线粒体DNA tRNA~(leu(UUR))和 ND1双重突变──糖尿病家系报道

目的：探讨线粒体ＤＮＡ突变在糖尿病发病中的作用。方法：采用ＰＣＲＲＦＬＰ、亚克隆及ＤＮＡ序列分析等技术，对一个母系遗传糖尿病家系成员的线粒体ＤＮＡｔＲＮＡｌｅｕ（ＵＵＲ）及其临近区域进行了突变分析。结果：发现ｍｔＤＮＡｔＲＮＡｌｅｕ（ＵＵＲ）ｎｔ３２４３Ａ→Ｇ和ＮＤ１ｎｔ３３６５Ｔ→Ａ双重突变。结论：结合该家系糖尿病患者具有发病年龄早（＜３０岁），对胰岛素依赖，伴耳聋等较严重的临床表型，推测ＮＤ１和ｔＲＮＡｌｅｕ（ＵＵＲ）突变一起在发病中起协同作用。     

伴线粒体基因突变的家族性糖尿病1例

非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）是一类多因子疾病。近年对ＮＩＤＤＭ分子遗传学研究的进展之一为发现线粒体基因突变糖尿病，为ＶａｎｄｅｎＯｕｗｅｌａｎｄ等［１］于１９９２年首次发现第１个线粒体ｔＲＮＡＬｅｕ（ＵＵＲ）基因ｎｔ３２４３Ａ→Ｇ突变糖尿病家系...     

线粒体tRNA^Leu（UUR）基因突变糖尿病的基因诊断

线粒体ｔＲＮＡ＾Ｌｅｕ（ＵＵＲ）基因核苷酸３２４３Ａ→Ｇ点突变临床上可致呈母系遗传方式传递的非胰岛素依赖型糖尿病。突变形成ＡｐａＩ酶切位点，用聚合酶链反应伴ＡｐａⅠ酶解可进行临床基因论断。     

家族性糖尿病中线粒体tRNA~(Leu(UUR))基因突变的发生率及临床特点

应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法，对１４０例有家族史的糖尿病患者的线粒体ｔＲＮＡ１ｅｕ（ＵＵＲ）基因ｎｔ３２４３Ａ→Ｇ突变进行筛查，结果发现６例（４．３％）该突变基因阳性者。总结其主要临床特征为：①呈母系遗传，②起病早（＜４０岁），③多消瘦（ＢＭＩ＜２４ｍｇ／ｍ２），④继发性口服降糖药失效需用胰岛素治疗，⑤多伴有神经性耳聋。本研究提示该突变在中国人家族性糖尿病群体中有较高的发生率；在临床上属于另一种糖尿病亚型。     

线粒体tRNA~(Leu(UUR))基因点突变与非胰岛素依赖型糖尿病亚型的关系探讨

探讨线粒体ｔＲＮＡＬｅｕ（ＵＵＲ）基因点突变与母系遗传方式传递的非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）亚型的关系。采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）２０６ｂｐ结合ＡＰａⅠ酶解方法，辅以阳性对照，即可确认线粒体ｔＲＮＡＬｅｕ（ＵＵＲ）基因核苷酸３２４３→Ｇ点突变。作者应用此种线粒体在基因突变诊断方法，对中国东北地区９７例≤４５岁、无亲缘关系，但各自均有糖尿病家族史的非胰岛素依赖型糖尿病病人中筛选此基因突变，结果发现２例基因诊断阳性，在具有不常见临床表现表现的ＮＩＤＤＭ亚群中占２．０６％～６．２５％。此结果进一步证实线粒体基因突变对ＮＩＤＤＭ亚型的发病起重要作用。     

伴线粒体基因突变的家族性糖尿病的临床特征

目的探讨由线粒体ｔＲＮＡＬｅｕ（ＵＵＲ）（ｍｔＤＮＡ）３２４３Ａ→Ｇ点突变引起的糖尿病亚型的临床特征。方法按ＷＨＯ的标准，采用基因诊断技术，对１３０例伴有糖尿病家族史的病人，其中包括胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）和非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）进行筛查。并对其中３例阳性者的家系进行临床及基因分析。结果从１３０例糖尿病患者中共检出４例（３．１％）伴有ｍｔＤＮＡ３２４３点突变的非亲缘关系的病人，然后从其中３例突变病人及其家系中检测出９例线粒体糖尿病。全部患者均为消瘦体型。其中８例伴有神经性耳聋，８例因对口服降糖药继发性失效需改用胰岛素治疗。结论由于这类病人具有母系遗传、耳聋、进行性胰岛素分泌不全等特征，临床上可将这一类型的糠尿病分为一种新亚型－ＭＩＤＤ。     

大鼠乳腺肿瘤线粒体细胞色素b基因突变

目的 了解大鼠乳腺癌组织、癌旁组织和正常组织的线粒体细胞色素ｂ基因变异,６方法 提取细胞总ＤＮＡ,用ＰＣＲ法扩增细胞色素ｂ基因,产物用ＤＮＡ自动测序法进行序列分析。结果 癌组织发生了ｎｔ １４９３１Ｃ→Ｇ,ｎｔ１５００４Ｃ→Ｇ和ｎｔ １５４３５ Ｔ→Ｃ３处点突变。癌旁组织发生了ｎｔ１５４３６Ａ→Ｃ突变,正常组织没有突变。结论 大鼠乳腺癌组织和癌旁组织线粒体细胞色素ｂ基因存在突变。     

一个非氨基糖甙类抗生素致聋家系mtDNA突变研究

目的：对１个有明确母系遗传的非氨基糖甙类抗生素致聋“线粒体耳聋”家系致病的分子生物学机制进行探索。方法：应用ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＤＮＡ序列分析等分子生物学技术对其线粒体ＤＮＡ突变进行研究。结果：家系中全部患者和１个母系亲属存在线粒体ＤＮＡ１２Ｓ ｒＲＮＡ基因１５５５位点Ａ－Ｇ的突变,家系中的正常后代和２０个正常对照个体未发现突变。结论：线粒体ＤＮＡ Ａ１５５５Ｇ点突变是导致该家系耳聋的主要因     

应用LCR技术检测氨基糖甙类抗生素致聋家系线粒体基因的突变

目的：研究线粒体ＤＮＡ突变与氨基糖甙类抗生素致聋（ＡＡＩＤ）的关系,建立相应的基因诊断方法。方法：应用连接酶链反应（ＬＤＲ）对一个ＡＡＩＤ家系的所有成员（共１１人）及５６例听力正常对照个体的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）突变进行研究。结果：ＡＡＩＤ家系中检出７例突变个体,而５６例听力正常对照个体均无突变。结论：本研究建立一种特异、方便,简便,适合批量检测ＡＡＩＤ中ｍｔＤＮＡ点突变的方法,通过对一个ＡＡ     

成都地区β地中海贫血基因突变型及产前基因诊断初步分析

我们通过ＤＮＡ扩增和等位特异寡核苷酸探针杂交，检测了成都地区可疑β地中海贫血（简称地贫）患者３３个家系，９５人。共检出５８例、７３条染色体的β珠蛋白基因突变。其中，Ｃｏｄｏｎ１７（Ａ→Ｔ）突变２８例（３８．４％）ｌｃＯｄｏｎ４１－４２（－ＴＴＣＴ）突变２１例（２８．８％）；ＩＶＳ－Ⅱ－６５４（Ｃ→Ｔ）突变１４例（１９．０％）；ｎｔ－２８（Ａ→Ｇ）和ｎｔ－２９（Ａ→Ｇ）突变分别是６例（８．２％）和４例（５．５％）。在测知双亲β地贫突变类型的基础上，对两例β地贫风险胎儿采羊水细胞分离ＤＮＡ，用相同方法进行了产前基因诊断，获满意结果。     

一个氨基甙类抗生素致聋家系线粒体DNA序列分析

目的：通过对一个氨基甙类抗生素致聋家系１１名成员的线粒体ＤＮＡ进行分析，探讨该病的遗传方式及与线粒体ＤＮＡ突变的关系。方法：对１１名成员外周血线粒体ＤＮＡ进行ＰＣＲ－ＲＦＬＰ及测序分析。结果：８例标本的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ结果异常，测序表明其均存在１５５５位点Ｃ－Ｔ突变。结论：氨基甙类抗生素致聋与线粒体ＤＮＡ突变有关，该家系呈典型母系遗传。     

一个氨基甙类抗生素致聋家系线粒体DNA序列分析

目的：通过对一个氨基甙类抗生素致聋家系１１名成员的线粒体ＤＮＡ进行分析，探讨该病的遗传方式及与线粒体ＤＮＡ突变的关系。方法：对１１名成员外周血线粒体ＤＮＡ进行ＰＣＲ－ＲＦＬＰ及测序分析。结果：８例标本的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ结果异常，测序表明其均存在１５５位点Ｃ－Ｔ突变。结论：氨基甙类抗生素致聋与线粒体ＤＮＡ突变有关，该家系呈典型母系遗传。     

扩张型心肌病患者心肌病患者心肌线粒体DNA缺失突变及与？…

为探讨扩张型心肌病患者心肌线粒体ＤＮＡ缺失突变对心衰发病的意义，１０例ＣＣＭ患者心内膜活检心肌，用定量ＰＣＲ方法，以常发缺失型突变ｍｔ ＤＮＡ ４９７７ｂｐ（ｍｔＤＮＡ＾４９７７）和７４３６ｂｐ（ｍｔ ＤＮＡ＾７４３６）缺失率为损伤指标，观察心衰不同发展阶段ｍｔＤＮＡ所失程度与患者心肌线粒体呼吸酶活性改变及临床心功能受损不同关系。     

Rett综合征患儿一例多种组织的线粒体DNA突变分析

目的：探讨线粒体ＤＮＡ在Ｒｅｔｔ综合征发病中的作用。方法：利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、聚合酶链式反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析及ＤＮＡ直接测序等方法，对一例Ｒｅｔｔ综合征患儿的外周血白细胞、死后的脑、骨骼肌组织及其母亲外周血白细胞的线粒体ＤＮＡ的部分片段进行分析。结果：患儿３种组织及其母亲外周血白细胞的线粒体ＤＮＡ上编码１６Ｓ ｒＲＮＡ的２６５０￣３０００区域的ＤＮＡ存在突变，进一步     

Rett综合征患者线粒体DNA突变的初步分析

目的 探讨线粒体ＤＮＡ在Ｒｅｔｔ综合征发病中的作用。方法应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、聚合酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析及ＤＮＡ直接测序结合错配ＰＣＲ的方法，对１５例Ｒｅｔｔ综合征患儿及其中１４例的母亲的外周血白细胞线粒体ＤＮＡ的部分片段进行分析。结果１３例患儿及其中１１例的母亲的线粒体ＤＮＡ上，编码１６ＳｒＲＮＡ基因的２６５０－３０００区域ＤＮＡ突变，其中７例患儿及其中６例的母亲存在２８３５位点的点突变（Ｃ－Ｔ），３０例正常对照均未发现有此点突变。结论线粒体ＤＮＡ在Ｒｅｔｔ综合征的发病中起一定作用。     

云南经典型苯丙酮尿症基因Exon—11突变的检测

为了探讨云南省经典型ＰＫＵ基因突变特征,为基因诊断提供依据,应用ＰＣＲ－ＡＳＯ探针斑点杂交和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析技术,对１４个ＰＫＵ家系１４名患儿的ＰＡＨ基因Ｅｘｏｎ－１１进行检测。结果：检出两种突变Ｙ３５６Ｘ（ＴＡＣ→ＴＡＡ）和Ｖ３９９Ｖ（ＧＡＴ→ＧＴＴ）,突变频率均为７．１４％,前者略高于北方人群,后者低于北方人群。提示：云南ＰＫＵ患者ＰＡＨ基因Ｅｘｏｎ－１１突变不同于北方人群,这对提高云南省     

应用LCR技术检测氨基糖甙类抗生素致聋家系线粒体基因的突变

目的：研究线粒体 Ｄ Ｎ Ａ 突变与氨基糖甙类抗生素致聋（ Ａ Ａ Ｉ Ｄ） 的关系,建立相应的基因诊断方法。方法：应用连接酶链反应（ Ｌ Ｃ Ｒ） 对一个 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 家系的所有成员（ 共１１ 人） 及５６ 例听力正常对照个体的线粒体 Ｄ Ｎ Ａ（ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ） 突变进行研究。结果： Ａ Ａ Ｉ Ｄ 家系中检出７ 例突变个体,而５６ 例听力正常对照个体均无突变。结论：本研究建立了一种特异、简便、适合批量检测 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 中ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 点突变的方法,通过对一个 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 家系ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 点突变的研究,为探讨 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 发病的分子遗传学机制提供科学依据。     

101例乙肝患者HBVDNA前C区nt1896位点基因突变的研究

用错配聚合酶链反应（Ｍ－ＰＣＲ）及限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析方法对１０１例乙肝病毒感染者ＨＢＶＤＮＡ前ＣＡ我ｎｔ１８９６（Ｇ→Ａ）点突变进行检测。结果共检出１８９６（Ｇ→Ａ）点突变株感染者２９例,检出率２６．１３％。其在电性肝炎患者及肝硬化患者中的检出率明显高于急性肝炎患者中,（Ｐ〈０．０５）,在肝硬化及慢性重症肝炎患者中的检出率又高于在慢性肝炎患者中（Ｐ〈０．０１）。同时对慢性肝炎患者中检出突变的病例和未检出突变的病例进行了ＡＬＴＡＳＴ以及ＴＢＩＬ的比较,结果差别有显著性（Ｐ〈０．０５）。以上结果说明,ＨＢＶ前Ｃ区ｎｔ１８９６位（Ｇ→Ａ）变异株感染可能是导致部分病人病情加重的原因之一,与肝脏病变的活动有关。     

一个非氨基糖甙类抗生素致聋家系mtDNA突变研究

目的：对１ 个有明确母系遗传的非氨基糖甙类抗生素致聋“线粒体耳聋”家系致病的分子生物学机制进行探索。方法：应用 Ｐ Ｃ Ｒ、 Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ 和 Ｄ Ｎ Ａ 序列分析等分子生物学技术对其线粒体 Ｄ Ｎ Ａ突变进行研究。结果：家系中全部患者和１ 个母系亲属存在线粒体 Ｄ Ｎ Ａ１２ Ｓｒ Ｒ Ｎ Ａ 基因１５５５ 位点 Ａ Ｇ 的突变,家系中的正常后代和２０ 个正常对照个体未发现突变。结论：线粒体 Ｄ Ｎ Ａ Ａ１５５５ Ｇ 点突变是导致该家系耳聋的主要因素之一。     

人TFAR19的定点突变及其重组蛋白的表达,纯化和功能分析

目的：了解凋亡相关新基因ＴＦＡＲ１９编码蛋白分子中潜在的Ｓｅｒ＾１００磷酸化位点与其促凋亡效应的关系。方法：利用重叠延伸ＰＣＲ定点突变技术构建ＴＦＡＲ１９ Ｓｅｒ＾１００→Ａｌａ＾１００突变体，用ＤＮＡ测序技术验证，大肠杆菌表达，离子交换技术纯化重组空谈蛋白，将其加入培养的白血病细胞株ＨＬ－６０，通过ＰＩ染色，流式细胞仪分析，观察突变重组蛋白的促凋亡效应。结果：构建成ＴＦＡＲ１９ Ａｌａ＾１００突