HPLC法测定杜仲雄花和杜仲雄花茶中京尼平苷酸、绿原酸和京尼平苷

目的 建立同时测定杜仲雄花及其制剂杜仲雄花茶中京尼平苷酸、绿原酸和京尼平苷的方法。方法 采用反相高效液相色谱法。色谱条件为迪马公司Diamonsil^TM C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm）,甲醇-水-冰醋酸（15∶85∶1.5)为流动相,体积流量为1 mL/min,柱温为25~27 ℃,检测波长为237 nm,灵敏度为0.100 0 AUFS。结果 京尼平苷酸、绿原酸及京尼平苷进样量与色谱峰面积线性关系良好。结论 该方法简便、准确,可用于杜仲雄花及杜仲雄花茶中京尼平苷酸、绿原酸及京尼平苷的测定。     

HPLC法同时测定杜仲皮中京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷和松脂醇二葡萄糖苷

目的 HPLC法同时测定杜仲皮中京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷4种有效成分的量,为更好控制杜仲皮质量提供依据。方法 采用Kromasil C₁₈柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）,乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）梯度洗脱,0～7 min,7% A;7～35 min,14% A;35～45 min,15% A。体积流量1.0 mL/min,检测波长235 nm,柱温30 ℃。结果 在该色谱条件下,京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷分别在0.102 5～0.512 5（r＝0.999 9）、0.092 5～0.462 5（r＝0.999 9）、0.120 0～0.600 0（r＝0.999 6）、0.090 0～0.450 0 μg/mL（r＝0.999 8）内与色谱峰峰面积呈现良好的线性关系,加样回收率分别为98.97%、98.71%、98.20%、100.44%,RSD分别为1.54%、1.30%、0.76%、1.13%。结论 该分析方法快速准确、重现性好,可为杜仲药材的质量控制与标准的完善提供可靠的检测依据。     

固相萃取分离纯化杜仲中环烯醚萜类化合物

杜仲是我国传统的名贵药材,有补肝降压、增强免疫功能及抗癌、抗疲劳等多种药理作用[1,2]。药理研究表明,杜仲中的京尼平苷、京尼平苷酸等环烯醚萜类化合物是主要的降血压活性成分,而其中的桃叶珊瑚苷却具有升高血压的作用[3,4]。因此,将杜仲中京尼平苷、京尼平苷酸与桃叶珊瑚苷分离十分有应用价值。固相萃取技术是一个包含液相和固相的物理过程,在药物、环境、农药等的分析中常作为一种预处理手段,具有分离纯化效率高、操作简便、溶剂耗量少等优点[5]。本实验采用以未键合的硅胶为填料进行固相萃取,以不同极性的溶剂萃取分离纯化杜仲中的环…     

车前子超微速溶饮片中京尼平苷酸与毛蕊花糖苷的含量测定

目的：建立一种同步测定车前子超微速溶饮片中京尼平苷酸与毛蕊花糖苷含量的高效液相色谱方法。方法：色谱柱为HypersilODS2C18柱（4．6mm×250mm,5p,m）,流速：1．0mL/min,检测波长：254nm,柱温：35℃。结果：京尼平苷酸与毛蕊花糖苷的线性范围分别为59．88μg/mL～159．68μg/mL（r=0．9999）和91．26μg/mL～243．36μg/mL（r=0．9999）;平均加样回收率分别为100．5％（RSD：1．1％,n=6）和99．7％（RSD=1．3％,n=6）。结论：本方法操作简便,测定结果准确,重复性好,可作为该产品质控的方法。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆甘草酸及其代谢物的浓度及药物动力学研究

目的 建立测定大鼠血浆中甘草酸及其代谢产物甘草次酸含量的超高效液相色谱-串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)方法，进行大鼠体内药物动力学研究。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈(2.1 mm×150 mm, 1.7μm),以5 mmol/L乙酸铵(A)-乙腈(B)为流动相，梯度洗脱，流速0.3 mL/min,电喷雾离子源，负离子模式下，多反应监测(MRM)方式，以格列喹酮为内标；大鼠口服给药，取血后血样经甲醇沉淀蛋白，检测大鼠血药浓度。结果 甘草酸与甘草次酸血浆浓度在0.009 9～2.899 0μg/mL与0.040 0～26.890 0μg/mL范围内线性关系良好，方法学各项指标均符合要求。药动学参数甘草酸T_max为(1.83±0.41) h, C_max为(0.42±0.04)μg/mL,AUC_0-∞为(2.13±0.43) h·μg^-1·mL^-1,t_1/2为(16.74±8.45) h。代谢产物甘草次酸T     

炮制时间对杜仲指标成分含量及药代动力学影响研究

[目的]建立液相色谱-质谱/质谱联用法(LC-MS/MS)应用于同时测定不同炮制时间杜仲中主要成分京尼平苷(GP)、京尼平苷酸(GPA)、桃叶珊瑚苷(AU)、松脂醇二葡萄糖苷(SG)的定量分析方法,研究不同炮制时间对杜仲中4个指标成分在大鼠体内药代动力学行为的影响。[方法]按照杜仲的药典盐炮制方法炮制,分别于0、1、2、4 h取样。以马钱子素(MS)为内标,应用LC-MS/MS建立的方法测定不同炮制时间杜仲中4个目标成分含量及药代动力学入血成分含量。[结果]各目标成分在测定范围内呈良好线性关系;杜仲炮制时间宜控制在2 h较为合理。[结论]本研究从体内暴露角度描述了炮制对目标成分的影响,研究结果对杜仲的炮制和临床应用具有指导意义。     

半枝莲提取物中半枝莲碱A和半枝莲碱B大鼠体内药代动力学研究

目的?建立同时测定生物样品中半枝莲碱A和半枝莲碱B的LC-MS/MS分析方法,并对其药代动力学进行研究。方法?血浆样品采用乙酸乙酯萃取,BDS Hypersil C₁₈(50mm×2.1mm, 2.4μm)色谱柱进行梯度洗脱,柱温40℃,流动相为乙腈:0.05％甲酸水溶液,流速为0.25mL/min。电喷雾离子源,MRM模式。大鼠单剂量灌胃500mg/kg半枝莲提取物后,检测半枝莲碱A和半枝莲碱B的血药浓度,DAS软件对其血药浓度-时间曲线进行拟合,统计矩模型计算药动学参数。结果?半枝莲碱A和半枝莲碱B在0.512~258.0ng/mL和0.482~241.0ng/mL间线性关系良好（r2>0.994）;精密度、准确度、提取回收率和基质效应、稳定性均符合生物样品分析要求。半枝莲碱A和半枝莲碱B的AUC_(0-t)分别为(88.69±12.4)μg/L·h和(57.09±9.84)μg/L·h,达峰浓度分别为(10.22±1.31)ng/mL和(6.27±0.80)ng/mL。结论?该方法简便、准确、灵敏,可用于半枝莲提取物中半枝莲碱A和半枝莲碱B体内药代动力学研究。      

车前子酒炙工艺优选及其不同炮制品对比研究

[目的] 优选酒炙车前子的最佳炮制工艺,并对车前子生品、酒炙品、盐炙品进行对比研究。[方法] 以车前子中京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量为考察指标,选择加酒量、闷润时间、炒制温度、炒制时间为考察因素,通过单因素实验优选车前子的最佳酒炙工艺。采用高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-DAD）建立车前子水提液指纹图谱测定方法,通过指标成分含量、不同炮制品水提液的出膏率及指纹图谱相似度分析不同炮制品间的差异。[结果] 酒炙车前子的最佳炮制工艺为每100 g车前子加黄酒10 g,闷润60 min,150℃下炒制9 min。经盐炙和酒炙后,车前子中的京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量均较生品显著增加,而两种炮制品并无统计学差异;在出膏率方面,盐炙和酒炙车前子的出膏率无明显差异,但均高于生车前子。高效液相色谱（HPLC）指纹图谱显示车前子生品、盐炙品和酒炙品具有很好的相似度。[结论] 优选出的车前子酒炙工艺稳定可行,并与盐车前子在成分上具有一致性,鉴于酒车前子已不再流通,在经典名方的开发研究中,可考虑用现行通用的盐车前子取代。     

RP-HPLC法测定杜仲冲剂中3种成分的含量

目的:建立杜仲冲剂中京尼平苷酸(GPA)、绿原酸(CA)、京尼平苷(GP)3种成分含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Diamonsil(钻石)C18色谱柱(5μm,150 mm×4.6 mm),甲醇-水-冰醋酸(14∶86∶1.2)为流动相,检测波长237 nm。结果:该方法线性关系良好。GPA,CA,GP的精密度分别为1.82%,1.38%,1.92%。加样回收率分别为97.5%,97.9%,96.8%。结论:本方法简便快捷、重现性好,可用于同时测定杜仲冲剂中3种有效成分含量。     

复方磺胺甲噁唑人体药动学与生物等效性研究

目的 研究单次空腹口服复方磺胺甲噁唑片在健康受试者体内的人体药代动力学特征和生物等效性。方法 试验采用单中心、随机、开放、单剂量、两制剂、两周期、两序列交叉设计,24例受试者分别空腹口服复方磺胺甲噁唑受试制剂T或参比制剂R。采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测血浆中的磺胺甲噁唑和甲氧苄啶的血药浓度,用Phoenix WinNonlin 8.2软件计算药动学参数,评价两制剂生物等效性。结果 空腹试验受试制剂T和参比制剂R的磺胺甲噁唑C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞分别为(27.340±3.400)和(28.042±3.527)μg/mL、(375.2±38.7)和(371.5±35.4)h·μg/mL、(390.0±42.9)和(386.7±41.0)h·μg/mL;甲氧苄啶C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞分别为(0.845±0.198)和(0.838±0.144)μg/mL、(8.7±1.3)和(8.2±1.5)h·μg/mL、...     

凝血酶活化标记物——纤维蛋白单体（FM）在外科术后的临床意义

  目的  探讨凝血酶活化标记物-纤维蛋白单体（FM）在外科术后的影响因素和临床意义。  方法  回顾性分析2021年12月至2022年5月昆明医科大学第二附属医院重症医学科收治的93例Ⅲ～Ⅳ级手术术后患者,收集患者临床资料和围术期出血量。记录手术前（T₀）纤维蛋白原（Fib）、术后当日（T₁）纤维蛋白原（Fib）和术后24 h（T₂）血浆纤维蛋白单体（FM）、抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）、血管性血友病因子（vWF）及纤维蛋白降解产物（DD二聚体）等指标。根据FM检测值的正常参考范围,将患者分为正常组、低水平组、中水平组、高水平组。统计描述患者临床资料;等级Logistic回归分析影响FM的因素;双变量相关性分析FM与Fib及DD的关系;方差分析不同疾病组FM的差异。  结果  （1）共纳入Ⅲ～Ⅳ级手术术后患者93例,平均年龄（59±13）岁,男性49例,女性44例。其中61例是恶性肿瘤患者（66%）,32例是非肿瘤患者（34%）;（2）纤维蛋白单体（FM）正常水平组（≤5 μg/mL）9例（9.7%）,FM（4.32±1.07） μg/mL;低水平组（6～54 μg/mL）39例（41.9%）,FM（20.67±13.25） μg/mL;中水平组（55～103 μg/mL）11例（11.8%）,FM（73.96±13.38） μg/mL;高水平组（≥104 μg/mL）34例（36.6%）,FM（172.30±26.78）μg/L,方差分析（ANOVA）显示正常水平组和低水平组间差异有统计学意义（P < 0.05）,其余各组间差异有统计学意义（P < 0.001）。等级Logistic回归分析显示:出血量达600～1000 mL和胃肠道手术会影响FM的浓度（P < 0.05）。vWF、AT-Ⅲ、肝脏恶性肿瘤、肾脏恶性肿瘤、其他非肿瘤性疾病、年龄、性别均对纤维蛋白单体（FM）浓度无明显影响（P > 0.05）;（3）双变量相关分析显示FM与T₀、T₁时间Fib无相关性,但是与T₂时间Fib呈负相关（r = -0.258,P < 0.05）,T₂时间DD与FM呈正相关（r = 0.536,P < 0.001）;（4）肝脏恶性肿瘤患者术后血浆纤维蛋白单体（FM）（76.4 μg/mL）浓度明显高于胃肠道肿瘤术后患者（25.7 μgmL）,DunnettT3检验显示两者间差异有统计学意义（P < 0.05）。  结论  纤维蛋白单体（FM）反应凝血酶的激活,与DD二聚体成正相关性,术后监测纤维蛋白单体（FM）有助于判断血栓事件。外科术后凝血酶大量活化（即FM升高）与纤维蛋白原（Fib）呈负相关性,即凝血酶大量活化会水解纤维蛋白原（Fib）导致纤维蛋白原降低,外科术后应关注纤维蛋白原浓度,以免发生出血。     

LC-MS/MS法测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的：建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在人体内的药代动力学。方法：血浆样品经乙酸乙酯萃取后,在正离子检测方式下选择多反应监测扫描方式进行质谱分析。结果：血浆中的内源性物质对样品测定无干扰,专属性良好。辛伐他汀的线性范围为0.1~10ng/mL,最低定量限为0.1ng/mL,平均提取回收率为81.4%,日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析的要求。测定的辛伐他汀片在人体内T1/2为（2.46±1.25）h;Tmax为（1.96±1.00）h;Cmax为（1.70±1.48）ng/mL;AUC0-24为（7.08±5.27）ng.h/mL;AUC0-∞为（8.11±5.83）ng.h/mL。结论：该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,可以满足本实验低浓度药物测定及药代动力学研究。     

术后早期应用微量普通肝素对剖宫产患者血液流变性的影响

目的:探讨微量普通肝素对剖宫产患者术后早期血液流变性影响。方法:持续硬膜外麻醉下行剖腹取胎术40例,年龄25～30岁、ASAⅠ～Ⅱ级,随机分为肝素组（H组）和对照组（C组）,每组20例。H组术毕即刻进行48h微量普通肝素治疗。记录麻醉前5min（T₁）、术后1h（T₂）、6h（T₃）、24h（T₄）、48h（T₅）的高切变率全血粘度（Hηb）、低切变率全血粘度（Lηb）、血浆粘度（ηp）、全血还原粘度（ηr）、红细胞聚集指数（EAI）、红细胞变形指数（EDI）、红细胞刚性指数（ERI）、红细胞压积（Hct）、红细胞沉降率（ESR）、红细胞电泳时间（EET）。结果:T₃～T₅时H组Hηb、Lηb、ηr、EAI、ERI、EET明显降低（P<0.05）,T4、T₅时ηp也明显降低（P<0.05）,T₅时H组Hηb、Lηb、ηp、ηr、ERI、EET明显低于C组（P<0.05）。结论:术后早期剖宫产患者血液粘度增加,早期使用微量普通肝素治疗可改善剖宫产患者血液流变性,降低产后静脉血栓栓塞症发生率。     

不同麻醉深度对快速外科康复腹腔镜全子宫切除术患者应激反应的影响

目的 探讨不同麻醉深度对快速外科康复(enhanced recovery after surgery,ERAS)妇科腹腔镜全子宫切除术患者应激反应的影响.方法 选取择期行腹腔镜全子宫切除术患者60例,ASAⅠ～Ⅱ级,BMI 20～28 kg/m2,采用随机数字表法分为两组:浅麻醉组(L组,n=30)和深麻醉组(D组,n...     

格列吡嗪的人体相对生物利用度与生物等效性研究

目的研究两种格列吡嗪的相对生物利用度及其生物等效性。方法采用双周期、随机、交叉试验设计,18例男性健康受试者随机分成两组,单剂量、交叉口服受试制剂及参比制剂格列吡嗪5mg,采集不同时间点的静脉血样,用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS／MS）测定给药后不同时间格列吡嗪的血药浓度。结果受试试剂及参比试剂的主要药代动力学参数如下：Tmax分别为（2．61±1．57）小时和（3．42士1．64）小时;Cmax分别为（382．15±109．54）ng／mL和（372．10士103．64）ng／mL;t1／2分别为（4．51土0．95）小时和（4．92土0．76）小时;AUC㈣4分别为（2198．13土735．82）ng／（h·mL）和（2138．23±664．2）ng／（h·mL）;AUCo一分别为（2345．10土755．33）ng／（h·mL）和（2335．62士625．43）ng／（h·mL）。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度F为102．37％±25．39％。统计分析结果表明,两者在不同制剂间和不同周期间差异无显著性（P〉0．05）。结论格列吡嗪的受试制剂与参比制剂具有生物等效性。     

目标导向液体管理对胰十二指肠切除术患者肠道功能的影响

目的 探讨目标导向液体管理（goal-directed fluid therapy, GDFT）对胰十二指肠切除术患者肠道功能的影响。方法 选取2018年2月至2021年3月咸阳市中心医院行腹腔镜胰十二指肠切除术的102例患者,采用随机数表法分为G组和C组各51例。G组采用GDFT治疗,C组采用常规补液治疗。记录两组患者血管活性药物使用率、输液总量、晶胶体使用量、尿量和出血量。记录两组患者麻醉前（T₀）、手术开始时（T₁）、标本切除时（T₂）、手术结束（T₃）时的平均动脉压（mean artery pressure, MAP）、心率（heart rate, HR）、心脏指数（cardiac index, CI）、中心静脉压（central venous pressure, CVP）、每搏变异度（stroke volume variation, SVV）等情况;在T₀及术后1,2,3 d（T₄,T₅,T₆）测定患者血浆二胺氧化酶（diamine oxidase, DAO）、D-乳酸、脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）和外周血人肠脂肪酸结合蛋白（intestinal fatty acid binding protein,iFABP）的浓度。记录两组患者术后气管拔管时间、排气时间、进食时间和住院时间。结果 G组的输液总量、晶体液及胶体液少于C组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者血管活性药物使用率、尿量及出血量比较差异无统计学意义（P>0.05）。与T₀时比较,G组T₁~T₃时MAP和SVV均下降,T₂、T₃时CVP上升;与T₀时比较,C组T₁~T₃时MAP和CI均下降,CVP上升,T₂、T₃时SVV下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。与C组比较,G组T₁~T₃时MAP和CI升高,SVV下降;G组T₂、T₃时CVP下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。与T₀时比较,两组患者T₄~T₆时的血浆DAO、D-乳酸、LPS及外周血iFABP浓度均升高,差异有统计学意义（P<0.05）;T₄~T₆时G组的血浆DAO、D-乳酸、LPS及外周血iFABP浓度均低于C组,差异有统计学意义（P<0.05）。G组患者术后拔管时间、术后排气时间、进食时间及住院时间均短于C组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 目标导向液体管理应用于胰十二指肠切除术中可维持血流动力学稳定,提高微循环灌注,改善组织氧供,缩短患者住院时间,对患者肠黏膜屏障功能有保护作用。     

无创心排血量监测评估呋塞米预处理后经尿道等离子双极电切术对老年患者血流动力学的影响

目的 应用无创心排血量监测观察呋塞米预处理后经尿道等离子双极电切术 （plasmakinetic resection of the prostate,PKRP）对老年患者血流动力学的影响。方法 选取2020年10月至2021年11月陕西省森林工业职工医院择期行经尿道PKRP男性患者50例,年龄65~80岁,ASAⅠ~Ⅱ级,BMI 20~28 kg/m²,采用随机数字表法分为两组（n=25）：对照组（C组）和预处理组（P组）。C组手术过程中出现恶心、呕吐、烦躁、血压升高、心率降低等前列腺电切术综合征（transurethral resection syndrome, TURS）先兆时给予呋塞米20 mg进行处理,P组手术60 min时给予呋塞米20 mg预处理。记录术前（T₀）、麻醉后（T₁）、手术开始（T₂）、手术30 min（T₃）、手术60 min（T₄）、手术90 min（T₅）、手术结束（T₆）7个不同时间点平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）、心率（heart rate,HR）、每搏输出量变异（stroke volume variation, SVV）及全身液体水平（total body water, TBW）等血流动力学指标。于T₀、T₃、T₄、T₅、T₆采集动脉血2 mL,记录动脉血Na⁺、K⁺、血红蛋白（hemoglobin, Hb）、红细胞比容（hematocrit, Hct）数值。记录术中手术时间、输血例数、总输液量、总灌洗量、用药次数及TURS发生率。结果 与C组比较,P组T_5-6时HR升高、TBW和MAP降低,T₆时SVV降低、Hb升高（P<0.05）。与T₀时比较,C组T_4-6时HR降低、MAP和TBW升高,T₁、T_4-6时SVV升高;P组T₄时HR降低、MAP升高,T₁、T_4-5时SVV升高,T_4-5时TBW升高（P<0.05）。两组患者组间及组内不同时间点血气指标Na⁺、K⁺、Hct和术中用药次数及TURS发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 手术60 min时给予呋塞米预处理可维持经尿道PKRP老年患者术中血流动力学稳定。无创心排血量监测可有效评估呋塞米预处理对术中血流动力学变化的影响,为临床治疗提供参考。     

胸腰段骨折伴脊髓损伤的术式选择以及疗效分析

目的:探讨胸腰段骨折伴脊髓损伤的治疗。方法:胸腰段骨折伴脊髓损伤患者39例,全部均采用前路、后路及前后联合手术入路的方法行手术治疗。其中单节段受累35例,T₁₁ 5例、T₁₂ 15例、L₁ 15例。双节断受累4例、T₁₁和T₁₂ 3例、T₁₂L₁ 1例。结果:所有的脊髓均获得了充分的有效的减压,脊柱得到了良好的内固定,平均随访了24个月,植骨处融合良好,有1例出现了脊柱后凸畸形,有2例出现椎弓根螺钉松动,伤椎由术前的（1.6±0.3）cm恢复到术后的（3.0±0.3）cm,cobb角由术前的（27±2）°恢复到（40±3）°。结论:胸腰段骨折伴脊髓损伤的手术治疗中,前后路均为有效的方法,且各有优缺点。     

多模态MRI诊断早期髌软骨损伤的研究

  目的  探讨扩散张量成像(DTI)及T₂*mapping评估早期髌软骨损伤的临床应用价值。   方法  收集2017年1月—2020年1月温州市中医院行膝关节镜检查Outerbridge分级为Ⅰ、Ⅱ级的早期髌软骨损伤患者32例及髌软骨正常者31例,所有入组对象均行膝关节MRI常规扫描、DTI及T₂*mapping检查。分析早期髌软骨损伤及正常者DTI、T₂*mapping的影像学表现,比较各定量参数的差异并分析DTI、T₂*mapping各定量参数的诊断效能。   结果  对照组及早期损伤组的各向异性分数(FA)、表观弥散系数(ADC)与T₂*值分别为0.42±0.08和0.31±0.09、(1.31±0.17)×10-3 mm2/s和(1.86±0.27)×10-3 mm2/s、(36.40±8.32)ms和(54.39±8.04)ms,各参数2组间比较差异均具有统计学意义(均P < 0.05)。以0.35为阈值时,FA值诊断早期髌软骨损伤的灵敏度、特异度分别为88.3%、83.6%;以1.56×10-3 mm2/s为阈值时,ADC值诊断早期髌软骨损伤的灵敏度、特异度分别为90.6%、84.2%;以46.88 ms为阈值时,T₂*值诊断早期髌软骨损伤的灵敏度、特异度分别为85.4%、80.3%。   结论  多模态MRI成像定量参数对早期髌软骨损伤具有较高的诊断效能,对早期髌软骨损伤的诊断及评估等具有一定的临床应用价值。