昆虫抗冻蛋白的特性与结构

抗冻蛋白具有特殊的热滞活性,能使溶液的冰点低于熔点、抑制冰晶的生长,特别是在较低的浓度下就有抑制重结晶作用,保护生物免受冻害的影响.本文就昆虫抗冻蛋白的生化特性、影响昆虫抗冻蛋白热滞活性的因素进行介绍,以黄粉甲、云杉卷叶蛾和赤翅甲为例对昆虫抗冻蛋白的结构作了较为系统的综述.     

从苏木中大量生产巴西红木精用于抑制血管生成

WO 2007066926-A1从苏木Caesalpinia sappan L.中大量生产巴西红木精(brazilein)方法:用水和(或)醇提取苏木,浓缩提取物得到粗结晶,然后将粗结晶溶解在醇中,浓缩,重结晶即得到巴西红木精。本品具有抗血管生成和抑制细胞生长活性,用于治疗癌症。     

姜黄素对PC-3前列腺癌细胞株生长抑制的体外实验研究

目的探讨姜黄素对PC-3前列腺癌细胞株的生长抑制的作用及其可能机制.方法用MTT法检测姜黄素对PC-3前列腺癌细胞的生长抑制作用.流式细胞学(flow gytometry,FCM)检测细胞凋亡率.RT-PCR检测姜黄素对PC-3细胞中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)mRNA及BAX mRNA表达的影响.结果姜黄素分别作用24 h和48 h后,PC-3细胞的生长受到了明显地抑制,并且具有时间-剂量依赖性.各实验组与对照组相比,抑制率具有统计学意义(P<0.01).姜黄素处理PC-3细胞24 h组,凋亡率随浓度的增加而增高,在姜黄素浓度为40μmol/L时凋亡率最大,各给药组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).不同浓度姜黄素作用于PC-3细胞后FASN mRNA的表达明显降低,随姜黄素的浓度增加而减少;而BAX mRNA的表达明显增高,随姜黄素的浓度增加而增高.结论姜黄素明显抑制PC-3前列腺癌细胞的生长.抑制FASN mRNA的表达,增加BAX mRNA的表达,诱导细胞凋亡增加可能是其作用机制之一.     

腺病毒介导的反义VEGF165对人皮肤恶性黑色素瘤细胞生长的影响

目的:用腺病毒介导的反义VEGF165(Ad-aVEGF165)转染人血管内皮细胞系(ECV304)和人皮肤恶性黑色素瘤细胞系(A375)后,观察Ad-aVEGF165对这两细胞系体外生长的影响.方法:用感染复数为100的Ad-aVEGF165分别转染上述细胞,测定其生长曲线(MTT法)、细胞周期、VEGF基因的表达.结果:转染Ad-aVEGF165基因的A375细胞上清能够抑制ECV304细胞的生长,其增殖指数下降.Ad-aVEGF165对A375细胞的生长、增殖指数无明显影响,但是它能抑制A375细胞VEGF的表达.结论:①ECV304细胞不表达VEGF,Ad-VEGF 165对ECV304细胞无直接影响,必须要经过A375细胞介导才能抑制ECV304细胞的生长;②在体外,Ad-aVEGF165不能直接抑制A375细胞的生长,但能抑制A375细胞分泌VEGF.     

甲磺酸伊马替尼对胰腺癌细胞体外生长的影响

目的探讨甲磺酸伊马替尼(Gleevec)对胰腺癌细胞体外生长的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测Gleevec对胰腺癌细胞中的生长抑制(GI)作用;克隆形成实验测定胰腺癌细胞的体外生长能力;流式细胞仪检测胰腺癌细胞周期的改变;膜联蛋白标记与碘化丙啶检测细胞的死亡及凋亡情况。结果Gleevec对胰腺癌细胞具有生长抑制作用,且呈现剂量依赖性,其半数生长抑制浓度(GI50)为17~31.5mmo.lL-1。Gleevec作用后胰腺癌细胞克隆形成率下降,细胞周期并无影响,未见明显凋亡细胞产生。Gleevec通过破坏细胞膜的完整性而诱导细胞死亡。结论Gleevec具有抑制胰腺癌的细胞体外生长的能力,其具体机制有待进一步研究。     

EGFR突变在非小细胞性肺癌发生和化疗反应性中的作用及其分子机制

表皮生长因子受体(EGFR)是具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白.它们将生长因子信号从细胞外传入细胞内,这一过程控制着细胞的诸多生理功能:如细胞生长、分化、血管生成以及凋亡抑制.在非小细胞性肺癌中,该信号通路和肿瘤的生长及转移关系密切.研究表明抑制EGFR酪氨酸激酶活性,可抑制肿瘤生长.本文综述了近年来EGFR及其抑制剂的研究进展.     

9-顺式-维甲酸联合8-cl-cAMP对肺癌细胞凋亡的协同作用

目的 探讨9-顺式-维甲酸(9-cis-RA)联合8-cl-cAMP对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株(H460和H292)的生长抑制和诱导凋亡的协同作用.方法 实验分为9-cis-RA 1、5、10、20μmol/L组;8-cl-cAMP 5、10、20、50μmol/L组;9-cis-RA(5、10μmol/L)+8-cl-cAMP(10μmol/L)联合组和阴性对照组.以台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率,以Hoechst33258荧光染色法、DNA凝胶电泳法和流式细胞术等检测细胞凋亡.结果 与阴性对照组比较,9-cis-RA明显抑制H460细胞生长,具有时间和浓度依赖性,并诱导凋亡(P＜0.01),5μ,mol/L 9-cis-RA诱导48h凋亡率最高;同样条件下,H292细胞对9-cis-RA不敏感.8-cl-cAMP抑制H460和H292生长,有浓度依赖性;与相同剂量单药组比较,联合用药组H460细胞和H292细胞的生长抑制率和凋亡率均显著提高(P＜0.01).结论 人NSCLC细胞株H460和H292对9-cis-RA的敏感性不同,9-cis-RA明显抑制H460细胞生长,诱导凋亡,H292则表现耐药;9-cis-RA联合8-cl-cAMP对H460和H292细胞的生长抑制和诱导凋亡具有协同作用,并可部分逆转H292细胞对9-cis-RA的耐药性.     

白藜芦醇影响OVCAR3细胞生长并通过活化caspase-3诱导细胞凋亡的研究

目的 探讨白藜芦醇对卵巢癌细胞生长及细胞周期的影响,并研究白藜芦醇诱导卵巢癌细胞凋亡及其途径.方法 MTT比色法检测白藜芦醇对细胞生长的影响,Ho33342染色荧光显微镜观察白藜芦醇对细胞核浓缩及片段化的影响,TUNEL检测白藜芦醇对细胞凋亡的影响,流式细胞术分析白藜芦醇对细胞周期分布和caspase-3活性的影响.结果 低浓度(＜30 μmol/L)的白藜芦醇促进细胞增殖,而高浓度(＞30μmol/L)抑制细胞增殖;白藜芦醇能够引起S/G2阻滞,并诱导细胞凋亡;白藜芦醇增加caspase-3活性具有时间和浓度效应.结论 白藜芦醇促进或抑制细胞生长具有浓度依赖性;并通过增加caspase-3活性而诱导卵巢癌细胞凋亡.     

灵芝抗肿瘤活性和免疫调节作用的研究进展

本文综述灵芝提取物和灵芝多糖的抗肿瘤活性和免疫调节作用及其机制.灵芝提取物和灵芝多糖在体内显著地抑制动物移植性肿瘤生长,将二者直接加到肿瘤细胞培养基中,既不抑制肿瘤细胞增殖,也不促进其凋亡,灵芝多糖在体内的抗肿瘤机制是由免疫学机制介导的.最近的研究指出,灵芝多糖肽在体内、外由于清除巨噬细胞中叔丁基氢过氧化物(tBOOH)产生的自由基,而具有抗氧化作用.此外,灵芝多糖还促进体外培养的鼠骨髓衍生的树突状细胞(DC)成熟,而且还促进由DC启动的免疫反应.     

姜黄素单体影响肝癌BEL-7402细胞凋亡及其周期蛋白D表达的研究

目的 采用细胞学实验观察3种姜黄素单体对肝癌细胞株BEL-7402的抑制增殖及诱导细胞凋亡的作用强度和机制.方法 以四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Annexin Ⅴ-FITC双标记及流式细胞术(FCM)实验观察3种姜黄素对肝癌细胞株BEL-7402增殖的抑制作用与细胞周期变化,采用 Western blot实验分析3种姜黄素对肝癌细胞株BEL-7402细胞周期蛋白D表达的影响.结果 (1)3种姜黄素均可通过诱导肝癌细胞凋亡而有效抑制肝癌细胞生长增殖,存在时间与剂量效应,以姜黄素Ⅲ抑制效果最强.(2)3种姜黄素通过影响细胞周期生长的调控信号、降低细胞周期蛋白D表达量致使肝癌细胞停滞于G1/S期.结论 3种姜黄素均可通过抑制肝癌细胞周期蛋白D表达而诱导细胞凋亡,有效地抑制肝癌细胞生长增殖,具有很高的临床治疗价值.     

瓣蕊唐松草根茎总生物碱的体外抗肿瘤活性研究

目的:研究瓣蕊唐松草根茎总生物碱对体外培养的肿瘤细胞株生长与集落形成的抑制影响。方法:用90%乙醇提取,D106大孔吸附树脂分离,乙醇洗脱得到瓣蕊唐松草根茎总生物碱。采用MTT法和集落形成法检测总生物碱对人肺腺癌细胞NCI-446、人大肠癌细胞SWWC116和人宫颈癌细胞Hela的生长与集落形成的抑制情况。结果:瓣蕊唐松草根茎总生物碱对NCI-446和SWWC116的生长与集落形成有明显的抑制作用,生长抑制的IC50值分别为1.0mg/L和1.4mg/L,集落形成抑制的IC50值分别为0.7mg/L和1.0mg/L。而对人宫颈癌细胞Hela的生长与集落形成的抑制不明显。结论:瓣蕊唐松草根茎总生物碱在体外具有明显的抗肿瘤作用。     

血管抑制素治疗脑胶质瘤的实验研究

目的探讨Angiostatin(血管抑制素)抑制血管生成在治疗胶质瘤中的作用.方法应用Angiostatin分别作用于C6胶质瘤细胞系的体外培养细胞和动物肿瘤模型,计算细胞存活率及抑瘤率,SABC免疫组化技术检测体内胶质瘤中的微血管密度.结果Angiostatin不抑制体外培养胶质瘤细胞生长,细胞存活率为100%,对体内生长的胶质瘤则有显著抑制作用且呈剂量依赖关系,抑瘤率可达78.1%(P＜0.01).经Angiostatin处理的胶质瘤中微血管密度较对照组降低(P＜0.01).结论Angiostatin能抑制胶质瘤血管生成,在胶质瘤临床治疗中可能有应用价值.     

戊地昔布的抑瘤作用与COX-2的表达及活性的关系

目的 探讨戊地昔布对肿瘤的抑制作用及其与COX-2是否有关.方法 用Western blotting和免疫细胞化学检测细胞COX-2的表达.用MTT法测定药物对细胞增殖的影响.用ELISA测定PGE2(前列腺素E2)含量.结果 ①BGC-823、HGC-27和 SK-OV-3细胞均无COX-2表达, clone 26 COX-2表达阳性.②戊地昔布可明显抑制4种肿瘤细胞的生长,对BGC-823、HGC-27、 SK-OV-3和clone 26生长抑制的IC50分别为:110.7、99.2、113.3、117.6 μmol/L.③ 3种药物对BGC-823和clone 26细胞生长抑制程度由高到低的顺序,为戊地昔布、SC-560(选择性COX-1抑制剂)和吲哚美辛(非选择性COX-2抑制剂).④PGE2本身对BGC-823和clone 26细胞的生长没有影响,也不拮抗戊地昔布、SC-560和吲哚美辛对细胞的生长抑制作用.⑤戊地昔布和吲哚美辛抑制细胞生长作用和抑制COX-2的作用不平行,在不影响细胞生长的浓度时就明显降低clone 26上清的PGE2含量.结论 戊地昔布抑制肿瘤细胞生长的作用与COX-2无关.     

降低蛋白激酶D3的表达和活性增强前列腺癌细胞DU-145对依托泊甙的敏感性

目的 探讨蛋白激酶D3(protein kinase D3,PKD3)是否会影响依托泊甙对激素抵抗性前列腺癌(hormonal refractory prostate cancer,HRPC)的生长抑制.方法 在HRPC细胞系DU-145中瞬时转染PKD3的siRNA,Western blot检测细胞中内源性PKD3的表达变化;siRNA转染48 h后,分别以0、30、70、100、300 μmol/L的依托泊甙处理对照siRNA、siRNA-PKD3-1、siRNA-PKD3-2转染的DU-145细胞24 h,并以细胞活力测定观察敲定内源性PKD3的表达有无影响依托泊甙对DU-145的生长抑制;利用PKC单一抑制剂、PKC-PKD双重抑制剂处理DU-145细胞,以观察二者是否增强DU-145对依托泊甙的敏感性.结果 Western blot证实siRNA-PKD3的转染敲低DU-145细胞内源性PKD3的表达;细胞活力测定表明,在非特异性siRNA(si-CTL)转染的DU-145细胞中,依托泊甙剂量依赖地抑制DU-145细胞的生长,而敲低PKD3的表达不仅可显著抑制DU-145的生长(P<0.01),还可显著增强依托泊甙对DU-145生长的抑制(P<0.01);G06976(PKC-PKD的双重抑制剂)可明显抑制前列腺癌DU-145细胞生长(P相似文献   

瓣蕊唐松草根茎总生物碱的体外抗肿瘤活性研究

目的：研究瓣蕊唐松草根茎总生物碱对体外培养的肿瘤细胞株生长与集落形成的抑制影响。方法：用90%乙醇提取,D106大孔吸附树脂分离,乙醇洗脱得到瓣蕊唐松草根茎总生物碱。采用MTT法和集落形成法检测总生物碱对人肺腺癌细胞NCI-446、人大肠癌细胞SWWC116和人宫颈癌细胞Hela的生长与集落形成的抑制情况。结果：瓣蕊唐松草根茎总生物碱对NCI-446和SWWC116的生长与集落形成有明显的抑制作用,生长抑制的IC50值分别为1.0mg/L和1.4mg/L,集落形成抑制的IC50值分别为0.7mg/L和1.0mg/L。而对人宫颈癌细胞Hela的生长与集落形成的抑制不明显。结论：瓣蕊唐松草根茎总生物碱在体外具有明显的抗肿瘤作用。     

α-双炔失碳酯对激素依赖人前列腺癌细胞LNCaP生长的影响

目的 探讨双炔失碳酯α单体(α-anordrin,α-ANO)对激素依赖人前列腺癌细胞LNCaP生长的影响.方法 采用氧化铝柱层析分离纯化双炔失碳酯(ANO)的α和β差向异构体,SRB细胞染色法检测аAN0 对LNCaP细胞生长的影响及对抗雄激素拟似剂R 1881促细胞生长的作用;观察α-ANO作用下细胞形态学变化;ELISA法检测α-ANO对LNCaP细胞分泌前列腺特异性抗原(PSA)的影响.结果 常规培养液中α-ANO(8,12,16,24,32μmol/L)作用LNCaP细胞后,细胞存活率分别为85.8%,51.5%,40.8%,29.2%,1.0%;在去除激素培养液中,α-ANO抑制细胞生长作用更强,能对抗R1881的促细胞生长作用,经α-ANO处理的LNCap细胞分泌PSA能力降低.结论 α-ANO抑制激素依赖人前列腺癌细胞LNCaP的增殖,具有抗雄激素促细胞生长的作用.     

曲古菌素A对K562细胞中HDAC1表达的影响

目的研究表明组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC1)在多种肿瘤中高表达,曲古菌素A(trichostatin A,TSA)可以抑制肿瘤细胞的生长.该实验研究HDAC1在K562细胞的表达及TSA对其增殖的影响.方法50～400 nmol/L的TSA分别处理K562细胞8～48 h后用四甲基偶氮唑蓝(MTT法)比色检测K562细胞的生长活性;应用流式细胞仪法观察细胞凋亡.RT-PCR和蛋白印迹法(western blot)方法检测K562细胞在24 h不同浓度(50～400 nmol/L)的条件下HDAC1的mRNA和蛋白的表达以及TSA对其作用.结果TSA可显著抑制K562细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈时间及剂量依赖性.HDAC1的mRNA A值的半定量表达以及蛋白表达明显增强(P＜0.05),但随着浓度的增加而表达下调.结论TSA对K562细胞具有明显的增生抑制及诱导凋亡作用,抑制HDAC1的表达,可能是其重要作用机制之一.     

甲地孕酮与三苯氧胺联合应用对乳腺癌MCF-7细胞生长和凋亡的影响

目的:探讨小剂量甲地孕酮(MA)和三苯氧胺(TAM)联合应用对乳腺癌细胞MCF-7生长和凋亡的影响.方法:分别或联合应用TAM、MA作用于MCF-7细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长和抑制作用,应用流式细胞技术测定细胞周期和凋亡率.结果:TAM可抑制MCF-7细胞生长,阻滞细胞周期于G0/G1期,并可诱导细胞凋亡;小剂量的MA对MCF-7细胞生长与凋亡无明显影响,G0/G1.期细胞增多;两者联合应用时,细胞的生长抑制作用加强,凋亡率上升.结论:TAM对MCF-7细胞具有抑制生长和诱导凋亡作用.加用小剂量的MA后,其抑制生长和凋亡诱导作用加强,两者联合应用具有协同作用.     

Gefitinib对激素非依赖性前列腺癌的治疗及其效应初探

目的 探讨受体酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib在体内外对激素非依赖前列腺癌(HIPC)的抑制作用及其效应机制.方法 不同浓度的Gefitinib处理HIPC细胞株PC-3后24～120h,MTT法检测细胞生长抑制率,Western blot检测细胞表皮生长因子受体(EGFR)、蛋白激酶8(Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶C(PKC)蛋白的表达水平.建立PC-3细胞裸鼠移植瘤,观察Gefitinib体内的肿瘤抑制率.结果 Gefitinib抑制PC-3细胞生长呈现时间-浓度依赖性,最佳抑制浓度为5mg/Ml,最佳抑制时间为72h,细胞生长抑制率稳定在50%～60%.与对照组比较,经Gefilinib处理后PC-3细胞中EGFR、Akt蛋白水平分别降低了70.44%和59.01%,而MAPK及PKC蛋白分别仅降低34.83%和33.40%.裸鼠实验结果表明,Gefitinib可显著抑制HIPC肿瘤的生长,抑制率高迭53.95%,常规病理HE染色提示大片灶状癌细胞坏死.结论 Gefitinib可在体内外显著抑制HIPC的生长,其机制可能为通过降低癌细胞EGFR和胞内蛋白Akt的表达水平来发挥作用.     

氧化苦参碱对人胃癌细胞BGC-823生长活性和环氧合酶-2表达的影响

目的观察氧化苦参碱(OM)对人胃癌细胞BGC-823生长活性和环氧合酶(COX)-2表达的影响。方法体外培养人胃癌细胞BGC-823,采用MTT法检测不同浓度和作用时间下OM对细胞生长活性的影响;Western Blot和Real-time RT-PCR检测COX-2蛋白和mRNA的表达水平。结果与对照组比较,低浓度(1.0mg/ml)OM处理组BGC-823细胞的生长活性未受到抑制,中浓度(2.0 mg/ml)和高浓度(4.0 mg/ml)OM处理组细胞的生长活性受到明显抑制(P<0.05),且抑制效应随药物剂量和作用时间的增长而增强;同时伴有COX-2蛋白和mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论 OM具有抑制人胃癌细胞BGC-823生长活性的作用,其作用机制可能与下调COX-2的表达相关。