儿Toll样受体2(TLR2)信号通路表达及其对疗效的诊断价值。方法 选取2019年5月-2021年5月济南市妇幼保健院收治的70例RMPP患儿为RMPP组，另选取医院同期收治的70例普通支原体肺炎(MPP)患儿为MPP组。收集两组患儿的临床资料，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)TLR2 mRNA、髓样分化蛋白88(MyD88)mRNA、核转录因子-κB(NF-κB)mRNA相对表达水平，酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、干扰素-γ(IFN-γ)、半胱氨酰白三烯(CysLTs)水平，采用受试者工作特征(ROC)曲线分析TLR2 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA相对表达水平对RMPP的诊断价值。根据RMPP患儿治疗后疗效将患儿分为有效组和无效组，比较治疗后7 d时TLR2 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA相对表达水平，并分析其表达与治疗效果的关系。结果 RMPP组的TLR2 mRNA、MyD88 mRNA...     

TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在萎缩性胃炎伴幽门螺杆菌感染中的作用

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路在萎缩性胃炎伴幽门螺杆菌感染中的作用及临床意义。方法 选取2019年6月-2021年5月在徐州市中心医院消化内科接受治疗的118例萎缩性胃炎伴幽门螺杆菌感染患者作为胃炎组，根据慢性胃炎的内镜分型分级标准中的萎缩性胃炎分类标准分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级，同时选择40名健康人作为对照组。酶联免疫吸附法检测两组血清中TLR4、MyD88、NF-κB以及白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)炎性因子的表达水平。应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析TLR4、MyD88和NF-κB对萎缩性胃炎伴幽门螺杆菌感染的预测价值。结果 与对照组比较，研究组患者TLR4、MyD88及NF-κB的表达量均增高(P<0.05);炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平高于对照组(P<0.05);血清TLR4、MyD88和NF-κB联合预测萎缩性胃炎伴幽门螺杆菌感染的AUC为0.897,高于单独检测的0.854、0.858、0.870。结论 血清中TLR4、MyD88、NF-κB以及三个指标联合应用对萎缩性胃炎伴幽门螺杆菌感染的诊断具有较高的价值，推测通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号转导，降低炎症反应，进而控制萎缩性胃炎伴幽门螺杆菌感染的进程。     

老年重症肺部感染患者T细胞亚群和TLR4/NF-κB蛋白表达及其与预后的关系

目的分析老年重症肺部感染(SPI)患者T细胞亚群和Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)蛋白表达变化及其与预后之间的关系。方法选择2017年6月-2020年8月武汉市第一医院重症医学科(ICU)收治的178例老年SPI患者为研究组,同期178例老年非肺部感染患者为对照组。比较两组患者T细胞亚群CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+表达,炎症指标白细胞计数(WBC)、血清C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6水平,外周血单个核细胞TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达,并分析上述指标与老年SPI患者预后的关系。结果研究组T细胞亚群CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平均低于对照组(P0.05),WBC、CRP、TNF-α和IL-6水平均高于对照组(P0.05),外周血单个核细胞TLR4蛋白、NF-κB蛋白和p-IκB蛋白表达均高于对照组(P0.05); 178例老年SPI患者住院治疗后死亡52例、存活126例,入院第7天,死亡组T细胞亚群CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平低于存活组(P0.05),WBC、CRP、TNF-α和IL-6水平高于存活组(P0.05),外周血TLR4蛋白、NF-κB蛋白和p-IκB蛋白表达均高于存活组(P0.05)。结论老年SPI患者的免疫功能下降,TLR4/NF-κB蛋白表达升高,且其水平变化与患者的预后不良有关。     

黄芪多糖对流感病毒感染小鼠急性肺损伤的保护作用的实验研究

目的研究黄芪多糖对流感病毒感染小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法实验分为正常对照组、流感病毒模型组、黄芪多糖治疗组,黄芪多糖预防组,利巴韦林抗病毒阳性对照组。用甲型H1N1流感病毒鼠肺适应株PR8构建小鼠流感模型,观察黄芪多糖在治疗(PR8感染后给药)和预防(PR8感染前给药)两种不同给药方式下小鼠生存率和肺组织病理变化情况,RT-PCR法检测肺组织炎性相关因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-αmRNA表达,Western blot法检测肺组织TLR4、TLR7、My D88、NF-κB蛋白表达。免疫组化法对肺组织NF-κB表达进行定位。结果黄芪多糖治疗和预防组均能延长小鼠生存时间,减轻肺组织病理变化;下调肺组织炎性相关因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-α水平(P0.01);抑制TLR4、TLR7、My D88、NF-κB的表达(P0.01)。结论黄芪多糖治疗给药和预给药的方式均能缓解流感病毒诱导的肺炎性病理损伤,通过TLR4/7-My D88-NF-κB信号转导通路降低肺组织的炎性反应,发挥抗流感病毒感染的作用。     

芩百清肺浓缩丸治疗肺炎支原体感染大鼠模型细胞因子表达水平变化

目的分析芩百清肺浓缩丸治疗肺炎支原体(MP)感染大鼠细胞因子表达水平变化,进一步探究芩百清肺浓缩丸对其免疫机制及炎症反应的调控。方法 SPF级成年雄性Wistar大鼠(90~110 g)60只随机分为4组:正常对照组、肺炎支原体肺炎模型(MP组)、芩百清肺浓缩丸组及阿奇霉素组。通过经鼻反复感染MP构建感染模型,对照组鼻内滴入等体积支原体改良培养基。芩百清肺浓缩丸组及阿奇霉素组从MP感染日起连续4天分别给与芩百清肺浓缩丸3.2 g/kg及阿奇霉素25 mg/kg,每日1次,模型组给予等量生理盐水灌胃。给药后第5天抽取血样、分离血清检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及γ干扰素(IFN-γ)水平,留取大鼠肺组织检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平。结果与对照组比较,MP组、芩百清肺浓缩丸组及阿奇霉素组大鼠血清中TNF-α含量显著升高(均P<0.05),与MP组比较,芩百清肺浓缩丸组及阿奇霉素组TNF-α水平显著降低(均P<0.05),但芩百清肺浓缩丸组与阿奇霉素组TNF-α水平无显著性差异;与对照组比较,MP组、芩百清肺浓缩丸组及阿奇霉素组IFN-γ含量均呈不同程度的降低(均P<0.05),与MP组比较,芩百清肺浓缩丸组及阿奇霉素组的IFN-γ水平均升高(均P<0.05),但芩百清肺浓缩丸组与阿奇霉素组IFN-γ水平无显著性差异;肺组织实时荧光PCR(qPCR)结果显示,与对照组比较,MP组、芩百清肺浓缩丸组及阿奇霉素组的TLR4、MyD88、 NF-κB mRNA表达水平均呈不同程度的升高(均P<0.05),与MP组比较,芩百清肺浓缩丸组和阿奇霉素组上述指标水平显著降低(均P<0.05),但芩百清肺浓缩丸组和阿奇霉素组上述指标水平无显著性差异。免疫印迹(WB)结果示TLR4、MyD88、 NF-κB的蛋白表达变化趋势与mRNA一致。结论芩百清肺浓缩丸可降低MP感染大鼠TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α的表达水平,增加IFN-γ的水平,从而减轻MP肺炎的炎症反应。     

泌尿生殖道沙眼衣原体感染对患者SIgA、IFN-γ水平及Th1细胞因子表达的影响

目的探究泌尿生殖道沙眼衣原体感染对血清分泌型免疫球蛋白A(Secretory Immunoglobulin A, SIgA)、γ干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)水平及Th1细胞因子表达的影响。方法选取2017年1月-2019年1月眉山市人民医院收治的生殖道沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)感染患者75例为CT感染组,同期于眉山市人民医院体检的健康者30名作为对照组,收集入组研究对象宫颈分泌物样本或前列腺液样本检测CT的基因型分布情况;酶联免疫(ELISA)法检测外周静脉血衣原体热休克蛋白60(Chlamydia heat shock protein 60,cHSP60)及SIgA水平;流式细胞术检测Toll样受体-4(Toll like receptor 4,TLR-4)、核因子κB(Nuclear factorκB, NF-κB)和髓样分化因子(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)的表达水平; ELISA法检测Th1细胞因子[白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、IFN-γ]及Th2细胞因子(IL-4、IL-10)水平。结果 75例生殖道CT感染基因分型中,E型22例(29.33%)、J型20例(26.67%)、F型18例(24.00%)、D型15例(20.00%); CT感染组cHSP60水平显著高于对照组,而SIgA水平显著低于对照组(P0.05);不同基因型CT感染患者的cHSP60及SIgA水平无显著差异; CT感染组TLR-4、NF-κB和MyD88水平显著高于对照组(P0.05); TLR-4、NF-κB和MyD88水平无显著差异; CT感染组的IFN-γ、IL-2水平显著低于对照组,而IL-4、IL-10水平显著高于对照组(P0.05);不同基因型CT感染患者IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平无显著差异(P0.05)。结论泌尿生殖道沙眼衣原体感染cHSP60水平上升,以TLR-4为信号受体,通过TLR-4-MyD88通路,活化NF-κB,促进炎性因子释放,抑制Th1细胞因子表达,IFN-γ及SIgA水平降低,促进Th2细胞因子表达,导致免疫功能下降。     

结核病鼠T细胞γ-干扰素及白介素-2表达

目的 探讨结核病鼠T细胞亚群中CD4~+、CD8~+及CD4~+CD8~+(DP)T细胞γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-2(IL-2)的表达水平.方法 将30只实验小鼠随机分成对照组和结核病组,饲养6周后取血,以流式细胞仪检测分析CD4~+、CD8~+及(DP)T细胞内表达IFN-γ、IL-2的阳性细胞计数和各自占淋巴细胞百分率.结果 表达IFN-γ的CD4~+T细胞占同亚群细胞总数的比值(t=1.83±0.59)高于对照组(t=1.04±0.22),差异有统计学意义(P＜0.05);表达IL-2的CD4~+T细胞、CD4~+CD8~+(DP)T细胞占同亚群细胞总数的比值(t=2.13±0.93,t=0.06±0.04)低于对照组(t=2.86±1.78,t=0.26±0.79),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 结核病鼠CD4~+T细胞表达IFN-γ的水平升高;结核病鼠CD4~+、DPT细胞表达IL-2的水平降低;结核病进展期早期T细胞亚群表达IFN-γ与IL-2呈矛盾现象,提示该阶段虽然保护性免疫已经启动,但仍为非特异性免疫占优势.     

血液透析巨细胞病毒感染炎症反应状态和 TLRs/MYD88信号通路水平

目的探究血液透析(HD)巨细胞病毒(CMV)感染炎症反应状态和Toll样受体/髓样分化因子88(TLRs/MYD88)信号通路水平。方法选择2017年12月-2019年12月青海省人民医院住院治疗的HD患者150例,根据患者是否合并CMV感染将其分为HD合并CMV组(n=37)和HD组(n=113),比较两组患者T淋巴细胞亚群(CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+)水平、炎性因子[白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NAGL)]水平以及TLRs/MYD88信号通路(TLR2、TLR4、MYD88 mRNA)表达水平。结果 HD合并CMV组患者CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+水平低于HD组、CD_8~+水平高于HD组(均P0.05),CD_3~+水平与HD组比较,无统计学差异;HD合并CMV组患者IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ、NAGL水平高于HD组、IL-10水平低于HD组(均P0.05);HD合并CMV组患者TLR2、TLR4、MYD88 mRNA表达水平高于HD组(P0.05)。结论 CMV感染可导致HD患者T淋巴细胞异常,加重患者炎性反应,其机制可能为上调TLR2、TLR4、MYD88表达,从而激活TLRs/MYD88信号通路。     

乙型肝炎病毒感染患者外周血细胞因子表达分析

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血中特异性白细胞介素-21(IL-21)+CD_4~+T细胞及γ-干扰素(IFN-γ)+CD8+T细胞表达差异,为阐明HBV感染后T细胞功能衰竭机制提供理论依据。方法选取2013年4月-2015年4月医院收治的HBV感染患者127例,其中慢性乙型肝炎患者41例、非活动性HBsAg携带患者38例、急性乙型肝炎(AHB)患者31例、慢性HBV携带患者17例,再选择同期医院健康体检人员30名作为对照组,比较各组受试者外周血中特异性IL-21+CD_4~+T细胞及IFN-γ+CD8+T细胞表达情况;采用SPSS22.0软件对数据进行统计分析。结果各组受试者特异性IL-21+CD_4~+T细胞比例及非特异性IL-21+CD_4~+T细胞比例均显著高于阴性对照(P0.05),急性乙型肝炎患者特异性IL-21+CD_4~+T细胞比例及非特异性IL-21+CD_4~+T细胞比例较对照组、慢性乙型肝炎、非活动性HBsAg携带、慢性HBV携带显著升高(P0.05);各组受试者特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例及非特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例均显著高于阴性对照(P0.05),急性乙型肝炎特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例及非特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例显著高于对照组、慢性乙型肝炎、非活动性HBsAg携带以及慢性HBV携带患者(P0.05);特异性IL-21+CD_4~+T细胞与IFN-γ+CD8+T细胞比例在对照组及各HBV感染组中均呈显著正相关关系(P0.05)。结论在急性乙型肝炎患者中,特异性及非特异性IL-21+CD_4~+T细胞与IFN-γ+CD8+T细胞水平较慢性HBV感染患者显著升高,且特异性IL-21+CD_4~+T细胞与IFN-γ+CD8+T细胞具有着明显的相关性,提示HBV慢性感染患者存在T细胞免疫功能的低下。     

NF-κB对小鼠冠状病毒性肝炎致病作用

目的探讨肝脏核因子-κB(NF-κB)和血清辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)细胞因子方面对小鼠冠状病毒性肝炎的致病机制。方法采用4周龄雄性BALB/c小鼠,以鼠肝炎冠状病毒(MHV-A59)和大肠埃希菌作为生物致病因子,建立MHV-A59鼠肝炎模型和大肠埃希菌鼠肝炎对照模型,以正常健康小鼠为空白对照,采用免疫组化法检测小鼠肝脏NF-κB表达[吸光度(A)值],ELISA法检测小鼠血清白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果冠状病毒模型组、大肠埃希菌对照组小鼠肝脏NF-κB表达分别为A=0.305,A=0.245;外周血Th1/Th2(IFN-γ/IL-4)比值分别为(2.17±0.16),(2.09±0.06)pg/mL,均比正常组有明显升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01),但冠状病毒模型组升高更明显。结论肝脏NF-κB表达增强及血清Th1/Th2细胞因子失衡可能是小鼠冠状病毒性肝炎的致病机制之一。     

上调miR-101对幽门螺杆菌感染模型大鼠的干预效果及作用机制

目的分析上调微小RNA-101(miR-101)对幽门螺杆菌感染模型大鼠的干预效果及相关作用机制。方法 80只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、miR-101下调组、miR-101上调组,每组20只。模型组、miR-101下调组、miR-101上调组大鼠给予1.5 ml的1×10~(11) CFU/L的幽门螺杆菌26695标准菌株灌胃构建幽门螺杆菌感染相关性胃炎模型,建模成功后miR-101上调组大鼠胃部注射分别含10μl miR-101上调质粒慢病毒悬液,miR-101下调组大鼠胃部注射10μl miR-101下调质粒慢病毒悬液。正常组、模型组大鼠注射等量生理盐水。鉴定miR-101转染效率,分析大鼠病理变化、血清炎症指标肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10),氧化应激指标一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及胃组织Toll样受体2(TLR2)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)通路蛋白表达量。结果与正常组相比,模型组、miR-101下调组miR-101表达量降低,miR-101上调组miR-101表达量升高(P0.05);与正常组相比,模型组、miR-101下调组、miR-101上调组炎症指标TNF-α、IL-1β、IL-10水平升高(P0.05);与miR-101下调组相比,miR-101上调组炎症指标TNF-α、IL-1β、IL-10水平降低(P0.05);与正常组相比,模型组、miR-101下调组、miR-101上调组氧化应激指标NO、MDA水平升高,氧化应激指标SOD水平降低(P0.05);与miR-101下调组相比,miR-101上调组氧化应激指标NO、MDA水平降低,氧化应激指标SOD水平升高(P0.05);与正常组相比,模型组、miR-101下调组、miR-101上调组TLR2、MyD88、NF-κB蛋白表达量升高(P0.05);与miR-101下调组相比,miR-101上调组TLR2、MyD88、NF-κB蛋白表达量降低(P0.05)。结论通过上调miR-101表达可在一定程度上抑制幽门螺杆菌感染相关性胃炎大鼠局部炎症、应激反应,保护胃组织,其作用机制可能与抑制TLR2/MyD88/NF-κB通路相关。     

IL-6调控TLR4/NF-κB炎症信号促进人胰腺癌细胞增殖的实验研究

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)对胰腺癌BxPC-3细胞增殖的影响及其调控Toll受体4(TLR4)/核转录因子kappaB(NF-κB)信号通路作用机制。方法 MTT法检测IL-6对BxPC-3细胞增殖的影响并计算增殖率;台盼蓝拒染法检测IL-6对BxPC-3细胞生长的影响并绘制生长曲线;克隆形成实验观察IL-6对BxPC-3细胞克隆形成的影响并计算克隆形成率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测IL-6对BxPC-3细胞TLR4、髓样化因子(MyD88)、NF-κB、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达水平的影响;Westen blot法检测IL-6对BxPC-3细胞TLR4、MyD88、NF-κB、IL-1β及TNF-α蛋白表达水平的影响。结果与阴性对照组比较,IL-6可促进BxPC-3胰腺癌细胞生长,升高细胞增值率和克隆形成率;IL-6干预后,BxPC-3胰腺癌细胞TLR4、MyD88、NF-κB、IL-1β和TNF-α等因子的mRNA和蛋白表达水平均明显上调。结论 IL-6可促进BxPC-3胰腺癌细胞生长增殖,其机制可能与上调TLR4/NF-κB信号通路有关。     

甘草酸单糖对单壁碳纳米管暴露小鼠急性肺损伤的保护作用研究

目的 评估甘草酸单糖（glycyrrhizic acid monoglucuronide,GAMG）对单壁碳纳米管（single-walled carbon nanotubes,SWCNT）诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法 取7～8周龄雌性C57/BL小鼠30只，随机分为3组，每组10只，分别为阴性对照组（生理盐水40μg/只，气管滴注）、SWCNT模型组（SWCNT 40μg/只，气管滴注）、GAMG治疗组（SWCNT 40μg/只，气管滴注+GAMG 200 mg/kg）,GAMG治疗组每天给予1次GAMG腹腔注射，连续3 d，其他组同时给予空白溶剂，在第3天对小鼠进行取材。观察各组小鼠肺组织HE染色病理改变和气管肺泡灌洗液中细胞因子白介素-6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的变化，采用免疫组化法检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的蛋白表达水平，免疫荧光法检测NF-κB和HSP47的含量。结果 GAMG治疗组小鼠肺损伤程度明显减轻。与SWCNT组相比，GAMG治疗组BALF中MCP-1和IL-6水平降低（P <0.01）;TLR4和MyD88的表达...     

红木生育三烯酚对结肠癌小鼠免疫相关细胞与细胞因子的作用

目的研究红木生育三烯酚(δ-T_3)对结肠癌小鼠CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、白介素(IL)-6、干扰素(IFN)-γ的调节作用。方法 75只CD1-ICR小鼠分为结肠癌造模组和阴性对照两大组,结肠癌造模组再分为肿瘤模型对照组和三个δ-生育三烯酚剂量组(分别5、10、20mg/kg·bw),每组15只。采用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导结肠癌模型。采用全自动五分类血球仪毛细管模式检测动物血液学指标,流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚型,ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-6、干扰素(IFN)-γ水平。结果与空白对照组比较,结肠癌造模组ICR小鼠白细胞计数降低(P0.05)。与肿瘤模型对照组比较,中、高剂量生育三烯酚组均能显著提高CD4~+/CD8~+比值和血清中IFN-γ的水平,降低IL-6水平(P0.05)。结论δ-生育三烯酚可增强结肠癌小鼠的免疫功能,这可能与其提高CD4~+/CD8~+比值,提高IFN-γ水平,及降低IL-6水平相关。