氨肽酶N在兔肝脏的表达及胆汁中活性的研究

我们通过检测氨肽酶Ｎ(ＡＰＮ)基因和ＡＰＮ蛋白在肝脏的表达及其在胆汁中的活性 ,探讨ＡＰＮ在胆固醇结石发生中所起的作用。一、材料和方法1 .动物模型 :新西兰白兔 ( 30只 ) ,雌雄各半 ,体重 2 .0 0～ 2 .50ｋｇ(北京大学医学部实验动物中心提供 )。普通饲料饲养 1周后 ,随机分为两组 :对照组 ( 1 0只 ) :每日喂普通颗粒饲料 1 0 0 ｇ ;结石组( 2 0只 ) :每日喂饲 1 .2 %的高胆固醇饲料 1 0 0 ｇ并分成 1 0ｄ组和 4周组 ,各 1 0只。实验前 ,动物禁食 1 2ｈ ,禁水 6ｈ ,3%戊巴比妥 ( 30～ 4 0ｍｇ/ｋｇ体重 )耳缘静脉注射麻醉 ,开腹 ,迅速…     

奥曲肽对胆管癌细胞中白细胞介素-6诱导增殖的抑制作用

目的　探讨两株人胆管癌细胞系中自分泌性白细胞介素 6(IL 6)的作用以及生长抑素类似物奥曲肽对其的影响。方法　以酶联免疫吸附试验测定胆管癌细胞系IL 6的分泌 ,IL 6受体亚单位 gp80和 gp1 30mRNA的表达及表达水平变化以逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)检测。体外IL 6对胆管癌细胞增殖的作用应用噻唑蓝 (MTT)比色法检测。结果　无血清培养条件下胆管癌细胞株NEC和SSP 2 5可以分泌IL 6 ,分别为 (2 67.0± 2 6 .3)ng/L和 (775 .5± 91 .0 )ng/L ,奥曲肽 (OCT ,1mg/L)作用 2 4h可以抑制这两种胆管癌IL 6的分泌 ,分别下降至 (1 86 .5± 2 9.7)ng/L和 (31 8.6± 1 1 5 .0 )ng/L(P <0 .0 1 )。两种胆管癌细胞株皆可表达IL 6的受体亚单位 gp80和gp1 30mRNA ,但计算积分吸光度比值显示奥曲肽对IL 6受体mRNA的表达无影响。IL 6(1 0 μg/L)可以促进胆管癌细胞系NEC和SSP 2 5的增殖 (A值分别为 0 .488± 0 .0 4 8、0 .699± 0 .0 30 ,对照组为 0 .383± 0 .0 2 7、0 .41 3± 0 .0 52 ,P <0 .0 1 ) ,奥曲肽则可以明显抑制IL 6刺激的增殖 (0 .376±0 .0 2 3、0 .441± 0 .0 2 4 ,与IL 6组比较 ,P <0 .0 1 )。结论　胆管癌细胞系NEC和SSP 2 5中存在IL 6自分泌促生长环路 ,奥曲肽可以减少这两种胆管癌细胞分泌IL 6 ,     

肝胆管结石肝胆管结石成因研究近况

在以往所了解的肝胆管结石形成与胆道感染、胆红素降解及黏蛋白过度分泌等因素有关的基础上，近年来的研究多集中在上述各因素在分子生物学方面的深入观察。本文主要介绍幽门螺杆菌和黏蛋白研究方面的近况。     

胆汁、胆石中结合胆汁酸高效液相色谱测定法

胆汁酸在胆汁中的重要作用已被人们所认识,其含量分析有助于胆石成因的探讨,同时也可为胆结石病人提供治疗依据。现代化分析手段,如薄层层析法、气相色谱法、高率液相色谱法(HPLC法)等均可用于测定胆汁酸,其中尤以HPLC法具有方法简单、灵敏度高等优点。我们参考国内外文献报道,取其所长建立了用HPLC连用紫外检测器对胆汁,胆石中结合胆汁酸的测定方法,现介绍如下。     

腺病毒介导内皮抑素基因预防大肠癌术后复发的研究

目的：研究腺病毒介导的内皮抑素对大肠癌术后复发的抑制作用。方法：构建内皮抑素的重组体腺病毒，观察转导表达后的生物学活性。建立人结肠癌术后局部复发裸鼠动物模型，分析基因转导后动物外周血内皮抑素水平、局部复发能力以及复发瘤的凋亡。结果：感染上清处理HUVEC细胞后，细胞增殖受到明显抑制。重组腺病毒注射后，动物外周血中内皮抑素水平显著增高，局部复发减少、瘤细胞凋亡增加。结论：内皮抑素重组体腺病毒的静脉注射，产生了内皮抑素基因在体内的长期高水平分泌表达，实现了大肠癌术后局部复发的有效预防。     

胡椒碱抑制兔胆结石形成的作用和机制

目的　观察胡椒碱对新西兰兔胆囊结石形成的预防作用和机制。方法　 (1)动物模型 :新西兰兔 30只 ,随机分成 :对照组 (10只 ) ,喂普通饮食 ;结石组 (10只 ) ,喂含 1 2 g/d胆固醇的成石饮食 4周 ,胡椒碱组 (10只 ) ,同时喂饲含 1 2 g/d胆固醇和 0 0 4 5 g/d的胡椒碱饮食 4周。 (2 )氨肽酶N(APN)表达 :利用RT PCR方法 ,检测肝APNmRNA水平的变化。 (3)APN活性 :用化学法检测。结果　结石组 6只 (6 / 10 )出现胆囊结石 ,9只 (9/ 10 )出现胆固醇结晶 ,胡椒碱组和对照组无结石及结晶出现 ;结石组APNmRNAIOD比值 (对照组 0 6 5± 0 18,结石组 1 0 8± 0 35 ,胡椒碱组 0 87±0 4 4 ) ,APN活性 (对照组 6 1± 2 5 3U/L、结石组 2 3 6 4± 10 36U/L ,胡椒碱组 8 31± 6 4 7U/L)明显高于对照组和胡椒碱组。结论　以上结果表明胡椒碱主要通过降低肝APN的表达及胆汁APN酶的活性 ,抑制APN的促成石作用而预防胆固醇结石的形成。     

结直肠癌术前区域动脉灌注化疗的临床研究

近年来区域化疗对实体肿瘤治疗作用日益受到重视,但对结直肠癌术前区域动脉灌注化疗报告极少。作者对30例结直肠癌患者行术前选择性区域动脉灌注化疗,术后标本组织病理学观察发现,在肿瘤边缘出现明显坏死灶,区别于发生在肿瘤中心的自然坏死。所有病例均发现癌细胞发生核固缩、碎裂、胞浆凝固、坏死,细胞间质水肿、纤维增生、炎性细胞浸润,血管出现内膜增生、血管炎及血栓形成,均以轻到中度变化     

不同食谱诱发地鼠形成两类不同胆石的实验研究

目的探讨两类不同食谱诱发叙利亚金黄地鼠形成胆石情况。方法采用高糖无脂饲料诱发幼年叙利亚金黄地鼠形成胆固醇结石（ＣＨＳ），用低蛋白高纤维素饲料诱发成年叙利亚金黄地鼠形成胆色素结石（ＰＳ）。结果６周后两组动物的成石率分别为７０．１％和８０．０％，死亡率分别为１５％和０，其结石的胆固醇含量分别为９２％±４．７％和１７％±３．８％。结论叙利亚金黄地鼠是研究两类胆石形成的良好实验动物之一。     

创伤后早期神经内分泌改变与应激性高血糖

为观察应激时血糖代谢与神经内分泌改变的关系，探讨胰岛素抵抗的机制和意义。对外科大手术后病人30例，于术毕即刻（AS）、脱离呼吸机后（AW）和术日次晨（NW）分别测定外周血糖和胰岛素（INS）、C－肽（GP）、皮质醇（CDRT）、促肾上腺皮质素（ACTH）、生长激素（GH）、胰高糖素（GL）（以上放免法），肾上腺素（E）和去甲肾上腺素（NE）（高效液相色谱法）水平。结果：术后患者的血糖及CORT、ACTH、E和NE均显著升高，分别为2．3g／L，280．7μg／L、47．6ng／L、324．4ng／L和1511．0ng／L，脱机后逐渐下降，至次展显著降低，分别为1．89g／L、134．4μg／L、7．38ng／L、92．6ng／L和9755ng／L。C－P明显升高并和INS一起逐渐递增，在AS和NM分别为3．59μp／Lvs．5．27μg／L和20．8mU／Lvs．32．7mU／L。GH和GL3个时相均在正常范围。结论：外科术后早期存在应激性高血糖和胰岛素抵抗，血糖水平主要受NE调节，24小时后逐渐复常，胰岛素抵抗的原因在于效应细胞的受体下调，是机体应激时重要的自我保护手段。