丙泊酚对大鼠海马长时程增强诱发的影响

目的:长时程增强与学习记忆密切相关,分析丙泊酚对长时程增强的作用有助于了解丙泊酚是如何对认知功能产生影响的。方法:实验于2004-11/2005-03在徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室完成。选取SD雄性大白鼠38只,随机分为6组:对照组8只、丙泊酚低浓度组6只、丙泊酚中浓度组6只、丙泊酚高浓度组6只、印防己毒素组6只、印防己毒素加丙泊酚组6只。①给药:对照组不给予任何药物,丙泊酚低、中、高浓度组分别给予丙泊酚10,20,50μmol/L,印防己毒素组给予印防己毒素25μmol/L,印防己毒素加丙泊酚组给予印防己毒素25μmol/L+丙泊酚20μmol/L。各药物加入人工脑脊液配成终浓度,用含有药物的人工脑脊液灌流脑片,给药10min时给予强直刺激,20min后去除药物,恢复正常人工脑脊液灌流。②海马脑片制备:动物麻醉后断头取脑,垂直于海马长轴切取三四片海马脑片,厚度400μm。将海马脑片置于人工脑脊液中孵育2.0～3.0h,然后再全部浸于(32.0±0.5)°C恒温灌流槽内,液面高出脑片表面2mm,不断通入经体积分数为0.95的O2和0.05的CO2混合气体饱和的人工脑脊液,气体流量为200mL/min,人工脑脊液的灌流速度为1.5～2.0mL/min。③群峰电位的记录和长时程增强的诱发:双极电刺激大鼠海马脑片CA3区锥体细胞的谢弗侧支,玻璃微电极置于CA1区锥体细胞层,记录CA1区群峰电位,然后施以100Hz,400串的强直刺激,诱发长时程增强产生。给予强直刺激后群峰电位幅度增加20%、并持续30min以上,即判定为长时程增强发生。整个实验过程中每5min观察记录一次,至少观察60min以上。结果:实验共纳入大鼠38只,全部进入结果分析。①对照组海马脑片长时程增强情况:以强直刺激前脑片的群峰电位幅度为100%计算,对照组脑片强直刺激后其群峰电位幅度显著增高,在60min时为刺激前的(135.35±3.9)%,形成了长时程增强。②丙泊酚各浓度组海马脑片长时程增强情况:预试验显示作为溶剂的脂肪乳剂对长时程增强产生无影响。在强直刺激后60min时,丙泊酚低、中、高浓度组群峰电位幅度分别为刺激前的(124.72±3.9)%,(116.77±2.2)%,(109.39±0.9)%,与对照组相比均有显著性差异(t=2.25,P<0.05;t=4.54,P<0.01;t=6.88,P<0.01)。③印防己毒素组、印防己毒素加丙泊酚组海马脑片长时程增强情况:印防己毒素组在强直刺激后60min时群峰电位幅度为刺激前的(137.57±3.4)%,对长时程增强产生无影响。而印防己毒素加丙泊酚组在强直刺激后60min时,群峰电位幅度为刺激前的(129.32±3.5)%,与丙泊酚中浓度组比较具有明显差异(t=3.02,P<0.05)。④丙泊酚对大鼠海马脑片突触基础传递的影响:丙泊酚低、中浓度组在测试刺激条件下加药20min后,脑片的群峰电位幅度分别为用药前的(98.86±1.5)%和(98.65±1.8)%,与用药前基本相近(t=0.75,P>0.05;t=0.73,P>0.05)。丙泊酚高浓度组脑片的群峰电位幅度明显减小,加药20min时为用药前的(82.37±2.9)%,与用药前相比具有明显差异(t=6.08,P<0.01),撤药后脑片的群峰电位幅度可恢复正常。⑤印防己毒素对大鼠海马脑片突触基础传递的影响:印防己毒素组在测试刺激条件下加入25μmol/L的印防己毒素20min后,脑片的突触基础传递兴奋性有所增高,表现为出现多个群峰电位波,但第一个群峰电位幅度为用药前的(102.35±2.4)%,与用药前相比基本相近(t=0.97,P>0.05)。结论:丙泊酚低、中、高浓度组在给药过程中给予强直刺激后,群峰电位幅度均明显降低,长时程增强的形成受到抑制,且呈明显的剂量相关性,而印防己毒素对长时程增强产生无影响。提示丙泊酚对长时程增强的诱发有阻断作用,可能与激活γ-氨基丁酸(GABA)受体有关。     

脑缺血大鼠缺血同侧海马齿状回突触可塑性的变化

目的：观察缺血性脑损伤对缺血同侧海马齿状回突触可塑性的影响。 方法：实验于2005-06／2005-08在中国科技大学生命科学院神经毒理实验室完成。24只雄性Wistar大鼠分为假手术2周组和缺血2周组两组，采用热凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型，待大鼠苏醒后（术后3h）及2周后分别观察大鼠行为表现并进行神经功能缺损评分。模型制作14d后进行海马齿状回区反应波形测定和实验参数测定，观察缺血同侧海马齿状回区的I／O曲线，缺血同侧海马齿状回区长时程增强，缺血同侧海马齿状回区长时程抑制。 结果：2组各12只大鼠均进入结果分析。假手术组有9只大鼠引出反应波形，缺血组有8只大鼠引出反应波形，排除过高或过低数值，每组有6只大鼠进人数据分析。①缺血2周后缺血同侧海马齿状回兴奋性突触后电位的I／O曲线幅度显著降低（F=43．95，P〈0．05），群峰电位的I／O曲线幅度也显著降低（F=4．58，P〈0．05）。②兴奋性突触后电位的长时程增强幅度在假手术组为（109．0&;#177;3．8）％，缺血2周后升高为（114．0&;#177;1．9）％（F=13．79，P〈0．05）。群峰电位的长时程增强幅度在假手术组为（201&;#177;13）％，而在缺血组群峰电位的长时程增强幅度明显降低为（179．0&;#177;13）％（F=4．56，P〈0．05）。③兴奋性突触后电位的长时程抑制幅度在假手术组为（98．7&;#177;3.4）％，缺血2周后明显降低为（89．0&;#177;3．5）％（F=18．95，P〈0．05）。群峰电位的长时程抑制幅度在假手术组为（84．7&;#177;5．3）％，而在缺血组群峰电位的长时程抑制幅度为（85．6&;#177;3．9）％，与假手术组无明显区别（F=0．63，P〉0．05）。 结论：脑缺血降低了海马齿状回区基本的突触传递，同时降低单脉冲刺激海马穿通纤维引起的齿状回颗粒细胞的共同发放幅度；缺血损伤了海马齿状回区群峰电位的长时程增强诱导，而对兴奋性突触后电位的长时程增强诱导有促进作用；缺血损伤了海马齿状回区兴备性突触后电位的长时程抑制诱导，而对群峰电位的长时程抑制诱导没有明显影响。     

离体海马脑片CA1区锥体细胞缺氧期间电生理指标变化与N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂MK801干预后的变化

背景：海马CA1区锥体细胞是对缺血缺氧性损伤最为敏感的神经元，缺血缺氧后海马CA1区锥体细胞膜电位表现为缺氧早期细胞膜的超极化，随着缺氧时间的延长，细胞膜发生缓慢去极化及快速去极化，引起神经元不可逆性损伤。目的：应用细胞内记录技术，观察N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂MK801对离体海马脑片CA1区锥体细胞缺氧期间电生理指标的变化。设计：观察对比实验。单位：解放军第九七医院，徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室，Healthy-Science Center,State University of New York．材料：实验于2002—09／2003—02在美国纽约州立大学医学中心完成。选择成年雄性SD大鼠5只，预吸纯氧3min后以体积分数为0．02的异氟醚麻醉，快速断头取脑，制备离体海马脑片。方法：大鼠海马脑片随机分为单纯缺氧组和MK801组，每组10个。单纯缺氧组海马脑片给予10min缺氧；而MK801组的海马脑片在缺氧前10min及10min的缺氧期间分别应用100μmol／L的MK801。所有脑片均给予60min的复氧。应用细胞内记录技术记录海马CA1区神经元缓慢去极化及快速去极化的时间、快速去极化的幅度。在复氧末，应用细胞内注入电流及经Schaffer通路刺激，观察神经元对刺激的反应。主要观察指标：①两组海马CA1区锥体神经元缓慢去极化速率。②两组海马CA1区神经元的快速去极化时间。③两组海马CA1区神经元的快速去极化幅度。④MK801对海马CA1区神经元功能恢复的影响。结果：①海马CA1区锥体神经元缓慢去极化速率：单纯缺氧组显著高于MK801组[（0．20&;#177;0．05）mV／s，（0．08&;#177;0．03）mV／s，（P〈0．05）]。②海马CA1区神经元的快速去极化时间：MK801组显著高于单纯缺氧组[（537&;#177;139）s，（261&;#177;26）s，（P〈0．05）]。③海马CA1区神经元的快速去极化的幅度：MK801组显著小于单纯缺氧组[（4&;#177;13）mV，（53&;#177;7）mV，（P〈0．05）。④在复氧末期，MK801组的10个神经元中，9个神经元恢复对刺激的反应。结论：N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂MK801可以显著降低缺氧引起的神经元缓慢去极化速率，延缓神经元快速去极化的发生及降低快速去极化的幅度，说明N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂可显著减轻神经元的缺氧性损伤，促进复氧后神经元功能的恢复。     

D-半乳糖对大鼠空间学习记忆行为与脑海马结构电生理以及突触形态学的影响

背景：学习记忆障碍是衰老的主要表现之一，D-半乳糖致衰老模型是近年来常用的动物模型，长期D-半乳糖处理可引起动物神经细胞形态学的改变。目的：对D-半乳糖引起拟衰老改变时大鼠的空间学习记忆行为进行观察，并结合其体内诱导海马齿状回长时程增强以及海马CA，区突触形态学的变化予以探讨。设计：随机对照观察。单位：上海第二医科大学解剖学教研室，上海中医药大学生理学教研室。材料：实验于2000-08／2001—04在上海中医药大学生理学教研室完成。选取3月龄雄性Wistar大鼠22只，随机分正常组和D-半乳糖组，11只／组。D-半乳糖（上海化学试剂二厂），Morris水迷宫（上海中医药大学老年所提供，自制）。方法：正常组每天皮下注射生理盐水1mL，D-半乳糖组每天皮下注射D-半乳糖800mg／kg，连续给药6周。大鼠空间学习记忆行为以Morris水迷宫潜伏期作为判定标准；应用体内记录单脉冲刺激穿通纤维在海马齿状回诱发的群体电位，测量高频刺激前后单脉冲刺激诱发的电位幅值变化，将高频刺激前的记录作为基线值，进行组间比较；应用透射电镜结合图像分析对大鼠海马CA，区突触形态结构进行观察。水迷宫潜伏期采用重复测量设计的方差分析，长时程增强各时段群体电位峰值潜伏期的组间差异采用t检验，长时程增强的诱导率用x^2检验，用XY-540型生物图像处理系统对电镜突触照片进行测量，对所得数据进行t检验。主要观察指标：①主要结局：Morris水迷宫潜伏期测试成绩以及长时程增强诱导率、群体电位的变化。②次要结局：海马CA，区突触形态结构的变化。结果：实验纳人大鼠22只，水迷宫测试中无脱落，其后在电生理实验中正常组和D-半乳糖组各有1只死亡，最后每组随机抽取3只用于电镜观察。①两组Morris水迷宫潜伏期成绩的比较：与正常组比较，D-半乳糖组寻找水下平台潜伏期明显延长[（14．77&;#177;10．10），（51．36&;#177;12．45）s，P〈0．05]。②高频刺激前正常组与D-半乳糖组海马齿状回诱发电位的比较：两组群体电位幅值及群体电位潜伏期均无明显差异[（1．05&;#177;0．47），（0．91&;#177;0．41）mV；（5．46&;#177;2．09），（5．38&;#177;2．26）ms；P〉0．05]。③两组齿状回长时程增强诱导率比较：与正常组比较，高频刺激后D-半乳糖组明显降低（80％，20％，x^2=7．20，P〈0．01）。④两组高频刺激后不同时间段的群体电位比值的比较：与正常组比较，D-半乳糖组于高频刺激后20，30，60min均明显降低（1．104&;#177;0．196，0．919&;#177;0．162；1．354&;#177;0．212，0．999&;#177;0．219；1．236&;#177;0．174，0．875&;#177;0．311；P〈0．05）。⑤两组大鼠海马CA3区突触结构各参数的比较：与正常组比较，D-半乳糖组海马CA，区突触后致密物厚度变薄[（40．60&;#177;18．26），（26．35&;#177;8．15）nm，P〈0．051，突触间隙宽度增大[（17．69&;#177;6．28），（26．95&;#177;5．67）nm，P〈0．05]，突触活性区长度缩短[（265．13&;#177;76．50），（229．13&;#177;90．68）nm，P〈0．05]。结论：皮下注射D-半乳糖可损害大鼠的空间学习记忆能力，降低大鼠在体海马齿状回长时程增强诱导率，使长时程增强增幅降低，并可显著影响大鼠脑海马CA，区的突触超微结构。提示D-半乳糖对大鼠海马齿状回长时程增强诱导的抑制和对CA，区突触形态结构的影响，是其导致空间学习记忆行为障碍的基础。     

七氟烷对大鼠海马脑片缺氧损伤的保护作用

目的：应用离体大鼠海马脑片电生理记录技术，观察七氟烷对海马脑片在缺氧过程中突触后诱发群峰电位（PS）的时相以及复氧后幅度变化的影响，探讨七氟烷对脑组织缺氧损伤的保护作用。方法：实验于2004-09／12在徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室电生理研究室进行。大鼠乙醚麻醉后迅速断头取脑，低温分离海马，并沿矢状面将其切成0．5mm厚的脑片。实验分为缺氧组和七氟烷（1％，2％和4％）处理组。平衡灌注后，双脉冲方波刺激海马CA3区Schaffer侧支，记录海马CA1区锥体细胞的诱发群峰电位潜伏期和幅度作为基础值，所有取得基础值的脑片分别按上述分组进行实验。用通入95％N2和5％CO2混合气的人工脑脊液灌注脑片，实施缺氧，时间为5min。更换通入人工脑脊液的混合气为95％O2和5％CO2，实施复氧，时间120min。七氟烷在缺氧前10min给予，并维持在缺氧期间和复氧后10min，给药时间为25min。实验结束后各组取脑片四五片用TTC染色，酶标仪测定A490值，与空白对照值比较，分析脑片活性。结果：①与基础值相比，2％七氟烷可明显延长正常脑片诱发群峰电位出现的潜伏期（P〈0.05），不降低诱发群峰电位幅度；4％的七氟烷不延迟诱发群峰电位出现的潜伏期，但可显著降低诱发群峰电位的幅度（P〈0.05）。②与缺氧组相比，2％和4％七氟烷均明显延迟缺氧所致的诱发群峰电位消失时间（P〈0．05）；而4％七氟烷又可明显增加复氧后诱发群峰电位幅度的恢复率（P〈0．05），降低脑片TTC染色下降百分率，差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：4％七氟烷可明显延迟海马脑片缺氧所致诱发群峰电位消失的时间，增加复氧后诱发群峰电位幅度的恢复率，具有抗缺氧损伤的神经保护作用。     

惊厥阈下电刺激诱发大鼠发作间痫样放电致认知功能障碍时相关神经生物学改变

目的：探讨发作间痫样放电致大鼠认知行为障碍时的相关神经生物学改变。方法：实验于2001—1／2003一12在第三军医大学大坪医院及成都军医总医院完成。选择6-7周龄雄性Wistar大鼠241只，成组设计随机分为海马点燃组（n=62），电极对照组（n=58），正常对照组（n=56）及发作间痫样放电组（n=65）。将大鼠用2％戊巴比妥钠腹腔麻醉后，固定于立体定向仪上，暴露颅顶骨，按Pllegrino大鼠脑图谱确定海马CA1区双极漆包不锈钢刺激电极埋植部位，海马快速电点燃模型电刺激参数为波宽1ms、频率15Hz、串长10s、刺激强度400μA、串隔5min，恒流、单向方波，刺激40次。发作间痫样放电大鼠在海马快速电点燃后13d再次阈下电刺激，电刺激参数为波宽1ms、频率25Hz、串长10s、刺激强度100μA、串隔7min，恒流、单向方波，刺激15次。电极对照组于海马CA1区埋植电极，不给予电刺激。于电点燃后1，7，14d分三次取各组大鼠8只，麻醉断头处死后分离双侧海马，常规方法制备10^5～10^7／mL的细胞悬液及胞浆蛋白，采用荧光探针标记法及流式细胞仪分别定量观测大鼠海马细胞内游离钙含量与钙调素相对活性平均通道荧光的变化，采用蛋白质免疫印迹法检测海马组织总钙调素、钙／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱα与钙／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅳ表达的动态变化规律。采用SPSS9．0软件进行单因素或双因素方差分析，以及各组均数的最小显著差值法和Tamhane’s T2检验。结果：实验过程中发作间痫样放电组、海马点燃及电极对照组分别有9、6、2只大鼠因电极脱落而被剔除实验，进入结果分析224只。①海马细胞内游离钙浓度变化：电点燃后1d海马点燃组及发作间痫样放电组大鼠海马细胞内游离钙浓度明显高于对照组及电极对照组[（659．2&;#177;134.3，684.6&;#177;138.5）nmol／L,（209.6&;#177;40．1，221．5&;#177;43．1）nmol／L,（P〈0．01）]，14d时发作间痫样放电组大鼠再次明显高于其他三组[（435．1&;#177;87．1）nmol／L（194．9&;#177;38．3，215．1&;#177;42．0,218．7&;#177;42．9）nmol／L，P〈0．01）]。②海马细胞内游离钙调素平均通道荧光改变：电点燃后1d海马点燃组及发作间痫样放电组大鼠海马细胞内游离钙调素平均通道荧光明显低于正常对照组及电极对照组[（1．16&;#177;0．28，1．26&;#177;0．31），（3．35&;#177;0．82，3．38&;#177;0．83），（P〈0．01～0．05）]，14d时与其他三组比较发作间痈样放电组大鼠再次降低[（2．36&;#177;0．58），（3．08&;#177;0．74,3．61&;#177;0．88,3．20&;#177;0．76），P〈0．05）]。③海马钙调素、钙／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱα及钙／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅳ免疫印迹检测结果：电点燃后1d海马点燃组及发作间痫样放电组大鼠海马钙调素、钙／钙调索依赖性蛋白激酶Ⅳ校正吸光度值均较对照组及电极对照组表达明显增高（P〈0．01），14d时发作间痫样放电组大鼠再次明显增高（P〈0．01-0．05）。而电点燃后1d海马点燃组及发作间痫样放电组大鼠钙／钙调索依赖性蛋白激酶Ⅱα校正吸光度值则较对照组及电极对照组明显减少（P〈0．01），14d时发作间痫样放电组大鼠再次明显降低（P〈0.01-0．05）．结论：惊厥阈下电刺激诱发实验大鼠发作间痫样放电所致认知行为异常的同时，亦同步引发了海马细胞内游离钙浓度短期明显增高，海马细胞内游离钙调素甲均通道荧光明显降低，伴有明显的海马细胞钙／钙调素依赖性蛋白激酶信号途径调控紊乱，这对发作间痫样放电所致情感行为异常及学习记忆障碍可能有重要意义．     

去皮质直视条件下大鼠海马长时程增强的在体记录

目的：探讨直观暴露条件下在体记录动物海马长时程增强的可行性。方法：实验于2004-07／2004-08在解放军第三军医大学生理教研室完成。选用正常健康Wistar系大鼠，在麻醉条件下，将其头部固定，开窗，去除覆盖在海马上的大脑皮质，暴露背侧海马。直视条件下定位刺激电极和记录电极，使用短暂高频刺激诱发长时程增强(long-term potentiation。LTP)。结果：在海马暴露的情况下。内嗅皮质穿通纤维-齿状回上记录到的短暂高频刺激前单个刺激诱发的(population spikes，PS)幅值为(1．58&;#177;0．12)mV，短暂高频刺激后单个刺激诱发的群体锋电位幅值为(2．25&;#177;0．10)mV,差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，群体锋电位振幅增大42．4％，持续时间30min以上。有9只大鼠成功诱发LTPO Schaffer侧支-CAl区的LTP记录到的短暂高频刺激前单个刺激诱发的PS幅值为(1．12&;#177;0．08)mV，短暂高频刺激后单个刺激诱发的PS幅值为(2．18&;#177;0．10)mV，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，PS振幅增大94．6％，持续时间30min以上，有8只大鼠成功诱发LTP。结论：去皮质暴露大鼠海马后电极定位更加准确，可以记录到该区长时程增强现象，操作简便易行，成功率高。     

慢性应激对大鼠海马长时程增强和氨基酸神经递质的影响

背景：严重或持久的应激是很多身心疾病的诱发因素，明显损害机体的认知功能。目的：观察应激状态下海马氨基酸的变化及慢性应激对大鼠海马长时程增强的影响。设计：完全随机对照动物实验。单位：汕头大学精神卫生中心。材料：实验于2000—12在汕头大学医学院完成。实验动物为SD成年雄性大鼠16只，随机分为对照组和应激组，每组8只。方法：应激组强迫游泳4周建立慢性应激模型，采用离体海马脑片（500μm）结合电生理的方法观测海马CA1区长时程增强的变化。在海马CA3区Schaffer侧支施加高频刺激后，观察CA1区锥体神经元群体峰电位幅值和场兴奋性突触后电位斜率的改变。应用高效液相色谱紫外检测法对海马氨基酸神经递质进行定量分析。主要观察指标：①以群体峰电位的幅值和场兴奋性突触后电位的斜率作为观察长时程增强变化的指标。②海马氨基酸含量变化。结果：实验第2周应激组大鼠溺水死亡1只，给予补充，其余全部进入结果分析。①对照组的群体峰电位幅值和场兴奋性突触后电位斜率在高频刺激后增大的幅度明显高于应激组（P〈0．05）。②对照组天冬氨酸和谷氨酸的水平明显低于应激组，[（2.425&;#177;0.211）μmol/g, （6.016&;#177;0.677） μmol/g, P〈 0.01; （4.746&;#177;0.609） μmol/g, （8.094&;#177;1.035） μmol/g, P 〈 0.01]，而两组间γ=氨基丁酸的含量接近，差异无显著性[（4.229&;#177;0.449） μmol/g, （4.249 &;#177;0.463） μmol/g, P 〉 0.05]。结论：慢性应激抑制海马CA1区长时程增强的形成，提高海马组织天冬氨酸和谷氨酸的水平，而对γ-氨基丁酸的含量没有影响。慢性应激所引起的海马兴奋性氨基酸的堆积可能是学习和记忆能力损害的神经生化基础。     

他克莫司对创伤性脑损伤大鼠神经行为和记忆能力的影响

背景：目前他克莫司对周围神经保护作用的研究比较多，而其是否具有促进中枢神经再生和保护作用。目的：通过神经行为学观察和检测突触素的表达及细胞凋亡数量，探讨他克莫司对大鼠脑液压伤后神经行为和记忆的影响。设计：随机分组，平行对照（自我前后对照、相互对照）实验。单位：大连医科大学附属第二医院神经外科和复旦大学附属中山医院神经外科。材料：实验于2002-11在上海长征医院神经外科实验室完成。选择由复旦大学实验动物科学部提供的雄性SD大鼠24只为观察对象，体质量（200&;#177;20）g，用抽签法随机分为对照组、损伤组和治疗组，每组8只。干预：伤前24h以20g／L戊巴比妥钠（40mg／kg）腹腔麻醉，损伤组和治疗组模型制备参照美国Dixon建立的大鼠脑液压损伤模型，打击能量为151．95-172．21kPa，相当于中度颅脑损伤，对照组只埋管不打击。治疗组伤后5min以1mg／kg腹腔注射他克莫司，1次／d，连续7d。损伤组和对照组腹腔注射生理盐水。伤前、伤后3d和伤后1周分别进行行走试验、平衡试验和记忆试验。于伤后1周全部大鼠断头取脑，分别取海马、伤灶周围额叶皮质、基底核部位进行免疫组织化学检测，图像定量分析技术检测突触素在海马各区以及伤灶周围的额叶皮质与基底节的分布，用流式细胞仪检测凋亡细胞计数。主要观察指标：①各组动物于伤前、伤后3d和伤后1周时行走试验、平衡试验和记忆试验成绩。②各组动物皮质、海马、基底核区突触素表达定量分析结果。③各组动物皮质、海马、基底核区细胞凋亡百分率。结果：24只大鼠全部进入结果分析。①治疗组伤后3d和伤后1周时行走试验成绩和平衡试验成绩低于损伤组[行走试验成绩：（7．5&;#177;2．5）s，（5．5&;#177;2．1）s，（10．5&;#177;2．5）s，（8．2&;#177;2．5）s。平衡试验成绩：（3．4&;#177;0．5）分，（2．5&;#177;0．2）分，（5．7&;#177;0．2）分，（5．0&;#177;0．5）分，P〈0．05-0．01]，治疗组伤后3d和伤后1周时记忆实验成绩高于损伤组[（4．9&;#177;1．7）s，（62&;#177;23）s，（4.0&;#177;15）s，（4．4&;#177;2．6）s，P〈0．05-0．01]。②治疗组皮质、海马、基底核区突触素表达量显著高于损伤组（140．36&;#177;3．87，45．52&;#177;2：16，31．67&;#177;2．35，96．25&;#177;2．85．24．35&;#177;2．47，20．49&;#177;2．08，P〈0．01）；对照组显著高于治疗组（162．24&;#177;3．52，50．58&;#177;2．31，42．69&;#177;2．53，P〈0．01）。③治疗组海马、皮质、基底节的细胞凋亡率显著低于损伤组[（10．37&;#177;2．12）％，（18．39&;#177;2．87）%，（12．78&;#177;2．45）%，（21．14&;#177;4．85）％，（38．57&;#177;3．78）％，（21．18&;#177;4．59）％，P〈0．01]。损伤组海马、皮质、基底核的细胞凋亡率显著高于对照组[（3．85&;#177;2．56）％，（4．96&;#177;2．15）%，（3．52&;#177;2．17）％，P〈0．01]。结论：他克莫司治疗后能促进大鼠海马、皮质及基底核区突触素表达，减少海马和皮质及基底核区神经细胞凋亡，对实验动物脑损伤后神经行为和记忆的恢复有促进作用。     

针刺预处理全脑缺血大鼠海马CA1区B细胞淋巴瘤2mRNA的表达

目的：探讨针刺预处理对全脑缺血大鼠海马CA1区B细胞淋巴瘤2mRNA表达的影响，并与缺血预处理的效果进行比较。 方法：实验于2003-10在黑龙江中医药大学神经解剖实验室进行。取120只Wistar大鼠随机分为5组，每组24只：①正常对照组：不干预。②假手术组：暴露4条血管，不造模。③脑缺血组：四动脉阻断法全脑缺血10min制作大鼠全脑缺血模型。④脑缺血预处理组：预全脑缺血3min，再灌注24h后再次全脑缺血10min。⑤针刺预处理组：术前7d给予针刺，双侧足三里、曲池穴，双侧连接全能脉冲电疗仪，频率为1Hz，电压为2V，30min／次，针刺百会30min／次，1次／d，7d后全脑缺血10min。每组分别于再灌注12，24，48和72h麻醉状态下取材，免疫组织化学法检测海马CA1区B细胞淋巴瘤2蛋白阳性细胞数，原位分子杂交技术检测大鼠海马CA1区B细胞淋巴瘤2mRNA表达。结果：经补充后120只大鼠进入结果分析。①脑海马B细胞淋巴瘤2蛋白阳性细胞数：正常对照组和假手术组无；脑缺血组少量表达，再灌注48h为高峰，脑缺血预处理组和针刺预处理组24h、48h、72h均显著高于脑缺血组[（33．65&;#177;9．57），（34．56&;#177;12．64），（17．89&;#177;5．96）个／mm^2；（39．14&;#177;9．11）．（38．69&;#177;10．54），（23．35&;#177;7．68）个／mm^2；（40．65&;#177;10．53），（38．99&;#177;9．34），（15．87&;#177;4．67）个／mm^2，〈0．05]，但两组间无差异（P〉0．05）。②脑海马B细胞淋巴瘤2mRNA阳性细胞数：正常对照组和假手术组无；脑缺血组少量表达，再灌注72h为高峰，而脑缺血预处理组和针刺预处理组24h、48h、72h均显著高于脑缺血组[（42．64&;#177;9．57），（44．66&;#177;11．61），（20．8&;#177;5．97）；（45．14&;#177;8．12）．（46．68&;#177;11．54），（27．39&;#177;6．55）；（50．65&;#177;10．53），（52．19&;#177;9．33），（20．87&;#177;6．67）；P〈0．05]，但两组间无差异（P〉0．05）。 结论：针刺预处理可能通过上调B细胞淋巴瘤2mRNA和蛋白表达而减轻严重缺血后细胞凋亡并促成脑缺血耐受的产生。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

The characteristics of interpretation of results of analysis of protein amount in urine of pregnant women

The adequacy of implementation of present proteinuria diagnostic thresholds under examination of pregnant women was examined. The analysis was applied to all urine samples of pregnant women from December 2009 to March 20010. The amount of protein in urine was concurrently evaluated by turbidimetric analysis with sulfosalicylic acid, colorimetric analysis with pyrogallol red, "dry chemistry" technology (the diagnostic strips). It is established that the mentioned techniques of analysis of protein in urine provide independent results. The results of colorimetric analysis are characterized by better precision and adequacy. However, in case of pregnant women the diagnostic threshold of protein concentration should be shifted from 0.120 to 0.150 g/l.     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。