健脾补肾、和解泄浊法抑制肾间质纤维化的实验研究

目的 观察补肾排毒合剂对单侧输尿管梗阻（UUO）后大鼠肾间质α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）表达的影响及对肾间质纤维化的保护作用。方法 采用UUO诱导肾间质纤维化的动物模型，将48只Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（UUO）和补肾排毒合剂治疗组（REM），每组分别于造模后3、10、20、30d各处死4只，取左肾组织行HE染色，动态观察肾脏病理学变化，评定各组肾小管间质损害程度，以免疫组化方法测定肾组织中α—SMA、Col Ⅳ。结果 与UUO组比较，REM组大鼠肾间质病变程度明显减轻，α-SMA、Col Ⅳ在肾间质中的表达也有明显降低。结论 补肾排毒合剂可通过降低α—SMA、Col Ⅳ的表达，减少肾间质细胞外基质合成，延缓肾间质纤维化的进展。     

苦楂合剂对大鼠梗阻性肾间质纤维化的保护作用

目的:探讨中药复方苦楂合剂对梗阻性大鼠肾间质纤维化的影响。方法:40只雄性SD大鼠,随机分为假手术组,模型组,洛汀新组,中药复方大剂量组和中药复方小剂量组。以单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型。术后第14d取术侧肾组织做HE、Masson染色及TGF-1β、-αSMA和Ⅲ型胶原蛋白免疫组化检测并运用图像分析系统作半定量分析。结果:苦楂合剂可以显著改善梗阻侧肾组织病理变化,下调TGF-1β表达,减少-αSMA及Ⅲ型胶原沉积。结论:苦楂合剂对梗阻性大鼠肾间质纤维化具有保护作用。     

补肾活血方对肾间质纤维化大鼠肾组织中血小板衍生生长因子蛋白表达的影响

目的:观察补肾活血方对实验大鼠肾间质纤维化的保护作用并探讨其作用机制。方法:实验采用单侧输尿管梗阻大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、洛汀新组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组,观察了梗阻侧肾脏组织形态学改变,并分别于单侧输尿管梗阻术后第3、7、14、21、28d采用法,观察造模大鼠肾组织中血小板衍生生长因子(PDGF-BB)蛋白表达变化。结果:造模各组与假手术组相比均呈不同程度的病理损害,肾组织PDGF-BB蛋白表达3d后开始增加,随时间延长,PDGF-BB蛋白表达逐渐增加。与模型组相比,各给药组大鼠肾功能得以改善,肾组织PDGF-BB蛋白的表达有所降低(P<0.05或P<0.01)。结论:补肾活血方可以降低肾组织中PDGF-BB蛋白的表达,防治肾间质纤维化。     

“清化固肾排毒颗粒”对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织Wnt4和TGF-β1表达的影响

目的:观察清化固肾排毒颗粒对肾间质纤维化大鼠肾组织Wnt4和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,从而探讨其对肾间质纤维化的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、洛丁新组及清化固肾排毒方高、中、低剂量组,除假手术组外,其余各组大鼠均采用单侧输尿管结扎手术方法(UUO)建立大鼠肾间质纤维化模型,术后各组分别予相应药物或生理盐水灌胃,每日1次。给药第7、14、21日后,各组大鼠禁食不禁水1d,处死,取手术侧肾组织做病理检测,Masson染色观察其病理变化,免疫组织化学染色检测Wnt4及TGF-β1在肾间质的阳性染色表达。结果:经Masson染色后,模型组与各给药组大鼠肾组织胶原纤维蓝染部分较假手术组明显增多,肾纤维化程度显著加重;与模型组比较,清化固肾排毒方各剂量组和洛丁新组大鼠肾组织胶原纤维蓝染部分明显减少,肾纤维化程度相对减轻。免疫组化结果显示,清化固肾排毒方各剂量组和洛丁新组大鼠肾组织Wnt4及TGF-β1阳性表达显著低于模型组(P0.05)。结论:清化固肾排毒颗粒能有效改善肾间质纤维化模型大鼠肾纤维化程度,其可能通过下调Wnt4、TGF-β1改善肾功能,从而达到改善肾纤维化的作用。     

清化固肾排毒方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织Notch1和Jagged1表达的影响

目的观察清化固肾排毒方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织Notch1和Jagged1表达的影响,探讨其抗肾纤维化的作用机制。方法 72只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组、洛丁新组及清化固肾排毒方组。除假手术组外,其余各组大鼠均采用单侧输尿管结扎手术方法(UUO)建立肾纤维化梗阻大鼠模型,术后各组分别予相应药物或0.9%Na Cl溶液灌胃,每日1次。第7、14、21 d后,各组大鼠禁食不禁水1日,处死,取UUO肾组织做病理检测,行Masson染色观察其病理变化,采用免疫组织化学染色方法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测Notch1、Jagged1蛋白及mRNA的表达情况。结果随着输尿管梗阻时间延长,肾小管间质纤维化程度逐渐加重。经Masson染色后,与假手术组比较,模型组肾纤维化指数差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,清化固肾排毒方组和洛丁新组大鼠肾纤维化程度相对减轻,差异有统计学意义(P0.05)。免疫组化和PCR结果显示,清化固肾排毒方组和洛丁新组大鼠肾组织Notch1和Jagged1表达显著低于模型组(P0.05)。清化固肾排毒方组与洛丁新组组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论清化固肾排毒方可能通过下调Notch1和Jagged1来抑制Notch信号转导通路,发挥改善肾间质纤维化和保护肾脏的作用。     

清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1和α一SMA表达的影响

目的：观察清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1） 和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响,探讨其抗肾纤维化的作用机制。方法：72只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、洛丁新组及清化固肾排毒颗粒组,除假手术组外,其余各组大鼠均采用单侧输尿管结扎手术方法（UUO）建立肾纤维化梗阻大鼠模型,术后各组分别予相应药物或生理盐水灌胃,每天1次。第7、14、21天,各组大鼠禁食不禁水1天,处死,取肾组织做病理检测,HE染色观察其病理变化,免疫组织化学染色检测TGF-β1和α-SMA在肾间质的阳性染色表达。结果：与假手术组比较,干预第7、14、21天,模型组、洛丁新组、清化固肾排毒颗粒组大鼠肾小管间质损伤指数显著增加,肾组织TGF-β1和α-SMA的表达均明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。与模型组比较,干预第7、14、21天,洛丁新组和清化固肾排毒颗粒组大鼠肾小管间质损伤指数明显减轻,肾组织TGF-β1和α-SMA的表达均明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：清化固肾排毒颗粒可能通过下调TGF-β1和α-SMA的表达来抑制上皮细胞间充质转化和细胞外基质的过度积聚,实现改善肾间质纤维化的作用。     

清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1和α-SMA表达的影响

目的:观察清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨其抗肾纤维化的作用机制。方法:72只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、洛丁新组及清化固肾排毒颗粒组,除假手术组外,其余各组大鼠均采用单侧输尿管结扎手术方法 (UUO)建立肾纤维化梗阻大鼠模型,术后各组分别予相应药物或生理盐水灌胃,每天1次。第7、14、21天,各组大鼠禁食不禁水1天,处死,取肾组织做病理检测,HE染色观察其病理变化,免疫组织化学染色检测TGF-β1和α-SMA在肾间质的阳性染色表达。结果:与假手术组比较,干预第7、14、21天,模型组、洛丁新组、清化固肾排毒颗粒组大鼠肾小管间质损伤指数显著增加,肾组织TGF-β1和α-SMA的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,干预第7、14、21天,洛丁新组和清化固肾排毒颗粒组大鼠肾小管间质损伤指数明显减轻,肾组织TGF-β1和α-SMA的表达均明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:清化固肾排毒颗粒可能通过下调TGF-β1和α-SMA的表达来抑制上皮细胞间充质转化和细胞外基质的过度积聚,实现改善肾间质纤维化的作用。     

清化固肾排毒颗粒对肾纤维化大鼠Wnt通路Wnt1和β-catenin表达的影响

目的观察清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠Wnt/β-catenin信号通路中Wnt1、β连环蛋白(β-catenin)表达的影响,从而探讨清化固肾排毒颗粒对肾间质纤维化的作用机制。方法 108只SPF级SD大鼠随机分为假手术组和模型组,清化固肾排毒颗粒高、中、低剂量(3.00、1.50、0.75 g/kg)组,洛丁新(1.60 mg/kg)组,每组18只;除假手术组外,各组大鼠均以结扎左侧输尿管制备单侧输尿管梗阻肾纤维化模型。各组分别于造模第7、14、21天时随机处死6只大鼠,采血,检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(SCr)水平;取手术侧肾脏组织进行相关病理检测,分别采用HE染色和Masson染色评价肾小管间质纤维化损伤程度,免疫组织化学染色检测肾脏组织Wnt1和β-catenin的表达情况。结果与假手术组比较,各造模组大鼠血清SCr、BUN水平升高(P0.05),间质纤维化程度加重(P0.05),肾组织β-catenin表达明显增多(P0.05),随着输尿管梗阻时间延长,各指标程度加重;与模型组比较,清化固肾排毒颗粒高、中、低剂量组和洛丁新组大鼠血清SCr、BUN水平下降(P0.05),间质纤维化程度有所缓解(P0.05),肾组织β-catenin表达降低(P0.05)。免疫组化结果显示:与假手术组比较,各造模组大鼠肾小管上皮细胞内Wnt1、β-catenin高表达(P0.05),在梗阻后第7天Wnt1表达量最高(P0.05),随后降低;与模型组比较,清化固肾排毒颗粒各剂量组、洛丁新组大鼠Wnt1、β-catenin表达降低(P0.05)。结论清化固肾排毒颗粒可以改善肾纤维化的发生发展,其作用机制可能是通过抑制Wnt1、β-catenin的表达,起到保护肾脏的作用。     

温莪术对大鼠肾间质纤维化的保护作用及其机制研究

目的:研究温莪术油对单侧输尿管(Unilateral Ureteral Obstruction,UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用及其机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组,莪术组和氯沙坦组。对模型组和治疗组行单侧输尿管结扎术。术后14 d处死大鼠,留取梗阻侧肾组织观察病理损害和间质纤维化程度,免疫组化检测TGF-β1、CTGF在肾组织中的表达。结果:模型组大鼠肾间质纤维化程度最明显,药物干预后肾间质纤维化程度减轻(P<0.05)。免疫组化结果表明模型组大鼠TGF-β1、CTGF表达明显增加;药物干预后TGF-β1、CTGF表达明显低于模型组(P<0.05)。温莪术组与氯沙坦组各指标比较差异均无统计学意义。结论:温莪术可能是通过减少TGF-β1的表达来抑制CTGF的分泌,进而减轻由此导致的肾间质纤维化的损伤。     

补肾活血方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中HGFmRNA表达变化的影响

目的：建立肾间质纤维化大鼠模型，动态观察模型大鼠肾功能、肾组织中HGFmRNA的表达变化及补肾活血方对其影响，探讨补肾活血方治疗慢性肾功能衰竭的可能作用机制。方法：将大鼠随机分为假手术组、模型组、洛汀新组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组，除假手术组外其余大鼠采用单侧输尿管梗阻的方法建立肾间质纤维化大鼠模型；分别于UUO术后3、7、14、21、28d观察造模大鼠血肌酐、尿素氮的动态变化；采用RT-PCR法，观察造模大鼠肾组织中肝细胞生长因子（HGF）mRNA的表达变化及补肾活血方对其影响。结果：与假手术组比较，造模大鼠血清肌酐、尿素氮浓度呈进行性增高，P〈0．05或P〈0．01；HGFmRNA表达于UUO术后第3天开始增加，于第14天达高峰，P〈0．05或P〈0.01，随后随时间延长表达逐渐渐弱。与模型组比较，各给药组大鼠肾功能改善，P〈0．05或P〈0．01；各时间点HGFmRNA的表达呈不同程度增加，P〈0．05或P〈0．01。结论：补肾活血方可以改善肾间质纤维化大鼠肾功能；可以提高肾组织中HGFmRNA的表达，防治肾间质纤维化。     

补肾排毒合剂对瘦素及其受体在慢性肾衰大鼠脂肪肾组织表达的影响

目的:探讨补肾排毒合剂改善慢性肾衰营养不良的作用机理.方法:60例大鼠分为正常对照组、慢性肾衰组和肾衰补肾排毒合剂治疗组,并取大鼠脂肪、肾组织,采用免疫组化技术,检测瘦素(Leptin)及其受体(Ob-R)的蛋白表达.结果:慢性肾衰后脂肪组织Leptin表达增强;肾脏Ob-R的表达降低;经补肾排毒合剂治疗后,肾脏Ob-R的表达有所恢复.结论:补肾排毒合剂有可能通过调节肾脏Ob-R活性而改善慢性肾衰营养不良.     

真武汤对肾间质纤维化大鼠ILK信号通路影响的实验研究

目的：探讨真武汤对肾间质纤维化的治疗作用及机制。方法：将大鼠随机分为模型组、假手术组、尿毒清对照组以及真武汤低、中、高剂量组;采用单侧输尿管结扎的方法建立大鼠肾间质纤维化模型,分别在术后2周、3周和4周前一天进行大鼠股动脉取血,分离血清,采用ELISA法检测Ang-Ⅱ和ILK蛋白表达情况。结果：真武汤能够降低单侧输尿管结扎模型大鼠血清中Ang-Ⅱ和ILK蛋白含量,以中剂量组合量最低,与尿毒清组的含量相当。结论：真武汤能够减轻肾脏病理损害,降低肾小管的损害,抗肾间质纤维化,其作用机制可能是通过抑制Ang-Ⅱ和ILK蛋白的表达,抑制了肾间质纤维化的进展。     

肾炎防衰液对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏保护作用的机理研究

目的:研究单侧输尿管梗阻导致肾间质纤维化的发生机理及肾炎防衰液对其治疗作用的机理.方法:采用单侧输尿管梗阻(UUO)模型,术后用肾炎防衰液治疗4周,然后观察大鼠肾组织的病理改变,应用HE,Mallory染色观察肾组织的生理病理以及肾间质胶原的生成,用免疫组织化学方法,检测转化生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的在间质表达,以探讨纤维化的发生机理和药物的作用机理.结果模型组肾间质胶原、TGF-β1和α-SMA的表达增加,阳性药物苯那普利组和肾炎防衰液治疗组与模型组相比有显著差异(P<0 05),表现为胶原、TGF-β1、α-SMA的表达下调.结论:肾炎防衰液可能通过抑制转化生长因子β1的生成减缓了胶原的过度表达,延缓了纤维化的进程,从而保护肾脏的功能.     

参附注射液对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏肝细胞生长因子及骨形态发生蛋白-7表达的影响

目的探讨单侧输尿管梗阻后大鼠肾间质纤维化发生过程中肝细胞生长因子（HGF）和骨形态发生蛋白-7（BMP-7）的表达以及参附注射液对其的影响。方法采用单侧输尿管结扎（UUO）制造梗阻性肾病模型,将56只大鼠随机分为假手术组、手术组（UUO）和治疗组（UUO＋参附注射液处理）,术后第7、14日观察肾组织病理改变,应用免疫组织化学方法检测肾组织HGF和BMP-7的表达。结果（1）与假手术组相比,手术组肾间质明显纤维化,HGF的表达在术后第7日明显增加,第14日较第7日减弱;与手术组相比,治疗组肾间质纤维化明显减轻,而且HGF的表达在术后第7日明显上调,第14日较第7日上调更明显,差异显著。（2）与假手术组相比,手术组肾间质BMP-7的表达在术后第7、14日逐渐减弱;与手术组相比,治疗组BMP-7的表达在术后第14日明显上调,差异显著。结论参附注射液可以上调肾组织HGF和BMP-7的表达,减轻肾小管-间质纤维化,发挥肾保护作用。     

肾衰泄浊汤对肾间质纤维化小鼠HGF、TGF β1的调节作用

目的:观察中药复方肾衰泄浊汤对肾间质纤维化小鼠肾组织肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子β1(TGFβ1)蛋白表达的调节作用,探讨其抗肾间质纤维化的机制。方法:将60只小鼠随机分为假手术组,模型组,中药低、高剂量组,苯那普利组,采用单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,术后7天观察梗阻肾组织病理改变,用免疫组化方法检测肾组织HGF、TGFβ1蛋白,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及FN的表达。结果:中药高剂量组和苯那普利组较模型组小鼠肾组织HGF蛋白表达增强,TGFβ1蛋白表达减弱,而Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原、FN生成减少,两组无显著差异,而HGF表达与TGFβ1表达呈明显负相关。结论:肾衰泄浊汤可能是通过诱导HGF蛋白表达,抑制TGFβ1表达,抑制Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及FN等ECM的过度沉积,加强肾保护作用,对抗肾间质纤维化。     

蛭倍煎治疗肾间质纤维化的实验研究

目的:探讨蛭倍煎(水蛭、五倍子)抑制肾纤维化的作用及可能机理.方法:采用大鼠单侧输尿管(UUO)梗阻术诱导肾间质纤维化动物模型.然后分为假手术组、模型组、中药组、西药组.中、西药组灌胃两周后,比较各组肾组织中α-SMA、FN的表达水平及Masson染色后肾间质纤维化的程度.结果:中、西药组与假手术组比较,药物组α-SMA、FN的表达水平增加及Masson染色后出现肾间质灶性纤维化(P＜0.05).中、西药组与模型组比较,药物组α-SMA、FN的表达水平明显下降及肾间质灶性纤维化减轻(P＜0.05).中、西药组间比较无显著差异(P＞0.05).结论:蛭倍煎能改善肾间质纤维化,可能是通过抑制肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞的转化及降低细胞外基质的途径.     

和解聚散方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织蛋白激酶C表达的影响

目的 观察和解聚散方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠的肾组织中蛋白激酶C-βⅡ(PKC-βⅡ)表达的影响,初步探讨其抗肾间质纤维化的作用机制.方法 采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型,将雄性SD大鼠40只随机分为假手术组、模型组、洛丁新组、和解聚散方组,每组10只;造模后第2日开始灌胃,洛丁新组按[ 1.0mg/(kg·d)],和解聚散方组按[9.8g/(kg·d)],假手术组、模型组灌胃生理盐水.于造模后7d取梗阻侧肾脏行HE、Masson染色,观察肾组织病理结构变化;采用免疫组化方法检测肾组织PKC-βⅡ的表达.结果 UUO模型组中PKC-βⅡ在术后7d表达明显高于假手术组,两个治疗组的表达水平明显低于UUO模型组.结论 和解聚散方可以降低肾组织中PKC-βⅡ的表达,这可能是和解聚散方抗肾纤维化的作用机制之一.     

补肾排毒合剂对慢性肾衰竭大鼠瘦素--神经内分泌轴的影响

目的:探讨补肾排毒合剂改善慢性肾衰竭营养不良的作用机理.方法:60只大鼠分为正常对照组、慢性肾衰竭组和肾衰竭补肾排毒合剂治疗组,并取大鼠脂肪、肾、脑组织,采用免疫组化技术,检测瘦素(Leptin)、瘦素受体(Ob-R)和神经肽Y(NPY)的蛋白表达.结果:慢性肾衰后脂肪组织Leptin蛋白表达增强;肾脏Ob-R的表达降低;下丘脑组织Ob-R表达增强,NPY的表达降低.慢性肾衰大鼠用补肾排毒合剂灌胃后,对脂肪组织Leptin的表达无明显影响;肾组织Ob-R表达明显增强;下丘脑组织Ob-R表达减弱,NPY的表达增强.结论:慢性肾功能衰竭大鼠存在瘦素-神经内分泌轴异常,补肾排毒合剂可能通过调节Leptin、Ob-R及NPY的活性而改善慢性肾衰竭营养不良.     

肝细胞生长因子在肾间质纤维化中的表达及氯沙埠干预研究

目的研究肾间质纤维化中HGF的作用及氯沙坦对其的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组、氯沙坦组（25mg&#183;kg^-1&#183;d^-1），行左侧输尿管结扎术，建立单侧输尿管梗阻模型，假手术组只游离输尿管但不结扎。分别于术后第3、6、9、14天取大鼠肾组织行HE染色、免疫组织化学染色、反转录PCR检测HGF mRNA，结果应用图像分析系统进行分析。结果氯沙坦组大鼠与同时期模型组比较，肾组织HGF及HGF mRNA的表达量有显著升高（P〈0．01），TGF-β的表达有显著降低（P〈0．01），肾组织病理形态学改变明显减轻。结论HGF在肾间质纤维化中发挥着重要作用，氯沙坦能够抑制单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1的表达并上调HGF的表达发挥肾脏保护作用。     

红花黄色素对实验性肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的:探讨红花黄色素对实验性肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法:选取45只雄性SD大鼠作为探讨对象,随机分为单侧输尿管梗阻模型组(A组)、假手术组(B组)和红花黄色素联合单侧输尿管梗阻治疗组(C组),红花黄色素剂量为每天5mg/kg,在大鼠造模之前1d予以腹腔注射,所有大鼠在术后10d处死,并比较三组大鼠肾间质纤维化和肾小管上皮细胞凋亡情况。结果:A组和C组大鼠可见显著肾间质纤维化变化,并发现凋亡细胞;与A组比较,C组大鼠肾间质纤维化改变程度显著减轻(P0.05)。结论:采用红花黄色素腹腔注射疗法有助于保护大鼠肾间质纤维化,该作用机制为对肾小管细胞凋亡。