小凹蛋白-1介导阿托伐他汀对自发性高血压大鼠肾叶间动脉收缩反应的抑制作用

目的肾叶间动脉收缩反应增强是高血压肾脏损伤的早期表现,是重要的预防和治疗靶点。平滑肌细胞小凹蛋白-1(caveolin-1)上调是其发生机制之一,阿托伐他汀(atorvastatin,ATVS)可通过降低胆固醇(cholesterol,CHO)调控caveolin-1表达,本研究探讨ATVS是否通过caveolin-1抑制自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)肾叶间动脉对血管紧张素II(angiotensin,Ang II)的收缩反应。方法 12只SHR大鼠随机分为2组:SHR对照组及ATVS(50 mg·kg~(-1)·d~(-1))处理组,每组6只,6只Wistar Kyoto(WKY)大鼠作为正常对照组。采用尾套法测量大鼠尾动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP),血管环张力描记技术检测肾叶间动脉收缩反应,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测caveolin-1和血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensin II type 1 receptor,AT1)蛋白表达,免疫沉淀和Western blot检测caveoin-1与AT1的结合。结果与WKY大鼠相比,SHR组SBP显著增高(P0.05),肾叶间动脉对AngⅡ的收缩反应强度及敏感性均显著增强(P0.05);4周ATVS处理显著降低SHR组SBP(P0.05)及肾叶间动脉对AngⅡ的收缩反应强度及敏感性(P0.05)。SHR组动脉AT1及caveolin-1的蛋白表达显著高于WKY大鼠(P0.05),AngⅡ孵育所致caveolin-1与AT1的结合亦较WKY组显著增多(P0.05)。ATVS处理可降低SHR组caveolin-1和AT1的蛋白表达(P0.05),并抑制caveolin-1与AT1的结合(P0.05),CHO孵育则可增高ATVS组caveolin-1蛋白含量并促进其与AT1的相互作用(P0.05),同时可显著增加肾叶间动脉对AngⅡ收缩反应的强度及敏感性(P0.05)。结论 ATVS可抑制SHR大鼠肾叶间动脉对AngⅡ的收缩反应,其机制与caveolin-1的蛋白表达降低及caveolin-1与AT1的结合减少有关。     

平滑肌细胞caveolae在大鼠肾动脉收缩反应调控中的作用研究

目的探讨平滑肌细胞caveolae在大鼠肾动脉对不同血管活性药物收缩反应中的作用及其机制。方法采用单独甲基-β环糊精(methyl-beta-cyclodextrin,MCD)或MCD和胆固醇(cholesterol,CHO)孵育肾动脉以减少和增加平滑肌细胞caveolae含量,并与未处理组[二甲基亚砜(DMSO)组比较]。采用电镜观察caveolae数量,采用血管环张力描记技术检测肾动脉对氯化钾(potassiurn chloride,KCl)、苯肾上腺素(phenylephrine,PE)和血管紧张素Ⅱ(angiotensin,AngⅡ)的收缩反应,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测法、荧光实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测caveolin-1及血管紧张素受体1型(Angiotensin type 1 receptor,AT1R)的基因和蛋白表达,采用免疫沉淀和Western blot检测caveolin-1与AT1R的结合。结果 MCD单独孵育可显著降低平滑肌细胞caveolae数量,而MCD与CHO共孵育则可使其恢复,MCD或CHO孵育均未影响caveolin-/基因和蛋白表达。MCD与CHO预处理后,肾动脉对KCl和PE的收缩反应无明显改变。但与未处理组相比,MCD单独孵育可使动脉对AngⅡ的收缩反应强度显著降低(P0.05),收缩敏感性显著减弱(P0.05),而MCD与CHO共孵育则可使动脉对AngⅡ的收缩反应强度及敏感性恢复正常水平。CHO与MCD对AT1R的蛋白表达水平无明显影响。在正常动脉,AngⅡ作用后caveolin-1与AT1R的结合显著增加(P0.05),而在MCD孵育动脉,这种反应被明显抑制,CHO则可使其恢复正常水平。结论平滑肌细胞caveolae是大鼠肾动脉收缩功能调控的重要机制,其主要通过影响caveolin-1与AT1R的结合而调控其下游通路。     

高血压大鼠海绵体平滑肌细胞间连接的变化

目的:比较自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞间连接改变及与阴茎勃起功能的关系。方法:注射阿朴吗啡(APO)观察14周龄SHR(SHR组,n=5)、W istar-Kyoto大鼠(WKY组,n=5)阴茎勃起情况,用透射电镜观察其阴茎海绵体平滑肌细胞间连接超微结构,RT-PCR测定海绵体平滑肌细胞Connexin 43的mRNA表达,免疫组化观察Connexin 43蛋白表达。结果:SHR组大鼠阴茎勃起次数明显低于WKY组(P<0.05),电镜发现SHR组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞间大量胶原纤维增生,Connexin 43蛋白及其mRNA表达较WKY组显著降低(P<0.05)。结论:高血压影响阴茎勃起功能,阴茎海绵体平滑肌细胞间连接的病理改变可能是高血压性勃起功能障碍的发病机制之一。     

连黄降浊颗粒对自发性高血压大鼠肾动脉重构的影响

目的:观察连黄降浊颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)肾动脉重构的影响,并探讨其作用机理。方法:40只SHR随机分为模型组、益肾化湿颗粒对照组(中药对照组)、盐酸贝那普利对照组(西药对照组)、连黄降浊颗粒低剂量组(低剂量组)、连黄降浊颗粒高剂量组(高剂量组),8只WKY大鼠作为正常血压对照组(WKY组),给予相应浓度和剂量药物。给药8周后,测定大鼠血压、尿微量白蛋白(m Alb)、尿微量白蛋白/尿肌酐(Um Alb/Ucr)、血浆血管内皮生长因子(VEGF)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ);计算肾小管损伤指数(TII)和肾小球硬化指数(GSI),测量肾动脉中膜厚度(MT)、管腔内径(LD),检测VEGF表达,观察其中膜超微结构。结果:8周后,模型组SHR血压、m Alb、Um Alb/Ucr、血浆VEGF和AngⅡ显著升高(P<0.01),肾组织病变严重,肾动脉重构明显。低剂量组和高剂量组SHR血压、m Alb、Um Alb/Ucr、血浆VEGF、AngⅡ、TII和GSI显著下降(P<0.01);肾动脉MT、MT/LD下降和VEGF表达减弱(P<0.01);肾动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增生、肥厚,内皮细胞脱落,中膜断裂改善,且高剂量组优于低剂量组。西药对照组SHR血压和m Alb、Um Alb/Ucr显著降低(P<0.01);TII、GSI,肾动脉VEGF表达和MT/LD有所下降(P<0.05),效果均不如高剂量组。结论:连黄降浊颗粒能够降低SHR血压、减少尿蛋白、保护肾功能、改善肾组织病变,并抑制SHR肾动脉VEGF过度表达、AngⅡ分泌,逆转其肾动脉重构。     

罗格列酮对实验性慢性环孢素肾病的作用

目的 探讨罗格列酮（RSG）对慢性环孢素肾病（CCN）大鼠模型的肾保护作用。 方法 低盐饮食基础上建立CCN大鼠模型，其中1组模型鼠用RSG同时灌胃。分别在实验开始后第14天和第35天处死动物，检测血浆和肾组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、AngⅡ1型受体(AT1R)、转化生长因子β1(TGF-β1)、细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）、α-SMA和纤连蛋白（FN）的表达。在体外用不同浓度的CsA和RSG孵育NRK细胞。RT-PCR检测肾皮质TGF-β1，Western印迹分析检测FN、AT1R、p-ERK水平。 结果 RSG可改善环孢素A导致的大鼠肌酐清除率的下降[（0.586±0.094）比(1.072±0.105)ml&#8226;min^-1&#8226;kg^-1，P < 0.01]、血浆和肾组织AngⅡ水平增加（P < 0.01）、肾间质单核细胞浸润（P < 0.01）、肾间质纤维化（1.707±0.019 比 2.335±0.022，P < 0.01）、肾组织α-SMA表达增加（P < 0.01）、肾皮质TGF-β1 mRNA水平增加（P < 0.01）、NRK细胞FN、AT1R和p-ERK蛋白水平增加（P < 0.05）。 结论 RSG可能通过减轻炎细胞浸润、影响AngⅡ作用和下调TGF-β1等途径减轻CsA所致的肾组织损伤。     

细胞间黏附分子-1在自发性高血压大鼠肾损害作用的研究

目的：研究细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在自发性高血压大鼠（SHR）肾组织的表达及其与肾损害的关系。方法：以同龄雄性正常血压大鼠（WKY）和SHR为研究对象,分别于10周龄和28周龄检测两种大鼠尾动脉压、24h尿蛋白定量、肾功能等;留取肾组织行HE染色、免疫组织化学及RT-PCR法检测ICAM-1蛋白及mRNA表达情况,并作分析。结果：与同龄WKY大鼠比较,SHR尾动脉压和24h尿蛋白定量明显增高（P〈0.05和P〈0.05）;与12周龄SHR比较,28周龄SHR尾动脉压和24h尿蛋白定量明显增加（P〈0.05和P〈0.05）。SHR组肾组织ICAM-1蛋白及mRNA表达较同龄WKY增强（P〈0.05）,28周龄SHR较10周龄SHR表达增强（P〈0.05）,ICAM-1表达与24h尿蛋白定量呈正相关（P〈0.05）。结论：SHR出现蛋白尿时,肾组织ICAM-1表达增强,炎症参与了高血压肾损害的发生。     

Apelin-APJ系统在1型糖尿病肾病大鼠发病中的作用

目的：探讨血管紧张素1型受体相关蛋白（putative receptor protein related to AT1,apelin-APJ）系统在糖尿病肾病发生中的作用及机制。方法：20只大鼠应用链脲佐菌素（STZ60mg/kg体重）构建1型糖尿病大鼠模型后随机分为三组,正常对照组（N）、糖尿病组（DN）、apelin干预组（T）。于应用apelin-13前、后4周,8周,12周测定三组大鼠24h尿微量白蛋白量、尿白蛋白/血肌酐指数;应用apelin-13前和12周时采血分别测定血肌酐（Scr）;应用ELISA法检测血清apelin-13水平;应用Western blot和免疫组化方法检测大鼠肾组织APJ受体和AngⅡ相关的1型受体（AT1R）的蛋白表达量。结果：与N组比较,DN组大鼠尿微量白蛋白、尿白蛋白/血肌酐指数显著升高（P〈0.01）,肾组织APJ受体的蛋白表达量显著下降（P〈0.01）,AT1R的表达量显著升高。与DN组比较,T组大鼠尿微量白蛋白、白蛋白/肌酐指数显著下降（P〈0.05）,肾组织APJ受体的蛋白表达量显著上升（P〈0.01）,AT1R的表达量显著下降。N组与T组大鼠尿微量白蛋白、白蛋白/肌酐指数、肾组织APJ受体和AT1R的蛋白表达量之间差异无统计学意义。结论：Apelin-APJ系统可能参与了糖尿病肾病的发病过程,其可能通过拮抗AngⅡ-AT1R的作用而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。     

高盐饮食对自发性高血压大鼠肾髓质环氧化酶2表达的影响

目的观察自发性高血压大鼠（SHR）肾髓质环氧化酶2（COX2）的表达以及不同盐负荷状态下COX2的变化。方法6周龄SHR大鼠及其对照Wistar-Kyoto（WKY）大鼠各12只，随机分为低盐组和高盐组（WKY-LS组，WKY-HS组，SHR-LS组，SHR-HS组），分别给予高盐（含8％NaCl）或低盐（含O．04％NaCl）饮食3d。观察基础状态及不同盐负荷前后大鼠尾动脉血压、24h尿量（UV）、尿钠（UNa）以及COX2代谢物6k．PGFlα排泄情况。应用免疫组化和Western印迹的方法检测肾髓质COX2蛋白表达。结果给予不同盐负荷3d后，SHR-Hs组血压显著升高[（12．59±5．13）比（11．94±3．76）mmHg，P〈0．05]。基础状态及不同盐负荷状态下，SHR大鼠24hUV、UNa排泄与WKY大鼠相比均显著下降（P均〈O．05）。与各自基础状态相比，低盐饮食后两种大鼠的UV和UNa排泄显著降低；高盐饮食后则显著增加（P均〈O．05）。SHR和WKY大鼠尿COX2代谢物6k-PGFlα的排泄对盐负荷的反应也类似，高盐组均较低盐组显著增加（P〈0．05），但同样盐负荷状态下两组之间差异无统计学意义。基础状态下及低盐饮食SHR与WKY大鼠肾髓质COX2表达差异无统计学意义；给予高盐饮食后WKY大鼠肾髓质COX2表达增加2．06倍，SHR大鼠增加1．87倍，但两种大鼠之间差异无统计学意义。结论SHR大鼠肾脏水盐排泄功能受损，高盐饮食后血压进一步升高，水钠潴留，同时伴有肾髓质COX2表达升高，但不同盐负荷对SHR大鼠肾髓质COX2表达的影响与WKY大鼠相同。提示肾髓质COX2参与了水盐代谢的调节，且在SHR大鼠中表达正常，但并非该动物模型高血压形成及水钠潴留的关键因素。     

可溶性细胞间粘附分子-1在自发性高血压大鼠肾间质纤维化作用的研究

目的研究可溶性细胞间粘附分子-1（Intercellular adhesion mol ecule—1，ICAM—1）在自发性高血压大鼠（Spontaneously hypertertensive rat，SHR）肾小管的表达及其与肾间质纤维化的关系。方法以同龄雄性正常血压（Wistar Kyoto，WKY）和自发性高血压大鼠为研究对象，分别于12周龄和24周龄时检测两种大鼠尾动脉血压、肾功能及β2微球蛋白（β2-MG），并采用免疫组织化学的方法检测ICAM—1在肾小管中的表达。结果同WKY组比较，SHR组24周时β2-MG显著增高（P〈0．01）；而且尾动脉收缩压（SBP）显著性增高；而尿素氮和血肌酐的差异无显著性（P〉0．01）。ICAM—1在WKY组肾小管的表达无或极微量；在SHR组的肾小球有少量表达，但在肾小管的表达显著，且随高血压病程的进展，ICAM—1的表达显著性增加（P〈0．01）。结论ICAM—1在自发性高血压大鼠肾小管的表达显著增加，与肾间质纤维化密切相关。     

人肾间质纤维母细胞培养及血管紧张素Ⅱ2型受体转染表达

目的：体外培养人肾间质纤维母细胞（hRIF)并用腺病毒介导转染表达血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）2型受体（AT2R）。方法：用肾穿刺活检法取慢性肾小球肾炎病人肾组织,以常规组织块贴壁法培养hRIF;构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体（AdCMV-AT2R),体外转染hRIF;用RT-PCR方法检测AT2RmRNA表达,免疫组织化学法及蛋白免疫印迹法检测AT2R蛋白表达,流式细胞仪检测AT2R表达0率,同时检测AT1R的表达变化。结果：用肾活检组织成功培养出hRIF,构建的AdCMV-AT2R体外转染培养hRIF表达率为90.57%,以免疫组化、免疫印迹和RT-PCR检测AT2R表明,转染后AT2R表达明显增强。并随表达时间延长而增加,48h为表达峰值。AT2R转染表达不影响AT1R表达,结论：腺病毒载体可较高效率介导AT2R在hRIF的转染表达,ATIR表达不受其影响。转染表达AT2R的hRIF可作为研究AngⅡ在肾间质纤维化中作用的良好细胞模型。     

RAS受体拮抗剂对重症急性胰腺炎脑损伤保护作用的机制研究

目的:研究重症胰腺炎脑损伤中肾素-血管紧张素系统(RAS)的变化,探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)拮抗剂氯沙坦(Losartan)和血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)拮抗剂PD123319在脑保护中作用机制。方法:健康雄性SD大鼠建立急性重症胰腺炎(SAP)、轻度水肿型胰腺炎(MAP)模型,分成生理盐水组、SAP组、MAP组、Losartan治疗组、PD123319治疗组、Losartan+PD123319联合治疗组,应用定量反转录PCR(qRT-PCR)法测定脑组织和外周血白细胞AT1R和AT2R的mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定脑组织和血浆中的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及肾素(Renin)水平。结果:1)与生理盐水对照组相比,SAP组和MAP组大鼠脑组织和血浆中的AngⅡ及Renin水平均显著升高。与SAP组比较,Losartan治疗组、PD123319治疗组、Losartan+PD123319联合治疗组的大鼠脑组织和血浆中的AngⅡ及Renin水平无明显变化。2)SAP组和MAP组大鼠双侧脑皮质、下丘脑、脑干及外周血白细胞AT1R与AT2RmRNA表达水平均高于生理盐水组,而Losartan治疗组、PD123319治疗组、Losartan+PD123319联合治疗组则能逆转这一变化。结论:胰腺炎鼠脑组织中AngⅡ、AT1R、AT2R表达均增高,Losartan、PD123319可通过拮抗AT1RmRNA、AT2RmRNA干预脑损伤。     

自发性高血压大鼠阴茎组织结构和勃起功能的改变

目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)勃起功能的改变及其发病机制。方法:20周龄雄性SHR大鼠及同系WKY大鼠各15只,夹尾法测量大鼠收缩压(SBP),皮下注射阿朴吗啡(APO)检测阴茎勃起功能,免疫组化染色观察阴茎海绵体α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原(COLⅢ)的表达。结果:SHR组及WKY组收缩压分别为(205.7±11.9)、(114.3±10.2)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),阴茎勃起次数分别为(0.6±0.5)、(2.4±0.6)次,差异均有极显著性(P<0.01)。SHR大鼠阴茎海绵体组织平滑肌及COLⅢ的表达显著高于WKY大鼠(P<0.01)。结论:高血压严重影响大鼠阴茎勃起功能,海绵体组织结构的病理改变可能是自发性高血压大鼠勃起功能下降的机制之一。     

c-fos在老龄自发性高血压大鼠肾脏的表达及缬沙坦干预作用

目的探讨老龄自发性高血压大鼠肾脏组织c-fos mRNA的表达及缬沙坦对其表达的影响。方法36只55周龄自发性高血压大鼠（SHR）随机分3组（n=12）：缬沙坦组（A组），贝那普利组（B组），对照组（C组），另设12只同龄WKY大鼠为正常对照组（D组）。定期检测尾动脉收缩压（SBP）；12周后：放射免疫法检测大鼠血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、醛固酮（ALD）水平；RT-PCR法检测肾脏组织c-fos mRNA表达。结果与C组比较，A、B两组SBP显著下降，但A、B组间无显著差异；B组显著降低血浆AngⅡ水平，A组显著升高其水平；A、B两组均降低血浆ALD水平，A组较B组降低更显著；A、B两组不同程度地降低SHR肾组织c-fos mRNA表达，且以A组降低更为显著。结论贝那普利和缬沙坦均能够显著改善老龄自发性高血压大鼠肾脏组织重构，考虑其部分机制与下调c-fosm RNA表达有关。     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗影响肝纤维化的实验研究

目的 观察血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对体外培养的肝星状细胞合成转化生长因子-β1(TGF-β1),以及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)mRNA表达的影响. 方法 采用HSC-T6肝星状细胞系作为活化的肝星状细胞的研究模型.将培养的肝星状细胞随机分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、受体拮抗剂(AT1RA)组和血管紧张素Ⅱ+受体拮抗剂(AngⅡ+AT1RA)组.采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1蛋白的含量.RT-PCR法检测肝星状细胞中TIMP-1 mRNA的表达. 结果 细胞培养上清液中TGF-β1蛋白的含量,对照组、AngⅡ组和AngⅡ+AT1RA组分别为(7.531±0.654)pg/mL、(9.855±1.485)pg/mL和(7.719±0.329)pg/mL,AngⅡ组高于对照组(P＜0.05),AngⅡ+AT1RA组显著低于AngⅡ组(P＜0.05).肝星状细胞TIMP-1mRNA的表达水平,对照组、AngⅡ组和AngⅡ+AT1RA组分别为3.387±0.042、4.870±0.061和3.837±0.042,AngⅡ组高于对照组(P＜0.05),AngⅡAT1RA组显著低于AngⅡ组(P＜0.05). 结论 血管紧张素Ⅱ能够促进肝星状细胞TGF-β1蛋白的合成以及TIMP-1 mRNA的表达,而血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂能够明显抑制这一作用.     

血管紧张素Ⅱ对小鼠足细胞小窝蛋白1表达的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激及氯沙坦干预对足细胞小窝蛋白1（caveolin-1）表达的影响,探讨caveolin-1在足细胞损伤中的作用.方法 体外培养永生化小鼠足细胞（MPC）,AngⅡ（10-6mol/L）刺激不同时间（3 h、6h、12 h和24 h）;Losartan（10-6 mol/L）提前预处理3h后与AngⅡ（10-6 mol/L）共孵育6h,Hoechst-33342检测足细胞凋亡率,Western-blot法检测各组细胞caveolin-1蛋白表达,免疫荧光检测caveolin-1及其磷酸化水平.结果 ①AngⅡ刺激3h,足细胞即开始发生凋亡,随着刺激时间的延长,足细胞凋亡明显增多（P＜0.05）.②AngⅡ刺激不同时间caveolin-1表达总量无明显改变（P＞0.05）,从3h开始,caveolin-1磷酸化水平明显增高（P＜0.05）.③Losartan干预后caveolin-1磷酸化水平明显降低（P＜0.05）.结论 caveolin-1可能在AngⅡ诱导的足细胞损伤中发挥着重要的作用.     

小窝蛋白-1与肿瘤及其耐药机制

细胞膜内陷形成的细颈瓶状特殊膜结构小窝(caveolae),参与细胞分子运输、细胞黏附和信号转导在内的多种细胞活动。小窝蛋白(caveolin)是caveolae发挥生物学作用的重要组成蛋白,其三成员中的caveolin-1是细胞caveolae形成及各种信号分子聚集在caveolae上所必需。许多肿瘤中会出现caveolin-1表达异常,且在不同肿瘤组织中的表达变化具两面性,这种差异性可能与该组织恶变的特异性、各种生长因子与激素的表达状态及caveolin-1基因自身突变有关。caveolin-1也参与肿瘤细胞形成多药耐药性机制。该文介绍caveolin-1蛋白的结构特性和功能,重点阐述caveolin-1在细胞的恶性转化、恶性增殖、侵袭、转移及多药耐药中的作用。     

血管紧张素Ⅱ及其受体在人肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)及血管紧张素ⅡⅠ型受体(angiotensin Ⅱ type Ⅰ receptor,AT1R)在人肝细胞癌组织中的表达及其与肝癌临床病理特征的关系.方法 应用免疫组织化学方法 分析行手术切除的45例肝癌和癌旁组织以及12例正常肝组织的AngⅡ及AT1 R的表达情况.结果 45例肝癌组织中39例Ang Ⅱ表达阳性(86.67%),41例AT1R表达阳性(91.11%);45例癌旁组织中7例Ang Ⅱ表达阳性(15.56%),10例AT1R表达阳性(22.22%).正常肝组织标本Ang Ⅱ及AT1 R表达均阴性.Ang Ⅱ及AT1 R在肝癌组织中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤直径、HbsAg(+/-)、AFP和肝硬化背景无关(P＞0.05),临床分期高及病理分级高两者的表达显著性高于分期低及分级低者(P＜0.01).结论 AngⅡ及AT1R在肝癌组织中的表达升高,并且随肝癌的分期及病理分级表达增高,表明Ang Ⅱ及AT1R与肝癌的发生、发展及转移有关.     

ROS/GADD153蛋白在血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨活性氧簇(ROS)/GADD153蛋白在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞凋亡中的作用.方法 体外培养乳鼠心肌细胞,随机分为9组(n=5),Ⅰ组(C组)常规心肌细胞培养,不予其他处理;Ⅱ组(AngⅡ6组)给予100 nmol/L AngⅡ,孵育6 h;Ⅲ组(AnsⅡ12组)给予100 nmol/L AngⅡ,孵育12 h;Ⅳ组(ArtsⅡ24组)给予100 nmol/L Ang Ⅱ,孵育24 h;V组[N-乙酰-L半胱氨酸(NAC)+AngⅡ组]预先给予抗氧化剂NAC 5 mmol/L,2 h后给予100 nmol/L Ang Ⅱ,孵育24 h;Ⅵ组(NAC组)仅给予NAC 5 mmol/L,孵育24 h;Ⅶ组(anti-ODN组)GADD153反义寡核苷酸10 μmol/L转染24 h后,加入100nmoFL AngⅡ,孵育24 h;Ⅷ组(mis-ODN组)GADDl53错义寡核苷酸10 μmol/L转染24 h后,加入100nmol/L Ang Ⅱ,孵育24 h;Ⅸ组(脂质体对照组)加入等容量转染试剂,孵育24 h.检测细胞活力、细胞内ROS产量、细胞凋亡率及GADD153蛋白表达水平.结果 与C组相比,AngⅡ6组、AngⅡ12组、AngⅡ24组细胞活力降低,细胞凋亡率、ROS产量及GADD153蛋白表达升高,且呈时间依赖性(P＜0.05);与AngⅡ24组比较,NAC+AngⅡ组和anti-ODN组细胞活力升高,细胞凋亡率、ROS产量及GADD153蛋白表达降低(P＜0.05).结论 AugⅡ通过增加ROS产量,诱导GADD153蛋白表达上调,从而导致心肌细胞凋亡的发生.     

连黄降浊颗粒对自发性高血压大鼠肾组织TGF-β_1/smads信号传导通路的影响

目的:观察连黄降浊颗粒对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rat,SHR)肾组织转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β_1/smads信号传导通路的影响。方法:雄性10周龄SHR40只,按体重随机分为4组:模型组、苯那普利对照组(对照组)、连黄降浊颗粒低剂量组(低剂量组)、连黄降浊颗粒高剂量组(高剂量组)各10只,采取切除所有大鼠右肾的方法制备高血压性肾损害模型。另取10只同周龄Wistar-Kyoto(WKY)大鼠同样切除右肾,作为正常血压对照组(WKY组)。造模1周后给予相应浓度和剂量的药物。给药第4周、8周末观察大鼠尿微量白蛋白(m Alb)、尿微量白蛋白与尿肌酐比值(m Alb/Ucr)和血清肌酐(Scr)。于第8周末处死所有动物,取其肾组织行HE染色、PAS染色和Masson染色,观察病理变化并半定量计算肾小管损伤指数(tubulointerstitial injury index,TII),免疫组化法检测骨形成蛋白-7(bone morphogenetic protein,BMP-7)、TGF-β_1、smad2、smad7在肾组织的表达。结果:造模1周以及给药第4周、第8周,4组SHRm Alb、m Alb/UCr、Scr随时间延长呈逐渐升高趋势,且差异均与WKY组差异有统计学意义(P0.01),而给药前4组SHR之间上述指标差异均无统计学意义(P0.05)。给药4周后,SHR中3个治疗组m Alb、m Alb/UCr、Scr显著低于模型组(P0.05),高剂量组明显低于对照组(P0.05)。8周时组间比较,低剂量组、高剂量组SHR上述指标明显低于对照组(P0.05),高剂量组低于低剂量组(P0.05)。HE染色、PAS染色显示WKY组大鼠肾组织形态大致正常。HE染色显示,3个治疗组SHR肾组织损害较模型组明显减轻,高剂量组病理改善更明显。PAS染色进行TII评分发现,3个治疗组大鼠TII显著低于模型组(P0.05),高剂量组明显低于模型组和低剂量组(P0.05)。TGF-β_1和Smad2在WKY组呈无或弱阳性,而BMP-7和Smad7呈强阳性表达。与模型组相比,TGF-β_1、Smad2在3个治疗组大鼠肾组织的表达下调(P0.05),2个中药治疗组大鼠肾组织的表达低于对照组(P0.05);3个治疗组BMP-7、smad7在肾脏组织的表达上调(P0.05),2个中药治疗组大鼠肾组织的表达高于对照组(P0.05)。结论:连黄降浊颗粒可能通过干预BMP-7/TGF-β_1/Smads信号转导通路抑制了TGF-β_1在肾组织的表达,而对SHR肾间质纤维化起到了治疗作用。     

连黄降浊颗粒对自发性高血压大鼠肾脏功能和结构的保护作用

目的：观察连黄降浊颗粒对自发性高血压（SHR）大鼠肾脏功能和结构的保护作用。方法：将29只SHR随机分为模型组、西药对照组（对照组）、连黄降浊颗粒低剂量组（低剂量组）、连黄降浊颗粒高剂量组（高剂量组）。分别给于相应浓度和剂量的药物灌胃12周,观察大鼠的血压、尿蛋白、肾功能和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、内皮素（ET）水平以及肾组织病理改变;并用半定量方法评价肾小球硬化程度、肾小管损伤程度及肾间质纤维化程度,用ELISA测定肾皮质转化生长因子-β1（TGF-β1）的蛋白定量。结果：连黄降浊颗粒能减少SHR尿蛋白、降低血压、改善肾功能、抑制AngⅡ和ET的合成,减轻肾脏病理损害,减轻肾小球硬化、肾小管损伤及肾间质纤维化程度,抑制肾脏TGF-β1表达,其效果优于苯那普利。结论：连黄降浊颗粒具有保护SHR肾功能和减轻肾脏病理损害的作用,其机制可能与减少尿蛋白、降低血压、抑制AngⅡ和ET的合成、减轻肾小球硬化和肾间质纤维化、抑制肾脏TGF-β1表达等有关。