4种大鼠肾草酸钙结石模型的比较

目的筛选简便、快捷、成石效果好的SD大鼠肾草酸钙结石的造模方法。方法分别采用目前普遍使用的2种大鼠肾草酸钙结石的模型复制方法和2种改良的造模方法进行造模,并设立空白对照组,造模结束后采集每组大鼠24h尿量及血清,比较大鼠24h尿量、尿Ca2＋、尿Mg2＋、尿pH、尿草酸（0x）及血尿素氮（BUN）、肌酐（cr）、P、Ca2＋、Mg2＋,肾脏病理切片HE染色后光学显微镜下观察和比较各组大鼠肾脏病理改变及草酸钙结晶的沉积情况。结果E组[1％乙二醇＋2％氯化铵＋10％葡萄糖（48d）]在光学显微镜下草酸钙结晶沉积较传统组C组明显增多（P〈0．05）,但有30％大鼠死亡,血肌酐在5组大鼠中最高。D组[1％乙二醇＋2％氯化铵＋10％葡萄糖（28d）]较传统组C组草酸钙结晶沉积明显增多（P〈0．05）,并且造模时间短,大鼠存活率高（80％）,E组与D组相比结晶形成量无统计学意义（P〉0．05）,B组[1％乙二醇（28d）3肾脏中无肾结晶形成,仅有轻微的肾脏病理学改变,大鼠无死亡,肌酐不高。空白对照组无结晶形成,无病理改变。结论用1％乙二醇＋2％氯化铵＋10％葡萄糖诱导28天复制肾草酸钙结石模型的效果好,并且花费时间短,大鼠存活率高,建议选用。     

中药泽泻中提取的化合物对尿草酸钙结石形成的影响

目的 通过乙二醇与氯化铵诱导的大白鼠肾草酸钙结石模型观察从中药泽泻中提取的三种化合物对尿草酸钙结石形成的影响,并探讨其抑制尿草酸钙结石形成的有效成分.方法 中药泽泻饮片,经药理学方法得到化合物Ⅰ、化合物Ⅱ、化合物Ⅲ.50只Wistar雄性健康大白鼠,随机分为5组,A组:正常空白对照组;B组:草酸钙结石成石组;C组:化合物Ⅰ实验组,在给予诱石剂的同时,每只大鼠每天灌胃化合物Ⅰ 1 ml,其他各实验组以此类推;D组:化合物Ⅱ实验组;E组:化合物Ⅲ实验组.各组在相同条件下饲养4周后,用代谢笼收集大鼠的24 h尿液检测24 h尿草酸(OX),Ca2+含量,断颈处死大鼠检测肾组织Ca2+含量,偏光显微镜下观察肾组织Von-Kossa's染色切片中草酸钙结晶大小,形态分布和肾小管损害程度.结果 C组24 h尿Ca2+(61.49±2.06)含量高于B组(37.23±1.84),差异有统计学意义(P<0.05);肾Ca2+(10.35±6.45)含量明显低于B组(49.20±9.63),差异有统计学意义(P<0.01);切片可见少量草酸钙晶体沉积和肾小管轻度扩张.结论 从中药泽泻中提取的化合物I能显著降低肾组织Ca2+含量和增加草酸钙结石大白鼠24 h尿Ca2+的分泌量,明显降低草酸钙晶体在肾脏的沉积和减轻肾小管的损害程度,因而化合物Ⅰ是泽泻抑制尿草酸钙结石形成的重要成分.     

苄丙酮香豆素对实验性大鼠肾草酸钙结石形成的影响

目的：探讨Vit．K拮抗剂苄丙酮香豆素(商品名华法令)对大鼠肾草酸钙结石形成的影响。方法：采用乙二醇饮水和氯化铵灌胃作成石剂，30只Wistar大鼠随机分为对照组(A组)、成石组(B组)、华法令组(C组)。饲养4周后，检测大鼠肾组织钙含量和草酸钙晶体形成、24h尿钙、尿草酸含量及血生化指标。结果：成石组和华法令组肾组织中钙、镁含量，24h尿草酸及尿钙、镁排泄量差异无显著性意义；镜下观察发现：华法令组大鼠肾脏草酸钙结晶形成多于成石组，但组间比较差异无显著性意义。结论：苄丙酮香豆素对大鼠肾草酸钙结石的形成无显著影响。     

无肾功能损伤大鼠肾草酸钙结石模型的筛选

目的 用最小的肾脏功能损伤筛选制作短时、经济和成石效果好的大鼠肾草酸钙结石模型.方法 将雄性SD大鼠90只随机分为两组.实验1采用1.0％氯化铵和不同浓度乙二醇(EC,0.1％、0.2％、0.4％、0.8％)处理.实验2单用不同浓度EG(0.1％、0.2％、0.4％、0.8％)处理.7～21 d后处死大鼠,测体质量、血、尿肌酐和尿草酸盐含量.苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理改变及肾成石.结果 实验1中,不同浓度EG+ 1.0％氯化铵处理7d后,大鼠尿草酸盐排泄量均高于对照组(P＜0.05).用0.4％或0.8％ EG+ 1.0％氯化铵处理14d后,大鼠肌酐清除率均低于对照组(P＜0.01);光镜观察,肾皮质、髓质和肾乳头等处出现草酸钙结晶体,肾组织炎性损伤加重.实验2中,用0.4％或0.8％ EG处理7d后,尿草酸盐排泄量高于对照组(P＜0.01),但肌酐清除率变化差异无统计学意义(P＞0.05).光镜观察,肾皮质及间质未出现明显水肿,可观察到少量结石结晶但无炎性细胞浸润.结论 单用EG处理大鼠可以在没有严重肾损伤的情况下构造短时、经济和成石效果好的大鼠肾草酸钙结石模型.     

三叶因子1在大鼠草酸钙结石模型肾组织中的表达及其意义

目的 探讨三叶因子1(TFF1)在大鼠草酸钙结石模型肾组织中的表达及其与肾脏草酸钙结石形成机制的关系.方法 分别以1％的乙二醇溶液自由饮用和2％的NH4Cl溶液2 mL/d灌胃2周和4周;用偏光显微镜观察结石结晶形成情况;采用免疫组织化学染色法分别检测成石2周(n=20)、成石4周(n=20)和正常组(n=20)大鼠肾组织TFF1蛋白的表达.结果 TFF1免疫反应阳性物质主要位于肾小球、肾小管,与正常组比较,成石2周肾组织TFF1平均灰度值略下降(P＞0.05),成石4周平均灰度值明显降低(P＜0.05).结论 乙二醇诱导的大鼠草酸钙结石模型肾组织中TFF1低表达,伴随结石结晶数量和密度的增加,TFF1表达降低.TFF1在肾组织中的表达与乙二醇和NH4Cl干预的时限呈负相关;TFF1可能在肾草酸钙结石的形成中起抑制作用.     

筛选乙二醇法复制大鼠肾结石模型最佳剂量的比较研究

目的：探讨乙二醇法复制大鼠肾结石模型的最佳剂量，建立乙二醇法复制规范化大鼠肾结石模型的方法。方法：采用不同浓度的乙二醇（1％、1．25％、1．5％、2％）分别与1％氯化铵溶液制作大鼠肾结石模型，实验用药第4周处死大鼠，用7150全自动生化仪测定血与尿Ca^2＋、Mg^2＋、P^3＋、UA含量，用变色酸比色法测定肾组织中草酸含量；无菌取肾组织，常规石蜡包埋、组织切片、比染色、偏光显微镜观察肾组织病理改变及大鼠肾成石情况。结果：在不同浓度的乙二醇4个剂量组中，血与尿Ca^2＋、Mg^2＋、P^3＋、UA，肾组织中草酸含量以及肾成石情况不以乙二醇浓度而增加，以1．25％乙二醇合1％氯化铵对大鼠肾成石作用为优。结论：1．25％乙二醇合1％氯化铵是复制肾结石模型的最佳剂量组，可以作为乙二醇法复制的规范化的大鼠肾结石模型。     

金钱草及广金钱草对大鼠肾草酸钙结石相关代谢产物作用的研究

目的对比金钱草与广金钱草抑制大鼠肾草酸钙结石的具体机制与作用效果。方法54只SPF级SD雄性大鼠适应性喂养1周至体重180~200 g,使用乙二醇灌胃法建立SD大鼠肾草酸钙结石模型,而后将大鼠按照随机数字表法分为9组处理并进行对照,分别为健康对照组(A组),阳性对照组(建模组,B组),金钱草低、中、高剂量组(C1、C2、C3组,共3组),广金钱草低、中、高剂量组(D1、D2、D3组,共3组),疗效对照组(枸橼酸氢钾钠组,E组),每组各6只。4周后收集标本测定各组大鼠血尿生化指标,并行Von Kossa染色检测肾草酸钙晶体,在偏振光显微镜下观察大鼠肾组织草酸钙结晶沉积情况,利用测算照片中阳性面积百分比与相关血尿生化指标判断两者药效差异。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用SNK-q检验;结晶形成情况组间比较采用Kruskal-Wallis检验。结果与阳性对照组相比,高剂量的广金钱草相对金钱草能显著降低肾草酸钙结石大鼠血肌酐水平,应用金钱草后血肌酐水平为(86.70±11.49)μmol/L,应用广金钱草后血肌酐水平为(70.72±9.08)μmol/L,两者差异有统计学意义(P<0.01);高剂量金钱草、广金钱草均能显著升高尿镁水平,降低血尿素水平,两者相比差异无统计学意义(P>0.05);与阳性对照组相比,给予高剂量金钱草(P<0.0001)与高剂量广金钱草(P<0.0001)均能显著抑制大鼠肾草酸钙晶体形成,保护大鼠肾脏,两者作用效果相比差异无统计学意义(P>0.05);给予金钱草与广金钱草均未能观察到显著升高尿pH值与显著降低尿钙、尿草酸、24 h尿量、血钙、血磷、血镁、血尿酸和肾草酸含量的效果。结论广金钱草抑制大鼠肾草酸钙结石发生的功效优于金钱草,对肾功能具有更好的保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸抑制大鼠肾草酸钙结石形成机制的研究

目的：探讨N一乙酰半胱氨酸（NAc）对大鼠肾草酸钙结石形成的影响及机制,为临床预防尿路结石提供理论依据。方法：将30只健康清洁成年雄性Wistar大鼠先在相同环境下适应性喂养1周,然后随机分为3组：A组（空白对照组）、B组（单纯诱石组）、C组（诱石＋NAC干预组）。A组饮去离子水,B组饮1％乙二醇的去离子水,C组饮1％乙二醇去离子水,并给予NAC100mg／（kg·d）灌胃。第4周处死大鼠,取出双肾,左肾纵向剖开,用10％甲醛固定,HE染色石蜡切片,在100、400倍光镜下观察肾组织草酸钙结晶沉积情况,并进行分级及评分。右肾皮质制成10％的匀浆,检测丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）。全部实验数据通过SPSS17．0统计软件分析处理。结果：①肾脏结晶沉积情况分级及评分结果：与B组相比,C组的肾脏结晶沉积评分明显降低（P〈0．05）。②MDA检测结果：与B组相比,C组的MDA含量降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。③SOD检测结果：与B组相比,C组的SOD含量增高,差异有统计学意义（P〈0．05）。④A、B、C三组肾组织结晶等级评分与s0D含量的相关系数为-0．499（P〈0．01）,结晶评分与MDA含量的相关系数为0．592（P〈0．01）。结论：NAc可以通过其抗氧化作用抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。     

肾结石大鼠肾组织bikunin mRNA的表达

目的 :研究bikunin在实验性肾草酸钙结石大鼠肾组织的表达及意义。方法 :采用乙二醇和氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石模型形成 ,检测各组大鼠肾功能、肾组织Ca2 + 含量和草酸钙晶体沉积、尿生化指标 ,并用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测bikuninmRNA在肾组织的表达情况。结果 :模型组大鼠的血清Cr、BUN、肾Ca2 + 含量、2 4h尿Ca2 + 、草酸 (Ox)分泌量和肾组织bikuninmRNA的表达均明显高于正常组 (P <0 .0 5 )。结论 :高草酸尿和草酸钙结晶的沉积能促使大鼠肾脏通过合成更多的bikunin来抑制大鼠肾组织草酸钙晶体的形成。     

碘海醇对实验性大鼠草酸钙结石形成的影响

目的探讨造影剂碘海醇对大鼠草酸钙结石形成的影响。方法将40只Wister大鼠随机分为成4组：空白对照组（A）、单纯诱石组（B）、单纯碘海醇组（C）、诱石＋碘海醇组（D）。用乙二醇法诱导建立大鼠草酸钙结石模型,C、D组尾静脉注射碘海醇。实验第4周末检测肾组织中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活力,镜下观察肾内草酸钙晶体沉积情况。结果A、B、C、D4组肾脏组织MDA含量（nmol／mg蛋白）分别为2．74±0．48、4．51±1．47、6．92±2．18、8．87±2．31,SOD活力（U／mg蛋白）分别195．21±11．01、170．24±13．59、140．86±25．91、121．54±25．50,各组间差异有统计学意义（P〈0．05）。B、D组结晶等级评分高于A组,D组结晶等级评分高于B组（P〈1．05）。培论碘海醇促进了大鼠肾小管内草酸结晶量的增加,其机制与碘海醇诱导的肾小管上皮氧化应激损伤有关。     

西梅汁预防大鼠草酸钙肾结石的实验研究

目的 研究西梅汁对乙二醇诱导的大鼠草酸钙肾结石形成的影响及其量效关系.方法 40只wistar大鼠随机分为8组:A空白对照组、B单纯乙二醇诱石组、C～E为西梅汁干预组[分别灌喂西梅汁2、4、8 mL· (kg·d)-1],每组8只.除空白对照组外,余皆用含1％乙二醇去离子水作为大鼠的唯一饮用水源并自由饮用,以诱导生成草酸钙肾结石.分别于实验前日和实验第4周末,检测大鼠尿钙、镁、草酸及枸橼酸浓度;血钙、镁、肌酐和尿素氮浓度;肾脏组织丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性;偏光显微镜观察HE染色肾脏组织草酸钙结晶形成情况;TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,以此分析西梅汁及西梅干预防肾结石的量效关系.结果 所用三种剂量的西梅汁均能明显减轻乙二醇所致的各项血尿生化指标和肾小管上皮细胞凋亡指数的改变,大幅增加尿镁浓度,明显减少乙二醇诱导的大鼠草酸钙肾结石的生成,且效果呈剂量依赖性.结论 所用的三种剂量的西梅汁均可明显干预乙二醇诱导的大鼠草酸钙肾结石的生成,且呈正相关的量效关系.     

鱼油抑制实验鼠草酸钙结晶形成

目的 了解鱼油在尿石形成中的作用。方法 ６０只大鼠随机分４组,饮用１％乙二醇（ＥＧ）水,同时喂饲不同剂量的鱼油。４周后检测各组大鼠肾功能、草酸钙结晶、２４小时尿钙和尿草酸。结果 加服鱼油组鼠肾积水、组织水肿减轻,肾组织内草酸钙结晶数及含钙量明显减少,２４小时尿钙排出减少;尿尿素氮、肌酐排出明显增加,而血中尿素氮、肌酐浓度显著低于成石组。结论 鱼油能抑制实验性高草酸尿症大鼠体内草酸钙结晶形成,减少尿     

Effects of high-sodium diet on lithogenesis in a rat experimental model of calcium oxalate stones

BackgroundThis study aimed to investigate the effects of a high- and low-sodium diets on lithogenesis in a rat experimental model of calcium oxalate stones.MethodsTwenty male Wistar rats were randomly divided into four groups; group A: 4% NaCl+1% ethylene glycol (EG); group B: 8% NaCl+1% EG; group C: 8% NaCl+normal drinking-water; group D: 1% EG +normal diet. All rats were sacrificed 4 weeks later, and blood samples were collected from the heart. The kidneys were collected for Von Kossa staining to evaluate the formation of calcium-containing crystals. The last 24-h urine samples were also gathered for metabolic analysis.ResultsVon Kossa staining demonstrated that the rats in both group A and group B had significantly more renal calcium crystals than those in group D. However, 24-h urinary volume increased significantly (142.26±20.91 mL) in group B compared with group A (100.52±28.23 mL), group C (107.36±14.24 mL), group D (40.79±8.71 mL) (P=0.004, 0.012, and 0.000 respectively). Level of urine sodium (Na), potassium (K), chlorine (Cl), and calcium (Ca), urea nitrogen were significantly higher in group B compared with group D. The urine phosphorus, oxalate, and creatinine levels; urine specific gravity; and urine PH were similar between group B and group D. The level of serum sodium was higher in group B (151.26±4.06 mmol/L) compared with group D (145.56±1.12 mmol/L) (P=0.002).ConclusionsA high sodium intake might increase the risk of lithogenesis in susceptible individuals (given by EG) or in individuals with water restriction.     

钙敏感受体活性改变对大鼠泌尿系草酸钙结石形成的影响

目的探讨钙敏感受体（CaSR）活性改变对草酸钙结石形成的影响。方法在实验期间给予乙二醇和氯化铵诱导雄性SD大鼠产生泌尿系草酸钙结石。在造模期间给予不同剂量的CaSR抑制剂（NPS-2390）。实验结束时检测各组大鼠血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血磷、血钙、血镁、PTH的含量、24h尿量、尿pH值、尿钙、镁、尿草酸的分泌量,显微镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶沉积及病理变化情况及肾脏中CaSR表达情况。从而评价CaSR活性的改变对泌尿系结石形成的影响。结果成石对照组大鼠血BUN、Cr、尿草酸、尿钙较空白组明显升高并且有大量结晶形成,表明建模成功。CaSR抑制剂组较成石对照组甲状旁腺激素（PTH）的分泌增加并且血Ca2＋升高尿钙升高。肾组织病理学检查显示CaSR抑制组的肾脏组织中的草酸钙结晶较成石对照组明显增加,组织病理损伤也较重。结论肾脏中及甲状旁腺中CaSR的表达下降可以导致草酸钙结晶的形成增加。     

甲状腺术中甲状旁腺原位损伤类型对甲状旁腺功能的影响

目的 通过模拟甲状腺全切除术中甲状旁腺不同类型的原位损伤情况建立动物模型,研究不同程度的甲状旁腺原位损伤对术后甲状旁腺功能恢复的影响.方法 以实验家兔为研究对象,随机分为A、B、C、D四组,每组8只,A组(假手术组):单纯暴露、探查甲状腺、甲状旁腺;B组(血供损伤组):双侧甲状腺全切除+双侧下甲状旁腺血供损伤保留被膜;C组(被膜损伤组)双侧甲状腺全切除+双侧下甲状旁腺被膜损伤保留血供;D组(复合损伤组)双侧甲状旁腺全切除+双侧下甲状旁腺被膜及血供的复合损伤.术前1d,术后第1天、第3天、第5天、第7天监测血钙、血PTH,术后第7天切取双侧下甲状旁腺行苏木精-伊红染色,观察甲状旁腺组织的存活及病理损害.结果 (1)各组动物术前血钙、血PTH差异无统计学意义(P＞0.05);(2)A组术后血钙下降,但在第5天恢复至术前水平(P＞0.05);B、C组术后血钙明显下降(P＜0.05),以术后第1天最低,逐渐恢复,但C组恢复较B组快(P＜0.05);D组术后血钙持续下降;(3)A组术后血PTH下降,但在第7天恢复至术前水平(P＞0.05);B、C组术后血PTH明显下降(P＜0.05),以术后1d最低,逐渐恢复,但3d后C组恢复较B组快(P＜0.05);D组术后血PTH持续下降;(4)病理结果:A组甲状旁腺以主细胞为主,少量空泡性改变(5％～10％);B组甲状旁腺出血、坏死(40％ ～50％),部分细胞空泡变性(30％ ～ 40％),中心伴纤维化,周边可见炎性肉芽肿及增生的甲状旁腺组织;C组甲状旁腺出血(10％ ～20％),部分细胞空泡变性(10％ ～ 20％);D组甲状旁腺坏死,几乎无正常甲状旁腺组织,明显纤维化,残存的甲状旁腺组织较少呈散在分布.结论 (1)甲状腺术中甲状旁腺原位损伤的类型影响术后甲状旁腺功能的恢复,其中甲状旁腺血供和被膜的复合损伤最严重,甲状旁腺缺血坏死,功能不能恢复;单纯血供损伤,部分能恢复功能;带血管蒂的甲状旁腺原位保留能较快的恢复功能;(2)对于甲状腺术中严重血供及被膜损伤,甚至游离的甲状旁腺应立即自体移植.