抗—HCV阳性血引发感染的核酸证据

血液和血液制品是丙型肝炎的主要传播方式之一,供血者健康检查标准规定凡ＥＬＩＳＡ检测抗ＨＣＶ抗体阳性者均不得献血。但ＥＬＩＳＡ检测存在着漏检及假阳性问题,并且只有ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性血清才具有感染性。因此,我们对某血站送检的１００例抗ＨＣＶ阳性献血员的血样进行了ＨＣＶ－ＲＮＡ检测,结果表明,在ＨＣＶ－ＲＮＡ半套式ＲＴ－ＰＣＲ中,传统的异硫氰酸胍／氯仿／异戌醇方法同磁珠法抽提病毒ＲＮＡ,结果两种方法同样可以得到理想的２４０ｂｐ扩增带。用传统方法进行实验,１００例血标本中３例ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性,其它均阳性,说明我国制定的献血员标准规定绝大多数情况下是适宜的,如果结合ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ,结果会更加理想。这为库血ＨＣＶ检测与献血员ＨＣＶ感染检测提供了一种可靠的检测方法,对防止输血后肝炎的发生、净化献血员有一定的指导意义     

聚合酶链反应检测庚型肝炎病毒的初步研究

应用美国Ａｂｂｏｔｔ公司Ｓｉｍｏｎｓ等人报道的引物序列，以逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测３８例甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）指标均阴性的慢性肝炎患者血中的庚型肝炎病毒核酸（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ）。２０例健康供血员血清作为对照，同时用ＲＴ－ＰＣＲ法测丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶＲＮＡ），结果３８例慢性肝炎患者中４例ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ阳性，其中２例同时有ＨＣＶＲＮＡ阳性。表明本地区有ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ感染存在。     

降低输血后HCV感染的临床研究

目的：探讨输血后ＨＣＶ感染高发的原因并提出降低发生率的可行措施。方法：对１３８例定期筛检供血及６８例献血前筛检供血的受血者进行了前瞻性调查。用定量ＰＣＲ试剂盒,通过荧光检测仪对１０份供血进行ＨＣＶ ＲＮＡ定量分析;对４１例血清进行ＨＣＶ ＲＮＡ定量、ＡＬＴ用抗－ＨＣＶ检测;用ＲＴ－ＰＣＲ法对３４份抗－ＨＣＶ（－）供血作ＨＣＶ ＲＮＡ定性分析。结果：两种方法筛检供血所致的输血后ＨＣＶ感染率分别为３４     

用多聚酶链反应检测环境样品中甲型肝炎病毒RNA的实验研究

采用直接逆转录一多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对加标海水、海泥、毛蚶的浓缩样品，用不同消毒方法处理过的甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）及毛蚶实测样品进行了ＨＡＶ－ＲＮＡ分析。结果表明，该方法可检出加标海水、海泥及毛蚶中的ＨＡＶ－ＲＮＡ；对苯酚消毒灭活的ＨＡＶ检验结果表明含有完整核酸序列的灭活病毒也能用ＲＴ－ＰＣＲ方法检出；毛蚶实测样品结果表明，只有１９８８年上海毛蚶ＲＴ－ＰＣＲ阳性，但细胞培养间接免疫荧光法检测结果为阴性，说明毛蚶冻存太久（≥５年），ＨＡＶ已不具感染性。直接ＲＴ－ＰＣＲ方法简便敏感，不需超速离心及其它特殊设备，在普通实验室也能使用。     

一起伤寒水型爆发的调查报告

应用套式ＰＣＲ检测抗－ＨＣＶ阴性献血员血清中ＨＣＶＲＮＡ陈友纯，赖进祥，蔡庆，林万明我们采用敏感特异的套式ＰＣＲ法，检测经ＥＬＩＳＡ试剂筛选后抗－ＨＣＶ阴性的献血员血清中ＨＣＶＲＮＡ，以了解抗－ＨＣＶ阴性献血员ＨＣＶ的感染情况。一、材料和方法：１．血...     

丙型肝炎诊断方法的研究概况

本文对丙型肝炎病毒第一代抗－ＨＣＶ检测，重组免疫印迹法（ＲＩＢＡ），第二代抗－ＨＣＶ检测，ＩｇＭ抗－ＨＣＶ检测，ＰＣＲ检测ＨＣＶ ＲＮＡ，肝细胞内的ＨＣＶ抗原检测，肝细胞ＨＣＶ ＲＮＡ检测，分泌物中的ＨＣＶ ＲＮＡ检测，以及精子细胞中的ＨＣＶ检测等最新进展作了综述，并对这些方法的使用价值和临床意义作了述评。     

耐热逆转录套式PCR法检测丙型肝炎病毒

耐热逆转录套式ＰＣＲ法检测丙型肝炎病毒张莉萍１郑佐华２毛裕民２检测ＨＣＶＲＮＡ的ＲＴＰＣＲ方法繁琐费时且费用高，难以作为一项常规诊断方法。我们完成了ＴａｇＤＮＡ聚合酶介导的耐热逆转录系统的优化［１］，建立在耐热逆转录套式ＰＣＲ检测ＨＣＶ的方法，并用...     

HGV—RNA阳性与阴性慢性乙型肝炎的对比研究

目的 研究慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的意义。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ法对８７例ＣＨＢ患者血清进行了ＨＧＶ－ＲＮＡ检测,并将ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴慢患者进行临床与病理学对比。结果 ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性１５例（１７．２４％）。ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴性患者的肝功能等生化指标水平,肝脏病理损害的程度、ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率及对抗乙肝胎盘肽的疗效等生化指标水平,肝脏病理损害的程度、ＨＢＶ     

HCV体外感染多种细胞株的观察

目的 寻找ＨＣＶ体外感染的细胞培养系统。方法 选用ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清感染人单核细胞株（Ｕ９３７）、人Ｔ淋巴细胞株（Ｍｏｌｔ－４）、人胆囊细胞株（Ｋｉｒｌｉｃｈ）、猪肾细胞株（ＰＫ１５）、鼠睾丸细胞株（ＳＴＥ）、人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２、Ｈｅｐ３Ｂ）等７种细胞。应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ在这种７种细胞中的感染和复制情况。结果 ７种细胞中均能检测到ＨＣＶ ＲＮＡ正链，并且在Ｕ９３７、Ｍｌ     

抗-HGV抗体酶联免疫试验法(EIA)与HGV PCR法检测结果比较

用抗－ＨＧＶ抗体酶联免疫试验法（ＥＩＡ）和ＨＧＶＲＴ－ｎＰＣＲ方法分别检测１００例正常献血员血清和４９例非甲～戊型肝炎患者血清。结果：在１００例健康献血员中,两法的符合率为９４％,但在４９例非甲～戊型肝炎患者中,两法的符合率仅为６３．３％。提示抗－ＨＧＶＥＩＡ法可用于献血员的筛查,但诊断ＨＧＶ感染应同时应用抗ＨＧＶＥＩＡ和ＨＧＶＲＮＡＲＴ－ｎＰＣＲ法。     

恙螨体内肾综合征出血热病毒基因的套式PCR检测

目的：检测恙螨体内微量肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）基因。方法：选择ＨＦＲＳＶ膜蛋白（ＭＰ）基因的保守区核苷酸序列合成两对引物，采用异硫氰酸胍一步抽提ＲＮＡ，建立了反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测鼠体恙螨及游离恙螨体内ＨＦＲＳＶ－ＲＮＡ的方法，扩增产物经凝胶电泳及点印迹杂交证实具有特异性。结果：ＨＦＲＳＶ抗原阳性鼠体恙螨５０只组、１０只组、游离恙螨５０只组，经ＲＴ－ＰＣＲ检测为阳性；ＨＦＲＳＶ抗原阳性鼠体恙螨５只组，ＨＦＲＳＶ抗原阴性鼠体恙螨５０只、１０只和５只组，游离螨１０只和５只组均未见明显扩增带。进一步用ＮｅｓｔｅｄＲＴ－ＰＣＲ检测，在ＲＴ－ＰＣＲ未检测出ＨＦＲＳＶ－ＲＮＡ各组中均检测有ＨＦＲＳＶ－ＲＮＡ，最低检出为５只螨组。并用核酸分子杂交技术进一步证实了上述结果。结论：ＮｅｓｔｅｄＲＴ－ＰＣＲ具有高特异、高敏感的特点，可用于检测恙螨体内微量ＨＦＲＳＶ－ＲＮＡ，从分子生物学角度为恙螨作为ＨＦＲＳＶ的传播媒介提供了直接证据。     

加热与洗涤法对HBV,HCV血清标志的影响

采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ），对经６０℃１０ｈ加热的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢＣ及抗－ＨＣＶ阳性血清和洗涤４次的ＲＢＣ洗涤及放散液的血清标志及ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ进行了检测。结果，６０℃加热１０ｈ用ＥＬＩＳＡ检测血清标志均由强阳性转为阳性，ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ及ＨＣＶＲＮＡ均为阴性；洗涤液用ＥＬＩＳＡ和ＰＣＲ检测血清标志及ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ均呈阴性反应，放散液用ＥＬＩＳＡ检测阴性，用ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ１０份标本９份阴性，１份阳性。提示６０℃加热１０ｈ和洗涤ＲＢＣ可灭活或去除血清中大部分ＨＢＶ、ＨＣＶ及其血清标志。     

广西85例肝癌患者庚型肝炎病毒感染的血清学研究

对肝癌高发区的８５例患者血清采用套式ＰＣＲ方法检测认型肝炎病毒核糖核酸（ＨＧＶ－ＲＮＡ），并用相同方法检测了ＨＣＶ－ＲＮＡ；ＨＢＶ－ＤＮＡ则采用单次ＰＣＲ检测，阴性者再用套式ＰＣＲ证实。结果提示：８５例肝癌患者中，１１例患者可检出ＨＧＶＲＮＡ，占和的１２．９％，而ＨＣＶ－ＲＮＡ，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者分别为１５例及６８例，占１７．６％和８０％。初步证明文本部分肝癌病人血清中存在ＧＶ感染，作者认为：Ｈ     

RT—PCR法检测甲肝疫苗滴度

建立快速灵敏特异的甲肝减毒活疫苗滴度的ＲＴ－ＰＣＲ检测法。方法：以编码甲肝病毒（ＨＡＶ）ＶＰ３羧基端的基因区为目标区，运用ＲＴ－ＰＣＲ法对甲肝疫苗病毒进行检测，并与ＴＣＩＤ５０检测法进行比较。结果：ＲＴ－ＰＣＲ法灵敏度和特异性均与ＴＣＩＤ５０法相似，...     

丙型肝炎病毒基因探针的制备

由于血液中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）量少，加上ＲＮＡ很容易被核糖核酸酶降解，因此，很多实验室采用逆转录（ＲＴ）套式聚合酶链反应（Ｎ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ。Ｎ－ＰＣＲ虽有敏感性很高的特点，但由于要经过两次扩增，使交叉污染机会增多。在现有的实验条件下，唯...     

青岛地区丙型肝炎病毒基因分型

对青岛地区８６例抗ＨＣＶ阳性肝炎患者血清，采用逆转录－套式基因扩增法（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶ，ＲＮＡ，并用多引物扩增进行基因分型，结果，ＨＣＶ·ＲＮＡ阳性５０例（５８．１％），其中ＨＣＶⅡ型４５例（９０．０％），Ⅲ型３例，Ⅱ／Ⅲ混合型２例。说明青岛地区ＨＣＶ基因以Ⅱ型为主，应据此设计预防和治疗措施。     

聚合酶链反应检测血浆及外周血单个核细胞中HCV—RNA的意义

目的 为提高丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶ－ＲＮＡ）的率。方法 采用套式逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测２００例抗－ＨＣＶ阴性,ＡＬＴ反复异常,临床疑似丙型肝炎患的血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果 ５２例患血浆中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ,阳性率为２６％,７８例患ＰＢＭＣ中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ,阳性率为３９％,其中两同时双阳性有２２例,阳性率为１１％。结论 同步检测丙     

庚型肝炎病毒母婴传播的研究

目的 了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在普通孕产妇群体中的感染情况和母婴传播的情况。方法 血中抗－ＨＣＶ采用ＥＬＩＳＡ法检测,ＨＧＶＲＮＡ采用ＲＴ－ＰＣＲ法检测。结果 在８４８名普通孕产妇中,抗－ＨＧＶ阳性者４６名,阳性率为５．４２％;在４６名抗－ＨＧＶ阳性孕产妇中,ＨＧＶＲＮＡ阳性者５名,符合率为１０．８６％,在５名ＨＧＶＲＮＡ阳性孕产妇中,其新生儿ＨＧＶＲＮＡ阳性者２名,传播率为４０％。结论 ＨＧＶ     

用RT—PCR法分析合肥地区HCV基因型

应用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对合肥地区的１９５例病人的血清进行了ＨＣＶＲＮＡ检测及基因型分析。结果显示，８０例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本中，７０例（８７．５％）为Ⅱ／１ｂ型ＨＣＶ感染，７例（８．８％）为Ⅲ／２ａ型，３例（３．７％）为Ⅱ和Ⅲ型混合感染，未发现Ⅰ／１ａ和Ⅳ／２ｂ型ＨＣＶ感染。     

434名HBsAg阴性应招飞行学员中的HCV感染调查

为了解ＨＢｓＡｇ阴性应招飞行学员中的ＨＣＶ感染情况，对体检合格的４３４名ＨＢｓＡｇ阴性健康应招飞行学员用ＥＬＩＳＡ法检测血清中的抗－ＨＣＶ，对抗－ＨＣＶ阳性血清用套式ＰＣＲ法检测了ＨＣＶ ＲＮＡ。结果发现，抗－ＨＣＶ阳性率为０．４６％（２／４３４），在２例抗－ＨＣＶ阳性者中，１例ＨＣＶ ＲＮＡ阳性。提示，为防止慢性ＨＣＶ感染者进入航校，对入学前的飞行学员进行抗－ＨＣＶ检测是必要的。