极低频电磁场对小鼠脑和肝细胞凋亡及细胞周期的影响

目的　研究极低频电磁场暴露对小鼠脑和肝细胞凋亡及细胞周期的影响。方法　小鼠经 5 0Hz、0 .2mT或 5 0Hz、6 .0mT电磁场暴露 2周 ,采用TUNEL法观察凋亡细胞 ,采用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果　 0 .2mT和 6 .0mT电磁场暴露后 ,脑细胞凋亡率分别为 ( 5 .6 0±1.4 7) %和 ( 4 .73± 0 .4 8) % ,与对照组 [( 2 .90± 0 .75 ) % ]比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;肝细胞凋亡率分别为 ( 4 .19± 2 .0 8) %和 ( 3.38± 0 .6 5 ) % ,与对照组 [( 1.84± 0 .76 ) % ]比较 ,差异亦有显著性 (P <0 .0 5 )。脑细胞G0 G1期细胞百分率分别为 ( 80 .2 1± 1.6 8) %和 ( 79.5 4± 0 .5 6 ) % ,肝细胞G0 G1期细胞百分率分别为 ( 79.4 2± 1.80 ) %和 ( 80 .4 7± 1.79) % ,与对照组 [分别为 ( 76 .85± 0 .83) %、( 73.36±3.10 ) % ]比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。与此同时 ,S期和G2 +M期的细胞百分率明显下降。结论　极低频电磁场暴露可能诱发小鼠脑和肝细胞周期改变 ,并可能进一步导致细胞凋亡。     

硒与氟对人肝细胞凋亡和脂质过氧化的影响

目的　研究硒、氟对离体培养的人肝细胞凋亡和脂质过氧化的影响。方法　体外培养的人肝细胞分别接触一定剂量的氟和 /或硒 1 2h后 ,检测肝细胞凋亡小体百分率、细胞周期构成比、还原型谷胱甘肽 (GSH)含量和脂质过氧化物 (LPO)的水平以及培养液中LPO和乳酸脱氢酶 (LDH)、丙氨酸转氨酶 (ALT)和天冬氨酸转氨酶 (AST)的活性。结果　加氟组肝细胞凋亡小体百分率 (1 5 557±2 0 56) % ,S期细胞数 (4 82 3± 0 454) % ,肝组织和培养液中LPO水平 [分别为 (2 884± 0 589)和 (3 547± 0 561 )nmol/LMDA/mg prot) ,培养液中AST和LDH含量 (分别为 91 1± 36 4和 1 4 0 4± 7 6U/L) ,均明显高于对照组 [分别为 (1 0 31 3± 1 0 2 3) % ,(3 2 53± 0 743) % ,(1 473± 0 40 1 )nmol/LMDA/mg ,(1 694± 0 443)nmol/LMDA/mg,(54 5± 3 2 )U/L和 (1 2 6 4± 2 6)U/L] ,而氟组肝组织GSH含量则明显低于对照组 [分别为 (4 2 2 5± 0 781 ) μg/mg和 (7 595± 1 0 4 2 ) μg/mg) ;硒可通过升高GSH含量 ,降低LPO、AST、LDH水平和凋亡小体百分率而拮抗氟产生的毒性作用。结论　一定剂量的硒可拮抗氟所诱导的肝细胞凋亡和脂质过氧化     

急性氨中毒患者心肌损伤的检测

目的　探讨检测急性氨中毒患者心肌损伤的比较好的指标。方法　分别测定 5 1例急性氨中毒患者及 2 0例正常对照组的心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸磷酸激酶 (CK)及其同工酶 (CK MB) ,同时作心电图检查。结果　重度氨中毒组心肌cTnT(1.2 85± 2 .6 5 0 ) μg L、CK(2 5 7.6 36± 36 2 .719)IU L、CK MB (2 0 .90 9± 19.770 )IU L ,均高于正常对照组 [心肌cTnT(0 .0 35± 0 .0 14 ) μg L、CK(82 .0 5 0± 36 .30 2 )IU L、CK MB(8.35 0± 2 .4 5 5 )IU L],差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;而轻度氨中毒组 [cTnT(0 .0 39± 0 .0 16 )μg L、CK(78.2 0 0± 2 8.4 0 1)IU L、CK MB(8.4 6 7± 2 .6 6 9)IU L]和中度氨中毒组 [cTnT(0 .0 5 4± 0 .0 4 3)μg L、CK(99.786± 71.94 1)IU L、CK MB(9.4 2 9± 3.85 7)IU L]与正常对照组相应各指标比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。心肌cTnT的阳性检出率 [6 8.2 % (15 2 2 ) ]高于CK[36 .4 % (8 2 2 ) ]、CK MB[31.2 %(7 2 2 ) ]和心电图 [31.2 % (7 2 2 ) ],差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　心肌cTnT有助于更好地检测重度氨中毒引起的心肌损伤。     

胚胎干细胞在心肌样环境中向心肌样细胞的分化情况

目的探讨心肌细胞促进胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)分化为心肌样细胞的诱导作用。方法收集小鼠3.5d胚龄的囊胚,将其培养在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上,4～5d后取内细胞团接种在饲养层上分离培养出ESCs。取3～5代ESCs,先将ESCs悬浮培养形成2～3d的拟胚体(embryoid bodies,EBs),再与新生大鼠心肌细胞共培养诱导向心肌细胞分化,相差显微镜下观察分化细胞的形态学变化,免疫细胞荧光技术检测心肌细胞特异性肌钙蛋白T(TnT)、а-肌动蛋白(а-Actin)的表达。结果诱导d3起可见自发性、有节律跳动的拟胚体出现,12d时共培养组约有93%的拟胚体出现节律性收缩,显著高于对照组,均表达心肌细胞特异性蛋白cTnT、а-actin,心肌细胞直接接触诱导组其分化比率达56.5%,分化的细胞形态较单一。结论心肌细胞与胚胎干细胞直接接触能促进胚胎干细胞向心肌细胞分化。     

壳聚糖对果蝇寿命影响的实验研究

目的　通过分析壳聚糖对果蝇寿命的影响 ,探讨壳聚糖的抗衰老作用。方法　以Ore gonK黑腹果蝇为研究对象 ,分别观察喂饲掺入 0 0 0 5 %、0 0 15 %、0 0 45 %、0 135 %壳聚糖的果蝇饲料对果蝇寿命的影响。结果　 0 0 15 %、0 0 45 %、0 135 %壳聚糖喂饲组雌性果蝇的平均寿命天数 (分别为 5 5 6± 15 6 ,6 0 7± 15 0 ,6 8 6± 17 1)较对照组 (5 1 0± 11 9)明显延长 (P <0 0 5 ) ;果蝇各剂量壳聚糖喂饲组的最高寿命天数 (雌性 :78 0± 4 1,80 9± 4 9,86 5± 3 4,94 1± 3 4;雄性 :83 0± 5 0 ,83 0±4 3,85 5± 5 3,82 9± 3 4)也较对照组 (雌性 :70 4± 2 9;雄性 :78 3± 5 3)明显延长 (P <0 0 1)。结论壳聚糖有延长果蝇寿命的作用     

吸烟气道炎症气道粘膜的免疫组化研究

目的　探讨吸烟气道炎症气道粘膜的免疫组织化学反应。　方法　以 8例健康吸烟者为研究对象 ,收集支气管肺泡灌注液 (BALF)及支气管粘膜活检 ,免疫组织化学方法检查T淋巴细胞 (CD45RO)、B淋巴细胞 (CD2 0 )、淋巴细胞白细胞 (LCA)、组织细胞 (CD68) ,与其健康不吸烟者作对照。　结果　 ( 1)BALF回收率 :对照组 [( 5 1 5± 3 4) % ]略高于吸烟组 [( 4 9 1± 8 5 ) % ,P >0 0 5 ] ;吸烟组细胞总数 [( 11 3 9± 7 3 3 ) 10 8/L]明显高于对照组 [( 1 2 7± 0 1) 10 8/L ,P <0 0 5 ] ;吸烟组肺泡巨噬细胞 (AM ) [( 9 74± 5 75 ) 10 8/L] ,明显高于对照组 [( 1 11± 0 15 ) 10 8/L ,P <0 0 5 ] ;吸烟组多形核白细胞 (PMN)绝对值 [( 5 71± 6 5 6) 10 7/L]及百分率 [( 3 63± 3 11) % ]亦高于对照组 [( 0 0 2± 0 0 1) 10 7/L、( 0 18±0 0 1) % ] ;( 2 )免疫组化 :吸烟组CD45Ro标记 8例均呈阳性表达 ( 10 0 % ) ;LCA标记 6例阳性 ,1例弱阳性 ,1例阴性 ,阳性率 87 5 % ;CD2 0 标记 8例均呈阴性 ;CD68标记 8例均呈阳性表达 (仅见极少量淋巴细胞 )。　结论　吸烟气道肺局部炎症以AM、PMN为主 ;免疫组化以T淋巴细胞 (CD45Ro)、淋巴细胞白细胞 (LCA)、组织细胞 (CD68)反应为主。     

骨髓间充质干细胞心肌移植对大鼠心梗后心功能的影响

目的　探讨骨髓间充质干细胞心肌移植对大鼠心梗后心功能及钙泵的影响。方法　取大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养、增殖和标记 ,同时以液氮冷冻左室游离壁建立心梗模型。 4周后分别将 2× 10 6个细胞悬液或冷D -Hanks液注入实验组和对照组心梗区数个不同部位。另取 5只大鼠作为正常组 ,仅行两次开胸手术。 4周后行心功能测定及取标本 ,RT -PCR检测SERCA2基因mRNA的表达。结果　骨髓间充质干细胞于移植后 1周、2周和 4周后均可存活并具有分化成熟倾向。Buxco系统行有创动态心功能测定 ,发现SLVP、+dp/dt以正常组为最高 ,实验组次之 ,对照组最低。而LVEDP则相反以正常组最低 ,实验组次之 ,对照组为最高。心梗后SERCA2基因mRNA表达水平对照组较正常组明显降低 ( 0 988± 0 0 0 4对 1 82 4± 0 0 0 9,P <0 0 1)。骨髓间充质干细胞心肌移植后 ,虽然SERCA2基因mRNA表达水平实验组也较正常组有所降低 ( 1 5 83± 0 0 12对 1 82 4± 0 0 0 9,P <0 0 1) ,但与对照组相比明显升高 ( 1 5 83± 0 0 12对 0 988± 0 0 0 4,P <0 0 1)。结论　骨髓间充质干细胞心肌移植可促进SER CA2mRNA表达 ,并使大鼠心梗后受损的心功能改善。     

铅暴露对生长发育期大鼠不同脑区一氧化氮合酶活力的影响

目的　观察低水平铅暴露对生长发育期大鼠不同脑区一氧化氮合酶 (NOS)活力的影响。方法　SD大鼠经饮含 0 .0 2 5 %、0 .0 5 0 %、0 .0 75 %醋酸铅水方法染毒 ,建立生长发育期低水平铅中毒的大鼠模型 ,应用荧光测定法测定大鼠海马、小脑、大脑皮层、脑干的NOS活力。结果　出生 2 1d ,3组铅暴露组海马、小脑NOS活力 [海马 :(1.5 3± 0 .2 0 )、(1.6 6± 0 .2 3)、(1.88± 0 .32 )U mgpro ,小脑 :(0 .87± 0 .2 4 )、(0 .85± 0 .0 9)、(0 .91± 0 .18)U mgpro]明显低于对照组 [海马 :(2 .36± 0 .18)、小脑 (1.4 1± 0 .18)U mgpro](海马F =14 .4 15 ;小脑F =7.933,均P <0 .0 1) ;出生 7、14、2 1d ,0 .0 75 %醋酸铅组大鼠大脑皮层NOS活力 [7d :(1.2 9± 0 .14 )、14d :(1.0 3± 0 .15 )、2 1d :(0 .6 9± 0 .10 )U mgpro]明显低于对照组 [7d :(2 .5 4± 0 .31)、14d :(1.6 4± 0 .2 2 )、2 1d :(1.2 4± 0 .14 )U mgpro],0 .0 2 5 %组 [7d :(2 .4 2±0 .19)、14d :(1.5 9± 0 .17)、2 1d :(1.2 7± 0 .12 )U mgpro],0 .0 5 0 %组 [7d :(2 .5 6± 0 .5 3)、14d :(1.77±0 .19)、2 1d :(1.2 4± 0 .10 )U mgpro](F =4 2 .6 30 ,P <0 .0 5 ) ,对照组、0 .0 2 5 %组、0 .0 5 0 %组之间两两比较 ,差异无显著性     

慢性苯染毒小鼠DNA损伤及体内抗氧化酶的变化

目的　了解苯对体内DNA的损伤作用、机制以及抗氧化酶体系的变化情况。方法　对小鼠进行静式吸入染毒 2个月 ,每天 4h ,采用单细胞凝胶电泳技术对骨髓细胞及外周血淋巴细胞DNA损伤进行检测 ;同时检测肝、脾、脑组织中超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px的活力及丙二醛 (MDA)含量。结果　低浓度组与高浓度组小鼠骨髓细胞及外周血淋巴细胞彗星百分率分别为骨髓细胞 (83.5 6 %± 10 .2 8% )、(92 .5 4 %± 15 .93% ) ;外周血淋巴细胞 (41.2 7%± 6 .0 3% )、(6 5 .79± 11.6 2 % ) ,明显高于对照组 (4.13%± 0 .5 2 %、2 .2 1%± 0 .31% ) ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,并呈剂量 -反应关系。高、低浓度组小鼠肝匀浆SOD活力 [(75 4 .33± 116 .30 )、(6 94 .2 6± 116 .30 )U/mgpro],GSH Px活力分别为 [(2 2 .5 2± 3.31)、(18.5 6± 4 .97)U/mgpro]均明显低于对照组分别为 [(999.92± 188.2 4 )、(35 .31± 6 .6 3)U/mgpro],差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,但两组间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;高、低浓度组小鼠脾匀浆GSH Px活力分别为 [(31.38± 2 .71)、(2 5 .30± 7.4 4 )U/mgpro],均明显低于对照组 [(37.11± 3.4 2 )U/mgpro],差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,且组间差异有显著性 (P <0 .0 5 )     

包头市温室作业人员肺通气功能研究

目的　了解温室作业对接触者肺通气功能的影响。方法　对 12 0名温室作业人员和 115名对照人员进行肺通气功能测定。结果　①肺功能通气指标FEV1 0 (96 6± 40 2 /10 3 4± 43 9)、FEV1 0 % (97 1± 2 1 1/10 3 1± 2 3 3 )、MMF(92 0± 42 3 /10 8 3± 42 6)、MVV(61 2± 18 2 /68 7± 2 2 4)、V50 (78 9± 3 3 6/90 0± 3 4 2 )和V2 5(90 4± 43 0 /110 0± 48 9)比较 ,接触组低于对照组 ,并且差异均具有显著性 (P <0 0 5 )。②两组中吸烟者肺通气功能结果比较 ,接触组FEV1 0(91 3± 44 0 /98 0± 44 7)、FEV1 0 % (94 9± 2 3 8/10 4 5± 2 2 9)、MVV(5 7 7± 16 3 /66 8± 2 2 5 )、和V2 5(88 4± 41 2 /10 6 7±46 4)低于对照组 ,差异具有显著性 (P <0 0 5 )。剔除吸烟因素后 ,接触组肺通气功能指标FVC、MMF、MVV、V50 和V2 5比较 ,低于对照组 ,并且差异均具有显著性。③随着从事温室作业时间的延长 ,MMF、MVV、V50 、V2 5呈现下降的趋势 ,差异具有显著性 (P <0 0 5 )。④随着年龄的增加 ,温室作业人员V2 5、MMF呈现下降的趋势 ,差异具有显著性 (P <0 0 5 )。结论　从事温室作业可对接触者的肺通气功能产生损害、吸烟与温室作业对接触者的肺通气功能可能产生协同作用 ,并且     

胚胎干细胞及诱导多能干细胞在胚胎毒性研究中的应用

药物对于生殖细胞或者早期胚胎的影响将会引起不孕或者种植前胚胎的发育异常,进而引起胚胎毒性或者是后代的畸形,因此药物的临床应用需要有可靠的实验数据证明其对胚胎的影响,而胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)由于其无限增殖及多向分化的潜能而作为研究药物胚胎毒性的细胞模型得到广泛应用,以ESC为基础的胚胎干细胞实验(embryonic stem cell test,EST)是获得国际认可的胚胎毒性评价的体外替代方法,但是该实验方法的快速性和准确性存在一定的局限性,目前该细胞模型的研究主要集中于快速性和准确性的优化。新兴的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSC),由于具有与ESC相似的增殖和分化特性,目前也被逐步应用于药物胚胎毒性的研究。     

生殖干细胞的研究进展

卵巢中始基卵泡是女性的基本生殖单位，也是卵细胞储备的唯一形式。传统观点认为，出生后卵母细胞数量不再增加，随着卵泡的发育、成熟和闭锁，卵母细胞不断耗竭，卵巢功能衰退，从而进入绝经期。随着人类在干细胞研究领域不断深入，应用干细胞治疗相关疾病已成为现实。在临床应用中，骨髓造血干细胞移植成为白血病等血液系统疾病患者的重要治疗方式。近年来，研究人员在成年小鼠卵巢内发现进行有丝分裂的生殖细胞，可能参与卵母细胞再生，这种细胞很可能就是生殖干细胞（GSCs）。GSCs的存在为卵巢功能不全、卵巢早衰和恶性肿瘤患者生育力保存及绝经后期女性健康维护带来希望。现就GSCs的研究进展进行综述。     

神经干细胞在临床的应用进展

干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞,它可以分化为多种组织和器官,因此成为近年来研究的热点。本文通过对神经干细胞的自身特点,存在部位及临床应用进行研究概述,发现神经干细胞在修复神经组织缺损、促进神经系统功能恢复方面起到极为重要的作用,尤其在缺血性疾病及神经退行性疾病方面具有广泛的应用前景。     

脐带间充质干细胞与脐血造血干细胞临床应用的研究进展

人胚胎干细胞(HESC)系及生殖细胞系的建立,被美国时代周刊(Times)列为20世纪世界十大科技成就之首。脐带间充质干细胞(UC-MSC)和脐血造血干细胞(UCB-HSC)的研究作为其中的一部分,具有广阔的临床应用前景。UC-MSC和UCB-HSC是具有自我更新、分化能力和产生多系或单系特异细胞功能的细胞,位于细胞发育谱系的顶端。笔者拟对UC-MSC和UCB-HSC的来源、生物学特点及其临床应用等方面的进展,综述如下。     

骨髓间充质干细胞的三维培养

目的：研究三维培养环境下骨髓间充质干细胞的生长情况,探讨骨髓间充质干细胞复合支架构建组织工程软骨的可行性。方法：全骨髓培养法分离骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）,免疫细胞化学测定其细胞表面抗原CD44、CD45,对BMSCs进行鉴定;冻干法制备壳聚糖（Chitosan,CS）支架,扫描电镜观测支架孔径;取BMSCs复合CS支架,通过三维培养观察BMSCs在CS支架上不同时段的生长情况。结果：三维培养环境下骨髓间充质干细胞生长良好,细胞在支架上分泌大量细胞外基质,并与支架黏附良好。结论：骨髓间充质干细胞可作为组织工程的种子细胞,构建组织工程软骨。