培养基培养法和细胞培养法分离培养生殖支原体的初步探讨

目的用培养基培养法和细胞培养法分离培养临床标本中的生殖支原体(Mg),以证实天津地区性传播疾病(STD)门诊患者有无Mg感染。方法用无菌棉拭子取STD门诊患者生殖泌尿道分泌物,分别接种于SP-4培养基和Vero细胞进行Mg的分离培养,对符合Mg培养特性的培养物,用套式PCR试验、代谢抑制试验以及PCR扩增产物核酸序列测定等方法进行鉴定。结果采用培养基培养法自79名STD门诊患者中分离培养出2株Mg,分离率为2.53％;采用细胞培养法自80名患者中分离培养出5株Mg,分离率为6.25％。两者无显著性差异(x2=0.57,0.25<P<0.5)。结论首次同时应用培养基培养法和细胞培养法从临床标本中分离培养出Mg茵株,从病原学上证实天津地区STD患者中存在Mg感染。     

生殖支原体分离培养及流行病学意义的研究

目的：用病原学方法探讨北京地区高危人群是否存在生殖支原体（Ｍｇ）感染及其频率（如果存在的话），为ＳＴＤ防治工作提供依据。方法：对性病患者和性乱者，用无菌棉拭子取生殖泌尿道分泌物，接种ＳＰ－４培养基进行Ｍｇ分离培养，对符合Ｍｇ生物学特征的培养物用ＰＣＲ、ＭＩＴ和ＣｏＡ加以鉴定。结果：在１５６例性病患者和性乱者中，培养出６株Ｍｇ，总分离率为３．８５％，其中性病患者分离率为５．５６％（４／７２），性乱者为２．３８％（２／８４），两者无显著性差异（χ２＝１．０６，Ｐ＞０．０５）。结论：从病原学证实，北京地区高危人群中存在Ｍｇ感染，ＳＴＤ防治工作中应加防范。     

ELISA法检测江门地区性病门诊患者生殖支原体抗原

目的应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测性病门诊患者泌尿生殖道生殖支原体（Mg）抗原，探讨江门地区性传播疾病（STD）门诊患者Mg感染状况。方法采用Mg多克隆抗体，标记酶结合物，建立检测Mg抗原的双抗体夹心ELISA法，对性病门诊患者泌尿生殖道分泌物进行MIg抗原检测。结果双抗体夹心ELISA法可检测到5μg／ml蛋白浓度，除肺炎支原体外与其他泌尿生殖道常见支原体和细菌无交叉反应；共检测了174例标本，Mg抗原阳性33例，阳性率为18．97％，其中男性和女性阳性率分别为19．88％和7．69％；男性患者中，非淋菌性尿道炎（NGU）、淋病、前列腺炎患者的Mg抗原阳性率分别为13．43％、62．5％和4．84％。结论STD门诊患者存在Mg感染，应用双抗体夹心ELISA法检测Mg抗原具有一定的灵敏度，且具有快速、简便的特点，适合临床筛查Mg抗原。     

PCR和分离培养检测细胞培养支原体污染的比较

目的：检测细胞培养中支原体的污染,建立支原体通用的ＰＣＲ方法。方法：根据已出版的序列设计并合成一对支原体（柔膜体纲）１６ＳｒＲＮＡ基因组特异引物。对实验室所存的１２种支原体、大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞进行了ＰＣＲ扩增。以ＰＣＲ与分离培养比较检测了３３份细胞培养标本。结果：１２种支原体均出现了约６２０ｂｐ左右的特异性扩增带,敏感性为１００～１０００个支原体细胞,且常见的６种细胞培养污染支原体的扩增片段均能被ＨｉｎｄⅢ切成２８０与３４０ｂｐ左右的２条带。理论上推测这对引物可扩增所有支原体１６ＳｒＤＮＡ。但对大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞等未见有扩增带出现。在对３３份细胞培养标本的检测中,除ＰＣＲ和分离培养同时检出２份阳性外,前方法还另检出阳性３份。５份ＰＣＲ扩增物均被ＨｉｎｄⅢ切出２条带。结论：ＰＣＲ较分离培养敏感性高,可提高细胞培养污染支原体的检出率,防止出现假阴性结果;如做好质量控制,对于一般实验室检测细胞培养支原体污染,ＰＣＲ扩增较分离培养具有更大的应用意义     

MRSACM分离培养MRSA方法学评价及临床应用研究

本文对文献报道的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌选择培养基（ＭＲＳＡＣＭ）用于分离培养耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）的效果进行了评价。并对我院９６年９月至９７年６月ＭＲＳＡ临床分离率及临床常见用抗生素敏感性进行了调查分析。结果显示：该培养基敏感性达１００％，特异性＞９７％：且方法简便、快速、准确。我院ＭＲＳＡ分离率占金葡萄的７１．１％。占感染标本的２３．７％。ＭＲＳＡ具有多重耐药性。     

PCR法检测耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌的mecA基因

临床标本进行ＤＮＡ抽提后，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）将具有６２３个ｂｐ的耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）的ｍｅｃＡ基因扩增，经琼脂糖电泳及ＤＮＡ印迹杂文（ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ），并用ＥＣＬ３’寡核苷酸标记增强化学发光进行检测，其结果与ＭＲＳＡ常规培养方法作比较。结果显示，７３份临床标本中，１５份常规培养法ＭＲＳＡ和ＰＣＲ法ｍｅｃＡ基因均为阳性，另１份ｍｅｃＡ基因扩增阳性的标本，常规培养ＭＲＳＡ为阴性。作者认为，由于ＰＣＲ对检测ＭＲＳＡ的ｍｅｃＡ基因具有快速、较强的特异性和敏感性等特点，作为检测临床标本中的ＭＲＳＡ的方法是可行的。     

生殖支原体的PCR法检测

探讨生殖支原体检测的方法及临床意义。方法：利用聚合酶链反应对１５４份临床标本进行ＭＧ的检测。结果：２５例阳性，阳性率１６．２３％。结论：生殖支原体是引起人类泌尿生殖道感染的病原体之一，ＰＣＲ方法是目前适于临床检测ＭＧ的理想方法。     

肺炎患儿肺炎支原体感染的实验室检测

目的：探讨肺炎患儿肺炎支原体（ＭＰ）感染的实验室检测方法。方法：使用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测６７６例肺炎患儿ＭＰ的感染,其中１３９例同时采用支原体培养进行检测;１１２例做间接血凝试验（ＩＨＡ）。结果：ＰＣＲ法对ＭＰ感染的检出率明显高于培养法（Ｐ〈０．０１）,双份血清ＩＨＡ的检测率和ＰＣＲ法比较无显著性差异（Ｐ〉０．０５）,单份血清ＩＨＡ的检出率明显低于ＰＣＲ法（Ｐ〈０．０１）。结论：ＰＣＲ法     

RPMI1640培养液在阴道滴虫培养中的应用

目的：评价１６４０培养液在阴道滴虫体外培养中的应用效果。方法；在ＲＰＭＩ１６４０培养液中加入其它在份，配制成新的阴道滴虫培养基。观察其对阴道滴虫的培养效果，并与ＣＰＬＭ培养基作比较。结果：滴虫在两种培养基中的增殖倍数有显著性差异。在临床标本中分离方面与ＣＰＬＭ培养基无明显差异，但在保种时间上比ＣＰＬＭ培养基较长。结论：ＲＰＭＩ１６４０培养液应用于阴道滴虫培养中效果良好。     

多重聚合酶链反应检测麻疹和风疹病毒感染的研究

用多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２１份临床疑似麻疹患者的血清和咽拭子标本中麻疹病毒和风疹病毒,其中麻疹阳性９份,风疹阳性６份,ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ检测麻疹ＩｇＭ抗体阳性３份,麻疹ＰＣＲ检测阴性,而风疹ＰＣＲ检测证实为风疹病毒,该法不仅简便,敏感,特异的区别麻疹和风疹病毒感染,而且为消灭麻疹野病毒监测提供了检测手段。     

聚合酶链反应检测临床标本中的肺炎支原体

作者应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测３～１３岁肺炎患儿１５０例咽拭标本中的肺炎支原体（ＭＰ），以分离培养及间接血凝试验（ＩＨＡ）为对照。ＰＣＲ检出率显著高于培养，若以ＩＨＡ为标准，ＰＣＲ阴性一致率为９６％、阳性一致率为７３％。不同病程ＭＰ－ＤＮＡ检出率无显著差异，提示即使病程较长仍可应用ＰＣＲ作出诊断。鉴于ＰＣＲ检测简便快速，可作呼吸道ＭＰ感染的常规诊断应用。但ＭＰ感染经敏感药物治疗可使ＰＣＲ结果阴性，因此，血清学检测尚不宜放弃。     

急性输卵管炎及输卵管性不孕妇女宫颈沙眼衣原体感染的检测

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测３０例急性输卵管炎和输卵管性不孕及３２例其他妇科疾病患者的宫颈内膜标本沙眼衣原体，以了解女性生殖道衣原体感染情况与一般细胞培养法相比较，结果表明：用ＰＣＲ法测得急性输卵管炎和输卵管性不孕的沙眼衣原体阳性率６０．０％，明显高于对照组１８．７％（Ｐ〈０．０１），并且敏感也较一般培养法高（Ｐ〈０．０１），提示ＰＣＲ法在检测沙眼衣原体感染方面较一般培养法更敏感，快速，早     

西安地区274例泌尿生殖道感染患者中生殖支原体感染分析

目的 了解西安地区人群泌尿生殖道感染患中生殖磕原体（Ｍｇ）的感染现状。方法 从西安地区性病门诊收集２７４例有泌尿生殖道症状患的标本,以支原体属特异性引物通过多聚酶链反应（ＰＣＲ）进行初步筛选,阳性标本进一步以生殖支原体特异性引物作ＰＣＲ检测。结果 ２７４例有泌尿生殖道症状患中,支原体属特异性引物扩增阳性患３０例,阳性率为１１％,进一步以Ｍｇ特异性引物对３０例标本进行ＰＣＲ检测,阳性患１０     

PCR法检测耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌的mecA基因

临床标本进行ＤＮＡ抽提后，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）将具有６２３个ｂｐ耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）的ｍｅｃＡ基因扩增，经琼脂糖电泳及ＤＮＡ印普杂交（ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ），并用ＥＣＬ３｀寡核苷酸标记增强化学发光进行检测，其结果与ＭＲＳＡ常规培养方法作比较。结果显示，７３份临床标本中，１５份传阅耕ＭＲＳＡ和ＰＣＲ法ｍｅｃＡ基因均为阳性，另１份ｍｅｃＡ基因扩     

PCR和分离培养检测细胞培养支原体污染的比较

目的：检测细胞培养中支原体的污染,建立支原体通用的ＰＣＲ方法。方法：根据已出版的序列设计并合成一对支原体（柔膜体纲）１６Ｓ ｒＲＮＡ基因组特异引物。对实验室所存的１２种支原体、大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞进行了ＰＣＲ扩增。以ＰＣＲ与分离培养比较检测了３３份细胞培养标本。结果：１２种支原体均出现了约６２０ｂｐ左右的特异性扩增带,敏感性为１００￣１０００个支原体细胞,且常见的６种细胞     

解脲脲原体检测之培养法与PCR法对比研究

应用ＰＣＲ法和培养法对１６０例泌尿生殖道感染患者的标本进行了解脲脲原体（ＵＵ）检测。结果 两种方法的总符合率为９１．２％，经卡方检验，两者的差异无统计学意义。若以培养法为标准，ＰＣＲ法的敏感性和特异性分别为８５．２％，９５．０％，提示培养法仍应是临床首选诊断方法。     

PCR法与培养法检测淋球菌的对比研究

ＰＣＲ法与培养法检测淋球菌的对比研究郑华１郑大为２钟淑霞１孙晓天１张林１（１白求恩医大第一临床学院皮肤科２长春中医学院）关键词淋病奈瑟菌ＰＣＲ培养中图号Ｒ４４６．１１材料和方法１．１临床资料性病门诊患者１５０例，其中男性１０３例，女性４７例。年龄１３...     

聚合酶链反应（PCR）检测淋球菌的临床意义

本文应用聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）方法对门诊患者中８６例女性宫颈分泌物和４２例男性尿道分泌物进行淋球菌检测，ＰＣＲ法检测敏感性为１００％，明显高于直接涂片（１１．７２％）和分离培养（１９．５３％）。因此ＰＣＲ法直接检测临床标本淋球菌具有特异、敏感、快速的优点，可以成为临床常规检查以取代直接涂片和分离培养，对于提高淋病的检出率和控制其传播具有非常重要的意义。     

套式聚合酶链反应加限制酶谱分析检测母婴垂直传播巨细胞病毒

目的：克服一次性ＰＣＲ假阳性及非特异性条带干扰。方法：建立套式ＰＣＲ技术，对１０５份母－脐配对血进行套式ＰＣＲ、病毒分离、特异性ＩｇＭ以及特异性ＩｇＡ测定。结果：母血ＨＣＭＶＤＮＡ阳性６份，脐血３份，母－脐传播率为３／６。３对被证实为母婴垂直传播ＨＣＭＶ的标本中，２对套式ＰＣＲ、病毒分离、特异性ＩｇＭ及ＩｇＡ均阳性，１对套式ＰＣＲ病毒分离，特异性ＩｇＡ阳性，但特异性ＩｇＭ阴性。结论：套式ＰＣＲ是一种敏感特异、简便快速、能早期诊断ＨＣＭＶ的检测手段，适用于孕妇及胎儿ＨＣＭＶ感染的监测。     

应用聚合酶链反应快速诊断巨细胞病毒感染

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测学龄前儿童尿标本中的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并和常规细胞培养（ＣＣＣ）、早期抗原检测（ＤＥＡ）两法进行了比较。结果表明，１０５份尿标本中有４１份ＣＣＣ出现ＨＣＭＶ特征性细胞病变（ＣＰＥ），其中３８份标本ＰＣＲ检测为阳性，敏感性为９２．７％；其余６４份ＣＣＣ阴性，有６份ＰＣＲ检测阳性，特异性为９０．６％。与ＤＥＡ相比，ＰＣＲ检测的特异性和敏感性分别为９３．６％，９５．２％；提示ＰＣＲ检测临床标本中ＨＣＭＶ，不仅敏感特异，而且与ＣＣＣ，ＤＥＡ两法相比快速简便。