重庆市涪陵区311例围生儿出生缺陷分析

目的 探讨重庆市涪陵区出生缺陷儿的现状和变化趋势,为制订适合当地出生缺陷防治措施提供参考。方法 选取该地区涪陵中心医院、涪陵区妇幼保健院、涪陵区人民医院3家监测机构2010年10月1日至2013年9月30日分娩的311例出生缺陷儿监测资料进行回顾性分析,了解出生缺陷发生率的变化趋势、缺陷顺位及出生缺陷的相关因素(缺陷儿性别,产妇居住地、年龄、文化程度等)。结果 该地区出生缺陷发生率呈逐年下降趋势,2013年出生缺陷发生率[1.846%(120/6 501)]明显低于2011年[2.046%(88/4 301)],差异有统计学意义(P<0.05);男性发生缺陷发生率[2.009%(165/8 214)]高于女性[1.829%(143/7 820)]。居住在城镇的产妇分娩缺陷儿发生率偏高于居住在乡村的产妇,但差异无统计学意义(P>0.05)。年龄小于20岁组和大于35岁组产妇分娩缺陷儿发生率均高于20~35岁组,文化程度在初中及以下产妇分娩缺陷儿发生率高于文化程度为高中/大学及大学以上产妇,差异均有统计学意义(P<0.05)。对出生缺陷儿的产前诊断以超声诊断及染色体检查为主,产前诊断率仅为21.54%(67/311)。结论 重视发生出生缺陷的相关因素、提高出生缺陷的产前诊断率可有效降低出生缺陷发生率。     

角膜后表面散光的测量及临床意义

角膜散光由角膜前表面散光（anterior astigmatism，AA）和角膜后表面散光（posterior astigmatism，PA）组成。据文献统计，PA在-0.01~-1.10 D范围内，85.0%~96.1%为逆规散光。随着年龄的增长，PA总体呈现由逆规向顺规漂移的趋势，AA的趋势则与之相反。因此，对于青年人，PA使总角膜散光（total astigmatism，TA）减小；对于老年人，PA使TA增大。在临床上，忽略PA会错误估计TA，影响屈光性白内障手术后的视觉质量。本文旨在介绍PA的测量方法及临床意义，以供眼科医生在临床工作中参考。     

早发型新生儿李斯特菌败血症3例并文献学习

正单核细胞增多性李斯特菌是一种可致严重疾病甚至死亡的致病菌,李斯特菌病是由该菌感染的人畜共患病,该病病情凶险,病死率高,尤以新生儿病死率最高。据报告,新生儿李斯特菌病发病率为8.6/100 000,其中美国和欧洲的病死率可高达20%～30%,但在发展中国家报道较少,我国对该病报道甚少,且暂无流行病学研究[1]。本文收集近2年于陆军     

定量检测破伤风类毒素酶联免疫吸附法的建立及初步应用

目的：建立定量检测破伤风类毒素（TT）抗原的双抗体夹心ELISA法,并探索其初步应用。方法：以TT抗毒素为包被抗体,大鼠抗TT多抗为检测抗体,采用相应酶标抗体检测TT抗原含量,建立双抗体夹心ELISA法,并进行方法学验证。结果：TT含量在0～0.062 5 Lf/ml范围内线性关系良好（r>0.99）。该方法与白喉类毒素、百日咳类毒素、百日咳丝状血凝素及百日咳黏附素无明显交叉反应,重复性好,特异性较强,精密度及准确度验证均符合常规质控要求。该法准确检测范围为0.000 625～0.040 000 Lf/ml,定量限度为0.000 625 Lf/ml。采用该方法对TT抗原进行吸附率检测,分别采用该法和絮状单位测定法测定6批TT的絮状含量,2种检测方法高度相关（r=0.94）。结论：建立的定量检测TT的双抗体夹心ELISA法为破伤风疫苗生产过程中TT质量控制提供了有效技术手段。     

肺癌四项血清学指标在肺癌患者中的表达与临床应用价值

目的 探讨肺癌四项在肺癌患者中的表达及其应用价值。方法 选取2018年8月至2020年1月安徽医科大学第四附属医院收治的100例初诊确诊为肺癌的患者为观察组,选取同时期来院就诊的85例肺部良性病变患者为对照组,比较两组血清中SCC、NSE、CYFRA21-1、CEA表达水平,同时分析观察组不同病理类型、分期上述指标的差异,分析肺癌血清四项单独及联合检测在肺癌诊断中的价值。结果 观察组血清SCC、NSE、CYFRA21-1、CEA水平均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。肺鳞癌患者血清CYFRA21-1、SCC水平较肺腺癌及小细胞肺癌明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;小细胞肺癌患者血清NSE水平较肺腺癌及肺鳞癌明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。肺腺癌患者血清CEA水平较肺鳞癌及小细胞肺癌明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。Ⅰ~Ⅱ期肺癌患者血清CYFRA21-1、NSE水平明显低于Ⅲ~Ⅳ期肺癌患者,差异有统计学意义（P<0.05）。而CEA、SCC水平在不同分期肺癌患者中无明显差异（P>0.05）。血清SCC、NSE、CYFRA21-1、CEA单独检测的灵敏度分别为60.0%、57.0%、37.0%和59%,而4种指标联合检测的灵敏度达75.0%;受试者工作特征曲线分析发现,4种指标联合诊断的曲线下面积为0.843。结论 肺癌血清四项指标在肺癌患者中的表达水平明显升高,四项指标联合检测对早期肺癌具有较高的诊断价值。     

表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的基因疫苗的免疫学特性

目的测定表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的两种重组质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法50只BALB/c小鼠随机分为5组(每组10只),将表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的两种重组质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF分别免疫小鼠3次,每次间隔2周,同时设卡介苗(BCG)免疫组、空载体质粒免疫组和生理盐水对照组。最后一次免疫结束后,每组取5只小鼠血清,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测特异性抗体的滴度,并分离小鼠的脾淋巴细胞,并在体外用结核分枝杆菌(MTB)培养滤液蛋白(cu lture filtrate prote in,CFP)刺激,测定脾淋巴细胞增殖指数和γ干扰素(IFN-γ)水平。用1 m l含1×105克隆形成单位(CFU)的MTB毒株H37Rv经尾静脉感染其余每组5只BALB/c小鼠,4周后计数脾脏细菌负荷数。结果质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF免疫小鼠血清的特异性抗体滴度分别为1∶1 000和1∶1 500。其脾淋巴细胞刺激指数分别为2.2和2.4,而生理盐水对照组和空载体质粒免疫组的刺激指数只有0.9和1.1;脾淋巴细胞悬液中诱发的IFN-γ分别为(5.48±0.38)ng/m l和(5.76±0.51)ng/m l,显著高于生理盐水对照组和空载体质粒免疫组(P<0.05),但与BCG免疫组的(5.55±0.31)ng/m l比较差异无统计学意义。结核毒株攻击后,与空载体质粒免疫组相比,质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF免疫的BALB/c小鼠其抗MTB在脾脏中增殖有显著作用,3组脾脏细菌负荷对数值(lg,CFU/g)分别为6.08±0.25、4.63±0.11、4.50±0.32,但不及BCG免疫组的4.09±0.27。结论表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的基因疫苗在小鼠体内诱导的IFN-γ水平与BCG相当,其保护力有待进一步提高。     

结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B-ESAT6的融合表达及纯化

目的　融合表达结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B ESAT6 ,为结核病的预防提供有效亚单位疫苗。方法　设计含不同酶切位点的Ag85B和ESAT6引物 ,采用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)的方法从结核分枝杆菌毒株H3 7Rv DNA中分别扩增出相应大小的DNA片段 ,将片段分别与PGEM T easy载体连接测序。将测序正确的Ag85B和ESAT6按照不同的酶切位点克隆入PPROEXHT表达载体 ,挑选出阳性克隆 ,将诱导的表达产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分析 ,同时与含6个组氨酸 (histidine 6×his)的单克隆抗体 (monoclonalantibody ,mAb)进行固定化蛋白质免疫学测定(Western blot) ,将用含Ni 鳌合剂的Ni NTA亲合柱纯化的表达产物免疫小鼠 ,用结核分枝杆菌培养上清滤液蛋白 (culturefiltrateproteins ,CFP)作为抗原 ,酶联免疫吸附试验 (enzyme linkedimmunosorbentassay ,ELISA)测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度。结果　PCR获得的Ag85B和ESAT6序列与基因文库 (GenBank)报道的完全一致。两者在大肠杆菌DH5α株中融合表达的产物约为 370 0 0 ,与预计大小相吻合。Western blot结果显示 ,在相对分子量约 370 0 0处有表达产物与 6×hismAb特异性结合带。表达产物为包涵体 ,通过Ni NTA纯化系统 ,可得到纯化的目的蛋白。Ag8     

上海市2013年8月至2014年7月腹泻病例病原学监测研究

目的 了解2013年8月至2014年7月上海市腹泻病例的病原谱和流行病学特征。方法 随机抽取23所不同级别医院,对在其肠道门诊就诊的腹泻病例按一定的抽样间隔进行调查,并采集粪便标本,进行细菌培养和病毒检测。结果 从3 467例病例粪便标本中检出至少1种病原体阳性者1 561例,阳性率为45.02%。检出细菌6种、病毒5种。细菌阳性率为13.46%,主要为副溶血性弧菌(172例)、沙门菌(143例);病毒阳性率为27.75%,主要为诺如病毒(471例)、轮状病毒(312例)。阳性例数呈较明显的夏季高峰和秋冬季高峰,秋冬季病毒阳性率高于细菌,夏季细菌阳性率高于病毒,差异均有统计学意义(P<0.05)。分层分析显示,病毒阳性组中,各年龄组均以11月至次年2月阳性数构成比最高,但各年龄组阳性数构成比差异无统计学意义(P>0.05)。细菌阳性组中,各年龄组均以6-9月阳性数构成比最高,且各年龄组阳性数构成比差异有统计学意义(P<0.05)。发热比例细菌阳性组(19.06%)高于病毒阳性组(10.91%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 上海地区腹泻病原谱较为广泛,季节高峰明显,应针对重点人群在不同季节对病原体加强相应的监测与防控。