利用基因芯片技术快速检测结核杆菌耐药性的初步研究

目的：探讨利用基因芯片技术检测结核杆菌的耐药性。方法：结核杆菌耐药性检测基因芯片的制备；临床分离株结核杆菌培养和药敏检测；结核杆菌基因组DNA的制备和结核杆菌耐药基因的聚和酶链反应；基因芯片的杂交、洗涤、检测与分析。结果：临床分离株结核杆菌培养和药敏检测结果：1株为药物敏感株结核杆菌(对异烟肼、利福平、链霉素、乙肤丁醇4种药物均敏感)；4株为多耐药株结核杆菌(对异烟肼、利福平、链霉素、乙肤丁醇4种药物均耐药)；药敏检测结果与5位患者临床的诊断性治疗的结果完全一致；进一步利用基因芯片技术进行检测，检测结果与上述结果相符合。结论：利用基因芯片技术检测结核杆菌的耐药性，准确、快速、高效。     

结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区耐药结核杆菌耐药性的相关性研究

<正>目的:探讨结核杆菌PhoP R双组分系统与新疆耐药结核杆菌耐药性的相关性。方法:新疆耐异烟肼、耐利福平、耐链霉素、耐乙胺丁醇、耐多药结核杆菌及药物敏感菌株分别行RT-PCR,测原始状态及抗痨药物选择压力下PhoP和PhoR基因表达及差异;复制各菌株动物模型并从肺、肝、脾分离菌株,测PhoP和PhoR基因表达及差异。结果:耐药结核杆菌PhoP和PhoR     

结核杆菌Pup-蛋白酶体系统与耐药结核杆菌耐药性的相关性研究

目的:检测不同耐药的结核杆菌临床分离株原核类泛素蛋白-蛋白酶体系统(以下简称:Pup-蛋白酶体系统)相关的Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达水平,探讨研究结核杆菌Pup-蛋白酶体系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株耐药性的相关性。方法:以培养对数生长期的新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株为研究对象,分别提取结核杆菌临床分离的药物敏感菌株、单纯耐异烟肼的结核杆菌临床分离株(INH-MTB)、单纯耐利福平的结核杆菌临床分离株(RFP-MTB)、单纯耐链霉素的结核杆菌临床分离株(SM-MTB)、单纯耐乙胺丁醇的结核杆菌临床分离株(EB-MTB)、耐多药结核杆菌临床分离株(MDR)等各组菌株的总RNA,经纯度鉴定后,利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,检测各组结核杆菌菌株的Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达水平,分析各组耐药结核杆菌临床分离株Pup-蛋白酶体系统相关的Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株耐药性的相关性。结果:与药物敏感菌株相比,Pup、Mpa基因在单一耐药菌株和耐多药菌株中表达有不同程度的下调,Dop、PafA基因在单一耐药菌株和耐多药菌株中表达有不同程度的上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与MDR相比,Pup、Dop、Mpa基因在单一耐药菌株中表达有不同程度的上调,PafA基因在单一耐药菌株中表达有不同程度的下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在结核杆菌临床分离的药物敏感菌株、INH-MTB组、RFP-MTB组、SM-MTB组、EB-MTB组和MDR组中,结核杆菌Pup、Dop、PafA、Mpa基因的表达差异,与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株耐药性有相关性。     

HIV患者分枝杆菌感染的快速鉴定和药敏分析

目的 建立HIV患者分枝杆菌感染的快速病原鉴定和药敏分析方法 .方法 运用Geneprobe探针杂交和16S rDNA序列分析技术鉴定分枝杆菌菌种,运用改良MODS方法 检测分枝杆菌对一线抗结核药物的敏感性,并与传统的抗酸染色、L-J培养及比例法药物敏感试验比较.结果 (1)来自68名HIV感染者的112份标本经液体培养后Geneprobe和16S rDNA序列分析显示分离的34株分枝杆菌中结核分枝杆菌复合群21例,非结核分枝杆菌(NTM)10例,结核与非结核分枝杆菌混合感染3例.10例非结核分枝杆菌中鸟胞内分枝杆菌复合体(M.avium complex)5例、戈登分枝杆菌(M.gordonae)2例、堪萨斯分枝杆菌(M.kansasii)2例和1例M.colombiense.(2)改良MODS方法 检测21株结核分枝杆菌对利福平和乙胺丁醇的敏感性为100%,对异烟肼的敏感性为76.2%,链霉素敏感性为90.5%;但10株NTM对利福平的敏感性为40%,乙胺丁醇、链霉素敏感性分别为60%、30%,异烟肼全部耐药.改良MODS方法 与比例法药敏试验结果 无显著差异.(3)传统分枝杆菌菌型鉴定和药敏试验需6～8周,本研究采用液体培养结合Geneprobe鉴定需5～14 d,16S rDNA序列分析需6～15 d,改良MODS试验需10～14 d,显著缩短了检验周期.结论 结合Geneprobe、16S rDNA序列分析和改良MODS技术,可在15 d之内对临床标本中分枝杆菌进行快速鉴定和药敏分析,可用于HIV合并分枝杆菌感染者的病原学特征和耐药状况分析.     

耐药结核杆菌原核类泛素蛋白(Pup)-蛋白酶体系统基因表达的研究

目的:检测分析经过不同浓度的抗结核药物培养后的各组耐药结核杆菌临床分离株和原始耐药状态的耐药Mtb临床分离株原核类泛素蛋白(Pup)-蛋白酶体系统基因的表达差异,探讨研究经过不同浓度抗结核药物的抗生素选择压力作用后,各组耐药Mtb菌株中的Pup-蛋白酶体系统的基因表达是否与新疆地区广泛流行的耐药Mtb临床分离株耐药性相关。方法:将单纯耐异烟肼的Mtb临床分离株(INH-Mtb)、单纯耐利福平的Mtb临床分离株(RFP-Mtb)、单纯耐链霉素的Mtb临床分离株(SM-Mtb)、单纯耐乙胺丁醇的Mtb临床分离株(EB-Mtb)、耐多药的Mtb临床分离株(MDR),分别在原始耐药状态、低浓度含药培养基和高浓度含药培养基上培养至对数生长期,分别提取各组耐药Mtb菌株的总RNA,利用SYBR Green I实时荧光定量PCR的方法检测各组耐药Mtb菌株在不同浓度抗结核药物的抗生素选择压力作用的Pup-蛋白酶体系统基因的表达水平。结果:与原始耐药状态下耐药Mtb菌株相比较,经低浓度抗结核药物压力作用培养后的各组Mtb菌株,Pup基因在INHMtb、RFP-Mtb、SM-Mtb、MDR组中的表达分别下调0.74、0.23、0.28、0.57倍;Dop基因表达分别上调1.33、1.63、1.14、2.88倍;Paf A基因表达分别上调1.69、1.30、1.58、1.32倍;Mpa基因表达分别上调3.05、1.79、1.31、2.27倍,差异有统计学意义(P0.05);与原始耐药状态下耐药Mtb菌株相比较,经高浓度抗结核药物压力作用培养后的各组Mtb菌株,Pup基因在INH-Mtb、RFP-Mtb、SM-Mtb、MDR组中的表达分别下调0.58、0.37、0.43、0.78倍;Dop基因表达分别上调2.62、2.49、1.69、2.95倍;Paf A基因表达分别上调2.16、1.48、2.02、2.21倍;Mpa基因表达分别上调1.63、3.22、1.13、3.94倍,差异有统计学意义;(P0.05)。结论:经过不同浓度抗结核药物的抗生素选择压力作用后各组Mtb菌株中Pup-蛋白酶体系统的Pup基因、Dop基因、Mpa基因和Paf A基因的表达有差异,提示结核杆菌Pup-蛋白酶体系统的基因表达与新疆地区广泛流行的耐药Mtb临床分离株耐药性相关。     

四川地区200例随机临床分枝杆菌分离株耐药状况的分析研究

目的 了解四川地区分枝杆菌的耐药状况,为临床用药提供参考依据.方法 采用罗氏绝对浓度法对我院2009年6月-2010年12月间的200株分枝杆菌随机临床分离株进行9种抗结核药物的敏感性试验,并同步进行微量药敏(MIC)检测.结果 200株分枝杆菌临床分离株中192株(96.0％)为结核分枝杆菌(MTB),8株(4.0％)为非结核分枝杆菌(NTM),两种分群方法结果一致.192株MTB中108株对9种抗结核药物全部敏感,对≥1种药物耐药者84株,总耐药率为43.7％ (84/192),多重耐药( MDR)23株(12.0％),广泛耐药4株(2.1％),全耐药2株(1.0％).耐9种不同抗结核药物的顺位由高到低依次为:丙硫异烟胺(PTA,33.3％)、异烟肼(INH,20.8％)、利福平(RFP,17.2％)、硫酸链霉素( SM,16.7％)、硫酸阿米卡星注射液(AMK,16.7％)、力克肺疾(PI,16.1％)、乙胺丁醇(EMB,10.9％)、左氧氟沙星( LFX,8.8％)、硫酸卷曲霉素(CPM,6.2％);单一耐1、2、3、4、5、6、7、8和9种药物耐药率分别为12.5％、7.3％、6.2％、4.7％、4.2％、3.6％、3.1％、1.0％和1.0％.对≥2种药物耐药者60株(31.2％);对≥4种药物耐药者34株(17.7％).M DR-TB对另外7种药物的罗氏药敏耐药率从高到底依次为:PI(78.3％)、EMB(69.6％)、SM(65.2％)、PTA (65.2％)、LFX (39.1％)、AMK( 30.4％)、CPM(8.7％).结论 四川地区耐药性结核病仍处于全国较高水平,特别是同时耐多种(≥4种)药物的耐药率较高,应引起重视.     

基因型分析法快速检测耐药结核分枝杆菌

目的 探讨基因型分析法检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药性的价值.方法 采用多重PCR和线性探针反向膜杂交法来检测异烟肼耐药基因katG S315T和inhA C-15T突变以及利福平耐药基因rpoB D516V,H526Y,H526D,S531L突变来判断78株结核分枝杆菌临床分离株的耐药性,并与金标准L-J固体培养基药敏法以及BACTEC960液体培养药敏法进行对比分析.结果 基因型分析法在6h内可以完成;结核分枝杆菌常规药敏检测需要3个月.与后者相比,基因型分析法检测异烟肼耐药的敏感性和特异性分别为89％ （16/18）和99％ （77/78）;检测利福平耐药的敏感性和特异性均为100％（13/13,78/78）.结论 基因型分析法检测结核菌耐药性快速准确,对耐药结核病的早期诊断和治疗很有帮助,有望在临床实验室广泛开展.     

耐多药结核病治疗药研究进展

耐多药结核病是指耐异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、链霉素五种中任何两种或两种以上抗结核药物或者是同时耐异烟肼和利福平而引起的结核病。由于这种结核病是耐药结核中后果最严重的一种，因此近年来临床为了对付这些久治不愈的患者，不得不采用一些毒性大、疗效欠佳、疗程更长的二线抗结核药。更严重的是当耐多药结核病治疗失败超过敏感菌的结核病时，     

噬菌体生物扩增技术在结核分枝杆菌药敏检测中的应用

目的探讨噬菌体生物扩增技术（PhaB）在结核分枝杆菌（MTB）耐药研究中的应用价值。方法应用PhaB法同时测定233株结核分枝杆菌分离株对异烟肼（INH）、链霉素（SM）、利福平（RFP）及左旋氧氟沙星（LEV）的耐药性,并用改良罗氏培养法（LJ）做对照,比较两种方法的检测结果。结果PhaB法检测INH、SM、RFP、LEV的药敏结果与改良罗氏培养法药敏结果相比符合率分别为97．4％、96．6％、95．3％、96．9％。同时检出耐多药菌株26株,占11．1％。结论PhaB法能快速进行结核分枝杆菌的药敏检测并与金标法U符合率高,可作为基层结防单位MTB耐药性的快速筛选方法。     

杆菌-结核杆菌穿梭质粒pMV261/rpsL的构建及其功能鉴定

目的：构建多耐药临床分离株结核杆菌rpsL基因重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒pMV261/rpsL及其功能鉴定。 方法： 制备临床分离株多耐药结核杆菌基因组DNA，PCR扩增该株结核杆菌rpsL基因，构建及鉴定该株结核杆菌rpsL基因重组穿梭质粒PMV261/rpsL，重组穿梭质粒PMV261/rpsL电转化结核杆菌H37Rv株及其鉴定。 结果： 成功地构建了重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒PMV261/rpsL；重组大肠杆菌－结核杆菌穿梭质粒PMV261/rpsL电转化结核杆菌H37Rv株获得成功，并且重组质粒PMV261/rpsL电转化后的结核杆菌H37Rv株对链霉素耐药。 结论： 该临床分离株多耐药结核分支杆菌对链霉素耐药的机制仅仅是由于rpsL基因的93 bp、94 bp处碱基突变所致，耐药性是一个基因突变的结果，是单基因型。     

HRCA技术联合DNA芯片检测结核分枝杆菌利福平耐药基因突变的初步分析

目的 对超分支滚环扩增技术(hyperbranched rolling cycle amplification, HRCA)技术联合DNA芯片检测结核分枝杆菌利福平耐药基因突变进行初步分析.方法 采用直接涂片检测在2013年至2015年期间搜集的898份痰液样本中结核分枝杆菌情况,同时采用改良罗氏培养法与HRCA技术联合DNA芯片法对阳性样本进行鉴定,并对利福平耐药基因进行初步分析.结果 989份检测的痰液样本中361份为阳性,涂阳率为40.2%.HRCA技术联合DNA芯片法阳性率为98.0%,显著高于改良罗氏培养法(35.2%),且差异具有统计学意义(P<0.05).通过HRCA技术联合DNA芯片法发现85株结核分枝杆菌对利福平耐药,其中单纯rpoB 基因突变比例为36.5%(31/344);katG基因与rpoB基因均突变比例为60.0%(51/344);inhA基因与rpoB基因突变比例均为3.5%(3/344);且二位点联合突变及单位点突变率分别为89.4%(76/85)与10.6%(9/85).结论 HRCA技术联合DNA芯片法能够有效快速检出结核分枝杆菌突变基因,rpoB基因突变为主要结核分枝杆菌利福平耐药的基础,且突变呈现多样性.     

PCR-膜芯片检测石蜡包埋组织中结核杆菌耐药基因突变

目的探讨PCR-膜芯片技术检测石蜡包埋组织中结核杆菌耐药基因突变的可行性及其在临床病理中的应用价值。方法采集100例石蜡包埋的肺或淋巴结组织标本(临床诊断为结核患者80例,非结核患者20例),TB膜芯片检测标本中的结核杆菌IS6110基因,阳性者利用12对特异性引物进行多重PCR,扩增产物与含有59个探针的耐药-TB膜芯片反向点杂交检测结核杆菌耐药基因突变并测序验证。结果 TB膜芯片检测石蜡包埋组织标本中的结核杆菌IS6110基因,以临床诊断为标准时,灵敏度为52.5%(42/80),特异度为100%(20/20);以抗酸染色结果为标准时,灵敏度为90.5%(19/21),特异度为61.0%(36/59)。耐药-TB膜芯片检测石蜡包埋组织结核杆菌耐药基因突变,在42例结核杆菌IS6110基因阳性的标本中,检出INH基因突变2例,RFP或SM基因突变各1例,INH、RFP和EMB基因同时突变1例,与测序结果基本符合,提示上述5例可能为耐药结核病。结论应用PCR-膜芯片技术可提高石蜡包埋组织中结核杆菌基因的检出率,耐药-TB膜芯片检测结果可为耐药结核病的病理学诊断提供有价值的参考。     

Comparison of a conventional antimicrobial susceptibility assay to an oligonucleotide chip system for detection of drug resistance in Mycobacterium tuberculosis isolates

An oligonucleotide chip (Combichip Mycobacteria chip) detecting specific mutations in the rpoB, katG, and inhA genes of Mycobacterium tuberculosis was compared with conventional antimicrobial susceptibility results. The probes detecting drug resistance were as follows: 7 wild-type and 13 mutant probes for rifampin and 2 wild-type and 3 mutant probes for isoniazid. Target DNA of M. tuberculosis was amplified by PCR, followed by hybridization and scanning. Direct sequencing was performed to verify the results of the oligonucleotide chip. One-hundred seven of 115 rifampin-resistant strains (93%) had mutations in the rpoB gene. Eighty-five of 119 isoniazid-resistant strains (71%) had mutations in the katG gene or inhA gene. The diagnostic oligonucleotide chip with mutation-specific probes is a reliable and useful tool for the rapid and accurate diagnosis of resistance against rifampin and isoniazid in M. tuberculosis isolates.     

显色法芯片技术快速鉴定分枝杆菌菌种

 目的 利用显色法芯片技术建立快速鉴定分枝杆菌菌种的方法。 方法 根据美国国家生物技术信息中心（NCBI）提供的分枝杆菌 16S rDNA 基因的保守区和突变区（第 129 ~ 267 位核苷酸的 A 突变区、第 430 ~ 500 位核苷酸的 B 突变区）分别设计引物和寡核苷酸探针，用地高辛标记引物并制备玻璃芯片。采用双重 PCR 技术分别对 16 种分枝杆菌标准株、5 种非分枝杆菌标准株和 120 株分枝杆菌临床分离株（非结核分枝杆菌 40 株、结核分枝杆菌复合群 80 株）进行扩增，扩增产物分别与玻璃芯片进行杂交检测，尼龙膜显色，以显现蓝黑色斑点作为阳性信号，并根据其在芯片方阵中的位置判断分枝杆菌种类。根据芯片杂交结果，选取部分经显色法芯片技术检测的临床分离株进行 DNA 测序。 结果 16 种分枝杆菌标准株和 120 株分枝杆菌临床分离株经 PCR 扩增均各产生 2 条 DNA 片段，其中 1 条长度为 272 ~ 280 bp，1 条长度为 183 ~ 192 bp。16 种分枝杆菌标准株均与芯片上特异性探针杂交，应用显色法芯片技术分析 16 种分枝杆菌标准株和 5 种非分枝杆菌标准株的特异性为 100%。120 株分枝杆菌临床分离株均与分枝杆菌属探针 a 杂交，其中 79 株确定为结核分枝杆菌复合群，38 株确定为非结核分枝杆菌（不产色分枝杆菌 17 株，胞内分枝杆菌 8 株，猿猴分支杆菌 6 株，瘰疬分枝杆菌 5 株，偶然分支杆菌 2 株），另 3 株只与分枝杆菌属探针 a 杂交，没有鉴定到种。选取的 26 株分枝杆菌临床分离株（结核分枝杆菌复合群 8 株，不产色分枝杆菌 5 株，胞内分枝杆菌、猿猴分枝杆菌、未鉴定到种的分枝杆菌各 3 株，瘰疬分枝杆菌、偶然分枝杆菌各 2 株）DNA 测序显示，未鉴定到种的 3 株分枝杆菌中，1 株为结核分枝杆菌突变株，1 株为 Mycobacterium lentiflavum，1 株为 Mycobacterium arupense，芯片上无后 2 种菌株的特异性探针；其余 23 株菌株测序结果与芯片检测结果一致。 结论 显色法芯片技术能简便、快速、灵敏、特异地将大多数分枝杆菌鉴定到种，具有一定的临床推广应用价值。     

噬菌体法检测结核分枝杆菌的临床应用

研究噬菌体扩增试验对结核分枝杆菌快速鉴定的意义.应用结核分枝杆菌噬菌斑技术快速检测结核分枝杆菌及肺结核患者痰标本.结果显示:结核分枝杆菌H37 Rv、噬菌体扩增试验均为阳性;20株结核分枝杆菌临床分离株本法检测结果全部阳性;20份涂阳肺结核患者(用药时间在一周之内的)痰标本,本法阳性19份(95％);20份涂阴(应用抗...     

腹泻相关致病菌基因芯片的制备及应用

目的确定引起人类感染性腹泻的11种病原微生物,并制备芯片用于检测门诊腹泻患者粪便标本中的致病菌。方法根据本院2009年1月至2012年12月期间腹泻门诊的粪便病原菌检测数据,采用生物信息学的方法,收集11种病原菌的所有基因序列,设计引物及探针,优化并制备芯片,PCR扩增杂交并对杂交结果进行分析。用该芯片对本院保存的163个肠道致病菌临床分离株进行鉴定来评价芯片的特异性,用芯片来检测掺有不同浓度沙门氏菌的粪便标本评价芯片的灵敏度。同时收集2010年6月至2013年3月在本院就诊的1052份腹泻患者粪便标本,平行进行PCR扩增、细菌培养、基因芯片检测,比较不同检测方法的阳性率。结果成功制备了腹泻相关11种致病菌检测芯片。应用制备的芯片检测了163个临床分离株,准确率达100％。与PCR方法比较,基因芯片检测沙门氏菌的灵敏度达102CFU／ml,比PCR法检测灵敏度高10倍。用该芯片对临床1052份腹泻患者腹泻标本进行检测,与传统的培养法及PCR法比较,有较高的阳性检出率,达36％,比常规细菌培养阳性率高13％（X2=2．28,P〈0．05）,比PCR检出率高4％（X2=5．16,P〉0．05）。结论成功制备11种腹泻相关致病菌基因芯片,能同时对11种腹泻致病菌进行检测,有较好的特异性和灵敏度,有更高的阳性率,可以用于临床检测。     

结核杆菌pcHSP65真核表达载体的构建及其DNA免疫实验

目的：构建以结核分枝杆菌热休克蛋白65kD基因为基础的核酸疫苗。方法：采用聚合酶链反应从结核杆菌H37Rv株基因中，扩增出HSP65的编码基因，经限制性核酸内切酶消化后，插入真核表达载体pcDNA3.1(-)的相应酶切位点，并将此重组质粒免疫动物。结果：重组质粒的插入基因经序列测定证实为结核分枝杆菌HSP65。DNA免疫小鼠体内产生特异性抗体，能抵抗结核杆菌的感染。结论：以HSP65编码基因为基础的真核表达载体构建成功，并能引起特异性动物免疫反应，为进一步研究其在结核病防治的作用奠定了基础。     

Detecting drug resistant genetic mutation among pneumoconiosis patients complicated with tuberculosis in Mycobacterium tuberculosis L-forms application of PCR-SSCP technique in Huainan mining district

Objective: To study the relationship between drug resistant genetic mutation and drug resistance in Mycobacterium tuberculosis L-form, discuss the internal relationship between drug resistances and drug-resistant related genes and explore the value of PCRSSCP to clinical application. Methods: A total of 52 clinically isolated strains of tuberculosis L-form were collected among 97pneumoconiosis patients complicated with tuberculosis. The gene mutations of katG, rpoB and rpsL were detected by PCR-SSCP,and the results were compared with those analyzed by traditional antimicrobial susceptibility test(AST). Results: The gene mutation rates of katG, rpoB and rpsL by PCR-SSCP were respectively 57.70% (30/52), 65.38% (32/52) and 40.38% (21/52). The rate of reversion was 78.85%(41/52) and the result of drug-resistant genes was invariable. The results of AST showed that there were 40 (76.92%) multi-drug resistant strains in 52 clinically isolated strains. The number for three-drug resistant strain was 21(40.38%) and that of two-drug resistant was 19(36.54%), but only 12 (23.08%) strains were one drug resistant. The rate of total drug-resistance was 100%, but there were 15 strains of allied mutation of three genes, 16 of two mutations and 6 of only one by PCR-SSCP. The coincidences were respectively 71.43%, 84.12% and 50.00%. Then there was no significant difference between the allied mutations of multi-drug resistant gene and the mutations of only one drug resistant gene (P ＞ 0.05). Conclusion: PCRSSCP technique has a higher sensibility and specificity to detect the genes of katG, rpoB and rpsL in tuberculosis L-form among pneumoconiosis complicated with tuberculosis,and the detecting rate of two drug resistant strains and three drug resistant strains was higher. The combined application of PCR-SSCP and AST has advantages at earlier diagnosis and guidance of clinical medications.     

PNB/TCH生长试验和DNA微阵列基因芯片鉴定非结核分枝杆菌的价值比较

目的 比较对硝基苯甲酸/噻吩-2-羧酸肼生长（PNB/TCH）和DNA微阵列基因芯片鉴定非结核分枝杆菌（NTM）临床分离株菌种的价值。方法 收集2013年1月~2018年6月我院住院患者的痰分枝杆菌培阳分离菌2175株,分别采用PNB/TCH生长试验和DNA微阵列基因芯片鉴别NTM,比较两种方法的鉴定结果。结果 PNB/TCH生长试验初步鉴定NTM 93株,占4.28%,DNA微阵列基因芯片鉴定NTM 79株,占3.63%,PNB/TCH生长试验初步鉴定的93株NTM中,有14例为假NTM（15.05%）;PNB/TCH生长试验鉴定NTM的阳性检出率低于DNA微阵列基因芯片;79株NTM中,占比前3位的依次为胞内分枝杆菌株（37.97%）、堪萨斯分枝杆菌（21.52%）、鸟分枝杆菌（16.46%）。结论 传统对硝基苯甲酸/噻吩-2-羧酸肼生长试验鉴定NTM特异性较低,采用DNA微阵列基因芯片技术鉴定NTM准确,临床参考价值较大。