基于主成分分析评价雷公藤配伍金钱草的相杀减毒作用

目的:考察雷公藤(LGT)配伍金钱草(JQC)的相杀减毒作用,优选二者的最佳配比,初步评价二者配伍后特征化学成分的贡献程度。方法:通过小鼠连续给药14 d的亚急性毒性试验并基于主成分分析优选LGT配伍JQC后相杀减毒作用的最佳配比,给药剂量以LGT提取物计均为60 mg·kg-1(相当于LGT生药约2 g·kg-1),给药体积均为20 m L·kg-1。基于常规小鼠急性毒性试验评价最佳配比的减毒效果,通过对配伍前后差异特征化学成分与总体减毒作用的灰色关联分析,评价化学成分对其相杀减毒作用的贡献大小。结果:与正常组比较,LGT单用组极显著升高了小鼠血清生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,肝组织和肾组织中的脂质过氧化指标丙二醛(MDA)水平以及总体减毒作用得分Z值(P0.01)。与LGT单用组比较,LGT-JQC质量比为2∶1,1∶1,1∶2,1∶4的配伍组均能显著降低LGT引起的血清过高的ALT水平(P0.05,P0.01),质量比为4∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶4配伍时均能显著降低LGT引起的过高的血清AST,Cr,BUN,肝MDA水平以及总体减毒作用得分Z值(P0.05,P0.01),质量比为4∶1,2∶1,1∶1配伍时均能显著降低LGT引起的肾过高的MDA水平(P0.05,P0.01)。LGT和JQC在各质量比(4∶1,1∶1,1∶2,1∶4)配伍时的总体减毒作用Z值均明显高于配比在2∶1时的Z值(P0.01)。LGT单独用药对小鼠的半数致死量(LD50)517 mg·kg-1,LGT-JQC(2∶1)配伍用药时的LD50升高至889 mg·kg-1,升高了72%。配伍前后12个差异特征化学成分与其总体减毒作用得分Z值的灰色关联系数最大的是雷公藤甲素(TP)。结论:LGT和JQC在质量比为4∶1~1∶4配伍时,对LGT所致亚急性肝毒和肾毒均具有配伍减毒作用,二者相杀减毒的最佳配比为2∶1;在2∶1配比时,急性毒性和亚急性毒性分别下降了72%和138.5%;TP是引起二者相杀减毒作用贡献最大的化学成分。     

基于调控生理状态下抗氧化抗炎水平探讨雷公藤配伍金钱草相杀减毒的生物机制

目的考察生理状态下雷公藤配伍金钱草相杀减毒的生物机制。方法通过对生理状态下小鼠的肝和肾组织抗氧化和部分炎症相关指标的比较分析,探讨二者相杀减毒的生物机制。结果与正常组比较,雷公藤被灌胃给药14 d后,极显著降低了小鼠肝和肾的抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、白介素(IL)-10的水平(P<0.01),并升高了肿瘤坏死因子(TNF)-α水平(P<0.01);与雷公藤单用组比较,雷公藤-金钱草在质量配比为4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4的各配伍组均能显著升高肝和肾的GSH、GST、GPx、SOD、CAT和IL-10的水平(P<0.05或P<0.01),并显著降低TNF-α的水平(P<0.01)。结论雷公藤配伍金钱草对生理状态下的相杀减毒机制,可能与增强靶器官的抗氧化防御并抑制炎症反应有关。     

雷公藤配伍金钱草对荷瘤状态下的相杀减毒机制研究

目的在荷瘤病理状态下观测雷公藤配伍金钱草的相杀减毒机制。方法通过对S180荷瘤小鼠血清肾功能指标以及肾组织氧化应激和炎症相关指标的比较分析,探讨雷公藤配伍金钱草的相杀减毒作用及其机制。结果雷公藤给药后诱导了S180荷瘤小鼠的血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肾丙二醛(MDA)的水平均显著升高,以各配比(4/1~1/4)配伍金钱草给药后,均显著逆转了以上3个指标的异常(P<0.01);进一步机制分析显示,雷公藤诱导了荷瘤小鼠肾谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、白介素(IL)-10的水平的显著降低(P<0.01)以及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的显著升高(P<0.01),而以各配比与金钱草配伍给药后,均显著逆转了以上7个指标的异常(P<0.01)。结论配伍金钱草对雷公藤所致的荷瘤小鼠的肾损伤具有减毒作用,其机制可能涉及增强荷瘤状态下肾的抗氧化防御并抑制炎症反应。     

基于PCA和GCA分析方法初步评价雷公藤“以药制药”炮制减毒作用

目的阐释雷公藤(LGT)"以药制药"炮制减毒的化学基础,初步评价金银花(JYH)、白芍(BS)、金钱草(JQC)、甘草(GC)、绿豆(LD)对其的炮制减毒作用。方法寻找LGT"以药制药"炮制前后HPLC化学差异特征成分(特征峰),基于主成分分析(PCA)和灰色关联分析(GCA)方法阐释炮制减毒的化学基础并评价其减毒作用。结果 LGT经JYH、BS、JQC、GC、LD炮制前后产生的11个化学差异特征成分并经PCA降维,产生3个主成分,结合解释的方差获得化学总得分Z值;JYH、BS、JQC、GC、LD炮制品均较LGT生品化学总得分显著降低(均P0.01),化学总得分降幅前三名依次为JYH、LD和JQC,分别降低170.2%、153.8%和128.0%,且LD和JQC炮制品与JYH炮制品比较,化学总得分均无显著差异(均P0.05);进一步通过GCA方法对11个差异特征成分与其化学总得分进行关联分析,由灰色关联系数大小判断特征成分对化学总得分的贡献程度,从而评价11个特征成分对LGT炮制减毒的重要程度,排在前3名的依次为3号、7号和6号特征峰,而雷公藤甲素(TP)和雷公藤红素(CEL)仅分排在第4和第10。结论寻找到的11个差异化学成分为LGT"以药制药"炮制减毒的主要化学基础,经JYH、BS、JQC、GC、LD炮制LGT均可通过降低化学得分从而发挥减毒作用,其中以JYH、LD和JQC炮制为佳,其减毒作用可能与TP、CEL、1-9号特征化学成分的综合作用有关,其中尤以3号特征成分的影响最大。     

Leigongteng(Radix et Rhizoma Tripterygii) via compatibility with Jinqiancao(Herba Lysimachiae): its toxicity-reduced efficacy in H22-bearing mice

OBJECTIVE: To observe toxicity-reduced effects of Leigongteng(Radix et Rhizoma Tripterygii)(LGT) via compatibility with Jinqiancao(Herba Lysimachiae)(JQC) in H22-bearing mice and investigate the possible underlying mechanism, and further explore whether JQC can enhance LGT-evoked anti-tumor effect.METHODS: H22-bearing mice were orally administered with LGT alone and its compatibility with JQC, and tumors, serum, livers and kidneys were collected to evaluate the toxicity-reduced efficacy and the possible mechanism.RESULTS: LGT evoked significantly elevated biochemical indicators including serum alanine/aspartate transaminase(ALT/AST), creatinine(Cr) and urea nitrogen(BUN) as well as pathological damage in mice, which were all obviously reversed by JQC via compatibility at the ratios from 4/1 to 1/4.Further analysis indicated that pro-inflammatory cytokine tumor necrosis factor-alpha(TNF-α), and malondialdehyde(MDA) levels significantly decreased, while anti-inflammatory cytokine interleukin(IL)-10, and glutathione(GSH), GSH-s transferase(GST), GSH peroxidase(GSH-Px), superoxide dismutase(SOD) and catalase(CAT) levels all increased in livers and kidneys of mice. Besides, after compatibility with JQC at the ratios of 4/1, 2/1, 1/1,1/2 and 1/4, LGT-decreased tumor weight was further decreased by 48.4%, 57.3%, 54.0%, 49.3% and52.9%, respectively(all P 0.01).CONCLUSION: JQC could reduce LGT-induced hepatotoxicity and nephrotoxicity, and enhance the antitumor efficacy via compatibility with JQC, and the toxicity-reduced mechanism could involve inhibiting hepatic and kidney oxidative stress and inflammation.     

当归补血汤对阿霉素化疗荷瘤小鼠的增效减毒作用

目的探讨当归补血汤对阿霉素化疗(Adriamycin,ADM)S180荷瘤小鼠的增效减毒作用。方法建立S180荷瘤小鼠模型后,随机分为4组,对照组、ADM组、当归补血汤(高、中剂量)+ADM组,每组10只。造模次日开始给药,共13天,停药次日处死,观察抑瘤率、外周血象、骨髓有核细胞计数、骨髓DNA含量、心肌超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力和丙二醛(Maleic Dialdehyde,MDA)含量的变化。结果当归补血汤可提高ADM对S180荷瘤小鼠的抑瘤率(P<0.05),对抗ADM所致外周血白细胞(WBC)、骨髓有核细胞计数、骨髓DNA含量和心肌SOD活力的降低(P﹤0.05或P﹤0.01),同时还可降低ADM化疗后小鼠心肌MDA的含量(P﹤0.05)。结论当归补血汤对化疗药物ADM抗S180荷瘤小鼠具有增效减毒的作用。     

南方红豆杉总黄酮、总多糖与紫杉醇配伍增效减毒作用研究

目的:研究南方红豆杉中总黄酮、总多糖及其与紫杉醇配伍抗肿瘤的增效减毒作用。方法:采用MTT比色法,观察南方红豆杉中总黄酮、总多糖及其与紫杉醇配伍对4T1、A549、MCF-7细胞增殖抑制率的影响;利用等效线图探讨联合用药的行为。采用均匀设计分组,培养S180肉瘤ICR小鼠,观察配伍对荷瘤小鼠移植瘤生长的抑制情况;血液细胞分析仪检测血常规。结果:体外总多糖、总黄酮能够增强紫杉醇对4T1、A549细胞的抑制作用;总多糖能够增强紫杉醇体外对MCF-7细胞、体内对S180荷瘤小鼠移植瘤的抑制作用,体内减轻紫杉醇抗肿瘤时的骨髓抑制毒副作用。结论:紫杉醇可以通过配伍南方红豆杉总黄酮、总多糖达到增效减毒作用。     

肉苁蓉对化疗荷瘤小鼠增效减毒作用的研究

目的探讨肉苁蓉对化疗荷瘤小鼠的增效减毒作用。方法建立S180荷瘤鼠模型后,随机分为4组,荷瘤对照组、单纯化疗组、肉苁蓉高、中剂量组,每组10只。造模次日开始给药,共10 d,停药次日处死,观察瘤重抑制率、外周血象、骨髓有核细胞计数、骨髓DNA、NK细胞活性、T淋巴细胞增殖能力。结果肉苁蓉可提高CTX的抑瘤率(P(0.05),增强化疗荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力和自然杀伤细胞(NK)活性(P(0.05)。同时还能对抗化疗药物CTX所致白细胞(WBC)、骨髓有核细胞和骨髓DNA的下降(P(0.05)。结论肉苁蓉对化疗药物CTX抗S180小鼠具有增效减毒的作用。     

雷公藤“以药制药”炮制减毒作用的整体评价

目的整体评价雷公藤"以药制药"炮制减毒作用。方法通过主成分分析和灰色关联分析方法,整体评价炮制减毒作用。结果金银花、白芍、金钱草、甘草、绿豆"以药制药"炮制雷公藤后,可以使雷公藤诱导小鼠生理、两种肿瘤(荷瘤S180和H22)状态下的减毒作用谱的总体得分均显著下降,其中尤以金钱草炮制后下降幅度为最高,且金钱草、金银花、绿豆后对两种肿瘤状态下的减毒作用均明显高于其对生理状态下的减毒作用。结论金钱草、金银花、绿豆、白芍、甘草均对雷公藤均有"以药制药"炮制减毒作用,且以金钱草作用最佳;其中,金钱草、金银花、绿豆对雷公藤的"以药制药"炮制减毒作用体现了中医"有故无殒"的重要思想。     

六君子汤对环磷酰胺的增效减毒作用研究

目的探讨六君子汤对环磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）的增效减毒作用。方法建立S180荷瘤小鼠模型后，随机分为4组，即荷瘤对照组、CTX组、六君子汤高剂量＋CTX组、六君子汤低剂量＋CTX组，每组10只。造模次日开始给药，共10d，停药次日处死，观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况及对小鼠免疫系统和抗氧化酶的影响。结果六君子汤可提高CTX的抑瘤率及血清SOD、GSH—Px活性，降低MDA含量，同时还能增强化疗荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力和自然杀伤细胞（NK）活性（P〈0．05）。结论六君子汤对化疗药物CTX具有增效减毒的作用，其作用可能是通过提高免疫系统功能和抗氧化功能实现的。     

癌化液对荷瘤动物化疗增效和减毒作用的实验研究

癌化液60mg/kg、30mg/kg可增强5mg/kg环磷酰胺和呋氟尿嘧啶对EAC及S180荷瘤小鼠体内抗肿瘤作用。对100mg/kg环磷酰胺所致H22荷瘤小鼠外周白细胞及骨髓有核细胞减少有明显的提高作用,并能明显地对抗增高的谷丙转氨酶,对肝肾功能未见明显的影响。表明癌化液与化疗药合用时有明显的增效和减毒作用。     

壁虎不同提取工艺成分抗肿瘤作用的研究

目的 比较壁虎不同提取工艺成分对S180和H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及免疫器官的影响.方法 以肉瘤S180、肝癌H22荷瘤小鼠作为动物模型,以抑瘤率及胸腺、脾脏指数为指标比较壁虎原粉及水煎煮、胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解、仿生酶解等不同工艺成分的抗肿瘤作用.结果 3种酶解工艺成分对肉瘤S180和H22肝癌抑瘤率均明显高于原粉与水煎煮液,相比模型组有显著性差异(P＜0.05),但对荷瘤小鼠的胸腺指数、脾脏指数无明显影响.结论 壁虎酶解工艺成分对S180、H22荷瘤小鼠均有明显抗肿瘤作用.     

参虫颗粒体内抗肿瘤实验研究

目的了解参虫颗粒的体内抑瘤作用和对比化疗药物的影响。方法体内抑瘤率和生命延长率观察分别用S180、人肝癌H22荷瘤小鼠进行;增效减毒实验采用S180小鼠,环磷酰胺作为化疗药物毒性模型。结果2,4,8 g/kg的参虫颗粒对小鼠S180实体瘤的平均抑瘤率为18.05%,21.24%和27.28%;对H22实体瘤的平均抑瘤率分别为17.35%,20.34%和27.26%;S180和H22具有一定的抗肿瘤作用,对化疗药物环磷酰胺有明显的减毒增效作用。结论参虫颗粒对移植性小鼠S180和H22具有一定的抗肿瘤作用,对化疗药物环磷酰胺有明显的减毒增效作用。     

青龙衣不同提取部位的抗肿瘤作用研究

目的 观察青龙衣不同提取部位的抗肿瘤作用。方法 制备S180和H22荷瘤小鼠模型，青龙衣不同提取部位ip给药，观察其对S180小鼠的抑瘤作用及对胸腺、脾脏器官指数的影响，对S180和H22荷瘤小鼠癌细胞膜和红细胞膜表面唾液酸(SA)含量的影响。结果 青龙衣冷、热醇提取部位对S180荷瘤小鼠均有明显的抑瘤作用，并呈良好的剂量效应关系；对H22荷瘤小鼠可延长生存期；冷、热醇提取部位能显著降低S180和H22小鼠肿瘤细胞膜表面SA含量，同时显著提高荷瘤小鼠红细胞膜表面SA含量。结论 青龙衣冷、热醇提取部位具有抗肿瘤作用。     

金不换与雪上一枝蒿不同比例配伍的减毒增效作用

目的:探讨金不换水提物(WVBF)配伍雪上一枝蒿总生物碱(CFA)的解毒作用及对药效的影响。方法:建立斑马鱼心血管模型,评价心血管毒性;上下法测小鼠不同比例CFA-WVBF的半数致死量(LD50);以热板法和扭体法比较CFAWVBF 1∶2和1∶5配伍组对小鼠中枢和外周镇痛作用的影响。结果:在心血管毒性评价实验中,单药CFA除了200 mg·L~(-1)组外,别的质量浓度组对斑马鱼心率都没有影响,不诱发斑马鱼心律不齐,CFA 66.6,200 mg·L~(-1)可诱发斑马鱼毒性表型(P0.05)。在不同配伍组心血管毒性评价实验中,除了CFA-WVBF 1∶5配伍组,别的实验组都诱发明显的心血管毒性表型(P0.05)。CFA-WVBF 4个不同比例(5∶1,2∶1,1∶2,1∶5)的LD50依次增加,都高于单独CFA的LD50(P0.05)。在中枢镇痛实验中,CFA-WVBF按1∶2和1∶5配伍组均可提高小鼠的舔足痛阈值,其中按CFA-WVBF 1∶2混合给药组(20 mg·kg~(-1))的镇痛率比单独给予CFA(20 mg·kg~(-1))和阿司匹林组(200 mg·kg~(-1))的镇痛率要高(P0.05),而在给药90 min时1∶2配伍组的镇痛率与CFA组接近,都高于阿司匹林组(P0.05),说明CFA-WVBF 1∶2配伍组有减毒存效作用,按1∶5给药的镇痛率比单独给CFA明显增高,在30,60,90 min也逐渐增加(P0.05),说明CFA-WVBF 1∶5配伍组有减毒增效和延效作用。在外周镇痛方面,各配伍给药组均能有效抑制冰乙酸所致小鼠扭体反应,其中CFA-WVBF 1∶2配伍组的扭体抑制率低于单独给予CFA组(P0.05);CFA-WVBF 1∶5配伍组的扭体抑制率略高于CFA组(P0.05)。表明在外周镇痛方面,CFA-WVBF 1∶2配伍组有减毒减效作用,CFA-WVBF 1∶5配伍组有较弱的减毒增效作用。结论:CFA-WVBF配伍可以减轻CFA诱发的斑马鱼心血管毒性和小鼠急性毒性,CFA-WVBF 1∶2,1∶5配伍组可以提高中枢镇痛效应,CFA-WVBF 1∶5配伍组还可以增加外周镇痛作用,因此CFA-WVBF 1∶5配伍组减毒增效作用最好。     

薯蓣皂苷元对灌胃FT-207荷瘤小鼠的减毒作用

目的:研究薯蓣皂苷元(D iosgen in,D io)对替加氟(FT-207)抗肿瘤的增效减毒作用。方法:以小鼠MFC,HepA,H22和S180移植性肿瘤为模型测定其抑瘤率、生命延长率及荷瘤小鼠的免疫功能。结果:薯蓣皂苷元对小鼠MFC有明显的抑瘤作用,能提高巨噬细胞的功能,血清溶血素的含量。结论:薯蓣皂苷元可增加替加氟的抑瘤效果,提高机体免疫功能,减轻化疗毒副反应。     

蒲薏颗粒对化疗药物减毒作用的研究

目的:研究蒲薏颗粒对化疗药物的减毒作用。方法:小鼠右腋皮下接种肝癌H22造成荷瘤动物模型,观察蒲薏颗粒与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合用药对荷瘤小鼠血小板、白细胞、血红蛋白、骨髓有核细胞计数、脾脏和胸腺指数的影响,探讨蒲薏颗粒对5-Fu的减毒作用。结果:蒲薏颗粒可对抗5-Fu降低荷瘤小鼠血小板、白细胞、血红蛋白、骨髓有核细胞、脾脏指数和胸腺指数的作用。结论:蒲薏颗粒对5-Fu有明显的减毒作用。     

芦荟多糖的抑瘤作用及其机理研究

目的研究芦荟多糖(AP)的抗瘤作用及其机制。方法采用移植性S180肿瘤小鼠(实体瘤)和H22肝癌小鼠(腹水瘤),单独ip或ivAP,或与环磷酰胺(CTX)、阿霉素(ADM)、氟脲嘧啶(FU)联合用药。连续给药10天后,S180肿瘤小鼠剥取瘤块,称重,减毒试验则于处死前采血,化验血象,计算脾指数和胸腺指数;H22肝癌小鼠停药后观察生存时间,或于停药后24小时取血,放射免疫分析法测IL-2和TNF含量。结果AP25mg/kg·d、50mg/kg·d两个剂量单独给药时,能显著降低S180肉瘤移植小鼠瘤块重量,显著延长H22肝癌移植小鼠的生存时间;与三种抗肿瘤药物合用时,均有不同程度的增效作用,且可减轻化疗药物的副作用;可显著提高荷瘤鼠血清中IL-2、TNF含量。结论AP对移植性S180肿瘤小鼠和H22肝癌小鼠具有抗肿瘤作用及化疗增效和减毒的双重作用,其机理可能是诱生IL-2、TNF及提高机体免疫力。     

龙葵碱对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响

目的探讨龙葵碱对S180及H22荷瘤小鼠红细胞免疫功能的作用。方法观察S180荷瘤小鼠和H22荷瘤小鼠的红细胞免疫黏附肿瘤细胞能力,采用DPH荧光探针,用荧光偏振法测定荧光偏振度(P),并计算膜的微黏度(η)研究红细胞膜脂流动性(LFU)。结果龙葵碱能升高S180和H22荷瘤小鼠的红细胞黏附肿瘤细胞的花环率,提高两种荷瘤小鼠的红细胞膜的流动性。结论龙葵碱可能是通过提高两种荷瘤小鼠的红细胞膜的流动性,从而恢复荷瘤小鼠红细胞免疫功能进而达到抗肿瘤作用。     

槲皮素二水对多柔比星抗肿瘤的增效及减毒作用研究

目的:了解槲皮素二水与多柔比星(doxorubicin,ADM)联合用药后能否增强多柔比星的抗肿瘤作用,并且观察槲皮素二水能否减低多柔比星对心脏的毒副作用。方法:增效作用采用槲皮素二水不同剂量与多柔比星联合用药,以荷动物移植性肿瘤肝癌(H22)小鼠模型观察其对小鼠生命延长率的影响,以荷动物移植性肉瘤实体型(S180)小鼠模型来观察其对抑瘤率的影响;减毒作用研究采用家兔多柔比星心肌损伤模型,观察槲皮素二水治疗后外周血心肌酶谱:肌酸激酶(CK)、CK同工酶MB亚型(CK-MB)、C-反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷草转氨酶(AST)的变化。结果:增效作用显示槲皮素二水(100μg/g)合用多柔比星与模型对照组对比,能明显延长荷H22腹水瘤小鼠的生存时间,并对小鼠S180实体瘤有明显抑制作用;与单用多柔比星组对比,抑制对荷H22腹水瘤小鼠的生存时间有延长趋势,S180实体瘤作用显著增强。减毒作用显示槲皮素二水治疗组与模型对照组对比,CK、CK-MB、CR、LDH和AST均有降低,差别有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:槲皮素二水与多柔比星联合用药能明显增强多柔比星对小鼠H22腹水瘤和S180实体瘤的抑制作用,并对多柔比星所致家兔心肌功能损伤有明显保护作用。