罗格列酮对多囊卵巢综合征患者黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物-1和-2表达的影响

目的探讨胰岛素增敏剂罗格列酮对多囊卵巢综合征（PCOS）患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物（IRS）-1、-2表达的影响。方法收集行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗的9例PCOS患者（PCOS组）和12例排卵正常的输卵管性不育患者（对照组）促排卵后卵巢黄素化颗粒细胞行体外培养,并用罗格列酮处理48h,采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blot方法分别测定颗粒细胞IRS-1、-2mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,PCOS组患者颗粒细胞IRS-1的表达升高,IRS-2表达降低（P〈0．05）;罗格列酮可显著降低PCOS患者黄素化颗粒细胞IRS-1的表达（P〈0．05）,增加其IRS-2的表达（P〈0．05）。结论罗格列酮可以通过调整IRS-1／2的表达失衡,改善PCOS卵巢局部胰岛素抵抗。     

人卵巢黄素化颗粒细胞细胞周期蛋白D2的表达与卵巢功能及反应性的相关性研究

目的探讨人卵巢黄素化颗粒细胞细胞周期蛋白D2（cyclin D2）的表达与卵巢功能及超排卵过程中卵巢反应性的相关性。方法收集48例行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）患者的卵巢黄素化颗粒细胞,根据取卵时卵泡发育数不同将卵巢反应性分为高反应组（12例）、中反应组（30例）及低反应组（6例）。采用免疫细胞化学方法检测颗粒细胞膜上eyclin D2及增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测颗粒细胞cyclin D2 mRNA的表达水平;化学发光法测定基础血清卵泡刺激素（FSH）,人绒毛膜促性腺激素（hCG）日E2水平。分析颗粒细胞eyelin D2 mRNA及蛋白的表达与IVF临床各项参数、卵巢反应性的关系以及和颗粒细胞增殖活性PCNA标记指数（PCNA-LI）的相关性。结果（1）黄素化颗粒细胞cyclinD2蛋白表达与年龄、基础FSH水平及促性腺激素（Gn）支数呈负相关（r=-0．547,P〈0．01;r=-0．456,P〈0．05;r=-0．451,P〈0．05）;cyclinD2蛋白表达与获卵数和hCG日E2水平呈正相关（r=0．592,P〈0．01;r=0．626,P〈0．01）;高、中和低反应三组cyclinD2蛋白表达有显著统计学差异（F=4．995,P〈0．05）。（2）黄素化颗粒细胞cyclin D2 mRNA表达与年龄、基础FSH水平呈负相关（r=-0．510,P〈0．05;r=-0．891,P〈O．01）;与获卵数和hCG日E2水平呈正相关（r=0．629,P〈0．01;r=0．524,P〈0．05）;高、中和低反应三组cyclin D2 mRNA的表达有显著统计学差异CF=8．843,P〈0．01）。（3）黄素化颗粒细胞cyclin D2蛋白及mRNA表达与PCNA-LI均呈显著正相关（r=0．696,P〈0．01;r=0．498,P〈0．0S）。结论黄素化颗粒细胞cyclin D2 mRNA及蛋白的表达可反映卵巢储备功能并与卵巢反应性正相关。cyclin D2可能通过调节颗粒细胞的增殖分化参与卵泡的发育。     

脂联素受体在胃癌组织中的表达及其与临床病理的关系

目的 探讨血清脂联素水平、脂联素受体-1( Adipo R1)和脂联素受体-2(Adipo P2)的表达与胃癌患者的临床病理学以及总生存率之间的关系.方法 用Western blot法检测Adipo R1和Adipo R2在胃癌细胞MKN45、TMK-1、NUGC3以及NUGC4的表达,并检测脂联素在体外的抗增殖效应.检测100例胃癌患者的血清脂联素水平,并用免疫化学染色检测Adipo R1和Adipo R2的表达.结果 MKN45和NUGC3细胞表达的Adipo R1水平明显高于NUGC4细胞,而各个细胞中Adipo R2的表达差异无统计学意义.脂联素浓度为10 mg/L时在MKN45和NUGC3细胞中会产生抗增殖效应.血清脂联素水平与临床病理学特征无明显相关,但是Adipo R1阴性表达的患者与Adipo R1阳性表达的患者比较淋巴转移(24/32,P＜0.05)和腹膜扩散会增加明显,差异有统计学意义(9/32,P＜0.05).此外,Adipo R2表达阳性的患者和Adipo R2表达阴性的患者之间只有在病理组织学类型方面差异有统计学意义(P＜0.01).在生存率分析方面,Adipo R1阳性表达组的患者与Adipo R1阴性表达组的患者比较可以延长存活率,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在胃癌中脂联素可以通过Adipo R1抑制细胞增殖.     

塞来昔布对裸鼠结肠癌移植瘤放疗增敏作用的机制研究

为探讨环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对裸鼠结肠癌移植瘤放疗增敏作用的机制,本研究应用人结肠癌SW480细胞建立裸鼠移植瘤模型,并将32只裸鼠随机分为A组（对照组）、B组（塞来昔布组）、C组（放疗组）和D组（塞来昔布＋放疗组）,观察各组裸鼠结肠癌移植瘤的生长情况,并应用免疫组化法检测移植瘤组织中COX-2、8-catenin、血管内皮生长因子（VEGF）、CD34表达,并对CD34阳性血管进行计数,计算微血管密度（MVD）。结果显示,（1）干预30d后,B、C、D组移植瘤瘤体质量及体积均明显小于A组,P〈0．05;而D组移植瘤瘤体质量和体积明显小于B、C组,P〈0．05。（2）免疫组化检测显示,COX-2、β—catenin、VEGF及CD34在各组移植瘤组织中均呈阳性表达。B、c、D组COx-2、p—catenin、VEGF表达水平及MVD均明显低于A组,P〈0．05;而D组各指标明显低于B、c组,P〈0．05。（3）相关性分析显示,COX-2、VEGF、β-catenin及MVD,各指标两两之间均具有显著相关性,P〈O．05。结果表明,塞来昔布可能是通过抑制wnt信号通路来抑制肿瘤新生血管的生成,最终发挥放疗增敏作用。     

溃疡性结肠炎肠黏膜组织PAR-2及COX-2表达及其相关性研究

目的：研究溃疡性结肠炎（UC）患者肠黏膜蛋白酶激活受体2（PAR-2）及环氧合酶2（COX-2）表达情况及在UC发病机制中的作用。方法：UC患者36例,对照组33例,均行内镜检查并活检肠黏膜组织,应用组织病理学及免疫组织化学分析组织中PAR-2及COX-2表达情况。结果：UC患者肠黏膜PAR-2和COX-2表达均高于对照组（P〈0．05）。重度UC组PAR-2及COX-2表达高于中度、轻度及对照组（P〈0．05）;病理I～IV级病变肠黏膜中PAR-2表达均高于对照组（P〈O．05）,Ⅲ～IV级高于I～Ⅱ级（P〈0．05）。病理Ⅲ～IV级COX-2表达明显高于I～Ⅱ级及对照组（P〈O．05,P〈0．01）。UC患者正规治疗,进入缓解期后两者表达明显下降（P〈O．01）。在肠黏膜组织中PAR-2表达与COX-2表达呈正相关（r：=O．501,P〈0．01）;均与UC病理分级呈正相关（P〈O．05）。结论：UC的发生发展与PAR-2及COX-2过度表达密切相关,两者共同促进炎症的发生发展。     

硫化氢复合浅低温可选择性激活突触内NMDARs及其下游CREB信号通路

目的：观察硫化氢复合浅低温对大鼠全脑缺血再灌注后海马N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDARs）的亚单位NR2A、NR2B及其环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）信号通路的影响,旨在探讨其是否存在脑复苏作用及发挥作用的潜在机制。方法：雄性SD大鼠随机分为以下五组（n=20）：假手术组（Ⅰ）、模型维（Ⅱ）、浅低温组（Ⅲ）、NaHS组（Ⅳ）,浅低温＋NaHS组（Ⅴ）。采用Pulsinelli-Brierley四血管阻塞法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,缺血15min,再灌注即刻Ⅳ组和Ⅴ组腹腔注射14μmol／kgNaHS。Ⅲ组和Ⅴ组行体表降温至肛温32～33℃。6h后断头取海马,分别采用分光光度计法测H2S的含量．westernblot法测NR2A、NR2B以及p-CREB的表达．RT-PCR法测BDNFmRNA的水平．每组分别职4只于再灌注72h取脑行HE染色观察CA1区锥体细胞病理改变。结果：①与Ⅰ组相比,各组海马组织H2S含量均升高（P〈0．05）;与Ⅱ组相比,Ⅲ组含量略升高（P〉0．05）,Ⅳ和Ⅴ组显著升高（P〈0．05）;②与Ⅰ组相比．各组NR2A、NR2B的灰度值均增高（P〈0．05）．且Ⅱ和Ⅲ组NR2A／NR2B〈1,Ⅳ和Ⅴ组NR2A／NR2B〉1;③与Ⅱ组相比。Ⅲ-Ⅴ组p-CREB及BDNFmRNA的表达均显著升高（P〈0．05）;④与Ⅱ组相比．Ⅲ-Ⅴ组CA1区锥体细胞损伤程度均明显减轻．尤以Ⅴ组效果昂佳。结论：硫化氢复合浅低温可通过选择性作用于突触内的NMDARs．进而激活其下游促存活CREB信号通路．从而发挥脑复苏的作用。     

雌激素调节大鼠去卵巢后骨髓细胞OPG、RANKL、RANK基因表达

目的 观察大鼠去卵巢后骨髓细胞核因子κB受体活化子配体（RANKL）、核因子κB受体活化子（RANK）、护骨素（OPG）以及TNF-α基因表达的改变和雌激素的影响。方法 健康3m龄雌性SD大鼠72只，24只为假手术对照组，48只去卵巢，随机分为去卵巢组和雌激素组，每组24只。分别于去卵巢后2、4、6、12w每组各取6只大鼠骨髓细胞提取RNA，RT-PCR半定量分析其表达。结果 与对照组相比，去卵巢后2W．去卵巢组骨髓细胞TNF-α和RANKLmRNA表达显著升高（P〈0．05—0．01），第4-6w，上述改变达高峰，至第12w TNF-α仍呈有意义增高；而OPG表达在第2-6W则明显降低（P〈0．01），2-4W为最低点；OPG／RANKL比值2-6W为最低（P〈0．01），12W仍低于对照组。雌激素组以上各时间TNF-α和RANKL表达低于去卵巢组（P〈0．05，P〈0．01）而OPG表达和OPG／RANKL比值明显高于去卵巢组（P〈0．01）。各组全程未见RANK基因表达水平有明显变化。结论 雌激素抑制大鼠去卵巢后骨髓细胞过度表达RANKL和TNF-α而增加OPG的表达。     

重组人促红细胞生成素对尿毒症患者细胞免疫功能和sIL-2R表达的影响

目的观察基因重组人促红细胞生成素（r-HuEPO）对慢性肾衰竭（CRF）患者外周血T-淋巴细胞免疫功能和红细胞免疫功能的影响。方法应用流式细胞仪、双抗体夹心ELISA法和红细胞酵母菌花环实验及红细胞免疫调节因子一步法分别检测观察90例CRF患者经r—HuEPO治疗后，外周血T-淋巴细胞亚群（CD3、CD4和CD4／CD8）、可溶性白介素-2受体（sIL-2R）、红细胞Gb受体花环试验（RNC-C3bRR）、红细胞免疫复合物花环试验（RN2-ICR）、红细胞免疫粘附促进因子（RFAR）和红细胞免疫粘附抑制因子（RFIR）的变化。结果①90例CRF患者外周血清中sIL-2R水平、RBC-ICR和RFIR明显高于正常对照组（P〈0．01），CD3、CD4、CD4／CD8、RBC-C3bRR和RFAR明显低于正常对照组（P〈0．01）；②r-HuEPO治疗后，RBC—C3bRR、RBC—ICR、RFAR和RFIR均有好转（P〈0．05），同时sIL-2R、CD3、CD4和CD4／CD8亦有所改善，但无统计学差异（P〉0．05）。结论CRF患者存在明显的细胞免疫功能和红细胞免疫功能低下，rHuEPO治疗对红细胞免疫功能有较好的提升和调节作用，对细胞免疫功能改善不明显。     

乳腺癌YKL-40表达与预后关系的研究

目的：探讨YKL-40表达水平与乳腺癌预后相关因素的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测60例乳腺癌患者YKL-40表达,比较YKL-40表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤直径、淋巴结转移、病理类型及TNM分期间的关系。结果：乳腺癌患者中YKL-40表达水平明显高于对照组（75％VS20％,P〈O．05）。肿瘤直径〉2cm患者YKL-40水平明显高于直径≤2cm组患者（P〈0．05）。随着肿瘤TNM分期进展,血清YKL-40表达水平逐渐升高（P〈O．05）。YKL-40在非浸润性和浸润性导管癌中表达率皆明显高于浸润性小叶癌（P〈O．05）。YKL-40表达阳性患者生存时间短于阴性患者[（36±4．9）月VS（49±7．5）月,P〈O．05],本组平均随访（35．4±2．39）月,YKL-40表达阳性患者病死率为22．2％（10／45）,表达阴性患者病死率为13.3％（2／15）。结论：YKL-40表达与乳腺癌预后相关,可望成为乳腺癌新的肿瘤标志物及治疗靶点。     

补肾法对去卵巢大鼠骨髓细胞0PG、RANKL和TNF-α基因表达的影响

目的观察补肾中药对大鼠去卵巢后骨髓细胞表达核因子κB受体活化子配体（RANKL）、核因子κB受体活化子（RANK）、护骨素（OPG）和肿瘤坏死因子α（TNF—α）基因的影响。方法健康3月龄雌性SD大鼠72只，其中24只为假手术对照组，48只去卵巢后随机分为去卵巢组和中药组，每组24只。分别于去卵巢后2、4、6、12周每组各取6只大鼠骨髓细胞提取RNA，RT-PCR半定量分析其表达。结果与对照组比较，去卵巢后2周，去卵巢组骨髓细胞TNF—α和RANKL的mRNA表达显著升高（P〈0．05～0．01），第4～6周，上述改变达高峰，至第12周TNF-α仍呈有意义增高；而去卵巢组OPG表达在第2～6周则明显降低，2～4周为最低点。中药组TNF—α和RANKL表达低于去卵巢组（P〈0．05，P〈0．01），而OPG表达明显高于去卵巢组。但是中药治疗未能使以上基因表达完全恢复正常。各组全程未见RANK基因表达水平有明显变化。结论补肾中药在一定程度上抑制去卵巢大鼠骨髓细胞过度表达TNF-α和RANKL，同时增加OPG的表达。     

MMP-2,-9及其抑制物TIMP-1在多囊卵巢综合征患者黄素化颗粒细胞上的表达

目的分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者黄素化颗粒细胞上基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9)及其组织抑制物TIMP-1的蛋白及mRNA在不同培养时间的表达水平,了解与细胞外基质合成、降解相关的MMPs/TIMPs系统参与PCOS的病理生理机制。方法收集2011年9月到2012年1月行体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的PCOS患者30例,对照组为同期行IVF或ICSI治疗的不孕症患者30例。密度梯度法获得卵巢黄素化颗粒细胞,细胞贴壁培养,分别在培养24、48和72h收集颗粒细胞。采用Western blotting方法检测颗粒细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的蛋白表达;RT-PCR检测颗粒细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1mRNA的表达。结果 (1)PCOS组黄素化颗粒细胞MMP-2,-9蛋白表达在各培养时间点(24、48、72h)均显著高于对照组(P均0.05);且MMP-2蛋白表达水平在48、72h相对于24h的比值,以及MMP-9蛋白表达水平在72h相对于24h的比值,PCOS组均显著高于对照组(P均0.01)。(2)PCOS组MMP-2mRNA在24、48、72h的表达,MMP-9mRNA在48、72h的表达均高于对照组,差异有统计学意义(P均0.05);MMP-2,-9mRNA表达水平在48、72h相对于24h的比值,PCOS组高于对照组,差异均有统计学意义(P均0.05)。(3)PCOS组TIMP-1蛋白及mRNA表达在24、48、72h与对照组比较无统计学差异(P0.05)。结论 PCOS患者黄素化颗粒细胞中MMP-2和MMP-9的表达升高,其MMPs/TIMPs的平衡状态向蛋白酶的活性增强方向移动,可能与PCOS患者黄体功能不足有关。     

腺病毒介导的PTEN基因对前列腺癌细胞株PC-3增殖及cyclinD1、p21表达的影响

目的:构建携带抑癌基因PTEN的腺病毒载体,探讨PTEN基因对前列腺癌细胞株PC-3增殖及cyclin D1、p21表达的影响。方法:采用RT-PCR方法从大鼠海马神经元扩增目的基因PTEN,连接入pENTR2A载体,在293A细胞中进行重组腺病毒的包装及扩增。以携带PTEN基因的腺病毒载体感染体外培养的前列腺癌细胞株PC-3。采用间接免疫荧光法检测细胞中PTEN的过表达情况。Western印迹检测PTEN、cyclin D1和p21表达的变化,通过细胞生长实验、平板克隆实验检测PTEN对PC-3细胞增殖能力的影响。结果:成功构建重组腺病毒载体Ad-PTEN;PC-3细胞经Ad-PTEN感染后PTEN蛋白表达水平明显增加。Western印迹实验所得条带进行灰度值分析后与β-actin求比值,PTEN蛋白在Ad-PTEN感染组细胞中表达(0.215±0.065)明显高于对照组[(0.052±0.009),t=4.30,P0.05]和Ad-LacZ组[(0.056±0.008),t=4.21,P0.05]。cyclin D1蛋白在Ad-PTEN感染组细胞中表达(0.256±0.072)明显低于对照组[(0.502±0.087,t=3.77,P0.05)]和Ad-LacZ组[(0.498±0.081,t=3.87,P0.05)]。p21蛋白在Ad-PTEN感染组细胞中表达(0.589±0.076)明显高于对照组[(0.146±0.026,t=9.55,P0.01)]和Ad-LacZ组[(0.163±0.024,t=9.26,P0.01)]。MTT实验显示Ad-PTEN对PC-3细胞的抑制作用自48h后(21.98%)有显著性(t=6.80,P0.01)。平板克隆实验显示Ad-PTEN组克隆形成率[(37.4±4.18)%]明显低于对照组[(54.9±4.81)%,t=4.76,P0.01]及Ad-LacZ组[(56.5±5.42)%,t=4.83,P0.01]。结论:通过腺病毒载体Ad-PTEN使PC-3细胞表达PTEN基因,可以明显抑制细胞的增殖,并可降低cyclin D1表达,同时增加p21的表达。     

CD133与胃癌细胞化疗耐药的关系及其机制

目的探讨CDl33阳性胃癌起始细胞对常规化疗药物氟尿嘧啶（5．FU）的敏感性及其耐药机制。方法免疫磁珠法分选KATO—III、SGC7901和MKN-45胃癌细胞株并分为未分选组、CDl33＋组及CDl33一组。Westernblot法和RT—PCR法分别检测分选后胃癌细胞CDl33、P—gP、Bax和Bcl-2蛋白及mRNA表达水平。免疫荧光法检测各组细胞P-gP及Bcl-2蛋白的表达。CCK-8法和Hoechest染色检测各组细胞对5．FU的敏感性。siRNA干扰MKN45细胞CDl33表达后，检测CDl33、P-gP、Bcl-2、Akt及p-Akt蛋白及mRNA表达。结果CDl33＋组胃癌细胞中CDl33、P—gP及Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均显著高于未分选组及CDl33-组（均P〈0．05），而促凋亡因子Bax的表达水平则明显降低（P〈0．05）。在相同药物浓度下，5-Fu对CDl33＋组的抑制率显著低于CDl33一组（P〈0．05）。5-FU处理胃癌细胞后，CDl33＋组胃癌细胞中凋亡细胞比率明显低于CDl33-组及未分选组（P〈0．05）。CDl33特异siRNA干扰胃癌细胞后，干扰组P—gP、Bcl-2和p-Akt蛋白及mRNA表达显著降低（均P〈0．05），而Bax表达水平则显著增加（P〈0．05）。结论CDl33可能通过调节P-gp和Bcl-2的表达来促进胃癌的化疗耐药；在胃癌化疗耐药产生中，CDl33＋细胞可通过P13K／Akt通路起作用。     

HIV一1感染者外周血I型干扰素产生细胞水平变化的研究

目的探讨我国HIV感染者外周血Ⅰ型干扰素产生细胞（IPC）水平及其与疾病进展的关系。方法应用流式细胞术以全血染色、全白细胞设门对92例HIV-1感染者和59例健康对照进行IPC水平的测定,并分析外周血IPC变化与CD4＋T细胞计数和HIV血浆病毒载量的关系。结果 HIV感染者外周血CD4＋T细胞及IPC绝对计数的均数分别为342.000个/μl和3.431个/μl,显著低于正常对照（965.000个/μl和5.995个/μl,P均〈0.001）;HIV感染者IPC细胞数量与CD4＋T细胞计数成正比（r=0.430,P〈0.001）,与HIV血浆病毒载量成反比（r=-0.483,P〈0.001）;CD4＋T淋巴细胞计数〈200个/μl的感染者IPC水平明显低于CD4＋T淋巴细胞计数〉200个/μl者（P〈0.005）。HIV慢性感染者的IPC水平显著高于艾滋病患者（P〈0.001）,新发感染者的IPC水平（5.080个/μl）明显低于正常对照（P=0.038）,但新发感染与慢性进展者的IPC水平间的差异无统计学意义。结论 HIV感染可显著降低机体的IPC水平,IPC水平变化与HIV疾病进展密切相关。     

蛋白激酶B在生长分化因子-9抑制卵泡颗粒细胞凋亡中的机制研究

目的探讨蛋白激酶B(PBK,又称Akt)信号转导通路在生长分化因子-9(GDF-9)抑制卵泡颗粒细胞凋亡的分子机制。方法应用Western blot法检测体外培养大鼠颗粒细胞磷酸化Akt的表达,Hoechst法检测体外培养颗粒细胞的凋亡情况。结果 GDF-9能降低促凋亡制剂Ceramide引起的颗粒细胞凋亡,并促进磷酸化Akt在颗粒细胞的表达。结论 GDF-9具有抑制体外培养颗粒细胞凋亡的作用,抑制作用可能通过提高细胞p-Akt的表达完成,Akt信号转导通路在GDF-9抑制颗粒细胞凋亡及卵泡闭锁起一定的作用。     

HIV和HCV合并感染对患者外周血中A3GmRNA及干扰素α表达的影响

目的：研究HIV和HCV（HIV／HCV）感染对患者外周血单个核细胞（PBMC）中A3G mRNA表达及外周血中内源性干扰素（ IFN）-α水平的影响。方法以未经抗病毒治疗的慢性丙型肝炎患者（ HCV单一感染组,43例）、艾滋病患者（ HIV单一感染组, CD4＋T 淋巴细胞＜200个／μL,45例）和HIV／HCV合并感染组（ CD4^＋T淋巴细胞＜200个／μL,45例）为研究对象,并以23名我院门诊健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测A3G mRNA,酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测血浆中内源性IFN-α的表达量。组间比较采用秩和检验,相关性分析用Spearman秩相关分析。结果 HIV单一感染组、HIV／HCV合并感染组、HCV单一感染组和健康对照组PBMC中A3G mRNA的表达量分别为4.89（0.59）,4.85（0.71）,3.89（1.08）和3.69（0.81）lg拷贝／mL。其中,HIV单一感染组和HIV／HCV合并感染组PBMC中A3G mRNA的表达量均明显高于健康对照组（ Z＝－6.306和－6.280,P＜0.01）和HCV单一感染组（Z＝－7.358和－7.275,P＜0.01）。 HIV单一感染组、HIV／HCV合并感染组、HCV单一感染组和健康对照组血浆中 IFN-α表达量分别为2.79（1.25）,2.05（1.29）,2.32（1.84）和2.16（2.19） pg／mL,其中 HIV 单一感染组血浆中 IFN-α表达量稍高于HIV／HCV合并感染组（Z＝－2.332,P＜0.05）,其他各组血浆中IFN-α表达量比较差异均无统计学意义（P值均＞0.05）。血浆中 IFN-α水平与 A3G mRNA 表达水平未见明显相关性（rs ＝0.04,P ＞0.05）,A3G mRNA 及 IFN-α表达量与HIV 及 HCV RNA 载量亦无明显相关性（P 值均＞0.05）。结论 HIV感染者PBMC高表达A3G,合并HCV感染对艾滋病患者的A3G表达无明显影响;A3G mRNA与IFN-α无明显相关性,且对HIV、HCV RNA载量的影响并不明显。     

腺病毒介导HSV-TK／GCV自杀基因系统靶向性治疗前列腺癌实验研究

目的观察腺病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶基因／丙氧鸟苷（HSV-TK／GCV）自杀基因系统在人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控下对人前列腺癌细胞的靶向性体外杀伤效应。方珐利用不同感染复数（MOI）的重组腺病毒携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因感染前列腺癌细胞LNCaP和人成纤维细胞MRC-5,荧光显微镜下观察其感染效率;利用携带不同启动子的重组腺病毒Ad-hTERT-HSV／TK以及Ad-CMV-HSV／TK感染LNCaP和MRC-5细胞,加入不同浓度GCV,MTT法观察受转染细胞的存活率。结杲重组腺病毒Ad-hTERT-EGFP能特异地转染LNCaP,其转染效率随重组病毒的MOI增加而升高（P〈0.01）,MOI为1时转染率为8.3％,MOI为1000时转染率达100％;应用GCV处理后,Ad-CMV-HSV／TK对LNCaP和MRC-5细胞均有杀伤作用,而Ad-hTERTp-HsV／TK只杀伤LNcaP（P〈0.001）,随着MOI和GCV浓度的增加,LNCaP细胞存活率明显降低（P〈0.01）,MOI为1和GCV浓度为1μmol／L时存活率为95.4％,MOI为100和GCV浓度为1000μmol／L时存活率仅为6.1％,并有旁观者效应。结论重组腺病毒携带EGFP报告基因可准确、简便地确定转染效率;hTERT启动子调控的重组腺病毒介导的HSV-TK／GCV自杀基因系统对人前列腺癌细胞有靶向杀伤作用。     

长期高效抗反转录病毒疗法对HIV-1感染者免疫重建作用研究

目的 探讨长期高效抗反转录病毒疗法（highly active antiretroviral therapy,HAART）对HIV-1感染者免疫重建的作用.方法 收集42例HIV-1感染者作为研究对象,将其分为HAART治疗组（25例）和未治疗组（17例）,另选15名健康人群作为对照,采用流式细胞仪检测受试者外周血CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、CD8/人白细胞DR抗原（HLADR）＋T细胞、CD8/CD38＋T细胞计数,以及CD127在CD3＋T细胞的表达情况,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HAART治疗组外周血IL-7浓度.样本均数采用t检验.结果 HAART治疗组治疗前CD4＋T细胞计数明显低于健康对照组（t=9.12,P＜0.01）,CD8＋T细胞、CD8/HLADR＋T细胞和CD8/CD38＋T细胞计数明显高于健康对照组（t=4.48、4.89和3.88,P值均＜0.01）.HAART治疗7年后,HIV-1感染者CD4＋T细胞计数明显上升,CD8＋T细胞计数明显下降,但均未达到正常水平（t=2.66和2.43,P值均＜0.05）,CD8/HLADR＋T细胞和CD8/CD38＋T细胞则逐渐降至正常水平（t=0.86和1.39,P值均＞0.05）.治疗前HIV-1感染组外周血IL-7显著高于健康对照组（t=5.31,P＜0.01）,经HAART治疗,IL-7水平逐年下降,但仍高于健康对照组（t=2.81,P＜0.05）.未治疗组患者CD3＋CD8＋T细胞表面CD127表达明显低于健康对照组（t=6.01,P＜0.05）,HAART治疗组CD3＋CD8＋T细胞表面CD127表达高于未治疗者（t=2.32,P＜0.05）,但仍低于健康对照组（t=4.49,P＜0.05）;处女型（CD45RA＋）CD3＋CD8＋T细胞表面CD127表达基本接近健康对照组（t=0.28,P＞0.05）,而记忆型（CD45RO＋）CD3＋CD8＋T细胞表面CD127的表达仍然明显低于健康对照组（t=4.86,P＜0.05）.结论 长期有效的HAART能使HIV-1感染者淋巴细胞亚群在数量和功能上得到一定程度的恢复,体内的异常免疫激活得到明显抑制.     

精索静脉曲张不育患者CD_4~+ CD_(25)~+ Foxp3~+调节性T细胞的检测及临床意义

目的:探讨精索静脉曲张(VC)不育症患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的变化及其临床意义。方法:72例VC不育症患者(VC组)作为研究对象,以30例非VC且正常生育者为对照(对照组)。流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的比例,ELISA法检测血清抗精子抗体(AsAb)水平,计算机辅助精液分析系统检测精液参数。结果:VC组的精子浓度、活率及活力均低于对照组(P0.05),精子畸形率及AsAb阳性率高于对照组(P0.05);Ⅲ度VC组CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在总CD4+T细胞所占比例低于正常生育组(P0.05)。AsAb阳性VC组的精子活率、精子活力及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占总CD4+T细胞比例均低于AsAb阴性VC组(P0.05),相关分析提示AsAb的存在与Treg/CD4+T比例、精子活率及精子活力负相关(r=-0.245,P0.05;r=-0.314,P0.05;r=-0.263,P0.05)。结论:精索静脉曲张不育患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的水平降低,且AsAb阳性组患者更低,这群调节性T细胞的异常可能是导致精索静脉曲张免疫性不育的重要因素之一。