RhoA/ROCK信号通路在糖尿病结肠肌层中的表达

背景:糖尿病(DM)胃肠动力障碍的机制目前尚不明确,越来越多的研究认为胃肠平滑肌肌源性因素在该病的发生中起重要作用。近年RhoA/ROCK信号通路在DM并发症中的作用成为研究热点。目的:分析DM患者结肠肌层中RhoA/ROCK信号通路主要信号分子的表达变化,探讨该信号通路在DM结肠动力障碍中的可能作用。方法:收集2012年9月-2013年12月南京医科大学第一附属医院行结肠癌根治术患者的正常结肠组织,根据糖化血红蛋白水平,将患者分为DM组和对照组。采用免疫组化或蛋白质印迹法检测结肠肌层中RhoA/ROCK信号通路主要信号分子RhoA、ROCK1、MYPT1和p-MYPT1的表达情况。结果:免疫组化结果显示DM组结肠肌层中RhoA表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);蛋白质印迹法结果显示,与对照组相比,DM组RhoA、ROCK1和p-MYPT1蛋白表达均明显减少(0.62±0.42对1.15±0.69,0.54±0.09对0.75±0.05,0.70±0.28对1.04±0.47;P0.05),而MYPT1蛋白表达差异无统计学意义(0.94±0.50对1.21±0.80,P0.05)。结论:DM患者结肠肌层中RhoA/ROCK信号通路活性被抑制,可能与DM结肠动力障碍有一定相关性。     

活性氧与 RhoA/ROCK 信号通路对血管平滑肌细胞钙浓度及钙敏感性的影响

活性氧(ROS)是体内一类重要的第二信使,能在缺血缺氧的诱导下大量产生。缺氧信号能通过 ROS 调节血管平滑肌细胞内的钙浓度,从而引起其收缩反应;缺氧还有可能通过 ROS 激活 RhoA/ROCK 信号通路,对钙敏感性进行调节。对 ROS 以及 RhoA/ROCK 信号通路进行深入的研究,可以阐明缺氧性肺血管收缩以及肺动脉高压的发病机制,为缺氧性肺动脉高压的治疗提供新的思路。     

RhoA/ROCK信号通路在糖尿病心肌病发病机制中的研究进展

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)是糖尿病常见并发症之一,其发病机制仍未完全阐明。RhoA/ROCK信号通路介导胰岛素抵抗、氧化应激、炎症、细胞凋亡、心肌纤维化、心脏舒缩功能等途径参与DCM发病,且ROCK抑制剂——法舒地尔在DCM中显示了一定治疗作用。本文就RhoA/ROCK信号通路在DCM发病机制中的研究进展作一综述。     

RhoA/ROCK信号通路与动脉粥样硬化关系的研究进展

动脉粥样硬化是一种常见的全身性血管疾病,同时也是多种急性心血管疾病的病理基础。而急性心血管疾病的死亡率高,严重危害人们的生命健康。近年来,越来越多的研究表明RhoA/ROCK信号通路与动脉粥样硬化的形成有密切联系。抑制RhoA/ROCK信号通路可以通过稳定血管内皮功能、抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移、抑制血管钙化、调控炎症细胞聚集以及抑制血小板增殖变形来延缓或抑制动脉粥样硬化的形成。     

ROCK信号通路在血管平滑肌细胞增殖和迁移作用中的研究进展

血管重构是多种心血管疾病共同的病理学特征。血管平滑肌细胞增殖和迁移在血管重构的形成中起着关键性的作用。ROCK是RhoA下游的效应分子之一,在调控血管平滑肌细胞收缩、增殖、迁移、基因表达等多项细胞功能中被证实具有重要的细胞内信号转导作用。RhoA/ROCK信号途径可能是防止血管重构的新靶点。     

RhoA在肝纤维化中的作用机制

肝纤维化发生的关键在于肝星状细胞（HSC）转化为成纤维母细胞及活化后细胞外基质（ECM）的异常表达。回顾了Rho/ROCK信号通路在HSC的激活中的重要作用。总结了RhoA,作为Rho/ROCK信号通路上小G蛋白家庭成员之一,且作为一种重要的调节肌动蛋白细胞骨架和细胞形态异质性的细胞因子,参与肝纤维化的进程。指出RhoA在肝脏纤维化发生发展过程中起着重要的调控作用,归纳了RhoA通过调节肌动蛋白应力纤维的装配,并通过级联放大效应影响细胞基质的合成和收缩,最终影响肝纤维化的进展。就RhoA在肝纤维化过程中的机制以及RhoA作为潜在的治疗靶点作一综述。     

RhoA/ROCK通路参与血管紧张素Ⅱ诱导的血管外膜成纤维细胞表型转化

目的 血管外膜成纤维细胞(AF)的表型转化在血管重塑过程中起了重要作用.通过观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对血管AF中RhoA/ROCK通路活性的影响,探讨该通路在AF/肌成纤维细胞(MF)表型转化中的作用.方法 AngⅡ刺激体外培养的SD大鼠血管AF,测定刺激后10、30 min RhoA的活性变化,并分别测定2、6、12、24 h ROCK底物肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1(MYPT1)的磷酸化水平,Western blot检测AF/MF表型转化标记蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)的表达,并观察腺病毒dominant negative N19RhoA(dnN19RhoA,MOI=200)和ROCK抑制剂Y27632(10μmol/L)对α-SM-actin表达的影响.结果 AngⅡ刺激使AF RhoA活性的明显增强及ROCK底物MYPT1的磷酸化水平明显增加.刺激30 min RhoA活性约为未刺激的3倍,刺激12 h MYPT1的磷酸化约为未刺激的3.5倍.dnN19RhoA和Y27632均可明显抑制AngⅡ诱导的血管Afα-SM-actin表达,抑制α-SM-actin表达程度均约为75％.结论 AngⅡ可激活血管AF中的RhoA/ROCK通路,该通路参与了AngⅡ诱导的血管AF/MF表型转化.     

非对称性二甲基精氨酸通过Rho／ROCK信号通路介导大鼠血管平滑肌细胞迁移

目的探讨非对称性二甲基精氨酸（Asymmetric Dimethylarginine,ADMA）对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）迁移和形态变化的影响,并探索Rho／ROCK和MAPK信号转导通路在其中的作用。方法原代培养大鼠VSMCs,并通过转染二甲基精氨酸二甲胺水解酶hDDAH2过表达载体,L-精氨酸（1mM）或ROCK抑制剂Y27632等预处理,观察细胞RhoA蛋白与底物rhotekin蛋白结合程度,ROCK底物MYPT-1磷酸化程度、VSMC迁移能力和细胞骨架及黏着斑定位情况。结果（1）ADMA诱导平滑肌细胞Rho/OCK信号转导通路;（2）Rho/OCK和ERK信号通路交联介导ADMA对平滑肌细胞迁移能力的诱导作用;（3）ADMA通过Rho/OCK诱导平滑肌细胞骨架无序排列、黏着斑定位改变;（4）L-精氨酸对上述变化有逆转作用。结论ADMA通过Rho/OCK和ERKl／2信号交联诱导VSMC迁移和表型转化,而L-精氨酸逆转ADMA引起的改变。     

RhoA/ROCK通路参与血管紧张素Ⅱ诱导的血管外膜成纤维细胞表型转化

目的血管外膜成纤维细胞(AF)的表型转化在血管重塑过程中起了重要作用。通过观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对血管AF中RhoA/ROCK通路活性的影响,探讨该通路在AF/肌成纤维细胞(MF)表型转化中的作用。方法AngⅡ刺激体外培养的SD大鼠血管AF,测定刺激后10、30min RhoA的活性变化,并分别测定2、6、12、24hROCK底物肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1(MYPT1)的磷酸化水平,Western blot检测AF/MF表型转化标记蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)的表达,并观察腺病毒dominant negative N19RhoA(dnN19RhoA,MOI=200)和ROCK抑制剂Y27632(10μmol/L)对α-SM-actin表达的影响。结果AngⅡ刺激使AFRhoA活性的明显增强及ROCK底物MYPT1的磷酸化水平明显增加。刺激30min RhoA活性约为未刺激的3倍,刺激12hMYPT1的磷酸化约为未刺激的3.5倍。dnN19RhoA和Y27632均可明显抑制AngⅡ诱导的血管AFα-SM-actin表达,抑制α-SM-actin表达程度均约为75%。结论AngⅡ可激活血管AF中的RhoA/ROCK通路,该通路参与了AngⅡ诱导的血管AF/MF表型转化。     

Rho相关蛋白激酶与动脉粥样硬化关系的研究进展

<正>动脉粥样硬化(AS)是一种累及全身大血管壁的慢性炎性反应和脂质沉积过程,一些危险因素(如高血糖、血脂异常以及高血压等)可以激活多种信号通路参与AS的发展,Rho A/Rho相关蛋白激酶(ROCK)通路就是其中之一。越来越多的证据表明,RhoA/ROCK通路参与AS过程的许多步骤,ROCK可能成为AS的潜在治疗靶点,了解Rho/ROCK通路在AS进展过程中的作用对AS的防治有重要意义^[1]。     

胱胺抑制5-羟色胺诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖及机制

目的研究胱胺对5-羟色胺(5-HT)诱导的人肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖以及Ras同源基因家族成员A(RhoA)信号通路的影响。方法培养人PASMC,用1μmol/L 5-HT进行刺激,以胱胺进行干预。采用CCK8法观察细胞增殖情况;采用Western blot、免疫共沉淀检测RhoA信号通路各蛋白分子。结果 5-HT诱导人PASMC增殖,使RhoA 5-HT化、RhoA膜转位、Rho蛋白激酶2(ROCK2)表达以及肌球蛋白磷酸酶目标亚基1(MYPT1)、蛋白激酶B(Akt)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)磷酸化明显增加。胱胺抑制5-HT诱导的PASMC增殖、RhoA 5-HT化及MYPT1、Akt、ERK磷酸化,但对RhoA膜转位、ROCK2蛋白表达无显著影响。结论胱胺通过抑制RhoA 5-HT化从而抑制5-HT诱导的人PASMC增殖。     

RhoA/ROCK信号通路对免疫细胞的调控及其在心肌损伤中的潜在作用研究进展

心肌细胞损伤时会释放心脏分泌信号分子,从而激活先天性免疫系统和适应性免疫系统,通过协同刺激和正反馈通路进一步加重心脏炎症损伤.RhoGTP酶Ras同源家族成员A(RhoA)是参与应激介导的心肌细胞信号转导的关键蛋白质之一,其能够激活下游的ROCK激酶构成RhoA/ROCK信号通路,发挥诱导细胞肌动蛋白骨架重组及细胞迁移...     

高盐摄入增强大鼠动脉RhoA/ROCK通路的活性和降低细胞内钙水平

正本文研究过度摄入盐对血管中RhoA(Ras homolog gene family,member A)/Rho相关激酶(RhoA/Rho-associated kinase,ROCK)通路功能和钙调节的影响。方法:分离2%,4%或8%NaCl食物喂养的大鼠的主动脉和肠系膜小动脉,在器官浴槽中评估动脉RhoA/ROCK通路活性和细胞内钙动员情况。在4%NaCl组同时评估RhoA/ROCK通路指标水平和细胞内钙水平。结果:普通食物喂养的大鼠动脉,使用ROCK抑制剂Y-27632可降低对苯肾上腺素的反应,     

羟基红花黄色素通过RhoA/ROCK通路保护大鼠心肌再灌注损伤的机制研究

目的:研究羟基红花黄色素A对大鼠离体缺血心脏再灌注的保护作用,探讨其与Rho/ROCK信号通路的作用。方法:36只大鼠被随机分为7组,采用离体心脏灌流模型,给予缺血预处理及药物灌流,比较各组心率、冠状动脉流量,测定左心室内压,TTC心肌染色评估梗死范围,Western blot检测心肌组织内ROCK1、ROCK2活性以及Caspase-3的表达。结果:治疗组大鼠心脏缺血再灌注损伤减轻,心肌梗死面积减少,ROCK1、ROCK2活性以及Caspase-3的表达减低。结论:羟基红花黄色素A能够减轻大鼠心脏缺血再灌注损伤,同时减少心肌梗死面积,其作用机制可能与其抑制RhoA/ROCK信号通路,减少Caspase-3的表达有关。     

Rho/ROCK信号通路与脑动脉硬化患者血液流变学的相关性研究

目的探讨Rho/ROCK信号通路与脑动脉硬化(CAS)患者血液流变学之间的关系。方法选择CAS患者80例及健康体检者80例,收集血液样本,检测相应生物化学指标、Ras同族体基因家族成员A(RhoA)、Rho激酶2(ROCK2)水平及血细胞比容、全血表观黏度(高切、低切)、血浆黏度。比较2组血液流变学指标、RhoA、ROCK2水平;分析CAS患者RhoA、ROCK2水平与血液流变学指标的相关性。结果 CAS组吸烟比例、体质指数、空腹血糖、餐后2 h血糖、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、血清同型半胱氨酸均高于对照组(P0.05)。CAS组血细胞比容、全血表观黏度(高切、低切)、血浆黏度、ROCK2、RhoA水平均高于对照组(P 0.05)。Pearson相关分析及多重线性回归分析显示,ROCK2水平与血细胞比容、全血表观黏度高切、低切、血浆黏度呈正相关; RhoA水平与全血表观黏度(高切、低切)呈正相关。结论 Rho/ROCK信号通路与CAS患者血液流变学的异常密切相关,可能参与了CAS的发生发展。     

Rho激酶在心血管疾病中新进展及Rho激酶抑制剂的应用

Rho激酶(ROCK)被认为是治疗心血管疾病的新靶点。本文主要简述RhoA/ROCK通路在调节脉管系统的功能,并探讨其在心血管疾病发病中的作用机制。     

糖基化终末产物在糖尿病胃肠动力中的作用及其机制

糖尿病(DM)几乎可影响消化道所有部位,约75%的DM患者伴有胃肠动力障碍。DM胃肠动力障碍的确切机制仍不清楚,其发生系由多因素所致,可能与自主神经病变、平滑肌病变、Cajal间质细胞病变等有关。糖基化终末产物(AGEs)是体内葡萄糖与蛋白质、脂质或核酸等经非酶促反应生成的化合物。DM时的高糖环境可促进AGEs形成,AGEs异常蓄积在DM并发症如DM肾病、DM血管病变的发生、发展中起重要作用,但其与DM胃肠动力障碍的相关性少见报道。本文对AGEs在DM胃肠动力中的作用及其可能机制作一综述。     

Rho/ROCK信号通路在慢性充血性心力衰竭中的作用

Rho/Rho相关的卷曲蛋白激酶（ROCK）信号通路的关键信号分子包括Rho、ROCK及其主要效应分子肌球蛋白轻链磷酸酶（MLCP）、肌球蛋白轻链激酶（MLCK）、肌球蛋白轻链（MLC）等,该信号通路激活后可产生多种生物效应,如肌动蛋白细胞骨架形成、细胞收缩、钙敏化等,且这些效应与心力衰竭的发展过程有关.目前,对于Rho/ROCK信号通路的研究主要集中在心、脑血管系统中,如缺血性卒中、高血压、冠心病等.越来越多的研究表明,Rho/ROCK信号通路的关键分子在慢性充血性心力衰竭（CHF）中存在异常表达与活化,提示该信号转导通路在CHF发病机制中具有重要的作用.本文结合文献就Rho/ROCK信号通路在CHF过程中对细胞舒缩功能、交感兴奋、细胞凋亡等的作用综述如下.     

吡格列酮对糖尿病大鼠冠状动脉RhoA/ROCK信号通路的影响

目的 观察糖尿病（DM）大鼠和正常大鼠冠状动脉RhoA及Rho激酶（ROCK）表达水平及PPAR-γ激动剂吡格列酮（PIO）对糖尿病大鼠糖脂代谢及冠状动脉组织RhoA及ROCK表达水平的影响.方法 30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3组,对照组予普通饮食;DM组给予高果糖饮食＋链脲佐菌素（25 mg/kg）造模,PIO干预组在糖尿病组基础上给予吡格列酮10 mg·kg-1 ·d-1干预.4周后采血检测血糖、血脂及胰岛素水平,分离冠状动脉采用Western Blot法测定各组大鼠冠状动脉组织中RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达水平.结果 吡格列酮可显著降低DM大鼠胆固醇、三酰甘油及空腹胰岛素水平（均为P ＜0.05）.与对照组比较,DM组RhoA（F =5.131,P=0.019）、ROCK2蛋白表达水平升高（F=6.953,P=0.011）,ROCK1蛋白表达水平差异无统计学意义.给予PIO干预后ROCK2蛋白表达水平明显降低,差异具有统计学意义（F =4.323,P=0.045）.结论 PIO可显著改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗状态,降低TC及TG水平.糖尿病大鼠冠状动脉RhoA/ROCK蛋白表达增加,吡格列酮可显著降低糖尿病大鼠冠状动脉组织ROCK2蛋白表达水平.     

Toll样受体4与2型糖尿病及其并发症

介导先天免疫和炎性反应的Toll样受体(TLR)4参与了炎性反应性疾病的发病.炎性反应在2型糖尿病(T2DM)及其并发症的发生、发展中具有重要作用.TLR4信号通路的激活与胰岛素抵抗(IR)有关,而IR是T2DM及其大血管病变的重要病理生理基础,TLR4信号通路激活后炎性反应因子释放增加,与糖尿病微血管病变及神经病变密切相关.抑制TLR4信号通路的激活可能会防治T2DM及其并发症的发生、发展.