奥曲肽对胆管癌细胞中白细胞介素-6诱导增殖的抑制作用

目的　探讨两株人胆管癌细胞系中自分泌性白细胞介素 6(IL 6)的作用以及生长抑素类似物奥曲肽对其的影响。方法　以酶联免疫吸附试验测定胆管癌细胞系IL 6的分泌 ,IL 6受体亚单位 gp80和 gp1 30mRNA的表达及表达水平变化以逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)检测。体外IL 6对胆管癌细胞增殖的作用应用噻唑蓝 (MTT)比色法检测。结果　无血清培养条件下胆管癌细胞株NEC和SSP 2 5可以分泌IL 6 ,分别为 (2 67.0± 2 6 .3)ng/L和 (775 .5± 91 .0 )ng/L ,奥曲肽 (OCT ,1mg/L)作用 2 4h可以抑制这两种胆管癌IL 6的分泌 ,分别下降至 (1 86 .5± 2 9.7)ng/L和 (31 8.6± 1 1 5 .0 )ng/L(P <0 .0 1 )。两种胆管癌细胞株皆可表达IL 6的受体亚单位 gp80和gp1 30mRNA ,但计算积分吸光度比值显示奥曲肽对IL 6受体mRNA的表达无影响。IL 6(1 0 μg/L)可以促进胆管癌细胞系NEC和SSP 2 5的增殖 (A值分别为 0 .488± 0 .0 4 8、0 .699± 0 .0 30 ,对照组为 0 .383± 0 .0 2 7、0 .41 3± 0 .0 52 ,P <0 .0 1 ) ,奥曲肽则可以明显抑制IL 6刺激的增殖 (0 .376±0 .0 2 3、0 .441± 0 .0 2 4 ,与IL 6组比较 ,P <0 .0 1 )。结论　胆管癌细胞系NEC和SSP 2 5中存在IL 6自分泌促生长环路 ,奥曲肽可以减少这两种胆管癌细胞分泌IL 6 ,     

乙型肝炎病毒x蛋白对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨乙型肝炎病毒x蛋白 (hepatitisBvirusxprotein ,HBx)在体内外对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将携带HBx基因的表达质粒 pHA HBx转染HepG2细胞 ,通过检测细胞生长曲线、倍增时间和3 H TdR掺入率观察HBx对细胞增殖活性的影响 ;将整合HBx基因的HepG2细胞接种裸鼠 ,建立表达HBx的人肝癌裸鼠模型 ,用阿霉素进行裸鼠腹腔化学药物治疗 ,观察肝癌组织的生长状况 ;用TUNEL方法检测切除的裸鼠癌标本中凋亡细胞的比例。结果转染HBx基因的HepG2细胞倍增时间为 2 8 5h ,对照组为 32 5h ;3 H TdR掺入率 :转染HBx基因组为 (10 2 1± 78)cpm ,对照组为 (85 9± 6 9)cpm ,转染组细胞明显高于对照组细胞 (t =2 5 4 ,P <0 0 1) ;转染HBx基因的细胞在裸鼠体内形成的癌重量为 (3 10± 0 39) g ,对照组癌重量为 (2 6 1± 0 2 8) g ,两组之间差异有显著意义 (t=2 0 3,P <0 0 5 ) ;裸鼠腹腔化学药物治疗后 ,转染组的癌细胞凋亡为 3 5±0 75 ,对照组为 2 2 5± 6 5 ,转染HBx基因的细胞凋亡明显减少 (χ2 =6 6 9,P <0 0 1)。结论HBx可以提高HepG2细胞的增殖活性 ,促进裸鼠体内肝癌生长 ,对阿霉素诱导的肝癌细胞凋亡具有抑制作用。     

胶质瘤细胞放射敏感性与ATM蛋白表达的关系

目的 探讨胶质瘤细胞放射敏感性与ATM蛋白表达关系.方法 采用流式细胞仪检测22例原代培养胶质瘤细胞中ATM蛋白的表达,用噻唑蓝(MTT)比色法检测胶质瘤细胞以60C0 2 Gy放射剂世照射后的存活分数(SF2),探讨ATM蛋白的表达量与胶质瘤放射敏感性的相关性;同时检测其中5例胶质母细胞瘤细胞及U251细胞系经60Co照射前后ATM蛋白表达量,以了解放射对ATM蛋白表达的影响.结果 原代培养的胶质瘤细胞形态多样;SF2平均值为0.417±0.176(0.162.0.735).在胶质瘤Ⅳ级与Ⅱ、Ⅲ级间差异有统计学意义(P<0.05);ATM蛋白表达水平随胶质瘤恶性程度的增高而增加,在高、低级别间差异有统计学意义(P<0.05);直线相关与回归分析显示:ATM蛋白表达水平与SF2呈显著正相关(r=0.857,P<0.05);5例原代培养的胶质母细胞瘤细胞及U251细胞系经照射后ATM蛋白表达水平提高.结论 ATM蛋白的表达水平与胶质瘤放射敏感性密切相关,胶质瘤中存在不同放射敏感性的细胞群,放射治疗应体现个体化原则.     

人胰腺癌细胞株放射敏感性的体外研究

目的通过体外实验探讨人胰腺癌细胞株的放射敏感性。方法培养人胰腺癌细胞株SW1990、Capan-1、AsPC-1、MIAPaCa-2、PANC-1、P3，应用集落形成实验测定胰腺癌细胞在6MVX线不同剂量照射后的存活分数，计算各株细胞的放射生物学参数。结果胰腺癌细胞株MIAPaCa-2对放射治疗最敏感，SF2为0．388，而Capan-1对放射治疗最不敏感，SF2为0．758，MIAPaCa-2与As-PC-1、AsPC-1与SW1990之间的放射敏感性无显著差异，其余各株胰腺癌细胞之间存在显著差异。结论不同胰腺癌细胞株的放射敏感性存在差异。     

非清除性异基因骨髓移植后输注供者淋巴细胞诱导的GVHD和GVL效应

目的　探讨非清除性异基因骨髓移植后输注逐渐增量的异基因供者淋巴细胞 ,是否能在减轻移植物抗宿主病 (GVHD)的同时保留移植物抗白血病效应 (GVL)。方法　L6 15白血病小鼠(H 2 k)为受者 ,于接种白血病细胞后的第 3d接受60 Coγ射线全身照射 ,总剂量 5Gy ,照射当天移植BALB/c小鼠 (H 2 d)的骨髓细胞 (3× 10 7个 )和脾细胞 (1× 10 7个 ) ,移植后 2d腹腔注射环磷酰胺 2 0 0mg/kg ,并分别于移植后 14d或 14、2 1、2 8d输注 2× 10 7个和 1× 10 7、2× 10 7、4× 10 7个供鼠脾细胞。结果　未处理的对照组受鼠平均存活时间为 (14 .1± 1.1)d ,均死于白血病 ;移植后未接受供鼠脾细胞组的小鼠平均存活 (2 6 .2± 3.6 )d ,均死于白血病复发 ;移植后 14d接受供鼠脾细胞输注的小鼠平均存活 (2 9.3± 3.7)d ,均死于GVHD ;移植后输注逐渐增量的供鼠脾细胞者 ,平均存活 (5 9.4± 5 .6 )d ,6 0 %的受者存活超过 5 0d ,均未发生GVHD。结论　非清除性异基因骨髓移植后输注逐渐增量的异基因供者淋巴细胞可在减轻GVHD的同时保留抗白血病效应。     

FK506与来氟米特预防异种胰岛移植排斥反应的效果

目的　探讨FK5 0 6、来氟米特 (Lef)应用预防大鼠对小鼠异种胰岛移植排斥反应的效果。方法　将 10 0 0～ 12 0 0个大鼠胰岛移植于化学诱导的糖尿病小鼠肾被膜下 ,实验分为对照组、FK 5 0 6组、Lef组和FK5 0 6+Lef组 ,研究胰岛有功能存活情况 ,并在移植后第 5天行病理组织学观察排斥反应。结果　FK5 0 6( 2和 4mg·kg-1·d-1)、Lef( 5、10、2 0mg·kg-1·d-1)术后用药 10d ,胰岛存活时间分别为 ( 8.9± 2 .1)、( 12 .5± 0 .7)、( 10 .8± 1.9)、( 15 .8± 2 .4)、( 18.8± 2 .2 )d ,较对照组( 5 .9± 1.2 )d明显延长 (P <0 .0 1)。FK5 0 6+Lef组移植物存活时间 ( 2 1.8± 1.2 )d ,较单纯用药组效果更好 (P <0 .0 1)。病理组织学显示Lef组与FK5 0 6+Lef组细胞浸润明显减少 ,有更多的完整胰岛存留。结论　FK5 0 6与Lef对异种胰岛移植有抗排斥作用 ,且两药联合应用有协同作用。     

ERCP术后胰腺炎的防治

目的　探讨内窥镜逆行胰胆管造影 (ERCP)术后胰腺炎乌司他丁 (Ulinastatin,UTI)的防治作用。方法　对1 998年 1月～ 2 0 0 3年 3月我院住院行 ERCP术 1 6 4例病人作回顾性分析总结。结果　 1 6 4例行 ERCP术病人随机分为三组 :对照组 6 2例 ,乌司他丁组 6 8例 ,生长抑素组 34例。1 34例插管成功 ,成功率 82 .0 % ,其中胆管、胰管均显影 6 6例 ,胆管显影 4 6例 ,胰管显影 5 2例 ,在胆管显影的 1 1 2例中 ,70例总胆管有扩张 ,直径≥ 1 0 m m,4 2例总胆直径正常 <1 0 m m。预防用药组 ER-CP术后 2 h血清淀粉酶 (乌司他丁 2 2 6 .5± 2 6 2 .9U/ L,生长抑素 2 6 4 .0± 2 0 4 .5 U/ L)、2 4 h血清淀粉酶 (乌司他丁 2 92 .4±31 9.6 U/ L,生长抑素 2 82 .7± 2 93.8U/ L)明显低于对照组组 (5 2 2 .2± 4 96 .2 U/ L,5 0 6 .1± 5 5 9.8U/ L,P<0 .0 1 ) ;乌司他丁组、生长抑素组 ERCP术后 2 h、2 4 h血清淀粉酶水平亦明显高于术前水平 (P<0 .0 5 )。结论　乌司他丁通过减少胰液的分泌量和降低胰酶的浓度 ,能够有效防治 ERCP术后胰腺炎的发生     

反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞bcl-2基因的表达并增强凋亡的研究

目的　观察反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞bcl 2基因的表达并诱导凋亡和增强化疗的敏感性。方法　应用反义硫代寡核苷酸 (bcl 2SON)和顺铂共同处理结肠癌细胞系SW62 0 ,通过流式细胞仪观察其bcl 2蛋白表达的变化 ,并通过原位末端标记法 (TUNEL)染色和流式细胞仪检测细胞凋亡指数。结果　用bcl 2SON处理过的SW62 0细胞其bcl 2蛋白平均荧光强度 (MFI)为(40 .3± 8.7) %与空白对照及随机链对照组相比 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) ,表明导入反义bcl 2后可明显抑制结肠癌细胞的bcl 2蛋白的表达。经bcl 2SON和 1 0mg/L顺铂共同处理的SW62 0细胞凋亡指数为 (64 .7± 8.4) % ,显著高于单纯顺铂处理组的 (2 3 .6± 6 .3) % (n =5 ,P <0 .0 1 )以及单纯bcl 2SON处理组的 (2 7.5± 5 .1 ) % (n =5 ,P <0 .0 1 )。而未经处理的对照组SW62 0细胞凋亡指数则为 (8.5± 1 .2 ) % ,显著低于后两组 (n =5 ,P <0 .0 5)。结论　bcl 2SON可通过抑制结肠癌细胞 (SW 62 0 )bcl 2蛋白的表达 ,诱导其凋亡 ,增强对化疗药物的敏感性     

γ-干扰素加强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抑制胆管癌细胞的作用

目的　探讨肿瘤坏死因子 (TNF)相关凋亡诱导配体 (TRAIL)对人胆管癌的作用及γ 干扰素 (IFN γ)对TRAIL抗瘤活性的影响。方法　应用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪 (FCM ) ,研究TRAIL对人胆管癌细胞的抑制作用及IFN γ对TRAIL抗瘤活性的影响。结果　透射电镜和DNA琼脂糖凝胶电泳可见到典型细胞凋亡特征。FCM分析显示 :浓度为 0、1、10、10 0、10 0 0 μg/L的TRAIL 2 4h引起QBC93 9细胞的凋亡率分别为 (1.66± 0 .73 ) %、(8.83± 0 .5 4) %、(2 2 .3 0± 0 .64 ) %、(4 2 .5 0± 0 .47) %、(4 9.0 6± 0 .72 ) % ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。IFN γ与TRAIL 10 0 μg/L联合应用 ,当IFN γ浓度大于 5 0U /ml或 10 0U /ml时 ,IFN γ作用时间超过 2 4h分别与单用TRAIL组比较 ,明显加强QBC93 9细胞凋亡 (P <0 .0 1)。结论　TRAIL通过诱导胆管癌细胞凋亡而起到抑癌作用 ,IFN γ能加强TRAIL诱导胆管癌细胞的凋亡。     

腹腔镜技术在异位妊娠治疗中的应用价值

目的　评价腹腔镜技术在异位妊娠治疗中的应用价值。　方法　回顾分析我院 1999年 1月 - 2 0 0 1年 12月期间 5 0 9例异位妊娠手术治疗方式的变化 ,选择 2 0 0 1年无低血容量性休克的腹腔镜手术 6 0例与同期开腹手术 5 8例做对照 ,比较 2组的手术时间、术后住院日、体温恢复天数、输液日及手术费用等。　结果　腹腔镜治疗病例 1999年 3例 ,2 0 0 0年 2 3例 ,2 0 0 1年 6 0例 ,后两年比 1999年分别增加13 7%和 39 4 %。腹腔镜组与开腹组的手术时间分别为 (6 6 .3± 2 5 .3)分和 (75 .9± 2 2 .0 )分 (t=- 2 .0 2 ,P=0 .0 3) ;术后发热 (1.5± 1.7)天和 (2 .8± 1.6 )天 (t=- 4 .2 7,P =0 .0 0 ) ;术后住院日 (3.3± 1.9)天和 (5 .1± 1.7)天 (t=- 5 .4 2 ,P =0 .0 0 ) ;住院总费用 (7318.4± 14 4 0 .1)元和 (5 5 6 7.8± 15 6 7.8)元 (t=6 .32 ,P =0 .0 0 )。　结论　腹腔镜手术治疗异位妊娠优于开腹手术。如经济条件允许 ,对异位妊娠的手术可优先选择腹腔镜手术