纳米递送系统在mRNA肿瘤疫苗中的研究进展

肿瘤疫苗是肿瘤免疫治疗中极具发展前景的治疗策略之一,其通过递送肿瘤抗原促进抗原递呈过程,进而激活抗肿瘤免疫反应。信使RNA (messenger RNA, mRNA)疫苗是一种新型疫苗,通过向体内递送特定抗原的mRNA序列并表达相应抗原蛋白,从而激活机体免疫系统达到免疫治疗的目的。mRNA疫苗与传统疫苗相比具有生产周期短、有效性高和免疫原性强等优势,近年来mRNA疫苗在肿瘤免疫治疗中的应用引起广泛关注,但mRNA的不稳定性和低递送效率限制了其应用。纳米递送系统能有效解决mRNA疫苗递送的难题,极大地促进mRNA肿瘤疫苗的研究进程和临床应用,已成为mRNA疫苗研究的热点。本文对mRNA肿瘤疫苗进行介绍,重点对纳米递送系统在mRNA肿瘤疫苗中的应用进行综述,以期为mRNA肿瘤疫苗高效递送及肿瘤免疫治疗提供新思路和新方法。     

疫苗增强性疾病风险探讨

目的对疫苗增强性风险进行探讨,为新型冠状病毒疫苗上市后安全性监测提供参考。方法通过检索、整理国内外关于病毒类疫苗与疫苗增强性疾病的研究成果,关注新型冠状病毒疫苗潜在的安全性问题。结果与结论2020年新型冠状病毒引发的疫情蔓延全球,由于目前尚无针对新型冠状病毒的特效治疗药物,新型冠状病毒疫苗的研发己成为全球关注的热点。疫苗增强性疾病是疫苗研发和上市后安全性监测中普遍关注的一个问题。根据目前已有的研究成果,疫苗增强性疾病风险成为新型冠状病毒疫苗的不确定性因素,需要在今后的研究和使用中认真分析和评价。     

基于脂质载体的mRNA疫苗递送系统研究进展

转录信使RNA（mRNA）具有安全有效的蛋白质表达谱,在遗传病新疗法、表达功能性蛋白和抗体、疫苗或基因编辑的开发上具有良好的应用前景。随着病原生物学与免疫学的发展,mRNA疫苗凭借其高效性与稳定性而愈发被重视。目前,有效的体内递送手段是mRNA疫苗所面临的较大挑战,脂质载体的mRNA疫苗递送系统具有靶向性强、包封率高、细胞亲和性好的特点,部分脂质载体能够使mRNA疫苗在体内以非侵入性的方式进行靶向递送。从mRNA疫苗递送的主要难点、脂质载体在mRNA疫苗递送中的研究现状以及针对新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的mRNA脂质载体疫苗开发进展,共3个方面总结了目前基于脂质载体的mRNA疫苗递送系统研究进展,并对未来的基因疫苗递送系统研究方向进行展望。     

新型冠状病毒肺炎的免疫失衡及干预策略

冠状病毒是一类在自然界中广泛存在的单链RNA病毒,21世纪头二十年由冠状病毒引起的传染病已在世界范围内引起3次较大规模的流行,加强对冠状病毒的研究势在必行。该文主要以SARS冠状病毒(SARS-CoV)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)以及最近在全球爆发的新型冠状病毒(SARS-CoV-2/2019-nCoV)为例,总结了这些冠状病毒在结构、基因、来源、传染力和致病性等方面的异同,基于实验研究和临床报道,从细胞因子风暴、中性粒细胞异常增多、淋巴细胞亚群失衡等方面阐述了新型冠状病毒肺炎发病的免疫失衡现象以及相应的干预策略,并提出后续展望,为新型冠状病毒肺炎的防治提供新策略和新思路。     

我国新型冠状病毒疫苗研发进展及思考

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是继SARS冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)之后又一严重危害人类的病毒。SARS-CoV-2引起的疾病被世界卫生组织命名为COVID-19,具有较高的传染性和病死率。为控制疫情蔓延,我国正应急开展多种技术路线的COVID-19疫苗研发,包括灭活疫苗、重组蛋白疫苗、病毒载体疫苗和核酸疫苗(DNA和mRNA)等,在加快疫苗研发进程的同时把握应急研发进度和科学性之间的平衡,并行解决相关科学问题,在满足安全性的前提下保证疫苗的有效性和质量可控。目前我国研发的腺病毒载体疫苗已率先进入Ⅰ期临床试验,多家企业进入注册检验和滚动提交审评资料阶段。本文对COVID-19疫苗研究进展进行综述,并提出现阶段对此种新疫苗研发的考虑。     

多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法的建立及验证

目的 建立多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法并进行验证。方法 以不同新型冠状病毒变异株mRNA为靶基因,选取各自保守序列设计引物和探针,建立多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法,并进行了线性范围、重复性、准确度、中间精密度、耐用性和适用性等方法学验证。结果 mRNA浓度在1～150 pg·mL^-1内时线性良好;重复性变异系数(coefficient of variation,CV)<10%;准确度回收率84%～114%,CV<10%;中间精密度和耐用性CV均<5%;并且4种不同二价新型冠状病毒mRNA疫苗组份比例检测结果CV均≤5%。结论 建立的多价新型冠状病毒变异株mRNA疫苗组分比例ddPCR检测方法灵敏度高,稳定性好,特异性强,适用于多价新型冠状病毒mRNA疫苗进行组分比例和含量检测。     

PD-1/PD-L1抑制剂治疗新型冠状病毒肺炎可行性探讨

2019年12月底我国湖北省武汉市出现由新型冠状病毒引起的新型冠状病毒肺炎,目前临床尚无针对性的特效药或疫苗。本文从PD-1/PD-L1的结构、功能、PD-1/PD-L1抑制剂与免疫相关性肺炎及新型冠状病毒肺炎的临床表现和实验室检查等方面进行综述,认为PD-1/PD-L1抑制剂应用于新型冠状病毒肺炎的治疗需谨慎。     

基于美国VAERS数据库的肝、肾移植受者接种新型冠状病毒疫苗不良事件分析

目的 通过对美国疫苗不良反应事件报告系统（vaccine adverse event reporting system,VAERS）中肝、肾移植受者接种新型冠状病毒疫苗后的不良反应数据进行挖掘,分析其具体特征,为器官移植受者接种新型冠状病毒疫苗提供安全性数据参考。方法 提取2020年12月18日到2023年5月24日VAERS数据库中肝、肾移植患者新型冠状病毒疫苗相关不良事件数据,用比例失衡法统计分析不良事件报告基本情况,对例数大于3的不良事件进行筛选和系统-器官分类分析。结果 共收集接种新型冠状病毒疫苗13个系统-器官分类的不良反应报告,肝移植253例,肾移植817例,常见不良反应为头痛、疲劳、发热、寒战、肢体疼痛、头晕、咳嗽、腹泻等。其中临床需关注新的不良反应有急性肾损伤、心房纤颤、丙氨酸转氨酶升高、移植排斥反应、病情加重、血氧饱和度降低等。结论 通过VAERS系统对肝、肾移植患者接种疫苗后不良反应数据挖掘,检测出多个值得关注的新的不良反应,为进一步开展移植患者接种新型冠状病毒疫苗提供参考。     

新型冠状病毒肺炎疫苗临床研究进展

至2021年2月,新型冠状病毒引起的新型冠状病毒肺炎疫情全球大流行已造成1亿以上的报告病例和超过200万的致死病例。随着临床治疗、病理学、流行病学和病毒分子生物学研究取得进展,疫苗研发也获得了重大突破。目前已有多款疫苗完成初步的临床安全性和效力评估,并获得紧急使用或有条件上市批准。此文对研究进展较快的多种类型新型冠状病...     

对世界卫生组织预防传染病mRNA疫苗非临床评价技术要点的解析

目的：了解WHO最新发布的《预防传染病mRNA疫苗质量、安全及有效性评价法规考虑》中关于mRNA疫苗非临床评价的主要内容,为我国评价此类产品非临床研究提供参考。方法：分析mRNA疫苗的主要特点,对照《预防传染病mRNA疫苗质量、安全及有效性评价法规考虑》,梳理mRNA疫苗非临床研究特别是药效学和毒理学研究设计、实施和分析的关键要点。结果与结论：mRNA技术已成为疫苗研发的前沿技术,作为新型生物制品,mRNA疫苗具有诸多不同于传统生物制品的特点。WHO认为非临床研究的设计、实施和分析应充分考虑mRNA产品的技术特点,相关药效学和毒理学研究应着重解决免疫应答的持久性或持久性免疫细胞表型、Ⅰ型干扰素介导的固有免疫应答、mRNA和LNPs的生物分布和持久性、全身和局部的毒性和炎症反应、非自然修饰核苷的潜在毒性、脂质纳米颗粒中新型脂质的毒性等方面问题,并提出了在公共卫生突发事件背景下针对优先病原体的mRNA疫苗非临床加速评价的考虑要点,对我国非临床评价此类产品具有很好的指导作用和应用价值。     

重组病毒载体疫苗的研究进展

重组病毒载体疫苗的原理是将外源基因插入病毒基因组以构建重组病毒,免疫机体后在体内表达相应蛋白并诱导特异性免疫应答。该类疫苗具有载体种类多、插入片段长、能同时诱导体液免疫和细胞免疫等优势,能克服灭活疫苗的效力维持时间短和减毒活疫苗回复突变的弊端。此文综述了重组病毒载体疫苗的最新研究进展,为将来的研究提供参考。     

水痘减毒活疫苗无明胶稳定剂的筛选和应用

 目的   研制不含明胶的新型稳定剂,以提高水痘减毒活疫苗的安全性。方法   以现行水痘减毒活疫苗稳定剂配方为基础,去除明胶,配制4种不同的新型稳定剂（B、C、D、E配方）。用无明胶稳定剂制备水痘减毒活疫苗,并将制备的无明胶稳定剂疫苗（B、C、D、E疫苗）与现行的含明胶稳定剂疫苗（作为对照的A疫苗）进行比较,确定最佳稳定剂配方。结果   疫苗成品于37 ℃放置7 d后,A、B、C、D、E疫苗的相关质量指标均符合《水痘减毒活疫苗注册标准》的要求,病毒滴度分别为3.6、3.5、3.3、3.3、3.3 lg PFU/0.5 ml,但C、D、E疫苗的病毒滴度已降至临界值。疫苗成品于2~8 ℃放置24个月后,A、B、C、D、E疫苗的病毒滴度分别为3.4、3.4、3.2、3.0、2.8 lg PFU/0.5 ml,其中C、D、E疫苗的病毒滴度已低于规定的标准（3.3 lg PFU/0.5 ml）,仅B疫苗的相关质量标准符合规定的要求,且与A疫苗（对照）没有差异。 结论   去除明胶的B配方稳定剂对水痘病毒有较好的保护作用。     

轮状病毒疫苗的研究现状及进展

轮状病毒是全球范围内引起婴幼儿腹泻的主要病原体,接种轮状病毒疫苗为目前最经济、有效的预防手段,很大程度上缓解了轮状病毒导致的疾病负担,但目前上市疫苗均为减毒活疫苗,存在毒力回复以及肠道不良反应等风险。因此,优化的传统活疫苗、灭活疫苗以及病毒样颗粒等亚单位疫苗成为潜在的候选疫苗,以提高轮状病毒疫苗的安全性和有效性。此文总结了市面上主要轮状病毒疫苗的应用现状以及进入临床试验新疫苗的研究情况,为后续的疫苗开发奠定基础。     

Nanotechnology in vaccine delivery

With very few adjuvants currently being used in marketed human vaccines, a critical need exists for novel immunopotentiators and delivery vehicles capable of eliciting humoral, cellular and mucosal immunity. Such crucial vaccine components could facilitate the development of novel vaccines for viral and parasitic infections, such as hepatitis, HIV, malaria, cancer, etc. In this review, we discuss clinical trial results for various vaccine adjuvants and delivery vehicles being developed that are approximately nanoscale (< 1000 nm) in size. Humoral immune responses have been observed for most adjuvants and delivery platforms while only viral vectors, ISCOMs and Montanide™ ISA 51 and 720 have shown cytotoxic T cell responses in the clinic. MF59 and MPL® have elicited Th1 responses, and virus-like particles, non-degradable nanoparticles and liposomes have also generated cellular immunity. Such vaccine components have also been evaluated for alternative routes of administration with clinical successes reported for intranasal delivery of viral vectors and proteosomes and oral delivery of a VLP vaccine.     

An mRNA vaccine elicits STING-dependent antitumor immune responses

Lipid-formulated RNA vaccines have been widely used for disease prevention and treatment, yet their mechanism of action and individual components contributing to such actions remain to be delineated. Here, we show that a therapeutic cancer vaccine composed of a protamine/mRNA core and a lipid shell is highly potent in promoting cytotoxic CD8⁺ T cell responses and mediating anti-tumor immunity. Mechanistically, both the mRNA core and lipid shell are needed to fully stimulate the expression of type I interferons and inflammatory cytokines in dendritic cells. Stimulation of interferon-β expression is exclusively dependent on STING, and antitumor activity from the mRNA vaccine is significantly compromised in mice with a defective Sting gene. Thus, the mRNA vaccine elicits STING-dependent antitumor immunity.     

疫苗0～2 ℃储存挑战性实验

目的  探讨冻干制剂乙型脑炎减毒活疫苗和液体制剂23价肺炎球菌多糖疫苗0～2 ℃条件下存放对其效价的影响。方法  将冻干制剂乙型脑炎减毒活疫苗和液体制剂23价肺炎球菌多糖疫苗存放于0～2 ℃条件下一定时间后,与存放于2～8 ℃规定条件的制品进行疫苗效价的比较。结果  1人份和5人份乙型脑炎减毒活疫苗在0～2 ℃条件下分别存放17 h 20 min和18 h 55 min,病毒滴度均符合5.7～7.1 lgPFU/ml的质量标准,且与存放于2～8 ℃规定条件的同批次疫苗比较,t值分别为0.26和0.28,P值均大于0.05,差异无统计学意义;23价肺炎球菌多糖疫苗在0～2 ℃条件下存放21 h 50 min,23个型别的多糖含量均符合35～65 μg/ml的质量标准,且与存放于2～8 ℃规定条件的同批次疫苗比较,t值为0.01~2.25,P值均大于0.05,差异无统计学意义。结论  冻干制剂乙型脑炎减毒活疫苗和液体制剂23价肺炎球菌多糖疫苗存放在0～2 ℃条件下的一定时间内,疫苗效价仍符合质量标准。     

Intranasal immunization with inactivated influenza vaccine

The development of improved vaccines against epidemic and pandemic influenza virus infection remains a priority in vaccine research. Killed vaccines given by injection are both cost-effective and induce immunity; however, their limitations are well known. Live vaccines have been in development for many years, but difficulties and safety concerns have prohibited their licensing in Western countries. However, the newer technologies of vaccine development, including DNA vaccines and attenuated virus vaccines produced by reverse genetics, remain a hope for the future. With these problems in mind, emphasis has been given to the development of inactivated vaccines that are administered intranasally, either as repeated doses of saline vaccine or in conjunction with suitable carriers or adjuvants. This review describes these latter developments and concludes that this approach offers advantages and should be vigorously researched.     

mRNA vaccines: Past,present, future

mRNA vaccines have emerged as promising alternative platforms to conventional vaccines. Their ease of production, low cost, safety profile and high potency render them ideal candidates for prevention and treatment of infectious diseases, especially in the midst of pandemics. The challenges that face in vitro transcribed RNA were partially amended by addition of tethered adjuvants or co-delivery of naked mRNA with an adjuvant-tethered RNA. However, it wasn't until recently that the progress made in nanotechnology helped enhance mRNA stability and delivery by entrapment in novel delivery systems of which, lipid nanoparticles. The continuous advancement in the fields of nanotechnology and tissue engineering provided novel carriers for mRNA vaccines such as polymeric nanoparticles and scaffolds. Various studies have shown the advantages of adopting mRNA vaccines for viral diseases and cancer in animal and human studies. Self-amplifying mRNA is considered today the next generation of mRNA vaccines and current studies reveal promising outcomes. This review provides a comprehensive overview of mRNA vaccines used in past and present studies, and discusses future directions and challenges in advancing this vaccine platform to widespread clinical use.