甲基汞对大鼠早期胚胎致畸作用的分子机理研究

为探讨氯化甲基汞（ｍｅｔｈｙｌｍｅｒｃｕｒｙｃｈｌｏｒｉｄｅ，ＭＭＣ）致畸作用的分子机理，本实验应用非放射性原位杂交和免疫组化半定量分析等方法研究了ＭＭＣ对９．５天龄大鼠胚胎５种基因及编码产物的影响。结果显示：染ＭＭＣ各组（０、０．２、０．４、０．８、１．６和３．２ｍｇ／ｋｇ）均未见母鼠有明显的中毒症状和死亡。随着染毒剂量的增加，胚胎形态总得分逐渐降低，畸胎率和发育迟缓率不断增高，最高分别达３４％和７６％；诱生型一氧化氮合成酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｉＮＯＳ）ｍＲＮＡ及其编码蛋白和ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达明显增强，ＮＴｍＲＮＡ及其编码蛋白表达水平下降，均呈明显剂量—反应关系。此外，ＭＭＣ还抑制ＴＧＦβｍＲＮＡ的表达，但对Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ及其编码蛋白表达的影响不明显。基于胚胎形态、基因和蛋白质表达的结果大体一致，相互佐证，提示在转录水平上多种基因表达异常可能与ＭＭＣ诱导大鼠畸胎发生之间存在密切关联     

胃腺癌组织中Fas、Bcl-2蛋白表达及其与浸润转移关系的研究

目的：为了解Ｆａｓ、Ｂｃｌ－２蛋白在胃腺癌中的表达及其意义。方法：用免疫组化ＡＢＣ法检测４８例胃腺癌中Ｆａｓ、Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：中、高分化癌中Ｆａｓ蛋白阳性表达率（７０．６％、７１．４％）显著高于低分化癌（１２．５％）,（Ｐ＜０．０５）,无淋巴结转移组的胃癌Ｆａｓ阳性表达率（５５．６％）高于有淋巴结转移组（２３．８％）,（Ｐ＜０．０５）,浸及粘膜及粘膜下的胃癌Ｆａｓ阳性表达率（７１．４％）高于浸及浆膜及周围组织者（２３．５％）,（Ｐ＜０．０５）。高分化癌中Ｂｃｌ－２的阳性表达率（４２．８％）显著低于低分化癌（８７．５％）,（Ｐ＜０．０５）,Ｂｃｌ－２阳性表达与浸润深度及淋巴结转移无关。结论：Ｆａｓ表达与胃腺癌的分化、浸润转移有关,Ｂｃｌ－２表达仅与胃腺癌分化有关     

镉对大鼠肺泡巨噬细胞Fc受体和超微结构影响的研究

雌性ＳＤ大鼠经气管注入ＣｄＣｌ２溶液染毒后２４ｈ，观察肺泡巨噬细胞（ＡＭ）Ｆｃ受体（ＦｃＲ）数的改变和超微结构的变化。结果表明，Ｃｄ对ＡＭＦｃＲ数的影响表现出一定的剂量效应关系。０．０２ｍｇ／ｋｇ时ＦｃＲ数即显著降低，０．１、０．５ｍｇ／ｋｇ染毒剂量组的ＦｃＲ数分别比对照组降低７２％和８８％。ＡＭ超微结构观察发现，暴露于Ｃｄ后，大鼠的ＡＭ线粒体（Ｍｉ）膜性结构明显受损，膜破损、嵴变淡、溶解，甚至空泡化。溶酶体的变化也比较显著。作者认为，Ｃｄ引起大鼠ＡＭ胞质变化比胞核的变化明显。     

镉的免疫毒性与促肾上腺皮质激素释放因子的关系

对ＣｄＣｌ２和ＣｄＣｌ２＋α－ｈＣＲＦ（α螺旋促肾上腺皮质激素释放因子）分另染毒的ＳＤ大鼠,用「＾３ＨＴｄＲ」掺入法测定大鼠脾Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖转化功能,垂体前叶细胞培养法测定中枢下丘脑和外周血浆中的ＣＲＦ含量。结果表明单独染镉组有丝分裂原诱导的鼠脾Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖转化均受到显示抑制,具有剂量－效应关系（Ｐ〈０．０５）;动物下丘脑ＣＲＦ含量着染镉剂量升高（Ｐ〈０．０５）;外周血浆ＣＲＦ含量各组间     

神经生长因子对ＰＭ２．５所致气道神经源性 炎症影响的研究

摘要：目的　研究神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＮＧＦ）调控ＰＭ２．５所致大鼠气道神经源性炎症的机 制。方法　将４０只ＳＤ 大鼠随机分为５ 组： 生理盐水对照组、ＰＭ２．５ 组、ＩｇＧ 组、磷酸盐缓冲液（ｐｈｏｓ ｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒｓａｌｉｎｅ,ＰＢＳ）组、抗ＮＧＦ组,每组８只。ＰＭ２．５组以大鼠气道滴注ＰＭ２．５,盐水对照组以生理 盐水代替ＰＭ２．５。其他三组染毒前分别腹腔注射ＮＧＦ抗体、ＩｇＧ 和ＰＢＳ。通过观察大鼠血清中速激肽水平 和各组肺组织病理变化确定模型的建立,检测血清中速激肽、ＮＧＦ、肺组织、背根神经节中Ｐ 物质（ｓｕｂ ｓｔａｎｃｅＰ,ＳＰ）表达。结果　抗ＮＧＦ组血清速激肽、ＮＧＦ 值低于ＰＭ２．５组（犘＜０．０５）;ＰＭ２．５组肺组织炎 症细胞浸润明显,抗ＮＧＦ组肺组织少量炎性浸润。各组大鼠肺组织中ＳＰ 表达差异无统计学意义（犘＞ ０．０５）;抗ＮＧＦ组背根神经节中ＳＰ表达低于ＰＭ２．５组（犘＜０．０５）;抗ＮＧＦ组肺组织及背根神经节中ＮＧＦ 表达低于ＰＭ２．５组（犘＜０．０５）。结论　ＮＧＦ抗体可通过抑制血清及背根神经节中速激肽的表达减轻ＰＭ２．５ 所致大鼠气道神经源性炎症。 关键词：ＰＭ２．５;神经生长因子;神经源性炎症;Ｐ物质;神经激肽Ａ;神经激肽Ｂ 中图分类号：Ｒ１２２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１８）０１ ００６４ ０６     

砷氟对大鼠血中AchE活性的交互影响

为研究砷氟联合染毒对大鼠血中乙酰胆碱脂酶（ＡｃｈＥ）活性的交互影响，以二因子析因方差设计方法用体重１００±５ｇ的Ｗｉｓｔａｒ系雄性大鼠通过自由饮水染毒三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）和氟化钠（ＮａＦ），６个月时采大鼠尾部全血，用ＤＴＮＢ法测定其ＡｃｈＥ的活性，结果显示：砷可显著地抑制ＡｃｈＥ活性（Ｐ＜０．０５），氟对ＡｃｈＥ活性的作用不显著（Ｐ＞０．０５），砷与氟对ＡｃｈＥ活性的影响存在显著的交互作用（Ｐ＜０．０５）。     

ＨＯ １、ＮＦ κＢ在矽肺纤维化中作用机制的实验研究

摘要：目的　观察血红素加氧酶 １ （ＨＯ １）及核转录因子ｋａｐｐａＢ （ＮＦ κＢ）在大鼠矽肺纤维化中的作用机
制及相互关系。方法　实验动物采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠６０只,体重１８０～２２０ｇ,雌雄不拘,适应性饲养１周后,
随机分为４ 组, 分别为对照组（Ａ 组） 和染尘模型组（Ｂ 组）、染尘＋ ＨＯ １ 抑制剂组（Ｃ 组）、染尘＋
ＨＯ １诱导剂组（Ｄ 组）,每组１５只。采用气管暴露法滴注二氧化硅悬液制造大鼠矽肺模型。建模２８ｄ后
ＨＥ 染色观察各组大鼠肺组织病理结构,采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测各组肺组织ＨＯ １ 和ＮＦ κＢ 蛋白含量,
采用荧光定量ＰＣＲ 法检测各组肺组织ＨＯ １ 和ＮＦ κＢ ｍＲＮＡ 的表达。结果　Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测结果显示
ＨＯ １、ＮＦ κＢ蛋白含量,对照组明显低于其他各组（犘＜０．０５）,Ｃ 组较Ｂ 组明显降低,而Ｄ 组较Ｂ 组表
达量明显升高（犘＜０．０５）。ＲＴ ＰＣＲ 检测各组ＨＯ １ ｍＲＮＡ 相对表达量分别为２．２５±０．３８、１．８１±０．７４、
７．７５±０．５６,Ｃ 组较Ｂ组表达明显降低,而Ｄ 组较Ｂ组表达显著升高（犘＜０．０５）;ＮＦ κＢｍＲＮＡ 相对表达
分别为３．０６±０．４２、６．１５±０．３７、１．３９±０．１４,Ｃ 组较Ｂ 组表达明显升高,而Ｄ 组较Ｂ 组表达显著降低
（犘＜０．０５）。结论　ＨＯ １、ＮＦ κＢ共同参与了大鼠矽肺纤维化的形成过程,通过对其干预可以改变大鼠矽
肺纤维化的程度,可为矽肺纤维化的诊断与治疗提供新途径。
关键词：血红素加氧酶 １;核转录因子 κＢ;矽肺纤维化;大鼠;锌原卟啉;钴原卟啉
中图分类号：Ｒ１３５．２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０５ ０４９０ ０５     

邻苯二甲酸二（２ 乙基己基）酯对小鼠肾脏损害及氧化应激机制的研究

摘要：目的　研究邻苯二甲酸二（２ 乙基己基） 酯（ＤＥＨＰ） 的肾脏毒性及氧化应激损伤作用机制;探讨
相关影响因素。方法　建立小鼠ＤＥＨＰ肾损伤模型：选择昆明４ 周龄小鼠６０ 只,体重（２０±２）ｇ,雌雄
各半,随机分为６ 组, 每组１０ 只。Ｏ 组为空白对照组,Ａ 组给予ＤＥＨＰ７５０ ｍｇ／ｋｇ,Ｂ 组给予ＤＥＨＰ
１５００ｍｇ／ｋｇ ,Ｃ 组给予３０００ ｍｇ／ｋｇＤＥＨＰ＋１０％ 维生素Ｃ,Ｄ 组给予ＤＥＨＰ３０００ ｍｇ／ｋｇ,Ｅ 组给予
３０００ｍｇ／ｋｇＤＥＨＰ＋０．５％ 尼古丁;经食饵和饮水连续自然给食染毒,于染毒第４周末处死。测量小鼠肾
脏和体质量的变化,检测不同ＤＥＨＰ染毒剂量组小鼠的血液、肾脏中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）、过氧
化氢（Ｈ２Ｏ２）,丙二醛（ＭＤＡ）等变化。将实验数据进行单因素方差分析（ＡＮＯＶＡ）。结果　随着ＤＥＨＰ
染毒剂量的增加,小鼠体质量逐渐降低（犘＜０．０５）,高剂量组肾脏脏器系数呈现增加趋势。ＤＥＨＰ 高剂量
组ＨＥ 染色可见肾脏组织出现以明显充血和水肿为主的损伤,尼古丁干扰组最为严重。维生素Ｃ 呈现良好
的肾脏保护作用。氧化应激相关物质的改变：血液中的ＧＰＸ 活性由对照组的（４７１．３２±１２０．２４ ）Ｕ／ｍｌ降
低至Ｅ 组的（２０８．７５±５２．９２）Ｕ／ｍｌ （犘＜０．０５）,且有剂量 反应关系;肾脏中ＧＰＸ 活性降低（犘＜０．０５）,
同时肾组织中Ｈ２Ｏ２ 含量由（４０７．７４±３２８．８３）ｍｍｏｌ／ｍｇ蛋白增加到（１６７４．９８±３７６．０７）ｍｍｏｌ／ｍｇ蛋白
（犘＜０．０５）,血液中Ｈ２Ｏ２ 含量也随着ＤＥＨＰ 的剂量增加而增加（犘＜０．０５）;肾组织中ＭＤＡ 含量增加（犘
＜０．０５）;同时维生素Ｃ 的保护作用和尼古丁的协同作用也有体现。结论　ＤＥＨＰ 具有小鼠肾脏毒性,其
作用机制可能与氧化应激有关,抗氧化剂维生素Ｃ 对ＤＥＨＰ所致肾脏损伤具有抑制作用。
关键词：邻苯二甲酸二（２ 乙基己基）酯（ＤＥＨＰ）;肾脏毒性;氧化应激
中图分类号：Ｒ１２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０１ ０００８ ０５     

大鼠卵巢镉暴露对ＤＮＡ 甲基转移酶表达的实验研究

摘要：目的　研究新出生卵巢组织体外镉暴露后,ＤＮＡ 甲基转移酶类（ＤＮＭＴｓ） 基因转录和蛋白表达的 情况,了解ＤＮＭＴｓ的变化在镉致卵巢毒性中的作用。方法　４ 日龄雌性ＳＤ 大鼠卵巢取出置于ＤＭＥＭ／ Ｆ１２与α ＭＥＭ 混合培养体系进行体外染毒,镉剂量分别为０、０．５、１０、５０μｍｏｌ／Ｌ,连续染毒４ｄ。分别 采用ＲｅａｌＴｉｍｅ ＰＣＲ 和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法检测ＤＮＭＴｓｍＲＮＡ 及其蛋白表达水平。应用单因素方差进行分 析比较,犘＜０．０５为差异有统计学意义。结果　各剂量组ＤＮＭＴ１、ＤＮＭＴ３α、ＤＮＭＴ３βｍＲＮＡ 与对照组 比较,差异均有统计学意义（犉＝１３．５７９、１２．９２６、１０．６２０,犘＝０．００９、０．０１２、０．０３１）,其中ＤＮＭＴｓ在 ０．５、１０μｍｏｌ／Ｌ 组表达上调,５０μｍｏｌ／Ｌ 组表达下调;各剂量组ＤＮＭＴ１蛋白表达与对照组比较,差异有 统计学意义（犉＝５６．３１１,犘＜０．０１）,其中在０．５μｍｏｌ／Ｌ 和５０μｍｏｌ／Ｌ 组降低,１０μｍｏｌ／Ｌ 组表达升高; ＤＮＭＴ３α蛋白表达在１０μｍｏｌ／Ｌ 组升高,５０μｍｏｌ／Ｌ 组降低, 与对照组比较差异有统计学意义（犉＝ ２８．５３３,犘＜０．０１）; 各剂量组ＤＮＭＴ３β 蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义（犉＝２．０４７,犘＝ ０．１８６）。结论　在本次实验条件下,镉暴露后卵巢组织ＤＮＭＴｓ表达发生改变,这可能参与镉致卵巢毒性 过程。 关键词：镉;ＤＮＡ 甲基转移酶;卵巢 中图分类号：Ｒ１１４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１６）０６ ０４０１ ０４     

细胞凋亡与女性生殖研究进展

女性生殖活动中细胞凋亡的研究已取得很大进展。卵巢颗粒细胞（ｇｒａｎｕｌｏｓａｃｅｌｌｓ,ＧＣｓ）的凋亡不仅受到ｐ５３、Ｂａｘ、Ｂｃｌ－２、Ｆａｓ、ＷＴ－１等凋亡相关基因的调控,而且受到ＩＧＦ、ＩＧＦＢＰ、激活素、ＩＦＮγ等体液因子的调控,且它们的调控毕受促性腺激素的影响。ＧＣｓ凋亡细胞内机制可能与Ｃａｓ－ｐａｓｅｓ途径和酰基鞘氨醇途径有关,不同的ＧＣｓ亚群以及卵泡发育不同时期ＧＣｓ对凋亡的敏感性不     

Bcl-2蛋白在64例大肠癌中的分析

本文采用流式细胞术（ＦＣＭ）研究了Ｂｃｌ－２蛋白在大肠癌中的表达。结果显示肿瘤的Ｂｃｌ－２蛋白表达量（１．３１±０．４１）明显高于正常粘膜细胞（１．０±０．１５），Ｐ＜０．００１；粘液腺癌、腺棘细胞癌和低分化腺癌的Ｂｃｌ－２蛋白表达量（１．４５±０．２１）高于中分化腺癌（１．３１±０．２２），Ｐ＜０．０５；低分化腺癌的Ｂｃｌ－２蛋白表达量（１．４８±０．０８），高于中、高分化腺癌（１．３１±０．２２），Ｐ＜０．０５；浸润型肿瘤的Ｂｃｌ－２蛋白表达量（１．４４±０．２０），高于非浸润型肿瘤（１．３０±０．２２），Ｐ＜０．０２５；异倍体肿瘤的Ｂｃｌ－２蛋白表达量（１．４１±０．２０），高于二倍体肿瘤（１．２４±０．２２），Ｐ＜０．０２５。因此认为，Ｂｃｌ－２蛋白与大肠癌的形成和不良预后相关。     

二甲双胍改善高脂喂养大鼠肝脏脂肪变性和 促进Ｍｆｎ２ｍＲＮＡ 表达的实验研究

摘要：目的　研究二甲双胍对高脂喂养Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝脏脂肪变性、胰岛素敏感性和线粒体功能的影响。方
法　２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为对照组（ＮＣ）、高脂组（ＨＦ） 和二甲双胍组（ＭＦ），每组８ 只，喂养８ 周
后，以高胰岛素 正常葡萄糖钳夹测定大鼠胰岛素敏感性，取空腹血清测定大鼠天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）、
丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）、甘油三酯（ＴＧ）、空腹血糖（ＦＢＳ），空腹胰岛素（ＦＩＮＳ） 的水平；将大鼠肝
脏组织进行ＨＥ 染色，观察肝脏组织学变化；取肝脏组织，测定肝糖原含量；提取、分离肝细胞线粒体超
氧化物歧化酶，测定线粒体超氧化物歧化酶活性，以及提取肝组织总ＲＮＡ，应用ＲＴ ＰＣＲ 测定肝脏组织
Ｍｆｎ２ｍＲＮＡ 的表达。结果　与ＮＣ 组大鼠比较，ＨＦ 组大鼠肝脏指数、ＴＧ、ＦＢＳ、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＩＮＳ明显
升高，ＭＦ组大鼠上述各指标差异无统计学意义（犘＞０．０５），ＨＦ 组大鼠ＧＩＲ、ＳＯＤ 活性及肝脏组织
Ｍｆｎ２ｍＲＮＡ 表达显著降低（犘＜０．０５）。与ＮＣ 组和ＨＦ 组大鼠分别比较，ＭＦ 组大鼠ＧＩＲ （８．４０±０．５０，
７．２９±０．４０狏狊１２．９２±８．３３）、肝糖原含量（１．７３ ±０．０１，１．８２ ± ０．３１狏狊１２．９２ ± ８．３３）、ＳＯＤ 活性
（１３．７１±２．６７，９．０８±３．１２狏狊１６．７２±４．８０）显著增加（犘＜０．０５）。ＮＣ 和ＨＦ两组间，肝糖原含量差异无
统计学意义（犘＞０．０５）。肝组织ＨＥ 染色，结果显示，ＨＦ 组大鼠肝细胞体积增大，胞质中有脂滴空泡；
ＭＦ组大鼠肝细胞显微结构无显著变化。结论　二甲双胍可以改善高脂诱导的肝脏脂肪变性、增加胰岛素
敏感性，这一作用可能是通过促进肝细胞线粒体融合基因２ （Ｍｆｎ２）表达、改善线粒体功能实现的。
关键词：二甲双胍；肝脏脂肪变性；胰岛素敏感性；线粒体融合素基因２
中图分类号：Ｒ５８７．１　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１６）０９ ０６８１ ０５     

2,5-己二酮抑制大鼠卵巢颗粒细胞干细胞因子的表达

目的研究2,5-己二酮对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及干细胞因子(SCF)表达的影响。方法 21日龄清洁级雌性SD大鼠10只,提取卵巢颗粒细胞混合后,均匀接种到六孔板培养,设立1个对照组和3个实验组,培养24h后分别加入浓度为0、20、40、60mmol/L的2,5-己二酮染毒24h,Hoechst 33258荧光染色计算细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测SCF、Bax、Bcl-2基因mRNA相对表达量。结果各染毒剂量组卵巢颗粒细胞凋亡率增高,差异有统计学意义(F=221.23,P0.05)。SCF基因mRNA的相对表达量在40、60mmol/L剂量组呈下降趋势,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。Bcl-2基因mRNA的相对表达量随染毒剂量增加呈下降趋势,各剂量组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。Bax基因mRNA的表达量和Bax/Bcl-2比值随着染毒剂量增加呈上升趋势,各剂量组与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。结论2,5-己二酮染毒可致卵巢颗粒细胞凋亡率增高,抑制SCF基因表达,SCF/c-Kit信号通路可能参与此过程。     

实时细胞分析技术与ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ法用于测定 纳米氧化铜细胞毒性的比较研究

摘要：目的　通过比较研究实时细胞分析技术（ｒｅａｌｔｉｍｅｃｅｌｌａｎａｌｙｚｅ,ＲＴＣＡ） 及ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ法测定纳米 氧化铜体外作用于人胚肺成纤维细胞ＭＲＣ ５及人正常肺上皮细胞ＢＥＡＳ ２Ｂ的毒性作用,探讨ＲＴＣＡ 实时 细胞分析技术用于测定纳米材料体外细胞毒性的可行性。方法　分别将ＭＲＣ ５ 及ＢＥＡＳ ２Ｂ 细胞接种于 ＲＴＣＡ 配套１６孔板中及普通９６孔板中,９６孔板中细胞用于ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ法测定细胞毒性。分别用剂量为 ０．７５ｇ／Ｌ、０．３８ｇ／Ｌ、０．１９ｇ／Ｌ、０．０９４ｇ／Ｌ、０．０４７ｇ／Ｌ 的纳米氧化铜混悬液进行染毒。选择１２ｈ、２４ｈ、 ３６ｈ、４８ｈ、６０ｈ时间点计算两种方法测得的ＩＣ５０值。采用ＳＰＳＳ１６．０分析软件,利用配对狋检验,对两种 方法所得相同时间点的ＩＣ５０值进行统计分析,判断其相关性及是否存在差异。结果　ＭＲＣ ５细胞用ＲＴＣＡ 法测定染毒后１２ ｈ、２４ ｈ、３６ ｈ、４８ ｈ、６０ ｈ 的ＩＣ５０ 值分别为３９１ ｍｇ／Ｌ、２４９ ｍｇ／Ｌ、１８５ ｍｇ／Ｌ、 １６５ｍｇ／Ｌ、１４７ｍｇ／Ｌ;ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ法所得相同时间点的ＩＣ５０值分别为５０７ ｍｇ／Ｌ、２０６ ｍｇ／Ｌ、１７２ ｍｇ／Ｌ、 １５４ｍｇ／Ｌ、９５．２ｍｇ／Ｌ。两种方法所测得ＩＣ５０值进行统计分析,差异无统计学意义。ＢＥＡＳ ２Ｂ 细胞用ＲＴＣＡ 法测定染毒后１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ、４８ｈ、６０ｈ 的ＩＣ５０ 值分别为１３１ ｍｇ／Ｌ、８３．７８ ｍｇ／Ｌ、６５．３７ ｍｇ／Ｌ、 ５３．９８ｍｇ／Ｌ、５１．２３ ｍｇ／Ｌ;Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 法所得相同时间点的ＩＣ５０ 值分别为１４８ ｍｇ／Ｌ、１０４ ｍｇ／Ｌ、 ７７．３ｍｇ／Ｌ、４２．５ｍｇ／Ｌ、３９．２ｍｇ／Ｌ。两种方法所测得ＩＣ５０ 值进行统计分析, 差异无统计学意义。结论　 ＲＴＣＡ 实时监测法与ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ法在相同时间点测定纳米氧化铜体外细胞毒性得ＩＣ５０值差异无统计学意 义,说明ＲＴＣＡ 实时监测法测定体外细胞毒性结果可靠,适用于纳米材料的体外毒性研究。 关键词：实时细胞分析技术（ＲＴＣＡ）;ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ法;纳米氧化铜;ＭＲＣ ５细胞;ＢＥＡＳ ２Ｂ细胞 中图分类号：Ｒ１１４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１６）０７ ０４９１ ０５     

子宫内膜腺癌组织中Bcl—2蛋白表达的研究

为探讨Ｂｃｌ－２蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达状况，其病理学与临床意义，本组应用抗Ｂｃｌ－２单克隆抗体对３４例子宫内膜腺癌细胞石蜡标本行Ｂｃｌ－２蛋白免疫组织化学测定（ＳＡＢＣ法）。结果发现Ｂｃｌ－２蛋白在子宫内膜腺癌组织中表达的阳性率为４７％，其阳性表达与肿瘤组织学分期、肌层浸润深度及患者预后有关（Ｐ〈０．０５）。说明Ｂｃｌ－２蛋白表达与子宫内膜腺癌的某些病理学特征及生物学行为之间存在的关系。应     

流式细胞术在小鼠局部淋巴结试验中的应用研究

摘要：目的　将流式细胞术应用到小鼠局部淋巴结实验（ｌｏｃａｌｌｙｍｐｈｎｏｄｅａｓｓａｙ,ＬＬＮＡ）中,期望建立既
可检测化学物致敏性也可同时检测刺激性的方法。方法　受试物分为溶剂对照［ＡＯＯ （丙酮∶ 橄榄油＝
４∶１）］、阴性对照（ＮａＣｌ）、致敏阳性物［己基肉桂醛（ＨＣＡ）、２,４ 二硝基氯苯（ＤＮＣＢ）、２ 氨基酚（２
ＡＰＣ）］、刺激阳性物［ＫＯＨ、十二烷基硫酸钠（ＳＬＳ）］。采用８～１０周龄１６～２２ｇ的雌性Ｂａｌｂ／ｃ小鼠７６
只,随机分为１９个受试物剂量组,每剂量组４只小鼠。每种受试物分别设低、中、高３个剂量组,检测浓
度分别为ＮａＣｌ （１００ｇ／Ｌ、２００ｇ／Ｌ、３００ｇ／Ｌ）、ＨＣＡ （犞／犞：３．３％、１０．０％、３０．０％）、ＤＮＣＢ（２．５ｇ／Ｌ、
５．０ｇ／Ｌ、１０．０ｇ／Ｌ）、２ ＡＰＣ （１２．５ｇ／Ｌ、２５．０ｇ／Ｌ、５０．０ｇ／Ｌ）、ＫＯＨ （２５ｇ／Ｌ、５０ｇ／Ｌ、１００ｇ／Ｌ）、ＳＬＳ
（５０ｇ／Ｌ、１００ｇ／Ｌ、２００ｇ／Ｌ）。于试验第１、２、３ 天将配制后不同浓度受试物稀释液以每耳２５μｌ／ｄ均匀涂
布于小鼠双侧耳后。检测小鼠耳缘厚度、耳引流淋巴结重量、Ｂ２２０＋ （ＣＤ４５Ｒ） 亚群淋巴细胞百分数等指
标。采用ＳＰＳＳ１１．５分析软件,对数据型指标进行方差分析,并对有差异的个体再行ＬＳＤ 两两比较,并根
据刺激指数对受试物致敏性大小进行分级。结果　与溶剂对照比较中高剂量的ＳＬＳ和ＫＯＨ 均可引起小鼠
耳缘厚度增加（犘＜０．０１）。可判定ＳＬＳ、ＫＯＨ 对皮肤有刺激性。ＤＮＣＢ、ＨＣＡ 各剂量组和２ ＡＰＣ 高剂量
组刺激指数均大于３,可以判断该３种化学物为皮肤致敏物。根据ＳＩ计算ＥＣ３的值,对致敏物进行分类：
ＤＮＣＢ （０．１９６）为强致敏物,ＨＣＡ （１．５５６） 和２ ＡＰＣ （３．１５６） 为中等致敏物。结论　应用流式细胞术
（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ）检测Ｂ２２０＋ （ＣＤ４５Ｒ）亚群淋巴细胞百分数作为致敏性观察指标的改良小鼠淋巴
结实验,结合耳缘厚度检测可实现同时评价化学物的皮肤致敏性和刺激性。
关键词：局部淋巴结试验;小鼠;致敏性;刺激性;流式细胞术
中图分类号：Ｒ１１４;Ｒ９９４．６　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０５ ０４７７ ０５     

维生素Ｄ 对稳定期慢性阻塞性肺疾病患者肺泡灌 洗液中白介素因子、肿瘤坏死因子 α的影响

摘要：目的　研究慢性阻塞性肺疾病（ｃｈｒｏｎｉｃｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅｐｕｌｍｏｎａｒｙｄｉｓｅａｓｅｓ,ＣＯＰＤ） 稳定期患者服用不 同剂量的维生素Ｄ 对患者肺泡灌洗液白细胞介素６、８、１７ （ＩＬ ６、ＩＬ ８、ＩＬ １７）、肿瘤坏死因子 α （ＴＮＦ α）的影响及其对肺功能的影响。方法　选取ＣＯＰＤ 稳定期患者１００ 例（ＣＯＰＤ 组）,分为Ａ、Ｂ 两 组,每组５０例,同期门诊体检无异常的中老年健康体检者５０ 例为对照（对照组）。以酶联免疫吸附法 （ＥＬＩＳＡ）检测治疗前后肺泡灌洗液ＩＬ ６、ＩＬ ８、ＩＬ １７、ＴＮＦ α水平,肺功能的变化。使用ＳＰＳＳ１８．０软 件,采用χ ２ 检验和狋检验进行数据处理。结果　治疗前, 试验组肺泡灌洗液中ＩＬ ６、ＩＬ ８、ＩＬ １７、 ＴＮＦ α高于对照组,差异有统计学意义（犘＜０．０１）。试验组Ａ 和试验组Ｂ,治疗后肺泡灌洗液中ＩＬ ６、 ＩＬ ８、ＩＬ １７、ＴＮＦ α明显低于治疗前,差异有统计学意义（犘＜０．０１）,对照组治疗前后ＩＬ ６、ＩＬ ８、 ＩＬ １７、ＴＮＦ α差异无统计学意义（犘＞０．０５）。同时,试验组Ａ 与试验组Ｂ 比较,治疗后肺泡灌洗液中 ＩＬ ６、ＩＬ ８、ＩＬ １７、ＴＮＦ α差异无统计学意义（犘＞０．０５）。试验组Ａ 和试验组Ｂ治疗前后第１秒用力呼 气空积（ＦＥＶ１）、用力肺活量（ＦＶＣ）、ＦＶＣ 相比,差异有统计学意义（犘＜０．０５）,对照组治疗前后肺功 能ＦＥＶ１／ＦＶＣ、ＦＶＣ 差异无统计学意义（犘＞０．０５）。结论　ＣＯＰＤ 稳定期患者的气道仍然存在慢性炎症, 维生素Ｄ 能通过降低稳定期ＣＯＰＤ 患者气道中的炎症因子ＩＬ ６、ＩＬ ８、ＩＬ １７ 和ＴＮＦ α等起到抗炎作用, 从而延缓ＣＯＰＤ 患者的肺功能下降。 关键词：慢性阻塞性肺疾病;维生素Ｄ;白细胞介素６;白细胞介素８;白细胞介素１７;肿瘤坏死因子 α; 肺功能 中图分类号：Ｒ３７　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１６）１１ ０８１７ ０４     

结核分枝杆菌Ｈ３７Ｒａ感染小鼠模型建立及其 对Ｂ细胞发育分化特征的实验研究

摘要：目的　建立减毒结核分枝杆菌Ｈ３７Ｒａ感染ＢＡＬＢ／ｃ小鼠模型并探讨Ｈ３７Ｒａ感染对小鼠Ｂ 淋巴细胞 分化发育的影响。方法　将２４只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为感染组和对照组，感染组尾静脉注射Ｈ３７Ｒａ菌液 １０６ ＣＦＵ／０．２ｍｌ，对照组注射等量生理盐水，感染４周及８周分别取小鼠的肝脏、肺脏及肾脏组织，切片 ＨＥ 染色，组织匀浆液接种罗氏培养基培养； 取小鼠骨髓细胞和脾脏细胞经荧光抗体染色， 采用 ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ分析感染早期及晚期小鼠的Ｂ淋巴细胞表型。结果　感染组小鼠肝脏、肺脏及肾脏肿大，培 养后均有Ｈ３７Ｒａ菌株生长。感染组与对照组比较，骨髓总Ｂ 淋巴细胞、脾脏总Ｂ 淋巴细胞、未成熟Ｂ 细 胞比例低于对照组，差异有统计学意义（均犘＜０．０５）；感染组骨髓成熟Ｂ淋巴细胞、脾脏成熟Ｂ淋巴细胞 比例高于对照组，差异有统计学意义（均犘＜０．０５）；感染组８周骨髓成熟Ｂ淋巴细胞、脾脏成熟Ｂ淋巴细 胞较感染组４周时增多（均犘＜０．０５）。结论　本研究成功建立了Ｈ３７Ｒａ感染ＢＡＬＢ／ｃ鼠模型； 小鼠被 Ｈ３７Ｒａ感染后影响了Ｂ淋巴细胞的分化发育，促使Ｂ 淋巴细胞向成熟阶段分化，为机体抵御Ｈ３７Ｒａ感染 奠定了基础。 关键词：结核；分枝杆菌；小鼠模型；Ｂ淋巴细胞；发育分化 中图分类号：Ｒ３３２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１９）０１ ００５８ ０５     

镉对大鼠睾丸间质细胞脂质过氧化的影响

目的观察镉对离体睾丸间质细胞的毒性作用。方法测定不同ＣｄＣｌ２染毒浓度下（含镉０、１０、２０和４０μｍｏｌ／Ｌ）间质细胞的脂质过氧化水平。结果染毒２４小时后，染毒组的细胞存活率显著低于对照组（Ｐ＜０．０１），且存在剂量－效应关系；随染毒浓度的增高，丙二醛（ＭＤＡ）含量和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力显著增高（Ｐ＜０．０５），而超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力则显著下降（Ｐ＜０．０１）。相关分析结果显示：ＳＯＤ与ＭＤＡ呈负相关、与ＧＳＨ－Ｐｘ呈显著负相关（ｒ＝－０．４３３９，Ｐ＜０．０５）；ＭＤＡ与ＧＳＨ－Ｐｘ呈显著正相关（ｒ＝０．４３２９，Ｐ＜０．０５），表明镉可使睾丸间质细胞的脂质过氧化作用增强、抗氧化能力减弱。结论镉对睾丸间质细胞具有直接毒性作用。     

抗着丝点蛋白Ｂ抗体阳性的原发性干燥 综合征的实验室特征分析

摘要：目的　分析原发性干燥综合征（ｐｒｉｍａｒｙＳｊｇｒｅｎ′ｓｓｙｎｄｒｏｍｅ,ｐＳＳ） 抗着丝点蛋白Ｂ （ＣＥＮＰＢ）, ＣＥＮＰＢ抗体阳性与抗ＣＥＮＰＢ抗体阴性的ｐＳＳ病例实验室检查特点,为ｐＳＳ的诊治提供更好的帮助。方 法　选取２０１３—２０１７ 年在北京大学口腔医院就诊的２９８ 例ｐＳＳ 患者的临床和实验室检查资料,分为抗 ＣＥＮＰＢ抗体阳性组（８７例）和抗ＣＥＮＰＢ抗体阴性组（２１１例） 进行回顾性分析。结果　抗ＣＥＮＰＢ 抗 体阳性的ｐＳＳ患者发病年龄大于阴性组（６４．２０±１０．６７）岁狏狊（５５．３５±１３．７２）岁,差异有统计学意义（狋 ＝５．９６４,犘＜０．０１）。血清ＡＬＰ （９５．３２±５６．７８）Ｕ／Ｌ狏狊（７４．１６±２２．７８）Ｕ／Ｌ、ＧＧＴ （７４．０５±１５７．３３） Ｕ／Ｌ狏狊（２７．４３±４０．９８）Ｕ／Ｌ 和ＩｇＭ （２．０４±１．８５）ｇ／Ｌ狏狊（１．５０±１．１７）ｇ／Ｌ 水平高于阴性组,ＡＭＡ Ｍ２的检出率较高１６．０９％ 狏狊８．０６％, 差异均有统计学意义（ＡＬＰ：狋＝３．２６２,犘＜０．０５;ＧＧＴ：狋＝ ２．６４５,犘＜０．０５;ＩｇＭ：狋＝２．５１５,犘＜０．０５;ＡＭＡ Ｍ２：χ ２＝４．２７,犘＜０．０５）。结论　抗ＣＥＮＰＢ抗体阳 性的ｐＳＳ患者实验室检查特点与抗ＣＥＮＰＢ抗体阴性患者有差异,部分患者肝脏受累明显,可能是ｐＳＳ中 的一个类型。 关键词：抗着丝点蛋白Ｂ;干燥综合征;ＡＭＡ Ｍ２;自身抗体;实验室检测 中图分类号：Ｒ４４６．６　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１８）０３ ０２３４ ０４